高良姜素对缺氧诱导因子-1α诱导胃癌细胞上皮间质转化的作用机制

目的探讨高良姜素(galangin,GLA)对缺氧微环境下胃癌的作用研究。方法采用CoCl_(2)诱导胃癌SGC-7901细胞株,体外模拟缺氧肿瘤微环境。使用CCK-8试剂,检测细胞活性;通过Transwell实验分析癌细胞侵袭能力;并通过蛋白印迹和逆转录PCR检测相关基因表达水平。结果研究显示,低中高浓度的GLA(50、100、150μmol·L^(-1))呈剂量依赖性抑制CoCl_(2)诱导胃癌SGC-7901细胞活性;且此浓度梯度对CoCl_(2)干预后的细胞侵袭也呈现明显抑制作用(P<0.01);深入研究发现,随着GLA浓度的提高,CoCl_(2)诱导引起的HIF-1α蛋白水平的升高被抑制,而HIF-1αmRNA水平未受影响;同时,上皮间质转化相关基因Snail和Vimentin的表达随GLA剂量增加而明显增加(P<0.05),而E-cadherin表达明显下降(P<0.01)。结论GLA能抑制肿瘤缺氧状态下的HIF-1α表达和上皮间质转化,从而抑制胃癌发展。

HMGB1和IDO在肿瘤免疫逃逸中的作用研究进展

高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)是一种高度保守的非组蛋白,广泛存在于真核细胞中。在细胞内可与DNA非特异性结合,参与细胞增殖、分化和侵袭;由免疫细胞主动分泌或受损坏死的细胞被动分泌至细胞外可与多种受体结合,激活相关信号通路,介导抗肿瘤免疫反应。吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)是一种含亚铁血红素的蛋白质,主要表达于免疫细胞和肿瘤细胞中,也可分泌至胞外,是色氨酸沿犬尿氨酸途径代谢的关键酶,通过降解色氨酸营造色氨酸饥饿环境及积累代谢产物来参与肿瘤的免疫耐受及免疫逃逸。HMGB1和IDO在机体肿瘤免疫逃逸中发挥着重要的调控作用,并存在一定的协同关系。因此,HMGB1和IDO有望成为抗肿瘤免疫治疗的新靶点。但HMGB1和IDO对机体抗肿瘤免疫功能的影响及二者之间的关系目前报道较少。本研究对HMGB1和IDO在肿瘤免疫逃逸中的作用及二者间调控机制的研究进展作一综述。

E3泛素连接酶在结直肠癌中的作用机制研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)作为全球发病率和致死率最高的恶性肿瘤之一,其致病机制十分复杂,至今尚未完全阐明。泛素化在CRC的发生发展过程中扮演重要角色,其调控作用主要依赖于E3泛素连接酶泛素化修饰底物蛋白使之活性改变或发生泛素—蛋白酶体降解。该文就RING(really interesting new gene)型和HECT(homologous to E6AP C-terminus)型E3泛素连接酶在CRC细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及化疗敏感性中的作用机制及这两类E3泛素连接酶的靶向抑制剂相关研究进展作一综述,为CRC致病机制研究及其靶向治疗提供新的思路。

胃癌中HIF-1a、VEGF及Glut1的表达

目的探讨HIF-1a、VEGF及Glut1在胃癌中的表达及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学SP法检测120例胃癌组织中HIF-1a、VEGF及Glut1的表达。结果HIF-1a、VEGF及Glut1在胃癌组织中的阳性表达率分别为70%、61.7%、69.2%,明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。HIF-1a、Glut1的阳性表达与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);VEGF的阳性表达与组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);HIF-1a分别与VEGF及Glut1在胃癌组织中表达存在密切的相关性(rs1=0.681,P<0.001;rs2=0.626,P<0.001)。结论HIF-1a、VEGF及Glut1的阳性表达可以作为胃癌侵袭转移潜能的生物学指标,且这些指标的表达对于临床早期干预治疗具有重要的指导意义。

乳腺导管内增生性病变中ER、Ki-67和cyclin D1的表达

目的探讨ER、Ki-67和cyclin D1在乳腺导管内增生性病变中的表达及意义。方法采用免疫组化和免疫荧光双标记法对56例乳腺导管内增生性病变进行ER、Ki-67和cyclin D1染色标记。结果正常乳腺组织中仅有散在的少数上皮细胞呈ER阳性表达。在普通型导管增生(usual ductal hyperplasia,UDH)中ER表达比正常乳腺组织增加,但ER阳性细胞呈不连续分布,阳性细胞间有较多的阴性细胞。非典型性导管增生(atypical ductal hyperplasia,ADH)和低级别原位导管癌(ductal carci-noma in situ,DCIS)中ER表达比UDH明显增加(P<0·05),ER阳性细胞呈连续的片状分布,阳性细胞间较少或没有ER阴性细胞。ADH和低级别DCIS中ER表达较高级DCIS显著(P<0·01)。DCIS中Ki-67和cyclin D1表达高于UDH(P<0·05),并与UDH、ADH和DCIS的组织学分组呈正相关(r=0·352,P<0·05和r=0·390,P<0·05)。正常乳腺组织中上皮细胞内无ER和Ki-67同时表达。在UDH中有极少数上皮细胞ER和Ki-67同时表达,而在ADH和DCIS中ER和Ki-67同时表达的细胞明显增加。结论从正常乳腺组织到UDH、ADH、低级DCIS的恶性转化过程中伴有ER表达的逐渐增高。ER过度表达及ER和Ki-67在上皮细胞内同时表达可能是某些乳腺癌发生过程中的早期事件。

单核细胞趋化因子-1与核因子-κB在溃疡性结肠炎模型的表达

目的研究单核细胞趋化因子-1(MCP-1)与核转录因子-κB(NF-κB)在溃疡性结肠炎(UC)模型中的表达。方法采用SP免疫组织化学方法对雄性SD大鼠UC模型组及正常对照组各30例标本中MCP-1、NF-κB的表达进行检测。结果MCP-1主要表达于胞浆,NF-κB主要表达于胞浆及胞核。UC模型组结肠组织中的MCP-1及NF-κB的表达明显高于正常对照组(P<0·001)。UC模型组结肠组织中MCP-1与NF-κB的表达呈正相关(r=0·87,P<0·05)。结论MCP-1与NF-κB在UC结肠组织中的高表达密切相关。两者的高表达在UC发生发展中具有重要作用。

不同糖耐量者外周血单核细胞中核因子-κB的活化及意义

目的比较不同糖耐量人群外周血单核细胞中核因子-κB(NF-κB)表达水平的变化,探讨2型糖尿病、糖调节受损与炎症的关系。方法按口服葡萄糖耐量试验结果,将研究对象分为正常糖耐量(NGT)组、糖调节受损组、A组(糖尿病病程<5年)和B组(糖尿病病程≥5年)。采用流式细胞仪、竞争性酶联免疫吸附法检测上述对象外周血单核细胞中NF-κB的表达水平,并与糖脂代谢指标、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)作相关性分析。结果外周血单核细胞中NF-κB的表达水平按分组顺序逐步升高,相关性分析显示,其与空腹血糖、糖负荷2h后血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、HOMA-IR呈正相关,与HOMA-β呈负相关。结论2型糖尿病在前期糖调节受损阶段就存在炎症状态,糖脂代谢异常及胰岛素抵抗可能参与了炎症发生发展。

转录因子Ets-1与MMP-9在胃癌中的表达及临床意义

目的观察转录因子Ets-1和MMP-9在胃癌组织中的表达;探讨两者在胃癌浸润转移中的作用、相互关系及意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测97例胃癌及癌旁组织、28例正常胃黏膜组织中Ets-1和MMP-9的表达。结果胃癌组织中Ets-1和MMP-9的阳性表达率分别为74.2%(72/97)、75.3%(73/97),均明显高于癌旁组织(40.2%、18.6%)及正常胃黏膜组织(17.9%、14.3%)(P<0.01);而在癌旁组织及正常胃黏膜组织中两者的表达差异无显著性(P>0.05)。Ets-1和MMP-9的阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性(P<0.01)。Ets-1和MMP-9的高表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.01),与性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤位置均无关(P>0.05)。Ets-1和MMP-9的表达成正相关(r=0.700,P<0.01)。结论Ets-1和MMP-9高表达与胃癌的浸润、转移密切相关;通过上调MMP-9的表达,可能是Ets-1促进胃癌浸润转移的机制之一。

SPARC在胃癌组织中的表达

目的检测SPARC在人胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌浸润转移的关系。方法运用免疫组化S-P法检测108例胃癌和89例正常胃黏膜组织中SPARC的表达情况。结果SPARC主要表达在胃癌的间质细胞,少数表达在胃癌细胞。SPARC在胃癌组织间质细胞的阳性表达率(88·0%)显著高于正常胃黏膜组织(14·1%)(P<0·01)。肿瘤细胞SPARC表达与胃癌生物学特性及临床各病理因素均无相关性;而间质细胞SPARC的表达与胃癌的淋巴结转移及临床分期有相关性,与性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、远处转移均无相关性。结论SPARC在胃癌间质过度表达可能促进胃癌的转移,可作为判断胃癌生物学行为的重要指标。

转录因子Ets-1在胃癌组织中的表达及意义

目的研究转录因子Ets-1在人胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌浸润转移的关系。方法运用免疫组化S-P法检测86例胃癌及癌旁组织中Ets-1的表达。结果Ets-1在胃癌组织中的阳性表达率为74·4%,显著高于癌旁组织(40·7%,P<0·05);Ets-1阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与印戒细胞癌/黏液腺癌之间差异有显著性(P<0·01);Ets-1的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关,与性别、年龄、肿瘤大小、远处转移均无关。结论Ets-1在胃癌组织中具有高表达率,其阳性表达与肿瘤的浸润、转移密切相关。

下丘脑核转录因子NF-kB的临床研究进展

核转录因子NF-k B（nuclear factor kappa B,NFk B）是几乎存在于所有细胞的快反应转录因子,其作用为调控大量基因的转录,与其调控的细胞因子参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡等生物进程。在正常生理过程和疾病的发生中有重要作用。

渗透压及弹性增强结合蛋白在椎间盘退变中作用的研究进展

随着中国人口的老龄化,颈椎病、腰椎椎间盘突出症等脊柱退行性相关疾病的发生率日趋升高,给人民群众造成了巨大的健康威胁和经济负担[1]。椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）是导致脊柱退行性相关疾病的主要病理基础,其发生机制较为复杂,至今尚无明确定论。

ErbB4和Ki-67在口腔鳞状细胞癌中的表达

目的探讨表皮生长因子受体(ErbB4)和核蛋白抗原(Ki-67)在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测了10例正常口腔黏膜组织和58例口腔鳞癌中的ErbB4和Ki-67的表达。结果ErbB4在正常口腔黏膜组织中未见表达,在口腔鳞癌中表达较强,阳性率为58.6%,与临床分期、病理分级、淋巴结转移有相关性。Ki-67在正常口腔黏膜组织中未见表达,与临床分期、淋巴结转移无相关性,而与病理分级有关。相关分析显示口腔鳞癌中ErbB4的表达与Ki-67呈正相关。结论ErbB4和Ki-67的表达可作为评估和判断口腔鳞癌恶性潜能的重要参考指标。

高迁移率族蛋白B1在肝脏疾病中的研究进展

高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein B1,HMGB1）是20世纪70年代在小牛胸腺中发现的一种染色质蛋白,主要分布于细胞核,在真核细胞DNA复制和修复中发挥重要作用。此后研究发现HMGB1可释放到细胞外,作为一种促炎因子在多种疾病的发生发展中起重要作用。

缺氧诱导因子1α和血管内皮生长因子在骨肉瘤组织中的表达及其与血管生成的关系

目的观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在骨肉瘤组织中的表达及其与血管生成的关系。方法应用免疫组织化学(SP)法,检测35例骨肉瘤、14例骨软骨瘤中HIF-1α、VEGF的表达情况,同时用CD34标记血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。结果 HIF-1α蛋白染色主要表达于细胞核,在骨肉瘤中阳性表达率高于在骨软骨瘤中阳性表达率(P<0.05)。VEGF蛋白染色主要表达于细胞质及细胞膜,在骨肉瘤中阳性表达率高于在骨软骨瘤中阳性表达率(P<0.05)。Ⅲ期骨肉瘤的HIF-1α、VEGF蛋白的表达强度与Ⅱa期、Ⅱb期比较差异有统计学意义(P<0.05),而Ⅱa期与Ⅱb期的表达强度比较差异无统计学意义(P>0.05)。35例骨肉瘤标本中有14例(40.0%)HIF-1α和VEGF的表达同时呈阳性,13例(37.1%)HIF-1α和VEGF的表达同时呈阴性,8例(22.9%)HIF-1α和VEGF的表达呈不一致性。HIF-1α和VEGF在骨肉瘤中的表达呈正相关。HIF-1α(+)、VEGF(+)的MVD值均显著高于HIF-1α(-)、VEGF(-)(P<0.01)。结论 HIF-1α和VEGF在骨肉瘤组织中均为高表达,提示它们可能在骨肉瘤新生血管生成中具有协同作用,对骨肉瘤的发生、发展起到重要作用。

SELDI技术检测反义寡核苷酸作用前后肝癌细胞培养液的差异蛋白

目的利用针对人端粒酶RNA(hTR)的反义寡核苷酸(ASODN)和正义寡核苷酸(NODN)作用于人肝癌细胞SMMC-7721,比较ASODN和NODN作用后细胞培养液蛋白的变化。方法利用SELDI技术检测差异蛋白的表达变化。对照组为未加任何处理因素的SMMC-7721细胞。结果SELDI技术检测发现,ASODN作用组有40个差异蛋白分子低表达,3个差异蛋白分子高表达。NODN作用组有37个差异蛋白分子低表达,6个差异蛋白分子高表达。所有差异蛋白分子量均小于10 000 Da。ASODN作用组中有3个低表达蛋白在NODN作用组高表达,分子量分别为3 011.99 Da、3 048.28 Da和3 248.75 Da。结论ASODN和NODN作用SMMC-7721细胞后细胞培养液中所表达的差异蛋白十分相似。

反义寡核苷酸作用后肝癌细胞端粒酶活性的变化及差异蛋白的表达

目的利用针对端粒酶RNA的反义寡核苷酸(ASODN)和正义寡核苷酸(NODN)作用于人肝癌细胞SMMC-7721,比较ASODN和NODN作用后癌细胞端粒酶活性及相关蛋白的变化。方法利用实时荧光定量端粒重复序列扩增法(FQ-TRAP法),检测ASODN和NODN作用后肿瘤细胞端粒酶活性变化;蛋白质芯片-飞行时间质谱仪,检测ASODN和NODN作用后特异蛋白质的变化。对照组为未加任何处理因素的SMMC-7721细胞。结果FQ-TRAP法检测CT值,A-SODN组为35.2±2.3,NODN组为26.1±3.5,对照组为18.2±0.7。蛋白质芯片-飞行时间质谱仪检测发现,ASODN组有19个差异蛋白分子高表达,13个差异蛋白分子低表达。NODN组有20个差异蛋白分子高表达,12个差异蛋白分子低表达。所有差异蛋白的分子量分布在3 000 D^10 000 D之间。结论ASODN和NODN均能抑制肝癌细胞端粒酶活性,两者作用SMMC-7721细胞后所表达的差异蛋白十分相似。

心肌缺血再灌注损伤中核因子-κB活性的变化

目的观察心肌缺血再灌注时心肌细胞核因子-κB(NF-κB)活性的变化以及甲基强的松龙对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法健康家犬12只,随机分为甲基强的松龙组(M组,n=6)和对照组(C组,n=6),两组动物均在全麻和机械通气下开胸建立心肺转流(CPB),冠脉灌注冷晶体停搏液使心电静止,主动脉阻断120 min后开放进行心脏复苏,循环稳定后停止CPB,继续观察至开放90 min;M组在麻醉后经静脉给予甲基强的松龙5 mg/kg,其余同对照组。CPB前(T0)、主动脉开放前(T1)、开放后30 min(T2)、90 min(T3)各时间点分别采取动脉血和右室前壁心肌组织,用125I标记的放免试剂盒测定细胞因子(TNF-α、IL-1βI、L-6I、L-8)的含量,用Western blot测定心肌组织NF-κB P65的活性及其病理学改变。结果两组动物T1、T2、T3各时点TNF-αI、L-1βI、L-6I、L-8水平和NF-κB活性均较T0显著升高(P<0.01),并且T1、T2、T3各时点M组较C组显著降低(P<0.01)。病理显示两组在T1、T2、T3各时点心肌组织中性粒细胞浸润增加,且T2、T3较T1时更明显;T1、T2、T3各时点M组较C组显著减轻。结论CPB可引起心肌细胞的NF-κB活化和细胞因子显著增加,产生心肌损伤,甲基强的松龙可抑制NF-κB的活性和减少细胞因子的释放,减轻心肌缺血再灌注损伤。

HMGB1在呼吸系统疾病中的作用及其机制

高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)是一种保守的核蛋白,对维持核小体稳定、DNA重组、复制、修复及转录有重要作用。其可由坏死的细胞被动释放,或在适宜刺激下主动分泌至胞外。近年的研究显示:HMGB1信号的活化与肺损伤、肺纤维化、肺癌等肺部疾病的发展密切相关,而阻断HMGB1信号可抑制其病理进程,说明HMGB1的抑制对这类疾病有潜在治疗价值。该文就HMGB1在呼吸系统疾病中的作用及其机制作一综述,以期为上述疾病的诊断和治疗提供新的理论依据。