大鼠湿阻中焦证的水盐代谢调节机制及平胃散对其的影响

目的 从抗利尿激素(ADH)、醛固酮(ALD)、心钠素(ANP)及红细胞内 Na+、K+等的变化来探索湿阻中焦证水盐代谢的调节机制,并观察平胃散对它们的影响。方法 塑造湿阻中焦证模型,将大鼠分为正常组、湿阻造模组、平胃散组及自然恢复组,采用放免法检测血浆 ADH、ALD 及 ANP 的浓度,用电解质分析仪测定细胞内 Na+、K+。结果 与正常组比较,湿阻造模组大鼠 ADH 显著升高(P<0.01),ALD 有明显升高的趋势,ANP 无显著性差异,Na+明显升高(P<0.05),K+明显降低(P<0.01);治疗后,平胃散组和自然恢复组与湿阻造模组比较,ADH 和 ALD 显著下降(P<0.01),ANP 无显著性差异,Na+明显降低(P<0.01),K+无显著性差异。结论 湿阻中焦证大鼠 ADH 的释放增强,ALD的分泌有增强的趋势,ADH、ALD 共同参与了湿阻中焦证水、电解质平衡的调节,使机体内水、钠潴留,钾排泄,而心钠素并不参与湿阻中焦证代谢的调节;平胃散可通过抑制湿阻中焦证大鼠 ADH 的释放和 ALD 的分泌,调节机体水、电解质平衡的紊乱,起到保钾排钠的作用。

艾叶挥发油体内外抑菌作用的实验研究

目的检测艾叶挥发油体内外抑菌作用。方法艾叶挥发油的最低抑菌浓度(MIC)检测采用琼脂二倍稀释法,并以红霉素为对照;其致死保护率检测是通过对感染小鼠进行试验性治疗来实现。结果艾叶挥发油对实验菌的MIC90值范围0.78～25μL/mL;对实验菌感染小鼠致死保护率40%～50%。结论艾叶挥发油体外对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌具有抑菌作用,其抑菌作用优于或等同于红霉素;体内对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌感染小鼠具有较好的保护作用。

血府逐瘀汤促急性心肌缺血大鼠心肌血管新生及对血管内皮细胞生长因子的影响

目的探讨血府逐瘀汤对急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生的影响及其分子学机制。方法雄性SD大鼠,结扎冠状动脉左前降支复制急性心肌缺血模型,随机分为模型组、血府逐瘀汤组、麝香保心丸组,并设假手术组。造模后24 h各组灌胃给予相应药物或蒸馏水,每日1次,连续7 d,于第7日灌胃后1 h断头处死动物,取出心脏。用免疫组化法测定缺血心肌内皮细胞数和微血管密度,检测缺血心肌局部血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果血府逐瘀汤组内皮细胞数、微血管密度及VEGF表达均明显升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血府逐瘀汤能够促进心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生,对缺血心肌具有保护作用,其作用机制可能与上调心肌局部VEGF蛋白表达有关。

血府逐瘀汤对急性心肌缺血大鼠的保护作用

目的探讨血府逐瘀汤对大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法采用大鼠舌下静脉注射垂体后叶素(pit)造成急性心肌缺血模型,观察血府逐瘀汤对实验性心肌缺血大鼠血清一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影响。结果血府逐瘀汤可以明显提高血清NO、SOD的含量,显著降低ET、MDA含量(P<0.05,P<0.01)。结论血府逐瘀汤对急性心肌缺血大鼠具有保护作用,其机制可能与调节NO、ET含量、减轻自由基损伤有关。

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素1β活性的影响

目的观察桂枝芍药知母汤对类风湿性关节炎(RA)的治疗作用,并探讨其作用机理。方法以Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导的免疫性关节炎(CIA)大鼠为RA动物模型,通过测量其关节肿胀程度、关节炎指数观察桂枝芍药知母汤大、中剂量组的治疗效果;采用ELISA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)活性,小鼠胸腺细胞法检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)活性,探讨其作用机理。结果桂枝芍药知母汤大、中剂量组均可使大鼠踝关节肿胀程度和关节炎指数明显减少,与模型组比较差异显著(P<0.01);同时发现模型组大鼠血清TNF-α含量及IL-1β活性明显升高,治疗组起下调作用,接近正常组水平,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论TNF-α、IL-1β异常增高,与RA发病密切相关。桂枝芍药知母汤可以降低CIA大鼠血清中异常增高的TNF-α、IL-1β浓度,从而抑制或控制RA病情发展。

化瘀祛痰方药对H_2O_2诱导人脐带静脉内皮细胞氧化应激保护作用的研究

目的探讨化瘀祛痰方药含药血清对H2O2诱导人脐带静脉内皮细胞(EA.hy926细胞)氧化应激的保护作用。方法体外培养EA.hy926细胞,随机分为5组。正常对照组:仅用DMEM完全培养基培养,不加任何药物;H2O2刺激组:培养液中加入终浓度为300μmol/L H2O2;含药血清低剂量组、含药血清中剂量组、含药血清高剂量组分别使用5%、10%、20%含药血清预处理24 h后加入终浓度为300μmol/L H2O2。各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用MTT法检测细胞活性,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)活性。采用细胞活性氧检测试剂盒,通过荧光显微镜观察细胞内活性氧水平的变化。结果与正常对照组相比,H2O2刺激后细胞活性明显下降,SOD、NO活性显著降低,而LDH活性、MDA含量则显著增加,活性氧水平明显升高。10%、20%化瘀祛痰方药含药血清可显著提高细胞存活率及SOD、NO活性,而显著降低LDH活性、MDA含量及活性氧水平。结论化瘀祛痰方药对H2O2诱导EA.hy926细胞氧化应激具有保护作用,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。

中药复方对糖基化终末产物培养下的肾小球系膜细胞增殖以及系膜基质增生的影响

目的观察中药复方对糖基化终末产物(AGEs)培养下的肾小球系膜细胞增殖以及细胞外基质分泌的影响。方法MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖,碱解法检测细胞上清液中羟脯氨酸的含量。结果1×10-3、1×10-2、1×10-1mg/mL的中药复方提取液均能抑制AGEs培养下的鼠肾小球系膜细胞的增殖;能减少AGEs作用下的细胞上清液中羟脯氨酸含量,抑制系膜基质增生。结论中药复方能抑制AGEs引起的大鼠肾小球系膜细胞增殖以及系膜基质增生,提示此方可能通过阻止AGEs受体信号通路抑制糖尿病肾病的发生发展。

七味白术散对人轮状病毒感染乳鼠血清IFN-γ、TNF-α的影响

目的观察七味白术散对人轮状病毒(HRV)感染乳鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨七味白术散治疗HRV感染的作用机制。方法NIH乳鼠经口建立感染模型,按窝随机分为3组,并分别灌服生理盐水(NS)、七味白术散、病毒唑,正常组灌服NS,连续7d。采用ELISA法检测HRV感染乳鼠血清IFN-γ、TNF-α。结果七味白术散组血清IFN-γ高于模型组,TNF-α低于模型组(P<0.05)。结论七味白术散能提高HRV感染乳鼠血清IFN-γ,下调血清TNF-α,显示一种新的免疫调节效应。

桃仁-红花“药对”不同配比的血府逐瘀汤对急性心肌缺血的保护作用

目的观察桃仁-红花“药对”不同配比的血府逐瘀汤抗垂体后叶素(Pit)致大鼠急性心肌缺血的作用。方法采用大鼠舌下静脉注射Pit造成急性心肌缺血模型,观察各给药组注射Pit后不同时间点Ⅱ导联心电图ST段变化以及血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果桃仁、红花不同配比的血府逐瘀汤对Pit所致缺血性ST段有明显改善作用,能明显增加血清SOD的活性,降低MDA、CK和LDH的含量,其中桃仁、红花配比为4∶3时效果最为显著。结论桃仁、红花不同配比的血府逐瘀汤均具有明显对抗Pit致大鼠急性心肌缺血的作用,其功效与桃仁-红花的不同配比之间关系不明显。

补肾活血中药对体外培养成骨细胞活性的影响

目的 研究补肾活血中药对体外培养成骨细胞活性的影响。方法 取二次酶消化法培养的胎鼠颅骨第三代成骨细胞,随机分为 5 组,即:细胞对照组、空白血清组、含药血清组、原药组、阳性对照药αD3 组,分别加入普通细胞培养液、含空白血清及不同浓度补肾活血中药含药血清、补肾活血中药原药液、阳性对照药(αD3)的条件培养液,分别在培养第 3 天和第 6 天进行各试验组成骨细胞碱性磷酸酶及骨钙蛋白分泌量测定,观察补肾活血中药含药血清及原药液对成骨细胞活性的影响。结果 含药血清组成骨细胞活性指标碱性磷酸酶(ALP)值在培养第3 天均低于空白血清组,且与含药血清浓度呈负相关关系;第 6 天,含药血清组各浓度组 ALP 值明显升高,均显著高于空白血清组,ALP 值与含药血清浓度存在正相关关系;空白血清组 ALP 值在培养第 6 天时下降,其均值低于培养第 3 天 ALP 值。培养第 3 天及第 6 天,各浓度原药组 ALP 值均高于细胞对照组及αD3 组;ALP 值与原药浓度呈正相关关系。含药血清组及中药原药组骨钙素(OC)含量显著高于空白血清及其他各对照组。结论 补肾活血中药含药血清及原药能够直接作用于体外培养的成骨细胞,促进成骨细胞增殖,增强其分泌活性;可延长成骨细胞活性分泌期,使其活性分泌高峰后移而峰值升高。

灭幽汤对幽门螺杆菌相关性胃炎小鼠胃黏膜组织NF-κB和IκBα表达的影响

目的探讨灭幽汤对幽门螺杆菌(H.pylori)感染小鼠胃黏膜组织核转录因子-κB(NF-κB)和核转录因子-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响及其作用机制。方法采用H.pylori菌液灌胃法造模,将造模成功的小鼠按体重分为模型组、灭幽汤组、三九胃泰组、丽珠胃三联组,除模型组每日予生理盐水外,其余组分别予灭幽汤、三九胃泰、丽珠胃三联给药。采用免疫组化法观察胃黏膜组织NF-κB和IκBα蛋白的表达情况。HE染色观察小鼠胃黏膜的病理组织改变。结果正常对照组胃黏膜细胞胞浆有少量NF-κB蛋白表达,胞核内无表达,而模型组NF-κB主要位于细胞核内。与模型组比较,灭幽汤组明显抑制胃组织细胞内NF-κB的核移位,灭幽汤组IκBα的磷酸化程度较模型组明显降低(P<0.05)。结论灭幽汤可能通过对降低IκBα的磷酸化程度,抑制NF-κB蛋白表达,发挥其治疗作用。

血府逐瘀汤对结扎冠脉所致缺血大鼠心肌细胞凋亡及ICAM-1蛋白表达的影响

目的观察血府逐瘀汤对结扎冠脉所致缺血大鼠心肌细胞凋亡及ICAM-1(intercellularadhesionmolecule-1)表达的影响。方法采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型,运用DNA末端标记法(TUNEL)和免疫组化技术分别观察心肌细胞凋亡及ICAM-1蛋白表达的变化。结果假手术组仅见极少量凋亡阳性细胞;心肌缺血组有明显心肌细胞凋亡增多,与假手术组比较差异显著(P<0.01);血府逐瘀汤组、地奥心血康组心肌细胞凋亡均显著减少,与心肌缺血组比较差异显著(P<0.01,P<0.05)。同时ICAM-1蛋白的阳性表达支持心肌细胞凋亡的情况。结论血府逐瘀汤与地奥心血康可有效抑制心肌细胞坏死凋亡,下调ICAM-1表达,减轻心肌细胞损伤,对缺血心肌有保护作用。

三叶虫茶对肾性高血压模型大鼠的影响

目的探讨三叶虫茶的降血压作用及作用机制。方法采用两肾一夹法复制大鼠肾性高血压模型(2K1C-RHR),观察三叶虫茶对该大鼠降血压过程中血浆降钙素相关基因肽(CGRP)含量的改变,分析该变化与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的关系,并与六味地黄丸、卡托普利进行对照。结果肾性高血压大鼠血压值显著升高,血浆CGRP含量降低,AngⅡ水平升高;三叶虫茶高、低剂量对此有不同程度的改善。结论三叶虫茶对2K1C-RHR有降血压效应;而升高CGRP含量、调节AngⅡ水平使血管扩张,是三叶虫茶降血压作用的机制之一。

加味真武汤对充血性心力衰竭少阴病阳虚水停证兔血流动力学的影响

目的 揭示加味真武汤对充血性心力衰竭(CHF)少阴病阳虚水停证兔血流动力学的影响。方法 先给兔灌服寒凉药7 d,再结扎冠状动脉,缩窄升主动脉口径,建立CHF少阴病阳虚水停证兔模型,设立中药组、西药组、中西药结合组及空白组,观察比较治疗后各组兔的心率及血流动力学指标。结果 给药1 min后,西药组、中西药组出现心率减慢,左室内压、左室内压最大上升速率降低,与中药组及空白组比较具有显著差异(P<0.05),中药组5 min时才出现上述变化,与西药组及中西药组对比无统计学意义上的差异,与空白组对比具有显著差异(P<0.05)。结论 加味真武汤能减慢CHF少阴病阳虚水停证兔的心率,降低其左室内压及左室内压最大上升速率,但其作用较缓慢。

调肝肾、祛痰瘀治法提前干预对SHR血压及血管活性物质的影响

目的 探讨调肝肾、祛痰瘀治法方药提前干预对自发性高血压大鼠(SHR)的高血压发展以及对多种血管活性物质的作用。方法 采用尾套式大鼠血压计动态观察SHR 9-12周龄时的血压变化,采用放射免疫法测定大鼠血浆内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量,采用硝酸还原酶比色法测定大鼠血浆一氧化氮(NO)。结果 经中药提前干预,SHR 9-12周龄的血压明显低于空白组,而不同给药时段之间无显著性差异。各给药组的NO水平均显著高于空白组,而全程给药组ET/NO比值则显著低于空白组。结论 调肝肾、祛痰瘀治法方药提前干预,能提高NO水平,改善内皮分泌舒缩因子的功能,从而延缓SHR早期的高血压发展。

安脑平冲汤对大鼠脑出血后脑水肿及水通道蛋白表达的影响

目的观察安脑平冲汤对脑组织含水量和水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响。方法将SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组和造模组。以Ⅳ型胶原酶注射法建立大鼠脑出血模型,造模成功后分为模型组和治疗组,治疗组予安脑平冲汤灌胃,其他组予蒸馏水灌胃,每日2次,共5d。假手术组、模型组和治疗组按12、24、48、72、120h5个时间点分为5个亚组,每个亚组各6只用来测定脑含水量,另选96只大鼠采用同样的分组方法检测AQP-4的表达。结果与模型组比较,治疗组各时间点脑组织含水量下降(P<0.05);AQP-4表达在24～120h时间点减低(P<0.05),12h时差异不明显(P>0.05)。结论安脑平冲汤可以在一定程度上减少AQP-4的表达,从而减轻脑出血后脑水肿。

健脾止动汤对多发性抽动症模型鼠纹状体多巴胺通路的影响

目的研究健脾止动汤对多发性抽动症(TS)模型鼠纹状体多巴胺通路的影响,为健脾止动汤干预小儿TS提供神经生化学依据。方法90只雄性ICR小鼠随机分成6组,即空白组、模型组、泰必利组、健脾止动汤组、六君子汤组、泻青汤组除空白组外,其余5组小鼠腹腔注射亚氨基二丙腈建立TS小鼠模型。除空白组和模型组给予生理盐水外,其余4组分别灌胃给予相应药物。4周后采用高效液相色谱电化学法测定TS模型鼠脑纹状体单胺类递质的含量。结果TS模型鼠表现出抽动症特征性的运动行为和刻板行为。小鼠脑纹状体单胺类递质含量,模型组较空白组脑多巴胺(DA)、二羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA) 、 5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)含量无明显变化(P> 0.05);泻青汤组较模型组DA、 DOPAC含量降低(P < 0.05),泻青汤组较泰必利组脑DA、 5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)NE含量降低(P < 0.01或P < 0.05),泻青汤组较六君子汤组脑DA、 5-HIAA、 NE含量降低(P<0.0或P<0.05)。结论健脾止动汤的主要作用组分为泻青汤,其抗抽动作用可能与兴奋脑纹状体多巴胺间接通路、降低DA含量有关。

加味小承气汤对慢性肝损伤大鼠肠源性内毒素血症的影响

目的探讨加味小承气汤对大鼠肝损伤内毒素血症的作用机制。方法建立硫代乙酰胺(TAA)所致大鼠肝损伤内毒素血症模型,以加味小承气汤进行干预,通过血液生化及病理检查,观察其对内毒素血症大鼠肝功能、肿瘤坏死因子(TNF-α)、内毒素的影响。结果加味小承气汤能明显降低TNF-α、内毒素的含量,减轻肝细胞坏死程度,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论加味小承气汤使内毒素含量、TNF-α水平降低是其对TAA所致大鼠肝损伤具有防护作用的机制之一。

四妙勇安汤对缺氧人脐静脉内皮细胞的影响

目的观察四妙勇安汤对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧损伤模型的影响。方法实验分为3组,即正常组、模型组、四妙勇安汤组,后2组建立体外细胞缺氧模型,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验观察四妙勇安汤对缺氧内皮细胞存活率的影响,测定四妙勇安汤对缺氧内皮细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量的影响,并用免疫荧光法检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)生成量的表达。结果四妙勇安汤能显著增加MTT实验中各孔吸光度值,降低LDH漏出量,增加VEGF的生成量。结论四妙勇安汤具有保护缺氧的HUVEC损伤的作用,其作用机制与增加细胞活性、降低缺氧造成的细胞毒性、增加VEGF的表达、促进血管新生的作用有关。

滋阴活血解毒中药对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察滋阴活血解毒中药对葡萄糖(Glu)、胰岛素(Ins)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的干预作用及其保护机制。方法以人脐静脉内皮细胞株ECV-304为受试对象,以一定浓度的Glu、Ins、ox-LDL诱导体外血管内皮细胞损伤,同时观察滋阴活血解毒中药对该细胞损伤的保护作用。各实验组细胞继续培养48 h后,分别检测细胞活性及细胞培养液中组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)、细胞粘附分子(ICAM-1)的含量。结果细胞培养48 h后,模型组较正常组细胞活力明显下降(P<0.01),PAI及ICAM-1含量明显升高(P<0.01),而不同剂量的滋阴活血解毒中药能显著改善细胞活力(P<0.05),降低PAI及ICAM-1含量(P<0.01),对t-PA的影响无显著性意义。结论滋阴活血解毒中药对Glu、Ins、ox-LDL诱导损伤的血管内皮细胞有保护作用,而这一作用可能是通过促进内皮细胞的纤溶功能、抑制与炎症反应相关的细胞粘附过程等途径实现的。