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E-cadherin,β-catenin,N-cadherin在卵巢浆液性癌中的表达及意义 被引量:11
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作者 林路 赵卫东 +2 位作者 何玉 欧玉荣 席玉玲 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2015年第1期95-100,共6页
目的研究浆液性卵巢癌中E-钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad),β-连环蛋白(β-catenin,β-cat),N-钙粘蛋白(N-cadherin,N-cad)的表达,探讨其相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测60例卵巢浆液性癌中E-cadherin,β-catenin and N-cadh... 目的研究浆液性卵巢癌中E-钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad),β-连环蛋白(β-catenin,β-cat),N-钙粘蛋白(N-cadherin,N-cad)的表达,探讨其相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测60例卵巢浆液性癌中E-cadherin,β-catenin and N-cadherin的表达。结果 E-cadherin,β-catenin在卵巢浆液性癌、卵巢浆液性良性肿瘤和卵巢交界性肿瘤及正常卵巢组织间差异有统计学意义(P<0.05),而在卵巢良性肿瘤和卵巢交界性肿瘤间,差异不大,无统计学意义(P>0.05)。N-cadherin在卵巢浆液性癌与卵巢交界性肿瘤,卵巢浆液性良性瘤及正常卵巢组织间差异有统计学意义(P<0.05),而在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤和卵巢交界性肿瘤间,无差异,无统计学意义。结论 E-钙粘蛋白(E-cadherin),β-连环蛋白(β-catenin),N-钙粘蛋白(N-cadherin)在浆液性卵巢癌中均存在异常表达。提示三种因子可能造成肿瘤的发生、发展、侵袭及转移。三者同时检测,可能为早期诊断上皮性卵巢癌及针对上皮性卵巢癌的靶向治疗提供分子依据及新的思路。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 E-CADHERIN Β-CATENIN N-CADHERIN 免疫组化
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分离、鉴定CD133^+人肝癌干细胞以及^(131)I-CD133mAb对其生物学效应的影响 被引量:5
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作者 侯妍利 唐敏 +4 位作者 陈兴月 段丽群 康强强 舒锦 李少林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期222-227,共6页
目的分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响。方法为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内... 目的分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响。方法为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内成瘤实验验证干细胞特性;氯胺T法制备131I标记CD133单克隆抗体(131ICD133mAb)并鉴定;取分选后的CD133+-Huh-7细胞、Huh-7细胞和HepG2细胞进行实验,将每种细胞分成4组(131ICD133mAb组、131I组、CD133mAb组、131I+CD133mAb组);MTT法检测各组对CD133+-Huh-7细胞生长抑制的最适剂量和各组在最适剂量作用后24、48、72 h对3组细胞生长抑制率;流式细胞仪检测131I-CD133mAb作用3组细胞72 h时细胞凋亡和细胞周期的变化。结果 Huh-7和HepG2细胞系CD133表达率分别为18.8%和5.2%,故选用Huh-7细胞进行分选;磁珠分选后CD133+-Huh-7细胞CD133的表达率为99.28%,与分选前比较差异有统计学意义(P<0.01)。CD133+-Huh-7细胞相对于CD133--Huh-7细胞具有更强的体外成球能力、克隆形成能力和体内成瘤能力。131I-CD133mAb标记率为87.92%,放射化学纯度为97.54%,具有较好的稳定性和免疫活性。当131I 4.8 MBq/100μL、CD133mAb 4.8μg/100μL时对CD133+-Huh-7细胞抑制率最高(P<0.05),取此放射性浓度进行实验。24、48、72 h时各组对CD133+-Huh-7细胞的抑制作用明显高于Huh-7和HepG2细胞组,131I-CD133mAb组对3种细胞生长抑制率明显高于其余各组,抑制率随时间的增加而升高(P<0.01)。131I-CD133mAb作用CD133+-Huh-7细胞72 h后凋亡率为31.21%,明显高于其余2组(P<0.05)。细胞周期检测结果显示CD133+-Huh-7细胞G0/G1期减少54.77%,明显高于其余2组(P<0.05)。结论 CD133+细胞具有肿瘤干细胞特性,131I-CD133mAb能特异性结合CD133+-Huh-7细胞,调控细胞周期和诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 CD133 肝癌干细胞 ^131I 单克隆抗体
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ERK1和E-cadherin在胃腺癌中的表达及其临床病理意义 被引量:4
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作者 陆国玉 吴晓飞 +2 位作者 周蕾 王丹娜 武世伍 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2015年第1期72-77,共6页
目的探讨原发性胃腺癌(gastric adenocarcinoma,GAC)组织中ERK1和E-cadherin蛋白的表达情况及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测261例GAC组织和100例正常胃黏膜组织中ERK1和E-cadherin蛋白的表达。结果在正... 目的探讨原发性胃腺癌(gastric adenocarcinoma,GAC)组织中ERK1和E-cadherin蛋白的表达情况及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测261例GAC组织和100例正常胃黏膜组织中ERK1和E-cadherin蛋白的表达。结果在正常胃黏膜组织中,ERK1和E-cadherin蛋白的阳性表达率分别为26.0%和100%;在GAC组中,ERK1和E-cadherin蛋白的阳性表达率分别为49.8%和41.4%,两组之间,差异有统计学意义(P<0.05)。ERK1和Ecadherin蛋白的阳性表达水平在肿瘤组织的不同分化程度、淋巴结转移与否、浸润深度及临床分期等之间差异有统计学意义(全部P<0.05);ERK1蛋白的阳性表达率与E-cadherin蛋白的阳性表达率呈负相关关系(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,ERK1蛋白表达阳性的患者其生存时间显著低于其阴性表达患者(P<0.001);E-cadherin蛋白表达阳性的患者其生存时间显著高于其阴性表达患者(P<0.001)。多因素Cox回归分析:ERK1、E-cadherin蛋白的表达水平以及TNM分期是影响GAC患者术后生存率的独立预后因素。结论 ERK1和E-cadherin蛋白的表达水平与GAC患者肿瘤组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期及预后等均有关;在GAC组织中联合检测ERK1和E-cadherin对判断GAC患者淋巴结转移及预后均有重要意义。 展开更多
关键词 胃肿瘤 ERK1 E-CADHERIN 预后 免疫组织化学
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miR-494通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进胰岛β细胞增殖、抑制其凋亡增加胰岛素分泌 被引量:2
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作者 宋姗姗 杨洋 +1 位作者 何静 唐俊峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1003-1009,共7页
目的 探究微小RNA-494 (miR-494)与胰岛β细胞功能和妊娠糖尿病之间的关系。方法 选择20例妊娠糖尿病患者和健康体检者,反转录PCR测定其外周血miR-494的含量;培养INS-1胰岛细胞瘤细胞,分别采用含低糖(3.3 mmol/L)和高糖(16.7 mmol/L)处... 目的 探究微小RNA-494 (miR-494)与胰岛β细胞功能和妊娠糖尿病之间的关系。方法 选择20例妊娠糖尿病患者和健康体检者,反转录PCR测定其外周血miR-494的含量;培养INS-1胰岛细胞瘤细胞,分别采用含低糖(3.3 mmol/L)和高糖(16.7 mmol/L)处理后,采用ELISA测定胰岛素含量来评价胰岛细胞基础和高糖刺激的胰岛素分泌能力;采用miR-494模拟物对照、miR-494模拟物、miR-494抑制物对照、miR-494抑制物分别处理INS-1细胞24、48、72 h,收集细胞。采用噻唑蓝(MTT)法检测INS-1细胞的活性,流式细胞术检测细胞凋亡;反转录PCR检测INS-1细胞Wnt3a、β联蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和c-Myc的mRNA表达;Western blot法检测细胞Wnt3a、β-catenin、cyclin D1、c-Myc蛋白表达。结果 与正常对照组相比,妊娠糖尿病患者空腹胰岛素、空腹血糖、1 h血糖和2 h血糖显著升高;外周血miR-494含量降低。过表达miR-494的INS-1细胞上清液胰岛素浓度增加,当给予高糖后,过表达miR-494进一步促进胰岛素分泌。过表达miR-494明显促进INS-1细胞活性,抑制INS-1细胞凋亡;miR-494能够显著性促进Wnt3a、β-catenin、cyclin D1、c-Myc的mRNA和蛋白表达,miR-494抑制物处理则结果相反。结论 miR-494通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进胰岛β细胞增殖、抑制其凋亡增加胰岛素分泌。 展开更多
关键词 妊娠糖尿病 WNT β联蛋白(β-catenin) 微小RNA-494(miR-494) 胰岛Β细胞
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肝素、5-羟色胺和白介素-1对NIH/3T3成纤维细胞AgNORs影响的图像分析 被引量:5
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作者 崔玉芳 杨红 +3 位作者 高亚兵 杨瑞彪 夏国伟 王德文 《中国体视学与图像分析》 1998年第1期18-21,共4页
应用核仁组成区相关蛋白银染技术(AgNORs)结合图像分析观察了肝素、5-羟色胺和白介素质(IL-1)对体外培养的NIH3T3成纤维细胞AgNORs的影响。结果表明:(1)加入0.1-0.4mgL浓度的肝素培养后... 应用核仁组成区相关蛋白银染技术(AgNORs)结合图像分析观察了肝素、5-羟色胺和白介素质(IL-1)对体外培养的NIH3T3成纤维细胞AgNORs的影响。结果表明:(1)加入0.1-0.4mgL浓度的肝素培养后第3天,成纤维细胞嗜银蛋白颗粒面积(Ag-a)、积分光密度(Ag-iod)和嗜银相关蛋白面积与核面积的百分比(Ag-a/Na)均出现升高,其中以0.10和0.20mgL浓度的肝素刺激作用最强,三个指标的均值分别为对照值的1.47、1.54和1.94倍(P<0.01);(2)加入不同浓度5-羟色胺后AgNORs的三个参数呈现出类似的升高趋势,而以1.0和2.0×10-6molL浓度的5羟色胺显示出较强的促进作用,成纤维细胞AgNORs的三个指标相当于对照值的1.53、1.57和2.42倍;(3)在所观察的lL-1四种浓度范围内,以100和200×103uL浓度的lL-1对成纤维细胞的促增殖作用最强,三个指标的均值分别为对照值的1.60、1.84和2.42倍。 展开更多
关键词 肝素 5羟色胺 白介素-1 成纤维细胞 图像分析 AGNORS
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17β-雌二醇通过上调CXCR4表达促进骨髓间充质干细胞的趋化迁移 被引量:4
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作者 孙欣慰 杨铧琦 徐惠成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期664-668,共5页
目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)对体外骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)趋化因子受体CXCR4表达的影响及CXCR4表达变化对BMSCs趋化迁移的调控情况。方法全骨髓法+贴壁法分离、培养BMSCs,不同浓度(10-1... 目的研究17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)对体外骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)趋化因子受体CXCR4表达的影响及CXCR4表达变化对BMSCs趋化迁移的调控情况。方法全骨髓法+贴壁法分离、培养BMSCs,不同浓度(10-10、10-9、10-8、10-7、5×10-7、10-6mol/L)的17β-雌二醇诱导经雌激素受体拮抗剂ICI182780处理和未经处理的BMSCs后于不同时相点(24、48 h),用RT-PCR法和Western blot法分别检测细胞趋化因子受体CXCR4的表达情况,利用Transwell小室体外迁移体系观察10-7mol/L 17β-雌二醇诱导前后的BMSCs对于不同浓度基质细胞衍生因子SDF-1的定向迁移情况,及采用AMD3100阻断SDF-1特异性受体CXCR4后对雌激素诱导前后BMSCs定向迁移的影响。结果 BMSCs在不同浓度17β-雌二醇诱导24、48 h后,其CXCR4 mRNA的表达均有不同程度的升高,其中以24 h时10-7mol/L组升高最为明显(P<0.05)。CXCR4蛋白表达在24 h各浓度组以升高为主,24 h时5×10-7mol/L组升高最为明显,48 h各浓度组以降低为主。雌激素受体拮抗剂ICI 182780能够明显抑制17β-雌二醇对CXCR4表达的影响(P<0.05)。BMSCs对SDF-1的定向迁移有明显的浓度依赖性,且相同条件下17β-雌二醇诱导后的BMSCs迁移细胞数显著高于未经诱导的BMSCs,而CXCR4阻断剂AMD3100可明显抑制17β-雌二醇干预前后BMSCs的趋化迁移(P<0.05)。结论 17β-雌二醇在一定的诱导时间内可提高BMSCs CXCR4的表达,进而增强SDF-1对BMSCs的体外趋化作用。 展开更多
关键词 雌激素 骨髓间充质干细胞 SDF-1 CXCR4[迁移
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CpG-c41分子对TLR7-MyD88依赖型信号通路的交叉干扰作用 被引量:1
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作者 陈铭 卫国 +2 位作者 祝元锋 沈伟 李彦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期927-930,共4页
目的探讨TLR9强力拮抗剂CpG-c41分子对TLR7-MyD88依赖型信号通路的交叉干扰作用。方法体外实验采用ELISA法检测CpG-c41对TLR7激动剂ssRNA83刺激RAW264.7细胞24 h诱发的炎症介质TNF-α和IL-6表达的影响,Western blot检测CpG-c41对TLR7-My... 目的探讨TLR9强力拮抗剂CpG-c41分子对TLR7-MyD88依赖型信号通路的交叉干扰作用。方法体外实验采用ELISA法检测CpG-c41对TLR7激动剂ssRNA83刺激RAW264.7细胞24 h诱发的炎症介质TNF-α和IL-6表达的影响,Western blot检测CpG-c41对TLR7-MyD88依赖型信号通路中IκBα蛋白表达的影响;体内实验采用ELISA法检测CpG-c41对ssRNA83攻击BALB/c小鼠2 h诱发血清中TNF-α和IL-6表达的影响作用。结果体内、体外实验均表明,CpG-c41分子能够显著抑制经ssRNA83刺激诱发TLR7-MyD88依赖型信号通路介导的炎症介质TNF-α和IL-6的释放(P<0.01),体外实验表明抑制作用具有量效关系;而Western blot检测显示在CpG-c41作用下,TLR7-MyD88依赖型信号通路中IκBα的降解受干扰。结论 TLR9强力拮抗剂CpG-c41分子通过干扰TLR7-MyD88依赖型信号通路中IκBα的磷酸化降解,抑制炎症介质的释放,发挥对ssRNA攻击小鼠的免疫保护作用。 展开更多
关键词 CpG—c41 ssRNA83 TLR7-MyD88依赖型信号通路 交叉干扰
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人非小细胞肺癌NCI-H3122克唑替尼耐药细胞株的构建及耐药相关miRNAs的初步筛选 被引量:1
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作者 刘晓 贾燕花 +1 位作者 张可 刘皈阳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期687-692,共6页
目的建立对克唑替尼耐药的非小细胞肺癌细胞株,并对其耐药性进行鉴定,初步筛选耐药相关的miRNAs。方法采用克唑替尼药物浓度递增的方法建立人耐药细胞株NCI-H3122CR,并通过细胞生长曲线、药物敏感性、细胞凋亡和细胞周期的检测评价NCI-H... 目的建立对克唑替尼耐药的非小细胞肺癌细胞株,并对其耐药性进行鉴定,初步筛选耐药相关的miRNAs。方法采用克唑替尼药物浓度递增的方法建立人耐药细胞株NCI-H3122CR,并通过细胞生长曲线、药物敏感性、细胞凋亡和细胞周期的检测评价NCI-H3122CR细胞株的耐药性。第二代基因测序法和RT-PCR检测耐药后microRNA表达量的变化。结果成功建立了克唑替尼耐药细胞株H3122CR,耐药指数为9.86。流式细胞仪检测结果显示H3122CR细胞凋亡率比H3122细胞低,并呈现浓度依赖性的趋势。耐药细胞株的细胞周期分布产生了显著的变化。当前的第二代测序和RT-PCR检测结果显示:miR-30a-5p、miR-374c-5p和miR-125b-5p表达上调,miR-31-5p、miR-10a-5p和miR-200c-3p表达下调。结论构建的H3122CR耐药细胞模型对克唑替尼有一定的耐药性,并且耐药后部分miRNAs表达量产生显著的变化。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 克唑替尼 抗药性 肿瘤 MIRNAS
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肌肉活检组织中NADH-TR染色与免疫组化双重染色技术 被引量:1
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作者 王丛阳 林莉 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1377-1378,共2页
对肌肉活检标本进行还原型辅酶Ⅰ四氮唑还原酶(NADH—tetrazolium reductase,NADH—TR)染色可区分不同的肌纤维结构,是神经肌纤维病变诊断的重要指标之一,免疫组化染色有利于观察肌纤维不同部位蛋白变化而进一步确定病变性质。在... 对肌肉活检标本进行还原型辅酶Ⅰ四氮唑还原酶(NADH—tetrazolium reductase,NADH—TR)染色可区分不同的肌纤维结构,是神经肌纤维病变诊断的重要指标之一,免疫组化染色有利于观察肌纤维不同部位蛋白变化而进一步确定病变性质。在同一张切片上进行NADH—TR染色与免疫组化双重染色,可同时显示不同染色成分,为病理诊断提供更丰富的形态学依据。现将方法介绍如下。 展开更多
关键词 肌肉活检 NADH—TR染色 免疫组织化学 双重染色
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逆转录PCR(RT-PCR)实验操作要点 被引量:3
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作者 孙晓东 王珺 +2 位作者 龚坚 王燕 桑明 《现代医药卫生》 2009年第13期2049-2049,共1页
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。以RNA为模板,首先在依赖于RNA的DNA聚合酶的催化作用下体外合成cDNA的第一条链。以此条cDNA链为模板,又可继续进行PCR。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于... RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。以RNA为模板,首先在依赖于RNA的DNA聚合酶的催化作用下体外合成cDNA的第一条链。以此条cDNA链为模板,又可继续进行PCR。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA.要得到理想的结果.关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。而确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染,关键是要做好实验前的准备,注意实验操作的一些细节。 展开更多
关键词 RT-PCR技术 实验操作 RNA病毒 逆转录 CDNA序列 基因表达水平 基因组DNA DNA聚合酶
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改良May-Grnwald染色法在血涂片染色中的应用
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作者 赵文华 陈河 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期43-44,共2页
关键词 May-Grünwald染色法 血涂片 微波辐射 压片法
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转染重组bcl-2基因缓解RA介导NTCD的电镜观察
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作者 孙榆 李泽桂 蔡文琴 《四川解剖学杂志》 2001年第2期116-117,共2页
关键词 转染 介导 NTCD bcl-2 神经管缺陷 神经管畸形 RA 基因
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BMP-2在成年大鼠脑内SVZa-RMS-OB通路中的表达 被引量:3
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作者 刘建军 姚忠祥 +2 位作者 陈兴书 蔡文琴 杨辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期1656-1658,共3页
目的明确BMP-2在成年大鼠脑内,SVZa、RMS、OB3个不同区域内的表达模式。方法用RT-PCR和免疫荧光染色的方法观察成年大鼠SVZa、RMS、OB3个区域BMP-2的表达情况。结果RT-PCR检测在成年大鼠脑内SVZa、RMS、OB3个区域BMP-2的mRNA均有不同程... 目的明确BMP-2在成年大鼠脑内,SVZa、RMS、OB3个不同区域内的表达模式。方法用RT-PCR和免疫荧光染色的方法观察成年大鼠SVZa、RMS、OB3个区域BMP-2的表达情况。结果RT-PCR检测在成年大鼠脑内SVZa、RMS、OB3个区域BMP-2的mRNA均有不同程度的表达,其中OB区表达最高;免疫组化显示BMP-2蛋白在OB区表达也最高,但在SVZa区表达次之,RMS区表达最低。结论确立BMP-2在成年大鼠SVZa、RMS、OB3个区域的表达模式,提示BMP-2可能对成年SVZa神经干细胞的增殖和定向分化起到一定的调节作用。 展开更多
关键词 骨形成蛋白2 嘴侧迁移流 表达
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SARS患者脾内IL-6I、FN-β和IP-10的免疫组织化学观察及定量分析 被引量:1
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作者 陈丽 唐军民 +4 位作者 战军 唐岩 李枫 任彩霞 梅芳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期458-462,共5页
目的通过对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾内白细胞介素6(IL-6),干扰素β(IFN-β)和干扰素γ诱导蛋白10(IP-10)的免疫组织化学结果分析,深入探讨SARS患者脾组织的病理变化及其发病机制。方法通过免疫组织化学技术观察6例SARS... 目的通过对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾内白细胞介素6(IL-6),干扰素β(IFN-β)和干扰素γ诱导蛋白10(IP-10)的免疫组织化学结果分析,深入探讨SARS患者脾组织的病理变化及其发病机制。方法通过免疫组织化学技术观察6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾组织细胞内IL-6、IFN-β和IP-10的表达情况,并进行图像分析。结果SARS患者脾红髓内含大量IL-6阳性细胞,阳性产物呈团块状分布于细胞质和细胞核。图像分析结果显示,SARS患者脾红髓内IL-6阳性细胞的平均吸光度值(AA)与正常对照组比较,有显著性差异(P〈0.05);SARS患者脾红髓内阳性细胞的细胞核、细胞质呈IFN-β阳性,阳性产物呈棕黄色团块状,图像分析结果显示,SARS患者脾组织内IFN-β阳性细胞的AA值与正常对照组比较,有显著性差异(P〈0.05);SARS患者脾红髓内含大量IP-10阳性细胞,阳性产物呈棕黄色团块状,分布于细胞核和细胞质。图像分析结果显示,SARS患者脾组织内IP-10阳性细胞的AA值与正常对照组比较,有显著性差异(P〈0.05)。3种细胞因子在SARS患者残存的脾白髓内均呈阴性。结论SARS患者脾内细胞的IL-6、IFN-β和IP-10反应均相对增强,提示SARS患者脾组织的病理性损伤以及免疫功能缺陷可能与上述促炎症因子、免疫抑制因子及趋化因子的相对增多有关。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 白细胞介素6 干扰素Β 干扰素γ诱导蛋白10 免疫组织化学
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微小RNA-7对人视网膜色素上皮细胞增生和迁移的影响 被引量:5
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作者 李林 徐剑容 +2 位作者 王咏针 孙玉莹 李斌 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第2期122-126,共5页
目的探讨微小RNA-7(miRNA-7)对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞增生和迁移的调控作用。方法利用脂质体Lipofectamine 2000将miRNA-7前体miRNA-145(miRNA-7前体干预组)和阴性对照物(阴性miRNA对照组)转染h... 目的探讨微小RNA-7(miRNA-7)对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞增生和迁移的调控作用。方法利用脂质体Lipofectamine 2000将miRNA-7前体miRNA-145(miRNA-7前体干预组)和阴性对照物(阴性miRNA对照组)转染hRPE细胞,同时设立空脂质体组和空白对照组,采用Real-Time PCR检测成熟miRNA-7的表达,CCK-8检测细胞增殖抑制情况,用直径为8.5 mm的Boyden小室进行细胞迁移能力的检测,对4组结果作统计学分析。结果 miRNA-7对hRPE细胞增殖有明显抑制作用,miRNA-7前体干预组细胞增殖抑制率(23.58%)明显高于阴性miRNA对照组(2.35%)、空脂质体组(2.97%)与空白对照组(0%),差异均具有统计学意义(均为P<0.05),空脂质体组、阴性miRNA对照组与空白对照组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。在miRNA-7前体干预组中,迁移细胞数明显较少,每高倍视野为(16.0±3.8)个,而在阴性miRNA对照组、空脂质体组和空白对照组中,迁移细胞数明显较多,每高倍视野分别为(32.2±7.8)个、(31.4±6.9)个和(33.9±8.4)个,miRNA-7前体干预组细胞迁移数较后3组显著减少,差异均有统计学意义(均为P<0.01),而后3组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 miRNA-7可明显抑制hRPE细胞的增殖和迁移,这种抑制作用可能是由于miRNA-7对hRPE细胞的EGFR通路产生了良好的靶向沉默后效应,直接下调EGFR表达,从而阻断或部分阻断了ERK1/2信号通路,使得hRPE细胞的增殖和迁移受到明显抑制。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 增生性玻璃体视网膜病变 表皮生长因子受体 微小RNA
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ISOLATION AND CUTURE EMBRYONIC STEM-LIKE CELLS DERIVED HUMAN AMNIOTIC FLUID CELLS
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作者 HUAJin-lian LIUYu-xiao DONGWu-zi DOUZhong-ying 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期508-508,共1页
关键词 人类 羊水源类ES细胞 多能性干细胞 分离培养 细胞培养
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Effect of Transforming Growth Factor-β_2 on Phagocytosis in Cultured Bovine Trabecular Meshwork Cells
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作者 曹阳 魏厚仁 +1 位作者 笪邦红 黄毅 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2001年第4期318-320,共3页
The effect of transforming growth factor β 2 (TGF β 2) on phagocytosis in bovine trabecular meshwork cells in vitro was investigated. After the cultured bovine trabecular meshwork cells were treated with 0 ... The effect of transforming growth factor β 2 (TGF β 2) on phagocytosis in bovine trabecular meshwork cells in vitro was investigated. After the cultured bovine trabecular meshwork cells were treated with 0 ng/ml, 0.32 ng/ml, 1 ng/ml, 3.2 ng/ml TGF β 2 for 24 h, latex beads were added into the incubation medium, and the numbers of the latex beads in 20 adjacent cells were counted under a microscope 24 h later, after treatment with Wright's stain. Our results showed that the average numbers of the latex beads in the trabecular meshwork cells treated with TGF β 2 of different concentrations were 53.1±1.7 beads/cell, 56.4±2.9 beads/cell and 77.9±6.5 beads/cell respectinvely, in comparison with 45.5±3.3 beads/cell of the control group. TGF β 2 significantly increased the number of the latex beads phagocytosed by cultured bovine trabecular meshwork cells in a dose dependent manner. TGF β 2 could promote the phagocytosis of bovine trabecular meshwork cells in vitro . It may be involved in the cellularity decrease of the trabecular meshwork in the patients of primary open angle glaucoma through promoting the phagocytosis of trabecular meshwork cells. 展开更多
关键词 transforming growth factor trabecular meshwork cultured cells PHAGOCYTOSIS
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EFFECTS OF ET-1 ON MITOGENESIS AND COLLAGEN SYNTHESIS IN CULTURED CARDIAC FIBROBLASTS
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作者 王长谦 黄定九 +3 位作者 陈润芬 谢秀兰 丁弘毅 徐依敏 《Medical Bulletin of Shanghai Jiaotong University》 CAS 1999年第2期100-102,共3页
Objective To examine the eflects of endothelin - 1 (ET- 1) on mitogenesis and collagen synthesis in cultured cardiac libroblasts. Methods The mitogenesis and collagen synthesis in cultured cardiac fibroblasts were ass... Objective To examine the eflects of endothelin - 1 (ET- 1) on mitogenesis and collagen synthesis in cultured cardiac libroblasts. Methods The mitogenesis and collagen synthesis in cultured cardiac fibroblasts were assessed by incorporation of 3H- TdR and 3H-proline respectively. Results 10-12~10-8mol/L ET- 1 could enhance the incorporation rate of 3H- TdR and 3H-proline in an dose - dependent manner in cultured cardiac libroblasts. Conclusion ET- 1 could stimulate the mitogenesis of cultured cardiac fibroblasts and could enhance collagen synthesis by cultured cardiac libroblasts, this effect of ET- 1 is probably related to the formation of myocardial collagen network remodeling. 展开更多
关键词 ventricular remodeling myocardial collagen network ENDOTHELIN-1
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人胎盘滋养层细胞的分离培养及IgG FcγRⅢ在滋养层细胞的表达 被引量:31
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作者 程勇前 聂青和 +2 位作者 周永兴 杜德伟 杨华光 《医学研究生学报》 CAS 2002年第2期105-108,111,共5页
目的 :体外分离培养人胎盘滋养层细胞 ,观察其生物学特性 ,研究IgGFcγRⅢ (CD16)在人胎盘组织中的定位及体外培养的滋养层细胞是否存在CD16,从而为HCV母婴传播机制的研究提供细胞学实验基础。 方法 :采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎... 目的 :体外分离培养人胎盘滋养层细胞 ,观察其生物学特性 ,研究IgGFcγRⅢ (CD16)在人胎盘组织中的定位及体外培养的滋养层细胞是否存在CD16,从而为HCV母婴传播机制的研究提供细胞学实验基础。 方法 :采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织 ,以 3 5 %、4 5 %两个Percoll密度梯度进行分离纯化。用ABC免疫组化染色法对足月分娩后的胎盘组织石蜡包埋切片及体外分离培养的胎盘滋养层细胞进行染色。 结果 :胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性 ,血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性 ,经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者(滋养层细胞 )占 90 %以上 ,胎盘组织切片的滋养层细胞及体外分离培养的滋养层细胞抗CD16染色阳性 ,阳性信号定位于胞质 ,未见胞核着色。 结论 :改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞 ,胎盘组织的滋养层细胞和体外分离培养的滋养层细胞均有CD16表达。 展开更多
关键词 滋养层细胞 分离纯化 细胞培养 FC受体 体外实验 表达
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MTT法与BrdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性比较 被引量:12
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作者 刘苹 李平 +1 位作者 熊仁平 周元国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1262-1263,共2页
目的比较MTT法与B rdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性。方法原代培养大鼠成纤维细胞,分别在细胞60%汇合和80%汇合时,以250 pg/m lTGF-β刺激细胞增殖,48 h后分别用MTT法和B rdU ELISA法,以及免疫组化方法检测细胞增殖情况。结果细... 目的比较MTT法与B rdU ELISA法检测成纤维细胞增殖的可靠性。方法原代培养大鼠成纤维细胞,分别在细胞60%汇合和80%汇合时,以250 pg/m lTGF-β刺激细胞增殖,48 h后分别用MTT法和B rdU ELISA法,以及免疫组化方法检测细胞增殖情况。结果细胞60%汇合时MTT检测组和B rdU ELISA检测组与各自的对照组比较,比值分别为1.46和1.70,检测值近似;细胞80%汇合时二者分别为1.0和2.5,免疫组化结果显示TGF-β刺激组蓝染的增殖细胞明显高于对照组。结论与MTT法相比,B rdU ELISA更能客观地反映细胞增殖情况。 展开更多
关键词 MTT法 BRDU ELISA法 细胞增殖
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