基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别对葡萄醋的质量评价

目的建立葡萄醋中有机酸成分的高效液相(High performance liquid phase,HPLC)指纹图谱,并结合化学模式识别对葡萄醋质量进行评价及为临床应用提供参考。方法采用HPLC法,以甲醇(A)∶0.5%磷酸水溶液(D)=1∶99洗脱,建立葡萄醋指纹图谱,同时测定琥珀酸的含量;采用相似度评价、聚类分析(Cluster analysis,CA)、主成分分析(Principal component analysis,PCA)和偏最小二乘-判别分析(Partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)等化学模式识别对差异性特征成分进行筛选。结果15批葡萄醋样品的指纹图谱共有峰有11个,通过与混合对照品色谱峰进行比对,指认出6个共有峰,分别是酒石酸(1号峰),苹果酸(2号峰),琥珀酸(3号峰),富马酸(4号峰),绿原酸(9号峰),乙酸(11号峰);CA结果表明15批葡萄醋样品中各个化合物之间含量差异较大,即使是同一生产企业生产的不同批次葡萄醋其含量差异也较大;PCA结果显示葡萄醋共有峰含量差异的主要成分并非单一成分,而是前4种主成分共同的影响;PLS-DA结果表明筛选出的7、3、9、4号峰可作为鉴别和区分葡萄醋质量差异的标志物,其中包括共有峰3号峰(琥珀酸)、4号峰(富马酸)。结论采用指纹图谱结合化学模式识别技术可快速、有效地筛选出葡萄醋的差异性特征成分,为葡萄醋质量评价及临床应用提供参考。

指纹图谱技术结合化学计量学评价五味子醇提物质量探索研究

目的:优化五味子乙醇提取工艺,建立其醇提物HPLC指纹图谱并结合化学计量学综合分析其质量。方法:基于单因素试验,采用L9(34)正交试验设计,系统研究了乙醇浓度、提取时间、提取次数及料液比等因素对五味子中五味子醇甲和五味子乙素的提取率产生的影响。按最优提取工艺制备9批五味子乙醇提取物,建立其高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。以共有峰峰面积为变量,结合化学计量学方法包括系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)法对9批五味子醇提物质量进行分析。结果:确定最佳提取工艺为:采用80%乙醇作为溶剂,料液比为1:10,进行2次回流提取,每次持续1 h。在9批五味子提取物指纹图谱中共有32个共有峰,并成功鉴定出X18(五味子醇甲)、X29(五味子甲素)和X32(五味子乙素),相似度高于0.94。HCA和PCA结果均显示9批样品有聚为四类的趋势,共有峰X1、X2、X3、X13、X17、X19、X21和X30是引起样品间差异的主要化学成分。结论:所优选的提取工艺稳定可行,不同批次五味子提取物的质量一致性较高,但不同样品间仍存在一定差异。

基于HPLC-ICP-MS的水蛭中总砷和无机砷含量及其转移率研究

目的:建立水蛭中总砷及无机砷的分析方法,并研究水蛭煎煮后总砷及无机砷的转移率。方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定水蛭药材、饮片和标准汤剂总砷量,同时采用人工胃液处理样品,以高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)测定无机砷含量,分析其转移率并进行风险评估。结果:水蛭中的砷主要为无机砷,且三价砷含量高于五价砷,所有批次的水蛭饮片煎煮后总砷及无机砷的转移率均大于60%,风险评估结果显示水蛭中的砷所致安全性风险较低。结论:该方法准确度高,专属性好,揭示水蛭药材在煎煮过程中砷及无机砷的转移规律,可为保障水蛭药材的质量和用药安全提供重要参考依据。

一测多评法测定无花果叶中4种成分的含量

目的:建立无花果叶中绿原酸、芦丁、补骨脂素和佛手柑内酯4种成分含量测定的一测多评方法,并验证此方法的可行性与准确度。方法:采用高效液相色谱法,以芦丁为内参物,建立绿原酸、补骨脂素和佛手柑内酯的相对校正因子(f_(s/i)),并利用f_(s/i)计算无花果叶样品中各成分的含量,同时用外标法测定不同产地无花果叶中各成分的含量,比较一测多评法和外标法所得结果的差异。结果:一测多评法得到的绿原酸、补骨脂素和佛手柑内酯f_(s/i)重现性较好,且通过一测多评法测得的不同产地的无花果叶各成分含量与外标法测得的结果无显著差异。结论:本研究建立的一测多评法准确可行,可用于无花果叶的定量分析和质量评价。

羟基红花黄色素A对实验性心肌梗死大鼠的保护作用及机制

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对大鼠缺血心肌的保护作用及其作用机制。方法通过结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,观察HSYA对大鼠心肌梗死面积(MIS),血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、血栓烷B2(TXB2)和血管紧张素(Ang)的影响。结果与模型组比较,HSYA明显减小急性心肌梗死大鼠MIS,显著提高血清NOS活性,明显增加NO及6-Keto-PGF1α的量,显著降低血清CK-MB、LDH、TXB2及Ang水平。结论HSYA对急性缺血心肌具有保护作用,其机制与HSYA调节NO、6-Keto-PGF1α、TXB2和Ang的水平,从而增加心肌供血供氧,减轻心肌细胞损伤、凋亡有关。

丹酚酸B大鼠在体肠吸收研究

目的:研究丹酚酸B在大鼠小肠的吸收情况。方法:采用在体单向灌流法进行小肠吸收实验,利用HPLC法测定灌流液中丹酚酸B的浓度。结果:丹酚酸B浓度为24.63μg·mL-1时,在十二指肠、空肠、回肠段的吸收速率常数(Ka)和表观吸收系数(Papp)无显著性差异(P>0.05)。与12.54μg·mL-1浓度比较,48.12μg·mL-1浓度时Sal B在空肠的Ka和Papp均显著降低[Ka:(2.13±0.50)×10-2vs(3.10±0.42)×10-2min-1,P<0.05;Papp:(2.07±0.49)×10-3vs(3.10±0.51)×10-3cm.min-1,P<0.05]。结论:丹酚酸B的小肠吸收存在高浓度饱和现象,且在全肠道吸收良好,且在小肠内无特定吸收部位,提示该药物适合制成日服2次的缓控释制剂。

党参、黄芪对实验性心肌缺血大鼠心电图影响的比较

目的 比较党参与黄芪提取物对实验性心肌缺血大鼠的保护作用。方法 采用垂体后叶素 (Pit)法建立心肌缺血动物模型 ,以 导联心电图 T波和 S- T段位移及心率的变化为指标 ,观察党参和黄芪对实验性心肌缺血大鼠的保护作用。结果 黄芪和党参均可减轻实验性心肌缺血大鼠心电图的 T波抬高 ,并能减慢心率 ,但对心电图S- T段的位移无明显作用 ,并且党参减轻 T波抬高的效果强于黄芪 ,而减慢心率的作用弱于黄芪。结论 党参和黄芪均对

高效液相色谱直接测定沸水浴处理人血清中冠心Ⅱ号来源的阿魏酸

目的：探讨建立健康人口服冠心Ⅱ号后吸收入血清成分的临床药动学（ＰＫ）研究的新方法。方法：用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）直接测定５名健康人服冠心Ⅱ号后经沸水浴处理过的血清样品中的阿魏酸（ＦＡ）。分别用二维、三维ＨＰＬＣ和紫外分光光度法定性ＦＡ后，ＦＡ用内标（香豆精）法定量。结果：甲醇∶乙酸∶水（３８∶０３∶６１７）为流动相，Ｃ１８（ＯＤＳ２）柱（１５０ｍｍ×４６ｍｍ，５μｍ）为固定相时，ＦＡ的最低检测限６ｎｇ（Ｎ／Ｓ＝３）；沸水浴１０ｍｉｎ的最低检测血清浓度是２０２μｇ／Ｌ，线性范围３３７～２１５６８μｇ／Ｌ，ｒ＝０９９９３；方法平均回收率（９３５９±２３６）％，日间及日内精密度ＲＳＤ值均＜８４４％。结论：与乙睛法比较，本法灵敏、快速、简便、精确、专一、价廉、无毒和重复性好。

羟基红花黄色素A对常氧／低氧犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响

目的探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对常氧/低氧两种条件下体外培养的犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响。方法采用内膜消化刮取法获取犬胸主动脉内皮细胞;在常氧(21%)/低氧(10%)两种条件下,分别以噻唑蓝(MTT)法观察HSYA对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响,血管内皮生长因子(VEGF)作为阳性对照。结果常氧条件下HYSA1、0.1mmol/L在72、96、120h时对VEC有明显促增殖作用;低氧条件下HYSA1、0.1、0.01mmol/L在24、48h时对VEC有明显促增殖作用,且具有浓度和时间依赖性。HYSA1mmol/L与VEGF2.6×10-7mol/L在同样条件下对VEC的促增殖作用强度相当。结论在常氧/低氧两种条件下,HSYA均具有明显促VEC增殖作用,且在低氧条件更为明显。

蝙蝠葛碱对心肌去甲肾上腺素出胞释放的影响

目的研究蝙蝠葛碱对心肌去甲肾上腺素（ＮＥ）出胞释放的药理作用。方法用高压液相色谱—电化学法测定电刺激时豚鼠离体灌注心脏流出液的ＮＥ含量。结果不加实验条件时第１次电刺激（Ｓ１）与第２次电刺激（Ｓ２）所引起的ＮＥ释放量无差别（Ｐ＞０．０５），蝙蝠葛碱（３０μｍｏｌＬ－１）、维拉帕米（５μｍｏｌＬ－１）明显减少Ｓ２引起的ＮＥ释放（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）；组间比较，蝙蝠葛碱组、维拉帕米组均显著低于对照组（Ｐ＜０．０１），而蝙蝠葛碱组与维拉帕米组之间无统计学差别（Ｐ＞０．０５）。结论蝙蝠葛碱具有抑制心肌去甲肾上腺素出胞释放的作用。

三七总皂苷对大鼠肝脏肾脏的毒性作用

目的:研究三七总皂苷对大鼠肝脏肾脏的毒性作用。方法:Wistar大鼠32只,雌雄各半,体重140～180g,随机分成溶剂(注射用水)对照组和三七总皂苷50,150和450mg·kg^(-1)组,各组每日肌内注射相应剂量的药物或溶剂,连续给予28d(高剂量组给药3d),每周测定动物体重。给药2周及4周后眼眶取血,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氧基转移酶(AST)、尿素氮(BUN)及肌酐(CREA)的活性,取肝脏、肾脏,HE染色光镜观察组织病理学变化。结果:三七总皂苷450mg·kg^(-1)组动物体重显著下降,肝、肾功能指标(AST,ALT,BUN及CREA)显著升高,组织病理学检查出现肝细胞及肾小管上皮细胞变性、坏死。结论:三七总皂苷肌内注射450 mg·kg^(-1)对大鼠具有明显的肝脏、肾脏毒性。

麝香保心丸对心肌梗塞后左室形态和功能影响的实验研究

目的 :观察麝香保心丸对心肌梗塞后大鼠左室形态及功能的影响。方法 :结扎冠状动脉复制大鼠心梗模型、随机分为心梗对照组、麝香保心丸组及开搏通治疗组。 2周及 6周时测量血动学参数及心功能 ,同时研究左室形态学参数 (左心腔面积、梗塞区室壁变薄比及左室伸展指数 )。结果 :麝香保心丸可减少梗塞后 6周大鼠的左室扩张及梗塞区伸展 ;明显改善心梗后左室收缩功能。结果提示

红花黄色素缓解大鼠心肌缺血的作用

目的研究红花黄色素(SY)对异丙肾上腺素(ISO)诱发的大鼠心肌缺血的作用。方法多次ipISO造成大鼠心肌缺血模型;观察大鼠血压、Ⅱ导联心电图J点的改变和出现T波倒置的阳性率,以及光镜下心肌组织形态学的变化;荧光素酶生物发光法测定心肌组织ATP量;硫代巴比妥酸比色法测量心肌组织丙二醛(MDA)量;Falholt法测定血浆脂肪酸(FFA)量。结果SY可明显抑制ISO诱导的大鼠心肌缺血所致最大收缩压、平均收缩压、平均动脉压降低;缓解心肌缺血导致的心肌MDA、血浆FFA水平升高及心肌ATP量的降低,同时SY还可减少心肌缺血后心电图出现T波倒置的阳性率(P<0.05);但对大鼠心电图J点抬高和缺血心肌细胞组织形态学变化未见明显改善。结论SY具有缓解大鼠心肌缺血的作用。

苦参碱对高胆固醇血症大鼠心肌缺血性损伤的保护作用

目的研究苦参碱对高胆固醇血症大鼠心肌缺血性损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法SD大鼠给予高胆固醇饮食4周后,sc异丙肾上腺素(ISO,85mg/kg,每日1次,连续2d)建立高胆固醇血症心肌缺血性损伤模型,观察苦参碱对模型大鼠血脂、心功能、心肌损伤标志酶及抗氧化酶等的影响。结果苦参碱(50、100和200mg/kg)可降低模型大鼠血清胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平;改善大鼠左心室收缩(升高LVSP和+dp/dtmax)和舒张功能(降低LVEDP和升高-dp/dtmax);减少血清心肌损伤标志酶:乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的量;提高血清及心肌组织中抗氧化酶:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力,并相应降低脂质过氧化物丙二醛(MDA)量。组织病理学结果显示,苦参碱可减轻高胆固醇血症大鼠缺血性心肌组织形态学结构的异常改变。结论苦参碱对高胆固醇血症大鼠缺血性心肌结构与功能具有保护作用,其作用机制与降低血清TC和/或TG,提高机体抗氧化酶活性并维持心肌细胞膜稳定性有关。

氧化苦参碱心肌保护作用及其作用靶点的研究

目的研究氧化苦参碱对心肌缺血的保护作用,并进一步探讨其可能的作用靶点。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型,观察氧化苦参碱对心肌缺血的保护作用;应用TUNEL法检测氧化苦参碱对心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡指数的影响;应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)研究氧化苦参碱对急性心肌缺血大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白mRNA表达的作用。结果氧化苦参碱大、中、小剂量(20、10、5mg/kg)组均可缩小心肌梗死面积;氧化苦参碱大、中剂量能明显提高血清SOD活力、降低MDA水平;TUNEL法证实氧化苦参碱可降低心肌细胞凋亡指数;RT-PCR检测结果表明,急性心肌缺血大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmR-NA表达水平明显高于假手术组(P<0.01),经氧化苦参碱治疗后,心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmRNA表达降低(P<0.05)。结论氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血具有保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化,降低大鼠心肌L型Ca2+通道蛋白α1CmRNA表达,从而抑制心肌细胞凋亡有关。

葛根素对冠心病患者心肌缺血的疗效

为观察葛根素对冠心病患者心肌缺血的治疗作用 ,将 6 0例冠心病心肌缺血患者随机分为葛根素组 (30例 ,常规西药加葛根素注射液治疗 )与对照组 (30例 ,单用常规西药治疗 )。结果显示 ,治疗后葛根素组的心肌缺血总负荷下降幅度明显大于对照组 (P <0 .0 1) ,心率、收缩压有所下降但不明显 (P >0 .0 5 ) ,室性期前收缩有明显减少 (P <0 .0 5 )。在治疗期间无明显不良反应。本研究认为葛根素是一种安全。

葛根素口服制剂抗心肌缺血及对心肌细胞的保护作用

目的 研究葛根素口服制剂对在体大鼠心肌和离体新生大鼠心肌细胞的保护作用。方法 实验大鼠随机分为空白对照组、阳性对照组 (造模前尾 iv 0 .0 335 g/ kg葛根素注射液 )和葛根素口服制剂高、低剂量组 ( ig 0 .8,0 .4 g/ kg,连续 6 d) ,以 1U/ kg垂体后叶素 ( Pit)诱导大鼠心肌缺血 ,记录尾 iv Pit前及注射后 5 ,15 ,30 s和 2 ,5 ,10 min大鼠心电图变化 ;显微镜观察心肌细胞形态学变化及测定不同时间点培养液中乳酸脱氢酶 ( L DH)、肌酸激酶 ( CK)和α-羟丁酸脱氢酶 (α- HBDH )的活性。结果 葛根素口服制剂 ig给药对心肌缺血大鼠的心电图 T波、P- R间期、Q- T间期变化有明显的改善 ;能对抗缺氧状态下离体新生大鼠心肌细胞形态学和酶学的异常变化。

去甲乌药碱的药理作用与心脏β－AR关系的初步研究

附子有效成分去甲乌药碱（ＤＭＣ）的药理作用以及与肾上腺素能β受体（β－ＡＲ）的关系的研究表明，０．５ｍｇ·ｋｇ－１的ＤＭＣ可使正常小鼠心肌β－ＡＲ轻度上调，与异丙肾上腺素（ＩＳＯ）相比，ＤＭＣ能轻度激动ｃＡＭＰ，使其血浆含量升高，升高的峰值时间在１０ｍｉｎ左右。ＤＭＣ的最小激动量为０．５ｍｇ·ｋｇ－１，最大激动量为５ｍｇ·ｋｇ－１。ＤＭＣ对１２５Ｉ－ＰＩＮ的竞争抑制实验表明，在１×１０－６～１×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１时，ＤＭＣ可抑制１２５Ｉ－ＰＩＮ与β－ＡＲ结合，与心得安比较抑制浓度大４～５个数量级。与ＩＳＯ合并用药观察血浆ｃＡＭＰ浓度变化提示，０．５ｍｇ·ｋｇ－１ＤＭＣ与小剂量（０．１ｍｇ·ｋｇ－１）和较大剂量（１ｍｇ·ｋｇ－１）的ＩＳＯ合用时，既无协同作用，也未见拮抗作用。