肝毛细线虫感染小鼠不同时间肝脏差异表达miRNA的鉴定及功能分析

目的:分析小鼠感染肝毛细线虫后第20和90天肝脏miRNA表达谱,筛选并鉴定差异表达miRNA。方法:将20只6周龄BABL/c雄性小鼠随机分为4组,分别为第20天感染组和对照组、第90天感染组和对照组,感染组以20卵/只的剂量灌胃感染期肝毛细线虫卵。分别于感染后第20和90天取对照组和感染组小鼠肝脏进行miRNA高通量测序,筛选感染后不同时间肝脏差异表达的miRNA,预测其靶基因并进行GO富集分析和KEGG信号通路分析,采用qRT-PCR对7个差异表达的miRNA进行检测。结果:第20天感染组筛选出差异表达的miRNA共81条,第90天感染组差异表达miRNA共122条;第20天和第90天感染组共同差异表达的miRNA有27条,其中均上调21条,均下调6条。差异miRNA靶基因主要参与了信号传导、转录调控等,可能参与的信号通路有Wnt信号通路、Ras信号通路等。qRT-PCR检测结果显示感染组miR-142a-3p、miR-342-3p、miR-34a-5p、miR-150-5p、miR-214-3p表达上调,miR-455-3p和miR-1948-5p表达下调(P<0.05)。结论:小鼠感染肝毛细线虫后肝脏miRNA呈现差异表达,差异表达的miRNA可能参与肝纤维化的进程。

《广州管圆线虫病诊断标准》(WS/T 321—2010)在福建省和云南省实施情况的跟踪评价

目的了解《广州管圆线虫病诊断标准》(WS/T 321—2010)(简称《标准》)的实施情况,为《标准》的推广和进一步修订、完善提供科学依据。方法通过分层抽样的方式抽取福建省和云南省的省、市、县和乡镇4级的疾病预防控制机构(简称疾控机构)和医疗机构的专业技术人员作为调查对象,采用调查对象自填问卷的方式开展《标准》实施情况调查。结果共调查工作人员308人,回收有效问卷308份。《标准》知晓率为71.10%(219/308),不同特征调查对象中,≥50岁(81.40%,35/43)、市级单位(79.76%,67/84)、疾控机构(88.24%,105/119)、从事寄生虫病防治工作(85.71%,114/133)、高级职称(82.86%,58/70)、本科文化程度(77.09%,138/179)、公共卫生专业(86.21%,75/87)等人群的《标准》知晓率较高,且随着年龄增加和职称升高,《标准》知晓率呈上升趋势(χ^(2)_(趋势)=8.272、8.258,P均<0.01);知晓途径主要是业务培训(65.30%,143/219)和自主查阅(60.73%,133/219)。在《标准》的使用情况方面,知晓《标准》的调查对象中,有75.34%(165/219)会在工作中使用,15.98%(35/219)会经常使用。不同宣贯方式中,宣传资料的普及率最高(58.77%,181/308);75.32%(232/308)的调查对象认为专题讲座的宣贯效果好。能正确且完整掌握诊断原则、感染方式、临床表现、实验室检查方法和诊断类型等知识的调查对象人数分别为292人(占94.81%)、102人(占33.12%)、130人(占42.21%)、117人(占37.99%)和152人(占49.35%)。绝大多数调查对象(占89.61%,276/308)认为标准的可操作性好或较好。宣贯力度对标准实施的影响最大(占80.84%,249/308)。91.88%(283/308)的调查对象认为现行标准不需要修订。结论《标准》仍适用于当前阶段的诊断需求,应继续加大对专业人员的宣贯力度,提高其认知和应用水平。

驴消化道3种线虫的扫描电镜观察及其系统发育分析

为深入研究采集到的驴消化道3种寄生线虫的体表形态及其系统发育关系,本试验利用扫描电子显微镜技术首次对寄生于驴消化道内的马圆形线虫[Strongylus equinus(Mueller,1780)]、无齿圆形线虫[Strongylus edentatus(Looss,1900)]和杯状彼得洛夫线虫[Petrovinema poculatum(Looss,1900)]的体表形态进行详细观察和描述。提取线虫核糖体DNA内转录间隔区(ITS)基因,对其进行系统发育分析,建立系统发育树。扫描电子显微镜观察结果显示,马圆形线虫有内叶冠80枚,外叶冠180枚,雄虫生殖锥具有2对指状突起,一长一短;无齿圆形线虫有外叶冠80枚,雄虫尾部生殖锥较长,具有2对附属物,分别为乳头状和细长状;杯状彼得洛夫线虫外叶冠呈刺状,32枚,雄虫尾部具有1对小囊状附属物。系统发育分析结果显示,上述3种线虫形态学鉴定结果与系统发育树中该种的分类学地位一致。本试验结果为上述3种线虫的分类鉴定提供更精确的形态和分子生物学依据。

2019-2023年云南省部分地区市售螺类广州管圆线虫感染情况调查

目的了解云南省部分地区市售螺体内广州管圆线虫的感染情况和特点。方法2019-2023年每年4-9月在13个州市采集市售鲜活螺,用胃蛋白酶消化法检测广州管圆线虫Ⅲ期幼虫。结果共检查1584份活螺样本,螺类的广州管圆线虫的感染率为3.66%。不同螺类的感染率由高到低分别为福寿螺(6.41%)、中华圆田螺(2.74%)、环棱螺(2.56%)。除福寿螺外,其它螺类的广州管圆线虫的感染率呈逐年下降趋势。7月份的螺类广州管圆线虫的感染率最高(7.87%)。除楚雄未检出阳性样品,其余12个州市均有阳性螺,其中红河州的螺类广州圆线虫感染率高达9.52%。结论云南省部分地区市售螺类仍然有广州管圆线虫的感染,存在食品安全风险隐患。需继续加强监管工作,加大宣传,改善环境,开展灭鼠工作,同时开展分子生物学检测技术应用研究,为广州管圆线虫病的防控提供更加敏感的监测方法。

2023年渤海海峡、渤海湾市售海鱼异尖线虫感染情况及形态学分析

目的了解渤海海峡、渤海湾市售海鱼异尖线虫感染情况,并对检出的异尖线虫进行形态学分析及属间鉴定,为防控措施制定提供参考。方法2023年春季和冬季采购渤海海峡、渤海湾沿海市售海鱼,检测海鱼异尖线虫感染情况,分析不同鱼群的感染差异及异尖线虫寄生部位等,并对异尖线虫进行形态学鉴定。结果调查共检测渤海湾海鱼7种91尾,未检出异尖线虫;渤海海峡海鱼21种210尾,其中11种48尾海鱼检测出异尖线虫,总检出率为22.86%,共检出异尖线虫1370条,平均感染强度为28.54条/尾。检出率前三的鱼种分别为鮟鱇(100.00%,14/14)、带鱼(100.00%,10/10)和辫子鱼(80.00%,8/10);感染强度前三的鱼种为鮟鱇(69.00条/尾)、带鱼(24.70条/尾)和海鲫鱼(19.00条/尾)。异尖线虫在鱼体的主要寄生部位为肠道、肠系膜、腹腔等,泄殖腔中未发现感染。相关性分析表明,鮟鱇和带鱼的体质量与异尖线虫感染强度均呈正相关(r=0.77、0.67,P均<0.01)。检获完整虫体1226条,经形态学鉴定,其中异尖属767条,宫脂属459条。结论渤海湾海鱼未检出异尖线虫,渤海海峡海鱼异尖线虫感染较重,且主要为具有致病性的异尖属和宫脂属线虫,建议加强当地异尖线虫病健康教育,以降低人群感染风险。

粪类圆线虫与肺炎克雷伯杆菌致重症感染一例

患者,男,82岁,因“四肢皮疹,伴双下肢肿胀1周”于2021年5月24日入住我院。患者1周前无明显诱因出现四肢暗红色皮疹,伴瘙痒,伴双下肢肿胀,纳差、乏力,轻微咳嗽,无其他不适,遂来我院就诊。自起病以来,患者精神、食欲差,大便干,尿量少。

旋毛虫病疫苗研究进展

旋毛虫病是一种由旋毛虫感染而引起的人兽共患病,人因食入生的或未煮熟肉类而患病。该病在世界上广泛分布,从发现至今已有188年的历史。通过肉类制品的传播可能导致旋毛虫病的暴发,从而产生更广泛的社会影响。本文通过梳理近10年的文献,综合分析旋毛虫病疫苗研究进展,为基于疫苗的旋毛虫病防控工作提供参考。

旋毛虫粪口传播途径的研究

目的了解旋毛虫粪口传播途径的可行性及粪便中旋毛虫幼虫的感染力。方法试验将6只Wistar大鼠分别一次性感染4000条旋毛虫幼虫,于0、4、8、12、16、24和48 h收集3只大鼠(A组)粪便,分别分成4份于室温下保存0、24、48和72 h,显微镜下计数粪便中幼虫数量,将每份含有旋毛虫幼虫的粪便喂给5只昆明小鼠,42 d后处死小鼠,计数幼虫数并计算生殖力指数(RCI);另外3只大鼠(B组)在感染后1~23 d收集粪便,提取DNA,通过PCR扩增旋毛虫线粒体atp6基因。结果A组大鼠感染旋毛虫幼虫后4~16 h排出幼虫,8 h排虫量达高峰,24 h及以后粪便中无旋毛虫幼虫。大鼠感染4、8、12、16 h后粪便中旋毛虫幼虫总数分别为350、400、145、40条。感染后4 h收集的大鼠粪便室温保存0、24、48 h后RCI分别为112.5、20.5、2;8 h收集的大鼠粪便室温保存0 h、24 h后RCI为66.7、9;12 h采集的大鼠粪便室温保存0和24 h后RCI为13.3和5;16 h收集的大鼠粪便室温保存0 h后RCI为10。B组大鼠中2只连续18 d扩增出旋毛虫线粒体atp6基因,1只连续20 d扩增出旋毛虫线粒体atp6基因。结论一次性大量食入旋毛虫幼虫后,可排出具有感染力的旋毛虫幼虫,可通过粪口途径进行传播。PCR可以检测粪便中的旋毛虫线粒体atp6基因,但不能确定旋毛虫是否具有感染力。

乳双歧杆菌诱导旋毛虫感染小鼠Th2型免疫应答的研究

目的探究不同剂量乳双歧杆菌干预对旋毛虫感染小鼠的淋巴细胞增殖、辅助型T细胞2(Th2)型免疫和肠道损伤的影响。方法用活力良好的旋毛虫灌胃48只小鼠获得感染旋毛虫模型小鼠,随机分为感染组(0.02 mL/g PBS灌胃)、乳双歧杆菌(高、中、低)剂量组(乳双歧杆菌浓度分别为1×10^(6)、1×10^(5)、1×10^(4) CFU/L,0.02 mL/g灌胃)连续灌胃30 d;采用噻唑蓝(MTT)法检测第7、14、21、28天各组模型小鼠脾细胞中T淋巴细胞增殖水平,流式细胞术检测小鼠脾脏及肠系膜淋巴结中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞表达水平,苏木精-伊红(HE)染色法对十二指肠组织病理学进行观察。结果与感染组比较,高剂量组、中剂量组脾脏T淋巴细胞的刺激指数(SI)升高(P<0.05);与感染组相比,小鼠脾脏中乳双歧杆菌高剂量组第14、21天脾脏中CD4^(+)T细胞表达升高,第21天乳双歧杆菌高剂量组表达CD8^(+)T细胞降低,小鼠肠系膜淋巴结中乳双歧杆菌高剂量组、中剂量组CD4^(+)T细胞表达增加(P<0.05);HE结果显示;与感染组比较,乳双歧杆菌高剂量乳双歧杆菌灌胃后第7天和14天炎性细胞浸润减轻,肠绒毛脱落减少。结论一定浓度的乳双歧杆菌能够提高小鼠抗旋毛虫感染的免疫效应,其机制可能与通过诱导小鼠趋向Th2型免疫极化、修复肠道病理损伤有关。

2016—2022年山东省临沂市农村土源性线虫病感染状况调查

目的 了解临沂市2016—2022年土源性线虫病感染现状,为制定有针对性的防治策略和措施提供依据。方法 每个监测点采集1 000份粪便样本,采用改良加藤厚涂片法和透明胶纸肛拭法检测,计算土源性线虫感染率。采用SPSS 24.0软件进行统计学分析,感染率的差异比较采用χ^(2)检验。结果 2016—2022年临沂市土源性线虫监测点共调查16 361人,总感染率为2.15%(352/16 361)。土源性线虫感染率在不同县区、年龄组、职业、文化程度之间均存在显著差异(P<0.001)。结论 临沂市农村土源性线虫病人群感染率总体呈下降趋势,农村60岁人群以上老年人和学龄前儿童是土源性线虫防控的重点人群。

扬州市广陵区1例蛲虫病例调查报告

为总结蛲虫病诊疗过程中存在的问题,为今后防治工作提供技术支持,通过对扬州市广陵区1例蛲虫病病例就医、诊断、驱虫、随访全过程跟踪调查,发现该病例在4次就诊过程中,2家医疗机构均未能及时作出明确诊断,患者首次驱虫后效果不佳,表明当前医疗机构加强寄生虫病诊断、防治知识培训工作仍很有必要。对于蛲虫病例,除驱虫治疗外,还需加强生活环境消毒与改善个人卫生行为。

福建省广州管圆线虫6种新宿主的发现及疫源地的感染率周年变化

目的探讨福建省广州管圆线虫病自然疫源地的状况。方法选择有广州管圆线虫感染病例或螺类和鼠粪检查阳性的连江、南安2县、市6个村为调查点,在春、夏、秋季对中间宿主、转续宿主和保虫宿主的感染情况与感染因素等进行调查分析。结果两县、市6个村共采集检查中间宿主与转续宿主22种7169个样本,发现感染广州管圆线虫幼虫者14种。感染率最高的是褐云玛瑙螺,为36.12%(108/299),其次是沼水蛙和高突足襞蛞蝓,分别为34.72%(25/72)与25.83%(273/1057)。秋季和距离居民点5m内的环境,螺类感染率最高。14种感染宿主中,一待定种环棱螺、光滑颈蛞蝓、罗氏巨楯蛞蝓、黄蛞蝓、双线大蛞蝓和沼水蛙,为广州管圆线虫首次报告的新宿主。结论证实连江、南安2县、市6个村为广州管圆线虫严重的自然疫源地。推想全国同纬度、同自然环境条件地区均有可能有本病的自然疫源地。

不同发育阶段广州管圆线虫的抗原分析

目的 分析不同发育阶段广州管圆线虫抗原差异 ,筛选优势诊断抗原分子。 方法 对不同发育阶段的广州管圆线虫的虫体蛋白进行十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和免疫印迹分析。 结果 不同发育阶段的虫体蛋白质谱大致相同 ,SDS PAGE中出现的少数差异带在免疫印迹试验 (Westernblotting)中无明显差异。各期虫体抗原相对分子质量为Mr 40 0 0 0、 5 0 0 0 0、 660 0 0和 80 0 0 0的 ,与感染大鼠和正常大鼠血清均出现反应条带。 2～ 3周幼虫Mr 10 40 0 0与 2周感染血清出现明显反应条带。雌虫Mr 3 3 0 0 0及所有虫体的Mr 3 2 0 0 0抗原与感染后 2周血清出现反应条带 ,与感染 3周～ 5月的大鼠血清均出现明显反应 ,与正常大鼠血清均无明显反应。 结论 Mr 40 0 0 0、 5 0 0 0 0、 660 0 0和 80 0 0 0抗原可能在以虫体粗抗原作探针的免疫诊断中引起非特异性反应。幼虫Mr 10 40 0 0、雌虫Mr 3 3 0 0 0和所有虫体的Mr 3 2 0 0 0可作为广州管圆线虫病早期诊断和流行病学调查的候选抗原分子。

三种淡水螺与广州管圆线虫相容性的实验研究

目的比较福寿螺、中国圆田螺、铜锈环棱螺等3种食用淡水螺与广州管圆线虫的相容性。方法在相同条件下,用广州管圆线虫福建株感染3种螺,1、3、6、12及24h后,随机抽样各20只,分别饲养于置有滤水器、水温(24±1)℃的玻璃缸内。记录感染2周内各组螺死亡数。第15天开始解剖,记录螺软体重量和感染虫数。同时设不感染螺对照组。结果3种螺感染后第1周死亡数达高峰。感染率和死亡率与螺的种类及感染时间均无相关性。虫负荷与虫密度,福寿螺感染6、12及24h均显著高于感染1h的(P值均<0.05);铜锈环棱螺,感染24h的均显著高于感染1、3、6及12h的(P值均<0.05);中国圆田螺,感染1、3、6、12及24h各组间差异均无显著性(P值均>0.05)。福寿螺感染6、12及24h的虫负荷均显著高于铜锈环棱螺和中国圆田螺(P值均<0.05)。感染6、12及24h,福寿螺及铜锈环棱螺虫密度均高于中国圆田螺(P值均<0.05)。结论3种螺对广州管圆线虫均易感并有较高的相容性,其中福寿螺的相容性较强。

PCR检测大瓶螺体内广州管圆线虫幼虫方法的建立

目的建立一种基于PCR方法检测大瓶螺体内广州管圆线虫幼虫的方法。方法从美国生物信息中心GenBank中获得广州管圆线虫感染性III期幼虫(L3)cDNA特异性片断,应用美国DNASTAR公司Lasergene软件,设计特异性引物。TRIzol一步法抽提广州管圆线虫感染性L3和大瓶螺总RNA,按RT-PCR试剂盒提供方法进行PCR扩增。结果用RT-PCR方法能检测出阴性与感染性螺,其最低检出的总RNA量相当于1条广州管圆线虫L3;将阴性大瓶螺总RNA与感染期幼虫总RNA不同浓度混合,PCR法可检测出肉眼能分辨的电泳条带相当于总RNA浓度为128pg。此方法可以检测出广州管圆线虫III期幼虫RNA的最低值为105pg。结论建立了PCR检测大瓶螺体内广州管圆线虫幼虫的方法。

1例粪类圆线虫感染病例报告

粪类圆线虫属于条件致病寄生虫,为兼性寄生虫。粪类圆线虫感染临床上较少见,检验医师对粪类圆线虫的成虫、幼虫及虫卵的识别能力普遍偏低,且较依赖仪器设备,而全自动粪便仪对粪类圆线虫的识别能力普遍较差,易造成漏诊和误诊。该文对1例粪类圆线虫感染患者进行检验确诊、病例分析、驱虫治疗及疗效观察,以期加深检验医师和临床医师对粪类圆线虫病的认识,减少误诊、漏诊。

1例结膜吸吮线虫病报告及中国流行状况分析

目的报道1例在中国大连感染结膜吸吮线虫的7个月大婴儿病例,并对中国人体结膜吸吮线虫病的流行状况作以分析。方法查阅1917—2016年文献,统计已报告的感染病例数进行分析。结果中国是世界上报道人体结膜吸吮线虫感染病例最多的国家,自1917年至2016年,中国已报告的感染病例数达626例,广泛分布于全国28个省市,我们分析了超过400例具有较详细临床数据的中国结膜吸吮线虫病病例。患者年龄最小2个月,最大至88岁。男性和女性患者所占比例分别为60.22%和39.78%。对患者的职业状况进行分析显示,学龄前儿童占55.38%;农民占32.27%;工人占4.78%;其余占7.57%。结论作为一种重要的人兽共患寄生虫,加强对结膜吸吮线虫生物学及流行病学等方面的研究,对防止其传播和流行具有重要的意义。

贵州省人体重要寄生虫病现状调查与分析

目的掌握贵州省重要寄生虫病流行分布现状。方法按照《全国重要人体寄生虫病现状调查实施细则》要求进行。结果土源性线虫病调查30个点15 958人,感染率为47.52%,其中蛔虫、钩虫、鞭虫、蛲虫感染率分别为42.41%、4.71%、10.77%和1.67%。绦/囊虫病调查16个点,其中问卷调查17 889人,无确诊绦虫病人;血清学检查6 669人,阳性16人,阳性率0.24%。华支睾吸虫病调查9个点5 195人,粪检虫卵阳性2人,感染率0.04%。包虫病调查2个点1041人,血清学阳性率8.26%;弓形虫病调查10个重点人群及3个点共4 933人,血清学阳性率16.81%。黑热病调查3个点1 442人,未发现患者或疑似患者,调查地亦未发现白蛉。结论与1991年全国首次人体寄生虫分布调查结果相比,贵州省人体土源性线虫感染率明显下降,但感染率水平仍较高,并存在食源性寄生虫及弓形虫等感染。

用SSR-PCR和RAPD技术研究中国不同地域旋毛虫株的遗传变异

目的 对中国不同地域的旋毛虫株基因组DNA进行多态性分析 ,并为其种及种下分类提供依据。方法 采用微卫星锚定PCR(SSR PCR)及随机扩增多态性DNA技术 (RAPD)对我国 6旋毛虫株基因组DNA进行PCR扩增 ,根据扩增产物电泳条带情况进行SAS分析 ,计算遗传距离并构建进化树。结果 T3、T7与国内各地域株间遗传距离均大于 0 85 ;湖北株与天津株、黑龙江株与云南株之间的遗传距离均小于 0 2。河南株与前 4株的遗传距离在SSR PCR小于 0 3,在RAPD小于0 6。结论 中国 6株旋毛虫在基因水平可分为不同层次的 3类 :a 湖北株、天津株为一类 ;b 黑龙江株、云南株为一类 ;c 不明株与河南株归为一类或者不明株归为a类中。国内 6株归属于T1。此外 ,国际标准株T3。

江苏省肠道线虫病防治效果分析

目的评估化疗对防治肠道线虫病的效果，并为制定下阶段防治对策提供依据。方法在全国首次人体寄生虫分布调查中签县（市）分层抽样，采用相同的方法调查人群感染率；收集驱虫服药、社会经济等资料进行分析。结果人群肠道线虫总感染率、蛔虫、钩虫、鞭虫和蛲虫感染率分别由防治前的59．32％、39．51％、21.80％、27．30％和36．08％下降为3．01％、0．83％、1．07％、1．31％和2．78％。苏南、苏中和苏北3个区域感染率分别下降了96．96％、97．65％和91．43％。全省1994～2005年共驱虫服药8390万人次，人均服药1．40次。苏南、苏中和苏北人均服药0．97、2．03、和1．26次。苏中地区服药率最高，感染率下降幅度最大。结论服药驱虫对降低人群肠道线虫感染率有十分显著的效果，今后要加强对重点地区和高危人群的防治，对不同感染率地区采取分类指导的防治措施。