目的:探讨猕猴桃皮多酚(kiwifruit peel polyphenols,KPP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)应激Caco-2细胞抗氧化能力的影响。方法:采用CCK-8法测定不同处理组Caco-2的细胞活力,荧光分光光度计测定活性氧和线粒体膜电位,分光光度计测...目的:探讨猕猴桃皮多酚(kiwifruit peel polyphenols,KPP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)应激Caco-2细胞抗氧化能力的影响。方法:采用CCK-8法测定不同处理组Caco-2的细胞活力,荧光分光光度计测定活性氧和线粒体膜电位,分光光度计测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应测定核红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,S O D 1)、S O D 2基因的表达;蛋白印迹测定N r f 2、Ke a p 1及N Q O 1蛋白表达水平。结果:与L P S组相比,经50μg/mL KPP干预后细胞活力显著升高(P<0.05);活性氧水平和MDA含量分别显著下降至1.82±0.28、5.08 nmol/mg(P<0.05),线粒体膜电位显著升高至1.84±0.10(P<0.05),SOD活力和GSH含量分别显著升高至52.57 U/mg和69.46μmol/g(P<0.05);同时KPP干预能显著提高Nrf2、NQO1基因和蛋白表达(P<0.05),显著降低Keap1基因和蛋白表达(P<0.05)。结论:KPP能够通过Keap1/Nrf2/NQO1信号通路提高Caco-2的抗氧化水平,缓解LPS应激造成的细胞损伤。展开更多
目的:研究高蛋白日粮对高脂诱导的肥胖小鼠脂代谢昼夜节律紊乱的调节作用。方法:120只SPF级C57BL/6J小鼠随机分成正常组、高脂组和高脂高蛋白组。干预第4周和第12周时监测小鼠活体代谢状态,饲养结束后分别于2时、8时、14时和20时处死小...目的:研究高蛋白日粮对高脂诱导的肥胖小鼠脂代谢昼夜节律紊乱的调节作用。方法:120只SPF级C57BL/6J小鼠随机分成正常组、高脂组和高脂高蛋白组。干预第4周和第12周时监测小鼠活体代谢状态,饲养结束后分别于2时、8时、14时和20时处死小鼠,测定血脂和肝脂水平以及肝脏脂肪合成与分解代谢和生物钟相关基因的表达并分析昼夜节律变化规律。结果:高脂饲喂能够引起小鼠体质量和肥胖指数增加,活动期自主活动量和热量消耗减少。同时,伴随着血脂紊乱及肝脏脂质水平异常升高,具体表现为肝脏脂肪合成代谢关键酶乙酰辅酶A羧化酶和脂肪酸合成酶基因在活动期和休息期持续高水平表达,而脂肪分解代谢关键酶激素敏感性脂酶和乙酰辅酶A氧化酶基因表达量升高缓慢,昼夜差异规律改变。与高脂干预相比,高蛋白干预可明显增加活动期自主活动量和能量消耗,恢复脂肪合成酶基因活动期高、休息期低的表达节律,脂肪分解代谢关键酶基因ACOX亦在摄食后高水平表达,表现出明显的昼夜节律。进一步分析表明,高蛋白干预改善高脂所致的脂代谢节律紊乱与调节肝脏时钟基因即昼夜节律运动输出周期故障蛋白(circadian locomotor output cycle kaput,CLOCK)与脑和肌肉芳香烃受体核转运体样蛋白1(brain and muscle-Arnt-like protein 1,BMAL1)基因的表达密切相关。结论:高蛋白膳食可以缓解高脂饮食引起的肝脏生物钟紊乱,通过稳定昼夜节律改善小鼠肝脏脂代谢紊乱。展开更多
文摘目的:探讨猕猴桃皮多酚(kiwifruit peel polyphenols,KPP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)应激Caco-2细胞抗氧化能力的影响。方法:采用CCK-8法测定不同处理组Caco-2的细胞活力,荧光分光光度计测定活性氧和线粒体膜电位,分光光度计测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应测定核红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,S O D 1)、S O D 2基因的表达;蛋白印迹测定N r f 2、Ke a p 1及N Q O 1蛋白表达水平。结果:与L P S组相比,经50μg/mL KPP干预后细胞活力显著升高(P<0.05);活性氧水平和MDA含量分别显著下降至1.82±0.28、5.08 nmol/mg(P<0.05),线粒体膜电位显著升高至1.84±0.10(P<0.05),SOD活力和GSH含量分别显著升高至52.57 U/mg和69.46μmol/g(P<0.05);同时KPP干预能显著提高Nrf2、NQO1基因和蛋白表达(P<0.05),显著降低Keap1基因和蛋白表达(P<0.05)。结论:KPP能够通过Keap1/Nrf2/NQO1信号通路提高Caco-2的抗氧化水平,缓解LPS应激造成的细胞损伤。
文摘目的:研究高蛋白日粮对高脂诱导的肥胖小鼠脂代谢昼夜节律紊乱的调节作用。方法:120只SPF级C57BL/6J小鼠随机分成正常组、高脂组和高脂高蛋白组。干预第4周和第12周时监测小鼠活体代谢状态,饲养结束后分别于2时、8时、14时和20时处死小鼠,测定血脂和肝脂水平以及肝脏脂肪合成与分解代谢和生物钟相关基因的表达并分析昼夜节律变化规律。结果:高脂饲喂能够引起小鼠体质量和肥胖指数增加,活动期自主活动量和热量消耗减少。同时,伴随着血脂紊乱及肝脏脂质水平异常升高,具体表现为肝脏脂肪合成代谢关键酶乙酰辅酶A羧化酶和脂肪酸合成酶基因在活动期和休息期持续高水平表达,而脂肪分解代谢关键酶激素敏感性脂酶和乙酰辅酶A氧化酶基因表达量升高缓慢,昼夜差异规律改变。与高脂干预相比,高蛋白干预可明显增加活动期自主活动量和能量消耗,恢复脂肪合成酶基因活动期高、休息期低的表达节律,脂肪分解代谢关键酶基因ACOX亦在摄食后高水平表达,表现出明显的昼夜节律。进一步分析表明,高蛋白干预改善高脂所致的脂代谢节律紊乱与调节肝脏时钟基因即昼夜节律运动输出周期故障蛋白(circadian locomotor output cycle kaput,CLOCK)与脑和肌肉芳香烃受体核转运体样蛋白1(brain and muscle-Arnt-like protein 1,BMAL1)基因的表达密切相关。结论:高蛋白膳食可以缓解高脂饮食引起的肝脏生物钟紊乱,通过稳定昼夜节律改善小鼠肝脏脂代谢紊乱。