成纤维细胞生长因子2对胎鼠肾小体发育的影响

目的观察成纤维细胞生长因子2(FGF2)对体外培养胚龄12.5 d(E12.5 d)胎鼠肾组织发育的影响,从而探求它与肾小体发育的关系。方法E12.5 d的胎鼠肾组织分别用0,25,100,200,400 ng/mL FGF2体外培养,培养2,4,6 d后HE染色观察肾组织中肾小体的发育情况;免疫组织化学染色结合体视学对不同浓度FGF2体外培养肾组织中各期肾小体成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)的表达进行半定量分析。结果E12.5 d胎鼠肾组织在体外培养过程中有类似在体的发育过程,经FGF2培养后,可见发育不同阶段的肾小体增多。免疫组织化学染色和体视学结果显示经与0 ng/mL FGF2比较,25,100,200,400 ng/mL FGF2体外培养后,肾组织中FGFR1的表达显著升高(P<0.05),但4个浓度间差异无统计学意义。结论推测在肾脏的发育过程中,FGF2主要通过与FGFR1结合从而促进间充质细胞的聚集和肾小体的发育。

成纤维细胞生长因子受体1,2在小鼠肾发育中的动态表达

背景:在肾发育过程中,成纤维细胞生长因子受体1,2的时空表达仍是一个有争议的问题,且其与肾脏发育的关系尚不清楚。目的:观察成纤维细胞生长因子受体1,2在小鼠肾发育过程中的动态表达,探求它们与肾发生发育的关系。方法:培育不同发育阶段的胎鼠(E12,14,16,18 d)和仔鼠(N1,3,7,14,24,40 d),应用免疫组织化学技术观察成纤维细胞生长因子受体1,2在不同肾组织中的时空表达,结合体视学和Western blot对它们的表达进行定量分析。结果与结论:①免疫组化显示:在E12 d时,成纤维细胞生长因子受体1主要定位在输尿管芽尖端的生后肾组织,随后表达在各期未成熟的肾小体、部分远曲小管和毛细血管袢,反应部位主要集中在生肾区;而成纤维细胞生长因子受体2开始即在输尿管芽和生后肾组织中均有表达,随着后肾发育,定位于未发育成熟的各期肾小体、远端小管、集合管和髓袢细段,成熟肾小体表达微弱;②体视学和Western blot检测显示:成纤维细胞生长因子受体1在生前表达较高,出生后逐渐下降,N7 d后表达很低;成纤维细胞生长因子受体2在肾脏的表达随着胚(日)龄的增加而升高,N7 d后趋于稳定;③结果表明:在肾的发育过程中,成纤维细胞生长因子受体1,2呈一定的时空性表达,推测二者可能参与了肾单位的发育与成熟,而在输尿管芽分支和形态的形成过程中,成纤维细胞生长因子受体2的作用更为显著。

持续肾盂灌注对兔肾损伤的实验研究

目的研究兔单侧肾盂恒压灌注后对肾脏的影响。方法对50只家兔行单侧输尿管造瘘，灌注组输尿管造瘘后立即行灌注，假手术组只造瘘不灌注，灌注压力分别为60、80、100、120cmH2O，术后每天留取尿标本定量测定尿三蛋白：即免疫球蛋白（IgG）、白蛋白（AIB）、β2微球蛋白（β2-MG），连续取肾组织行病理检查监测兔肾形态学改变。结果所有灌注兔肾术后都出现尿蛋白增高，术后第1天与术前相比，都有显著性差异（P〈0．01），灌注各组术后第1天与假手术组相比，也有显著性差异（P〈0．01），术后第1天在灌注各组间有显著性差异（P〈0．01）；灌注后第6天后各种蛋白趋于正常，与假手术组无显著性差异，但β2-MG恢复时间稍长，80cmH2O以上压力灌注后术后第6天所测结果与假手术组相比仍有显著性差异（P〈0．05）；形态学表现：肉眼观：灌注后即刻见肾盂内充满灌注液，肾脏颜色逐渐变深，包膜紧张，肾脏较前增大，压力越高改变越明显，且随着压力增高，部分肾脏包膜下有少量渗出，在压力超过100cmH2O时，19例中有16例出现明显的水外渗。术后再次取病理时见肾脏大小、颜色无明显改变。显微镜下观察见集合系统扩张，并随着压力的增高，改变更明显，恢复时间越长。结论压力为60～120cmH2O对兔肾盂进行灌注时，在短期内会出现尿三蛋白及组织学改变，提示短暂的肾功能损害，且压力越高，肾功能损害越严重，恢复时间越长，但只要引流通畅，避免感染，肾功能则会较快恢复。

成纤维细胞生长因子受体1和受体2在小鼠肾发育中的表达

目的观察成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)及受体2(FGFR2)在小鼠肾发育过程中的时空表达,探讨其与肾发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d的胎鼠和生后N1、7、14、21、40d的仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定位观察;应用图像分析技术、体视学方法及免疫印迹技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定性分析及定量检测。结果免疫组化结果显示,胚龄E12d时FGFR1和FGFR2即开始表达。FGFR1在发育各期的肾小体(即逗号小体、S小体、毛细血管襻期肾小体、未成熟期肾小体及成熟期肾小体)、远端小管和集合管均有表达,而在近端小管未见表达。FGFR2主要在远端小管表达,在各期发育肾小体、近端小管和集合管未见表达。图像分析结果显示,随着肾脏的发育,FGFR1、FGFR2表达逐渐增高。体视学及免疫印迹检测结果显示,FGFR1和FGFR2的含量都随着肾脏的发育逐渐增加。结论 FGFR1和FGFR2对小鼠肾发育所起的作用不同,FGFR1与肾小体、远端小管和集合管发育相关,而FGFR2主要与远端小管发育相关。

组织型纤溶酶原激活物、尿激酶型纤溶酶原激活物在单侧输尿管梗阻大鼠不同阶段肾组织中的表达及意义

目的:建立单侧输尿管梗阻大鼠模型,观察组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)在不同时间点肾组织中的表达情况,探讨其不同的表达与肾间质纤维化的关系。方法:实验于2006-05/2007-04在泸州医学院附属医院病理学实验室及传染免疫学实验室完成。72只清洁级雄性SD大鼠,随机分为3组,正常组24只,假手术组24只,模型组24只。各组大鼠于单侧输尿管结扎术后1,4,7,14d取肾组织进行病理分析,观察各组大鼠于单侧输尿管梗阻术后1,4,7,14d的肾小管损伤与肾间质纤维化情况,并采用免疫组织化学技术动态观察t-PA、u-PA在各组的表达情况。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。结果:参加实验动物72只,中途共死亡5只,均及时补充,最后进入结果分析大鼠为72只。①模型组术后4d,肾脏组织即表现早期纤维化的病理改变,术后第7天,肾小管表现出明显损害,术后14d,肾间质纤维化表现明显。②假手术组较正常组各时间点t-PA、u-PA表达明显减少(P<0.05),模型组t-PA、u-PA在梗阻初期均随梗阻时间延长表达增多,术后第4天表达最多,以后随梗阻时间延长表达逐渐减少。结论:在输尿管梗阻早期,肾组织可能自身代偿分泌合成t-PA、u-PA,在一定程度下有利于延缓肾间质纤维化的进展,随着纤维化的发展,肾小管上皮细胞变性坏死,t-PA、u-PA分泌逐渐减少。

CGRP对UUO小鼠肾组织间质纤维化与炎性因子表达的干预作用

目的探讨CGRP对小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化的影响。方法选择雄性小鼠36只,建立小鼠UUO模型,前2 d治疗组和模型组分别每天给予CGRP 1.0 nmol·kg^(-1)·d^(-1)和同等量0.9%氯化钠溶液静脉注射。观察模型第14天肾小管损害百分比、肾间质纤维化程度、肾间质α-SMA平滑肌肌动蛋白、肾间质巨噬细胞数,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)以及F4/80 mRNA的表达。结果 CGRP显著减轻肾小管损害和肾间质纤维化(P<0.05);治疗组肾间质巨噬细胞数F4/80和肾间质α-SMA表达显著低于模型组(P<0.05);CGRP显著抑制MCP-1以及F4/80 mRNA的表达(P<0.05)。结论 CGRP减少小鼠UUO模型肾间质巨噬细胞浸润、降低MCP-1以及F4/80 mRNA表达、抑制α-SMA的表达,从而减轻肾间质纤维化。

肝豆状核变性肾脏近端小管损害的研究

目的:评价肝豆状核变性(HLD)患者肾脏近端小管损害的检测方法,为避免HLD误诊及其早期干预治疗提供帮助。方法:对确诊为HLD并除外其他肾小管疾病诱因的38例患者以及31例健康对照者行尿常规检查及24 h尿量、尿糖、尿蛋白、尿钾、钠、氯、钙、磷和尿酸化功能;并对其中37例HLD患者行尿氨基酸定量分析。结果:(1)HLD组的血碱性磷酸酶、24 h尿蛋白、尿钾、尿pH值、尿比重、最初pH值、尿常规中尿蛋白、尿糖、尿潜血、尿红细胞、尿白细胞阳性率较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HLD组的血钾、钙、磷、尿磷、尿可滴定酸较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)HLD患者24 h尿氨基酸高于正常值。结论:HLD患者存在不同程度的肾脏近曲小管功能受损。

不同剂量参芍胶囊对动脉粥样硬化大鼠肾损害的保护作用

目的观察不同剂量参芍胶囊对动脉粥样硬化大鼠肾损害的影响。方法将50只Wistar大鼠随机分成对照组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组。模型组给予大量高尿酸饮食,制成肾损害模型,对照组给予普通饮食,高、中、低剂量组在给予高尿酸饮食的同时给予高、中、低剂量的参芍胶囊治疗;6周后分别测定各组大鼠肾组织分泌的一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。结果模型组大鼠肾组织中NO、NOS、SOD水平与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);给予参芍胶囊治疗后大鼠肾组织中NO、NOS、SOD水平较治疗前升高,而MDA降低,其中仅中剂量组各指标水平与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论中剂量参芍胶囊对动脉粥样硬化造成的肾损害有保护作用。

纤维连接蛋白与TGF-βⅡ型受体在小鼠肾小体发育中的表达

目的观察纤维连接蛋白(Fn)及转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)在小鼠肾小体发育中的时空性表达。方法采用免疫组织化学技术结合体视学方法测定不同胚龄(E,12、14、16和18d)及生后日龄(P,1、3、7、14、21、28和42d)小鼠肾小体Fn和TGF-βRⅡ的表达及其含量变化。结果Fn在除逗号小体以外的各期肾小体基底膜处均有表达,TGF-βRⅡ在各期肾小体内均有表达,且两者的表达量均随着肾小体的发育逐渐增加。结论Fn和TGF-βRⅡ在小鼠肾小体发育中的表达具有一定的时空性,推测两者在小鼠肾小体发育中起一定作用。

细胞外基质纤维连接蛋白在小鼠肾脏发育中的表达

目的：纤维连接蛋白作为细胞外基质的重要成份，成为肾脏正常组织结构的基本组成部分。实验观察纤维连接蛋白在小鼠肾脏发育中的时空性表达，探讨纤维连接蛋白与肾脏发育的关系。方法：实验于2006—09／2007—07在辽宁医学院组织胚胎学教研室与科学实验中心完成。①实验材料：选取成年健康昆明系小白鼠44只，体质量25～30g。②实验过程：小白鼠雌雄（1：1）同窝倒养，以观察到阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0d，以观察到仔鼠出生的最早时间计为生后0d。分别取胚龄12，14，16，18d胎鼠和生后1，3，7，14，21，28，42d仔鼠肾脏，每时间点4只，常规石蜡标本制备、切片。③实验评估：采用免疫组织化学方法、体视学和Western blot技术测定不同胚龄及生后口龄小鼠肾脏内纤维连接蛋白的表达及其含晕变化。实验过程中对动物的处理符合动物伦理学标准。结果：①免疫组织化学结果：显示从胚龄14d开始，纤维连接蛋白在除逗号小体以外的各期肾小体、肾小管、集合管的基底膜处均有表达。②体视学测量结果：显示纤维连接蛋白在除逗号小体以外的各期肾小体及肾小管、集合管基底膜处的表达量均逐渐增加。③Western blot结果：显示纤维连接蛋白随着肾脏的发育其表达景逐渐增加。结论：纤维连接蛋白对肾脏各结构的发育以及成熟肾脏各结构的维持均起一定的作用。

肾上腺髓质素对大鼠肾脏机械损伤早期TNF-β及其受体表达的影响

目的探讨外源性肾上腺髓质素(ADM)对肾脏机械性损伤早期肿瘤坏死因子-β(TNF-β)及肿瘤坏死因子受体(TNFR)表达的影响。方法选健康成年普通级Wistar大鼠104只,随机分为四组:对照组8只、单纯创伤组32只、创伤前注射ADM组32只、创伤后注射ADM组32只,后三组的动物分别于创伤后1 h、6 h、12 h和24 h各处死8只。采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型。ADM分别于创伤前或创伤后10 min采用腹腔注射法给药。实验动物采用快速心脏采血法处死。迅速解剖动物提取肾脏标本,10%甲醛固定。免疫组化染色观察TNF-β、TNFR在组织中的表达。结果单纯创伤组于创伤早期(1 h和6 h点)TNF-β表达低于对照组,外源性ADM早期(1 h和6h点)可上调TNF-β(P<0.05)。单纯创伤组于创伤早期(1 h和6 h点)TNFR表达低于对照组,外源性ADM(创伤前给药)早期(1 h和6 h点)可上调TNFR(P<0.05)。结论 TNF-β在肾脏损伤中主要参与的是抗损伤过程。TNFR对TNF-β具有动态调节作用。ADM在早期肾损伤过程中可以上调TNF-β、TN-FR,并与其相互协调,共同发挥对损伤器官的保护作用。

单宁酸——氯化铁法媒染肾微血管的光镜研究

目的：光镜下观察用单宁酸———氯化铁法媒染的肾微血管形态结构特点及分布。方法：应用单宁酸、多聚甲醛、戊二醛混合媒染固定液灌流大鼠，取肾做冰冻连续切片，再入氯化铁溶液中呈色。结果：肾皮质、髓质部分血管被显示，血管球及肾小管周围球后毛细血管呈蓝黑色，亦有部分肾血管球未显色。结论：单宁酸———氯化铁法为肾微血管的研究提供了一种新方法；入球小动脉可能存在括约肌。

血管紧张素Ⅱ受体1和受体2在小鼠肾脏输尿管芽中的表达

目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体1和受体2在小鼠肾脏发育早期输尿管芽的表达及其与肾脏发育的关系。方法:实验于2005-05/2006-05在锦州医学院组织与胚胎学教研室完成。①取成年健康昆明系小白鼠24只,体质量25～30g,雌、雄(1∶1)同窝饲养,见雌鼠阴道栓出现计为胚龄0d。取胚龄12,14,15,16日胎鼠,各龄小鼠每组4只。剖腹取出肾脏,40g/L甲醛固定,制成切片5μm。②常规苏木精-伊红染色光镜下观察小鼠肾组织发育早期形态学变化。③采用免疫组织化学方法检测胚龄12,14,15,16d小鼠肾脏发育早期输尿管芽分支中血管紧张素Ⅱ受体1和受体2的含量。④体视学测量:每个动物的肾脏系统随机选取5张切片,按“S”形等间隔选取视野,采用方格测试系统,交点计数法测算血管紧张素Ⅱ受体1和受体2在输尿管芽阳性表达的体积密度。结果:①小鼠肾组织发育早期形态学观察:胚龄12d小鼠肾脏中可见输尿管芽及其分支。胚龄15d,输尿管芽周围出现了逗号小体、S小体,但未见成熟肾小体。胚龄16d的肾脏中可见出现了成熟肾小体、近曲小管和远曲小管。②小鼠肾脏组织免疫组织化学染色结果:在胚龄12d,血管紧张素Ⅱ受体1和受体2在输尿管芽中均有少量表达,胚龄15d,血管紧张素Ⅱ受体1达到高峰,胚龄16d血管紧张素Ⅱ受体1仅有微量表达;胚龄14d,血管紧张素Ⅱ受体2达到高峰,以后逐渐降低。结论:输尿管芽在小鼠后肾发生中有血管紧张素Ⅱ受体1和血管紧张素Ⅱ受体2表达,且血管紧张素Ⅱ受体1与诱导输尿管芽分支不断延长有关。

成纤维细胞生长因子7、10及其受体2Ⅲb在小鼠肾脏发育中的表达

目的观察成纤维细胞生长因子7、10(FGF7、FGF10)及其受体2Ⅲb(FGFR2Ⅲb)在不同发育阶段的小鼠肾脏的表达变化情况,探讨其与肾脏发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d胎鼠和生后N1、3、7、14、21和42d仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定位观察;应用体视学方法及Western blotting法对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定性分析和定量检测。结果免疫组织化学法显示,E12d时,FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb开始在输尿管芽微弱表达;随着肾脏发育成熟,三者主要表达于远端小管和集合管。FGF10在近曲小管表达,近直小管无表达;FGF7和FGFR2Ⅲb在近端小管无表达。生后肾组织及发育各阶段肾小体未见FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb的表达。体视学和Western blotting结果显示,从E14d至N7d,三者在肾脏的表达量明显增加,N7d至N42d表达量逐渐减少。结论 FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb在肾脏发生和发育过程中可能起着重要作用。FGF10主要作用于近曲小管、远端小管和集合管,而FGF7和FGFR2Ⅲb主要作用于远端小管和集合管。

肾小球系膜细胞三维立体培养方法的构建

建立一种肾小球系膜细胞三维立体培养系统，该系统可以模拟肾小球系膜细胞在肾小球系膜区的生长环境，并证实在三维立体培养系统中．肾小球系膜细胞在24、48和72h的增殖作用比传统贴壁培养时明显缓慢。

肾组织肥大细胞表型特点分析研究

目的阐明各种肾病患者肾组织肥大细胞的表型特点。方法选取包括糖尿病肾病、IgA肾病、急性间质性肾炎、慢性间质性肾炎、过敏性紫癜性肾炎、膜性肾病和狼疮性肾炎在内的肾病患者369例,正常供肾16例,以免疫组化方法检测肾活检标本中肥大细胞类胰蛋白酶和糜蛋白酶表达情况,对其进行分型分析。结果双连续切片分析发现,绝大多数肥大细胞表现为类胰蛋白酶和糜蛋白酶染色双阳性,仅有少数表现为类胰蛋白酶或糜蛋白酶单阳性;"双夹心"连续切片分析法显示,所谓的类胰蛋白酶或糜蛋白酶单阳性肥大细胞实际上是类胰蛋白酶和糜蛋白酶双阳性;以类胰蛋白酶为标记分子和以糜蛋白酶为标记分子检测肾组织肥大细胞的结果比较没有显著区别。结论类胰蛋白酶糜蛋白酶亚型(MCTC亚型)是正常个体和肾病患者肾组织肥大细胞的基本亚型。

人肾输出小动脉ABS铸型观测

本研究观测了新生儿、2.5岁、15岁、16岁、29岁及52岁肾ABS铸型的输出小动脉。90％以上的肾小球只有一条输出小动脉。分布于皮质内的输出小动脉可分为长型、短型及网络型;分布于髓质内者,可分为直小动脉和非直小动脉,它们均有一定的供血区。此外,还观测了其管径及出球位置。

人肾远曲小管钠－钾ATP酶活性分布的电镜观察

人肾远曲小管钠－钾ＡＴＰ酶活性分布的电镜观察韩景崧，姜先华，石玉秀，刘凤芝（辽宁省公安厅，中国医大二电镜室，试剂科，）本研究采用钠—钾ＡＴＰ酶的电镜酶细胞化学方法对人肾远曲小管的Ｎａ￣＋－Ｋ￣＋ＡＴＰ酶和活性分布进行了观察。实验材料选用新鲜健康成人尸...

杜鹃兰生物碱组织化学定位初步研究

采用植物组织化学定位的方法,研究了杜鹃兰各营养器官中生物碱的分布及大致含量。结果表明,杜鹃兰全株均含有生物碱,但其根中所含的生物碱类型跟其它部位有所不同,而假鳞茎、叶片和叶柄中的生物碱可能是同一类型。杜鹃兰营养器官中生物碱含量由高到低分别是:假鳞茎、叶柄和叶片。

小鼠肾发育中胶质细胞系源性神经营养因子家族受体α1和受体酪氨酸激酶的表达

目的研究小鼠肾发育过程中胶质细胞系源性神经营养因子家族受体α1(GFRα1)和受体酪氨酸激酶(RET)的表达及意义。方法应用免疫荧光和蛋白印迹技术检测各胚龄小鼠肾组织中GFRα1和RET的时空定位表达及蛋白含量变化。结果在肾发育早期,GFRα1和RET在输尿管芽上皮细胞开始表达,生后肾组织内仅见GFRα1表达。随着肾小体的发育,GFRα1在肾小体发育早期即小泡体、逗号小体和S小体均有表达,而在肾小体发育后期即毛细血管袢期肾小体和未成熟期肾小体表达减弱,在成熟肾小体未见表达。RET在各期肾小体均未见表达。随着早期髓质的出现,GFRα1在近端小管、远端小管和集合管有明显表达;RET在集合管表达。在成熟肾脏,GFRα1定位表达于近端小管、远端小管和集合管;RET定位表达于集合管。GFRα1和RET在肾脏的蛋白表达量随胚龄的增加而增加,生后1 d达峰值,随后两者的蛋白表达量随日龄的增加而逐渐减少。结论在肾发育中,GFRα1参与肾小体发生、早期发育过程及肾小管和集合管的发生、发育过程,并维持其正常生理功能。RET参与集合管的发生、发育过程,并维持其正常生理功能。