反复呼吸道感染患儿外周血单个核细胞中TLR2、TLR4表达情况与Th1/Th2免疫应答的关系

目的探讨反复呼吸道感染(RRTI)患儿外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)表达情况与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)免疫应答的关系。方法将2020年12月至2022年12月该院收治的65例确诊为RRTI的患儿纳入研究作为RRTI组。另选取同期于该院体检的健康儿童45例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PBMC中TLR2和TLR4的信使核糖核酸(mRNA)相对表达水平。采用流式细胞仪检测PBMC中TLR2和TLR4蛋白表达率。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中Th1细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)水平及二者比值(IFN-γ/IL-4)。采用Pearson相关分析TLR2、TLR4蛋白表达率与血浆IFN-γ、IL-4水平的相关性。结果RRTI组血浆Th2细胞因子IL-4水平高于对照组,血浆Th1细胞因子IFN-γ水平低于对照组,IFN-γ/IL-4低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。RRTI组PBMC中TLR2和TLR4 mRNA相对表达水平及蛋白表达率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,RRTI患儿PBMC中TLR2和TLR4蛋白表达率与血浆IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4均呈负相关(P<0.05),与血浆IL-4水平均呈正相关(P<0.05)。结论RRTI患儿PBMC中TLR2、TLR4的表达及血浆Th1/Th2细胞因子均可能参与疾病的发生、发展的过程。过度活化的TLR2和TLR4可能会使Th1功能减弱、Th2功能增强。

泛免疫炎症值与急性心肌梗死患者PCI术后左室重构的关系

目的分析急性心肌梗死(AMI)患者泛免疫炎症值(PIIV)与经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后左室重构的关系。方法选取于住院期间接受PCI的AMI患者150例为AMI组、同期进行体检的健康成人150例为对照组,收集入选者的一般临床资料[性别、年龄和体质量指数(BMI)]、血细胞计数(中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和血小板)、实验室检查数据[肌酸肌酶同工酶(CK-MB)、氨基末端脑钠素前体(NT-proBNP)、血糖和血脂],AMI患者分别于PCI术前、出院后第6个月时进行心脏超声检查获取左心室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期容积指数(LVEDV)、左心室射出分率(LVEF);根据PIIV值的中位数(681.32),将AMI组患者分为低PIIV组(≤681.32)和高PIIV组(>681.32);于出院12个月内对AMI患者进行随访,以6个月内LVESV增加>15%为发生左室重构,收集患者12个月内再发AMI、心源性再住院和全因死亡;采用Pearson相关分析PIIV与LVEDV、LVESV和LVEF的相关性,ROC曲线分析PIIV评估AMI患者左室重构的价值,logistic回归分析AMI患者左室重构的影响因素。结果与对照组比较,AMI组患者的PIIV值升高(P<0.05);与低PIIV组比较,高PIIV组AMI患者的中性粒细胞计数、单核细胞计数、血小板计数、血糖、LVESV、LVEDV和LVEF更高,而淋巴细胞计数更低(P<0.05);与低PIIV组比较,高PIIV组AMI患者的左室重构、再发AMI和心源性再住院升高(P<0.05);PIIV与LVESV和LVEDV呈明显的正相关性(P<0.05),与LVEF呈显著负相关(P<0.05);ROC曲线提示PIIV预测AMI患者PCI术后左室重构的AUC为0.868(95%CI为0.821~0.915,P<0.05),其敏感性为89.2%、特异性为76.7%。结论PIIV在评估AMI患者PCI术后发生左室重构方面具有良好的预测价值。

MHR在慢性精神分裂症共病代谢综合征中的评估价值

目的分析单核细胞与高密度脂蛋白比值(MHR)在慢性精神分裂症代谢综合征(MS)评估中的价值。方法选取慢性精神分裂症患者100例作为研究组,另选择同期在医院体检健康体检者100例作为对照组,收集两组入选者的一般人口学资料[性别、年龄、体质量指数(BMI)]和实验室检查资料[单核细胞计数(M)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、MHR等];依据慢性精神分裂症患者是否伴发MS分为MS组和非MS组,根据患者MHR采用四分位法分为A组(n=25)、B组(n=25)、C组(n=25)及D组(n=25);比较MS组与非MS组患者一般资料及糖脂代谢水平,分析MHR四分位法的4个亚组糖脂代谢水平及MS的发生率;采用Pearson相关性分析MHR与BMI及糖脂代谢指标的相关性、二元logistic回归分析慢性精神分裂症伴发MS的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评估MHR在慢性精神分裂症伴发MS的诊断价值。结果与对照组比较,研究组BMI、M、TG、GLU、MHR水平升高,HDL水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与非MS组比较,MS组病程、年龄、BMI、GLU、TG、MHR水平增加,HDL水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与A组比较,B组、C组、D组BMI增加,HDL水平降低,P<0.05;与A组(8%)比较,B组(12%)、C组(28%)、D组(40%)MS发生率均升高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的MHR与BMI、TG呈正相关(P<0.05);与HDL水平呈负相关(P<0.05);年龄、BMI、TG、MHR均是慢性精神分裂症伴发MS的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,MHR诊断慢性精神分裂症伴发MS的AUC为0.721,95%CI为0.592~0.849,敏感度和特异度分别为77.3%、61.5%。结论MHR与慢性精神分裂症伴发MS有关,对慢性精神分裂症患者伴发MS方面具有良好的预测价值。

造血干细胞移植患者术后淋巴细胞亚群水平在移植物抗宿主病中的临床意义

目的 动态监测血液病患者行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)术后30、60、90 d淋巴细胞亚群水平。探讨淋巴细胞亚群水平变化与移植后急性移植物抗宿主病(a GVHD)的相关性,以及监测淋巴细胞亚群的临床意义。方法 选取2019年1月—2021年12月解放军总医院第一医学中心allo-HSCT术后患者33例,根据是否发生a GVHD分为a GVHD组(19例)和非a GVHD组(14例)。采用流式细胞术检测患者移植后30、60、90 d淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD19^(+)、CD16^(+)CD56^(+))和调节性T细胞(CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+))水平,分析淋巴细胞亚群的动态变化特征。比较2组淋巴细胞亚群差异。结果 移植后第30天,患者自然杀伤(NK)细胞相对计数达到较高水平,60 d后逐渐降至正常水平。B细胞长期处于较低水平。T细胞在移植后第30天时处于较低水平,60 d后恢复至正常水平;CD8^(+)在各监测时间点均高于CD4^(+)。淋巴细胞亚群相对计数中,各监测时间点NK细胞、总T细胞、CD8^(+)、CD8^(+)CD28^(+)、CD8^(+)CD28~-差异均具有统计学意义(P<0.05);绝对计数中,各监测时间点仅CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)差异具有统计学意义(P<0.05),NK细胞、B细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05)。此外,a GVHD组和非a GVHD组移植后第30天的调节性T细胞和第60天的CD4^(+)差异有统计学意义(P<0.05),其他淋巴亚群差异无统计学意义(P>0.05)。结论 定期检测造血干细胞移植(HSCT)患者淋巴细胞亚群对监测其免疫重建过程有重要意义。术后监测调节性T细胞有助于临床及时发现a GVHD,提高患者生存率。

淋巴细胞亚群和细胞因子检测在脓毒症并发MODS中的应用价值

目的分析淋巴细胞亚群和细胞因子检测在脓毒症并发多器官功能障碍综合征(MODS)中的应用价值。方法收集2022年1月至2023年6月中山大学附属第一医院符合《脓毒症与感染性休克的国际共识》中脓毒症诊断标准的脓毒症患者103例为研究对象,根据是否发生MODS分为MODS组(46例)与非MODS组(57例)。回顾性分析这两组患者的基线资料、淋巴细胞亚群、细胞因子和血清学指标,使用秩和检验比较两组患者淋巴细胞亚群、细胞因子与血清学指标水平,采用受试者工作特征曲线分析淋巴细胞亚群、细胞因子和血清学指标诊断脓毒症并发MODS的效能。结果MODS组CD3^(+)CD19^(-)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞水平明显低于非MODS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。MODS组白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平明显高于非MODS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD3^(+)CD19^(-)、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞诊断脓毒症并发MODS的曲线下面积(AUC)分别为0.899、0.711、0.676;IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α诊断脓毒症患者MODS的AUC分别为0.637、0.797、0.761、0.650;PCT诊断脓毒症并发MODS的AUC为0.720。结论淋巴细胞亚群、细胞因子水平对诊断脓毒症并发MODS有一定价值,其中CD3^(+)CD19^(-)T淋巴细胞诊断灵敏度最高,IL-6诊断特异度最高。

异基因造血干细胞移植患者T淋巴细胞亚群与EB病毒感染的相关性分析

目的 分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者T淋巴细胞亚群与EB病毒(EBV)感染的相关性。方法选取北部战区总医院2015年5月至2021年12月行allo-HSCT的67例患者作为研究组,同时选取54例造血干细胞移植供者作为对照组。应用实时荧光定量PCR技术检测EBV-DNA含量,采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群水平。比较2组研究对象T淋巴细胞亚群分布差异。分析EBV-DNA载量与T淋巴细胞亚群水平的相关性。结果研究组患者EBV-DNA感染率和病毒载量均高于对照组(P<0.05)。CD3~+CD4~+T淋巴细胞与CD4~+/CD8~+比值在研究组EBV阳性组患者中含量低于EBV阴性组,差异均有统计学意义(P=0.010,P=0.005)。研究组EBV阴性组与EBV阳性组CD3~+CD4~+T淋巴细胞百分比均主要分布在20%~<40%,2组分布差异有统计学意义(χ~2=9.269,P=0.010),CD3~+CD8~+T淋巴细胞百分比分布比较差异无统计学意义(χ~2=0.279,P=0.870)。研究组EBV阳性组CD4~+/CD8~+比值主要分布在0.6~<1.2,2组比较差异有统计学意义(χ~2=10.367,P=0.006)。EBV-DNA病毒载量与CD3~+CD8~+T淋巴细胞含量呈正相关(P<0.01),与CD4~+/CD8~+比值呈负相关(P<0.01)。结论allo-HSCT患者活动性EBV感染与T淋巴细胞亚群关系密切,检测外周血T淋巴细胞亚群对allo-HSCT患者EBV感染的病情严重程度评估具有重要意义。

艾滋病合并宫颈病变患者细胞免疫状态及其高危型HPV感染率研究

目的 分析艾滋病(AIDS)合并宫颈病变患者细胞免疫状态及其高危型人类乳头瘤病毒(HPV)感染率。方法 纳入2020年3月~2023年3月期间我院收治的102例AIDS合并宫颈病变患者,根据其宫颈病变类型,分为宫颈癌组(n=32)、宫颈上皮内瘤变(CIN)组(n=44)、宫颈炎组(n=26)。检测并比较三组患者细胞免疫状态[CD4+、CD8+]及高危型HPV感染率。使用受试者工作(ROC)曲线分析CD4+、CD8+水平联合高危型HPV感染率预测AIDS患者合并宫颈癌的预测价值。结果 三组患者CD4+、CD8+水平及高危型HPV感染率比较存在明显差异,CD4+水平比较中,宫颈癌组CIN组>宫颈炎组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线中,CD4+、CD8+水平联合高危型HPV感染率预测AIDS患者合并宫颈癌的曲线下面积(AUC)为0.879,敏感度为71.87%,特异度为94.29%。结论 AIDS患者细胞免疫功能降低及其高危型HPV感染情况会增加宫颈癌发生风险,临床需积极检测患者细胞免疫状态及高危型HPV感染情况,对AIDS患者并发宫颈病变进行预防、早期诊断及治疗。

蛋白C受体(PROCR)在全葡聚糖颗粒(WGP)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞成熟中的作用

目的探究蛋白C受体(PROCR)在全葡聚糖颗粒(WGP)作用下对小鼠骨髓源性树突状细胞(BMDC)成熟过程及其免疫相关功能的调控效应。方法从NCBI的基因表达数据集(GEO)数据库中下载GSE2197数据集,随后通过深入分析该数据集的芯片数据,识别并获得了差异表达基因(DEG)。从免疫学数据库和分析门户网站(IMMPORT)数据库中下载并整理与免疫功能相关的基因,与DEG取交集得到免疫相关的差异基因。通过运用专门的R包等生物信息学算法,成功识别了关键基因并解析了相关的信号通路。实时定量PCR检测BMDC经WGP刺激前后的差异基因。在体外实验中,从小鼠的胫骨和腓骨中抽取骨髓,并利用FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)诱导这些骨髓细胞分化成BMDC。经过诱导后,对这些BMDC进行转染处理,并随后使用WGP进行刺激。为了评估BMDC的免疫表型,利用流式细胞术分析了细胞表面分子CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅰ/Ⅱ(MHC-Ⅰ/Ⅱ)以及程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)的表达情况。此外,为了探究BMDC的免疫调节功能,利用ELISA技术检测了BMDC上清液中细胞因子白细胞介素12p40(IL-12p40)、IL-6、IL-10的分泌含量。在T细胞实验中,我们利用OT-Ⅰ和OT-Ⅱ小鼠的淋巴结和脾脏,通过磁珠分选试剂盒成功分离出CD8^(+)和CD4^(+)T细胞。随后,我们将这些T细胞与特异性抗原卵清蛋白(OVA)以及之前制备的BMDC进行共培养。最后,利用流式细胞术检测了T细胞的增殖与分化情况,以评估BMDC在抗原特异性T细胞反应中的作用。结果经过分析WGP诱导的与CpG(GSE2197)刺激的BMDC的差异基因,与IMMPORT数据库中的免疫基因取交集,筛选到PROCR基因。数据显示敲低PROCR基因后,经WGP激发的BMDC的表面分子MHC-Ⅰ明显降低,细胞因子IL-10的分泌显著增多;其驱使CD8^(+)T细胞产生γ干扰素(IFN-γ)的能力明显减弱。结论在WGP诱导BMDC成熟的过程中,PROCR对MHC-Ⅰ的表达以及IL-10的分泌具有调控作用,进而调节BMDC诱导CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞增殖与分化的功能。

外周血T细胞受体多样性指数联合CD4/CD8+T细胞比值对乙肝相关性肝细胞癌预后转归的预测价值分析

目的 探讨外周血T细胞受体(T cell receptor, TCR)多样性指数、CD4/CD8+T细胞比值对乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞癌预后转归的预测价值。方法 收集2020年7月至2021年8月我院收治的HBV相关性肝细胞癌患者51例,同期选取在我院进行体检的健康成人35例为对照组。检测所有受试者外周血T淋巴细胞分群、TCR多样性,比较不同预后转归患者与健康人群的获得性免疫功能及相关生化指标。分析外周血TCR多样性指数、CD4/CD8+比值、二者联合对HBV相关性肝癌疾病转归的预测价值。结果 TCR多样性指数、CD4/CD8+比值水平等在健康人群与HBV相关性肝癌人群中差异有统计学学意义(P<0.05),预后不良组TCR D50值、CD4+T细胞比例、CD4/CD8+均下降,而CD8+T细胞比例显著上升(P<0.05);TCR多样性指数、CD4/CD8+比值、二者联合预测疾病预后的曲线下面积(AUC)分别为0.872、0.832、0.945。二者联合敏感度86.40%,特异度93.10%。结论 预后不良的HBV相关性肝癌患者获得性免疫功能相关指标均显著降低,TCR多样性指数、CD4/CD8+比值二者联合检测对于HBV相关性肝癌患者的预后具有较高的预测价值,可作为临床上评估肝癌患者肝切除术后不良预后的指标。

基线年龄对艾滋病抗病毒治疗长期免疫功能的影响

目的探讨基线年龄艾滋病毒感染或艾滋病(HIV/AIDS)患者抗逆转录病毒治疗(ART)对长期免疫功能的影响。方法收集2004年1月至2021年12月期间在柳州市人民医院关爱门诊随访的初治患者作为研究对象,共计1832例。其中男1292例,女540例。按基线年龄分为3组,分别为<35岁年龄组557例、35~50岁年龄组675例、>50岁年龄组600例。每3个月随访1次,应用广义估计方程(GEE)比较3个年龄组患者在启动ART后(0~120个月)外周血CD4+T淋巴细胞计数增长情况是否有统计学差异。结果GEE参数估计值结果显示,在启动ART后的随访66个月内,不同年龄组间的CD4+T淋巴细胞计数变化情况差异有统计学意义(P<0.05),在随访66个月之后,不同年龄组间的CD4+T淋巴细胞计数变化情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论艾滋病患者经抗病毒治疗后,随着治疗时间延长,大部分患者免疫功能均可获得一定程度恢复,但>50岁的患者需重点关注。

儿童肺结核患者支气管肺泡灌洗液免疫细胞检测与分析

目的采用流式细胞仪检测肺结核患者支气管肺泡灌洗液淋巴细胞亚群,探讨肺结核患者支气管肺泡灌洗液淋巴细胞免疫功能状态的变化。方法选取19例儿童肺结核患者作为观察组,根据痰涂片结果分为菌阳组(11例)和菌阴组(8例)。同期选取就诊的21例成人肺结核患者作为对照组。通过流式细胞术对其进行检测,检测两组研究对象的支气管肺泡灌洗液T淋巴细胞、CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞、单核细胞和B淋巴细胞比例的变化,并比较其差异性。结果儿童肺结核患者的支气管肺泡灌洗液中各免疫细胞的比例分别为:T淋巴细胞(54.57±5.28)%、CD4^(+)T淋巴细胞(66.14±4.08)%、CD8^(+)T淋巴细胞(33.80±4.07)%和B淋巴细胞(13.54±2.53)%与成人肺结核患者的T淋巴细胞(53.30±4.76)%、CD4^(+)T淋巴细胞(65.45±3.49)%、CD8^(+)T淋巴细胞(34.55±3.49)%和B淋巴细胞(14.70±2.83)%比较,两组差异均无统计学意义(P>0.05)。两组肺结核患者的CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比例均无统计学差异(P>0.05)。儿童肺结核患者的单核细胞(16.00±3.20)%与成人肺结核患者(9.25±1.17)%比较,显著性增高,两者差异有统计学意义(P<0.05)。菌阳组支气管肺泡灌洗液中CD4^(+)T淋巴细胞(65.64±5.41)%、CD8^(+)T淋巴细胞(34.36±5.41)%和单核细胞(19.15±5.18)%与菌阴儿童结核患者CD4^(+)T淋巴细胞(66.84±6.65)%、CD8^(+)T淋巴细胞(33.03±6.58)%和单核细胞(11.75±1.75)%比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。但菌阳组T淋巴细胞(45.06±6.38)%和B淋巴细胞(9.30±2.60)%显著低于菌阴组[分别为(67.64±6.93)%和(21.48±4.17)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童肺结核患者的单核细胞高于成人肺结核患者;痰涂片细菌阳性的儿童结核患者B淋巴细胞的比例显著低于痰涂片细菌阴性患者。提示在活动性儿童结核患者的免疫功能有所下降,为了解肺结核的发病机制及为临床免疫治疗提供一定的理论依据。

miR-21水平与ICU脓毒症患者T淋巴细胞亚群指标的关系及在多重耐药菌感染防治中的价值

目的探讨微小RNA(miRNA)-21(miR-21)与重症监护病房(ICU)脓毒症患者T淋巴细胞亚群指标间的关系,并分析其对防治多重耐药菌(MDRO)感染的价值。方法选取2020年1月至2022年5月ICU脓毒症患者125例为研究对象,其中一般脓毒症患者73例,脓毒症休克患者52例。检测纳入研究者血清miR-21水平及T淋巴细胞亚群指标(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞百分比和CD4^(+)/CD8^(+)比值),分析miR-21水平与T淋巴细胞亚群指标的相关性。统计ICU脓毒症患者MDRO感染情况,分析患者MDRO感染的影响因素,构建风险模型。结果脓毒症休克患者血清miR-21水平、CD8^(+)T淋巴细胞百分比高于一般脓毒症患者,CD3^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值低于一般脓毒症患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。ICU脓毒症患者血清miR-21水平与CD3^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)T淋巴细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)比值呈负相关(r=-0.842、-0.788、-0.825,P<0.001),与CD8^(+)T淋巴细胞百分比呈正相关(r=0.818,P<0.001)。校正机械通气、住ICU时间、使用糖皮质激素等因素后,合并慢性阻塞性肺疾病、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、抗菌药物使用频率、抗菌药物持续使用时间、miR-21为ICU脓毒症患者发生MDRO感染的独立影响因素(P<0.05)。ICU脓毒症患者MDRO感染的风险模型显示,MDRO感染风险得分>8分患者感染风险最高,感染率为66.67%。结论ICU脓毒症患者miR-21表达与T淋巴细胞亚群指标密切相关,而且miR-21高表达会增加MDRO感染风险,检测血清miR-21水平对MDRO感染防治具有重要指导意义。

腹腔镜胃癌根治术对患者免疫功能、肠道屏障功能及应激反应的影响

目的探讨采取腹腔镜胃癌根治术的方式对患者术后的免疫功能、肠道屏障功能及应激反应的影响。方法选取198例胃癌患者作为研究对象,按照采取手术治疗方式的不同分为观察组和对照组,每组各99例。对照组患者给予传统胃癌根治术治疗;观察组患者给予腹腔镜胃癌根治术治疗。对比术后2组患者的免疫功能、肠道屏障功能以及应激反应。结果术后第3 d 2组患者的免疫球蛋白水平、D-乳酸及二胺氧化酶(DAO)水平均低于术前(P<0.05),其中观察组的免疫球蛋白水平高于对照组,而D-乳酸及DAO水平均低于对照组;术后第3 d 2组患者的应激因子水平均有上升(P<0.05),其中观察组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对胃癌患者采取腹腔镜胃癌根治术能够显著减轻对患者免疫功能、患者肠道屏障功能的影响,并且能够减少应激反应的发生率,有利于改善患者的预后。

具有中央记忆T细胞表型的新型CAR-T细胞的制备及其对GD2阳性人骨肉瘤细胞的杀伤作用

目的通过优化嵌合抗原受体结构制备具有中央记忆T细胞表型并靶向双唾液酸神经节苷脂(GD2)的新型嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞,检测其对GD2阳性骨肉瘤细胞的杀伤能力。方法构建由抗GD2单链抗体、CD28铰链区及跨膜序列、4-1BB胞内共刺激域和CD3ζ胞内段组成的新型嵌合抗原受体慢病毒载体,包装纯化慢病毒并感染Jurkat细胞,检测所得新型CAR-T细胞的感染效率、扩增能力、记忆表型以及不同骨肉瘤细胞株的GD2表达水平;慢病毒感染并筛选稳定表达荧光素酶和增强型红色荧光蛋白(eRFP)的GD2+MG63细胞系;荧光素酶实验检测新型CAR-T细胞对建系MG63细胞的杀伤能力。结果获得优化结构的新型CAR-T细胞,CAR阳性率达到92%以上;新型CAR-T细胞具有良好的体外扩增能力和中央记忆T细胞表型;杀伤实验显示新型CAR-T细胞能够有效杀伤GD2阳性的MG63骨肉瘤细胞。结论通过优化CAR分子结构成功制备的新型CAR-T细胞具有中央记忆T细胞表型,能够有效杀伤GD2阳性骨肉瘤细胞。

合并慢性子宫内膜炎的反复着床失败患者CD56^(+)CD16^(+)自然杀伤细胞水平的研究

目的观察合并慢性子宫内膜炎(CE)的反复着床失败(RIF)患者子宫自然杀伤(uNK)细胞的表达水平。方法选取2018年10月—2023年2月就诊于生殖医学中心的82例RIF患者为RIF组;选择同期在本中心行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的有IVF助孕妊娠活产史且拟再次助孕的82例患者为对照组。2组均在黄体中期取2份子宫内膜组织,一份采用流式细胞仪检测子宫内膜CD56^(+)CD16^(+)uNK细胞水平,另一份采用免疫组化方法检测CD138。采集外周血3~4 mL,采用流式细胞仪检测CD56^(+)CD16^(+)外周血自然杀伤(CD56^(+)CD16^(+)PbNK)细胞水平及血常规。CE阳性患者口服抗生素治疗1个疗程。抗炎治疗结束后下个月经周期黄体期时再次取少量子宫内膜组织,采用免疫组化方法检测CD138。比较治疗前后2组临床妊娠率及胚胎着床率。结果RIF组CD56^(+)CD16^(+)uNK细胞水平为(34.23±17.01)%,低于对照组的(45.41±20.90)%,差异有统计学意义(P<0.05);RIF组黄体中期外周血中CD56^(+)CD16^(+)PbNK细胞水平为(14.38±5.36)%,与对照组的(13.58±4.34)%比较,差异无统计学意义(P>0.05);RIF组与对照组白细胞计数、淋巴细胞百分比、中性粒细胞百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。子宫内膜CD56^(+)CD16^(+)uNK细胞水平与外周血CD56^(+)CD16^(+)PbNK细胞水平无相关性(r=0.06)。RIF组合并CE与无合并CE、对照组合并CE与无合并CE的黄体中期内膜中CD56^(+)CD16^(+)uNK细胞、外周血中CD56^(+)CD16^(+)PbNK细胞水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。在RIF组合并CE及对照组合并CE患者中,治疗后CE转阴者较CE仍为阳性者的临床妊娠率、着床率均升高,早期流产率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CD56^(+)CD16^(+)uNK细胞低表达可能导致母胎界面免疫紊乱,从而增加RIF发生的风险;外周血CD56^(+)CD16^(+)PbNK细胞与子宫内膜CD56^(+)CD16^(+)uNK细胞无相关性;抗生素治疗CE能明显改善RIF患者妊娠结局,CE的确诊和治疗应作为RIF评估的重要因素。

冠心病合并肺部感染患者中性粒细胞CD64及Toll样受体的表达及临床意义

目的探讨冠心病合并肺部感染患者中性粒细胞CD64、Toll样受体(TLR)的表达水平及临床意义。方法将2019年7月至2022年7月该院收治的冠心病患者86例纳入研究,依据是否合并肺部感染分为感染组(35例)与非感染组(51例)。另外,选取进行体检的健康志愿者50例作为对照组,比较3组中性粒细胞CD64指数、TLR2、TLR4水平的差异,分析CD64指数与TLR2、TLR4的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CD64指数、TLR2、TLR4诊断冠心病合并肺部感染的效能。结果3组CD64指数、TLR2、TLR4水平比较差异有统计学意义(P<0.05);感染组上述各指标均高于非感染组与对照组(P<0.05);非感染组上述各指标均高于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,TLR2、TLR4均与中性粒细胞CD64指数呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,CD64指数与TLR2、TLR4用于冠心病合并肺部感染诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.922、0.929、0.662,CD64指数、TLR2有较高诊断效能,当取最佳界值时,CD64指数和TLR2的灵敏度、特异度分别为0.943、0.804和0.914、0.902。结论中性粒细胞CD64、TLR2、TLR4表达在冠心病患者发生肺部感染时明显增加,CD64指数与TLR2在冠心病合并肺部感染中有较高诊断效能。

微量元素与儿童免疫功能的认识及进展

随着社会的发展及人们生活方式的改变,蛋白质-能量营养不良已显著减少,但微量元素缺乏或不平衡的问题却日益凸显。微量元素与人体健康密切相关,尤其是儿童,其常以辅酶的形式参与机体各种代谢,促进人体生长发育、维护中枢神经系统完整性、参与机体免疫应答等。微量元素是维护人体免疫功能的重要因素,对机体免疫功能的影响是多方面的,特别是对淋巴组织、细胞免疫功能和吞噬细胞杀菌作用的影响更明显。因此,阐明微量元素对机体免疫功能的作用机制,对保障儿童的健康、预防相关疾病的发展具有重要意义。本文主要通过对铁、铜、硒免疫机制的探讨初步阐述微量元素与儿童免疫功能的关系。

慢性肾小球肾炎患者外周血Th1/Th2及CD28^+细胞的变化及其临床意义

目的探讨慢性肾小球肾炎(CGN)患者外周血Th1/Th2及CD28+细胞百分率的变化在疾病进程中可能的细胞免疫学机制。方法采用流式细胞术检测50例CGN患者及30名正常人(对照组)外周血Th1/Th2和CD28+细胞的百分率,用SPSS 16.0软件对试验结果进行统计分析。结果与对照组比较,CGN患者外周血CD3+CD4+细胞百分率和CD4/CD8比值明显降低(P<0.05),Th1和Th2细胞百分率差异无统计学意义(P>0.05),但Th1/Th2比值明显增高(P<0.05);CGN患者CD28+、CD4+CD28+细胞百分率明显减少(P均<0.01)。结论 CGN患者体内T细胞免疫功能紊乱和活化受限,细胞免疫功能低下,Th1和Th2细胞失衡,通过对CGN患者外周血Th1/Th2及CD28+细胞的检测,有助于了解患者的细胞免疫状态,为临床诊断和免疫治疗提供参考依据。

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清细胞因子水平与疾病预后的关系研究

目的观察乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血清细胞因子水平的变化,探讨细胞因子在疾病预后中的作用。方法收集HBV相关ACLF患者24例(治愈者13例,死亡者11例)、慢性乙型肝炎(CHB)患者30例和正常对照者15名,采用Luminex液相芯片技术检测血清白细胞介素IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子水平,并结合临床指标进行相关分析。结果 ACLF组IL-6、IL-8和TNF-α水平高于CHB组和对照组(P<0.01),CHB组亦高于对照组(P<0.05);ACLF死亡组IL-6、TNF-α水平和终末期肝病模型(MELD)评分明显高于治愈组(P<0.05);TNF-α、IL-6与凝血酶原活动度(PTA)之间呈明显负相关(r=-0.712,P<0.001;r=-0.521,P=0.009);TNF-α、IL-6与MELD评分之间呈明显正相关(r=0.491,P<0.015;r=0.379,P=0.048)。细胞因子与HBV DNA和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)之间无明显相关性。结论 HBV相关ACLF患者血清中多种细胞因子明显升高,其中IL-6和TNF-α水平随疾病严重程度的增加而增加,检测其血清细胞因子水平有助于疾病严重程度和预后转归的判断。