钆塞酸二钠增强磁共振成像评估慢性乙型肝炎患者肝功能的临床研究

目的:研究使用钆塞酸二钠(Gd-EOB-DTPA)增强磁共振成像(MRI)评估慢性乙型肝炎(CHB)患者肝功能的可行性。方法:选取2022年10月1日至2023年12月10日江苏省中医院感染科收治的60例CHB患者进行前瞻性研究,所有患者均行Gd-EOB-DTPA增强MRI检查,计算各期信号强度比(SIR)、对比度增强指数(CEI),并与患者的Child-Pugh分级、肝脏实时剪切波弹性成像(SWE)以及无创肝纤维化模型APRI、FIB-4、GPR相比较。结果:不同Child-Pugh分级的SWE(P<0.001)、SIR肝胆期(P=0.005)、CEI肝胆期(P=0.003)、FIB-4(P<0.001)差异均有统计学意义。不同SWE水平CHB患者的SIR肝胆期(P=0.031)、CEI肝胆期(P=0.001)、FIB-4(P<0.001)差异均有统计学意义。低CEI肝胆期组与中CEI肝胆期组(P=0.017)、高CEI肝胆期组(P=0.022)之间的SWE差异有统计学意义,不同水平CEI肝胆期组间的Child-Pugh分布有差异(P=0.011)。CEI肝胆期水平与SWE呈负相关(r=-0.3973,P=0.0017),CEI肝胆期水平诊断Child-Pugh B+C级的曲线下面积(AUC)为0.720,灵敏度为0.818,特异度为0.605。结论:Gd-EOB-DTPA增强MRI可以较好地评估CHB患者的肝功能,CEI肝胆期水平可以定量地辅助诊断肝功能分级。

乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

目的 探讨荧光定量PCR法检测的乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物之间的关系。方法 3 62例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBVDNA的检测 ,按照不同的乙肝病毒标志阳性情况分组后 ,进行乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物的分析研究。结果 乙肝病毒标志物HBsAgHBeAgHBcAb阳性组HBVDNA阳性率 97.7% ,拷贝数在 10 4 ～ 10 8之间 ;HBsAgHBeAbHBcAb阳性组阳性率 5 6% ,拷贝数在 10 2 ～ 10 7之间 ;HBsAgHBcAb阳性组阳性率 5 4% ,拷贝数在 10 2 ～ 10 7之间 ;HBsAgHBeAg组阳性率 10 0 % ,拷贝数在 10 7之间 ;HBeAbHBcAb组 3例 ,有 1例阳性 ,拷贝数 10 2 ;HBsAb组阳性率 14 .3 % ,拷贝数在 10 3 ～ 10 7之间 ;189例全阴性有 2例阳性 ( 1.0 6% ) ,拷贝数在 10 4 ～ 10 5之间。结论 HBVDNA在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出 ,但检出率相差甚大 ,从 1.0 6%～ 10 0 % ;HBVDNA乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBVDNA阳性率及拷贝数较高 ;HBsAg及其抗体阳性者仍可检出HBVDNA ,说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断病人是否具有传染性是不够的。

PCR测定乙型肝炎病毒DNA弱阳性质控血清的适用性研究

为确定目前国内PCR测定乙型肝炎病毒 (HBV)DNA弱阳性质控血清的浓度水平 ,将已知浓度的 10倍系列稀释的 5份质控血清寄发给全国 91个临床和试剂生产厂家实验室 ,让其以室内常规方法检测 ,回报测定结果由我处统计分析。结果表明 ,目前全国PCR测定HBVDNA灵敏度不高 ,当样品HBVDNA含量低于 5× 10 5拷贝 /ml时 ,大部分实验室 (5 6 0 % )测不出来 ,不同厂家试剂对上述样品的检出差异较大。因此 ,目前国内PCR测定HBVDNA弱阳性质控血清的浓度以 10 5拷贝

乙型肝炎病毒感染者血清前S_1和前S_2抗原同步检测的临床意义

采用 ELISA 双抗体夹心法对106例 HBV 感染者共146份血清进行前 S1和前 S2抗原同步检测,结果血清前 S 抗原与血清 HBVDNA 密切相关,但并不完全一致;其与血清 HBeAg、PHSA 受体活性及抗 HBc 也具有良好的正相关性。五组不同临床类型 HBV 感染者血清前 S 抗原检出率及相对含量均以 ASC 组最高,SH 组次之,CAH、CPH 和 AH 组均较低。AH 组随疾病恢复、ALT 下降,血清前 S 抗原相对含量下降乃至阴转;CAH 和 CPH 组尽管病情改善、ALT 下降,血清前 S 抗原相对含量并无明显改变;SH 组则无论病情好转或恶化,血清前 S 抗原相对含量均下降。表明连续定量检测血清前 S 抗原可为除 SH 外其它各型乙型肝炎提示预后。作为 HBV 复制和疾病预后观察指标血清前 S1抗原较前 S2抗原敏感。

应用多聚酶链反应(PCR)检测HBVDNA

<正> 国内外现行乙型肝炎病毒感染的诊断方法,其检测敏感性(大于10~5毒粒/ml)尚未达到最低血清感染水平(10~2毒粒/ml)。本文应用高灵敏度与特异性的DNA多聚酶链反应(PCR),直接检测肝炎患者血清中的HBVDNA,以探讨PCR技术在乙型肝炎病毒感染诊断中的应用及HBVDNA与乙型肝炎血清标志物间的关系。材料与方法检测对象:本组220例,按1990年上海全国病毒性肝炎会议制订的病毒性肝炎防治方案进行诊断,急性肝炎51例。

乙型肝炎病毒前S_1抗原及抗体的检测及临床意义

用合成乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ１肽及其免疫抗体制备的试剂，检测１９例急性、１０３例慢性乙型肝炎患者血清中的前Ｓ１抗原和抗体。结果：前Ｓ１抗原及抗体的阳性率在急性乙型肝炎患者分别为８４．２％和８９．５％，在慢性乙型肝炎患者分别为２５．０％和８４．２％。前Ｓ１抗原在血清学表达上与ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ的阳性符合率分别高达８９．３％和８７．５％。前Ｓ１抗体与抗ＨＢｓ在体内有明显相伴随关系。提示：前Ｓ１蛋白是ＨＢＶ在体内复制的可靠标志，而前Ｓ１抗体反映疾病的恢复和病毒的清除。

乙肝标志物模式与HBV-DNA定量的比较分析

目的 :探讨乙型肝炎标志物模式与 HBV-DNA复制水平之间的关系。方法 :采用 EL ISA法检测乙型肝炎病毒标志物 ,采用荧光定量探针 PCR法 ( fluorogenic quantitative PCR,F Q-PCR)检测 HBV-DNA。结果 :310例血清标本中 ,H Bs Ag,HBe Ag,H Bc Ab( +)组的平均拷贝数为 10 7.32± 1 .2 8,阳性率为 10 0 % ;H Bs Ag,HBe Ab,HBc Ab( +)组的平均拷贝数为10 4 .6 9± 1 .4 0 ,阳性率为 47% ;H Bs Ag,H Bc( +)组的平均拷贝数为 10 5.0 4± 1 .4 3,阳性率为 5 0 % ;HBe Ab,HBc( +)组的平均拷贝数为 10 4 .94± 2 .72 ,阳性率为 11.8% ;HBs Ab ( +)组的平均拷贝数为 10 4 .71± 1 .56 ,阳性率为 14 .3% ;阴性组的平均拷贝数为10 4 .38± 1 .2 8,阳性率为 12 .5 %。HBs Ag,HBe Ag,HBc Ab( +)组的平均拷贝数显著高于其它各组。结论 :FQ-PCR可以更为清楚地反映乙肝患者的病程变化情况及更为真实地反映 HBV的感染和复制情况 ,对临床诊断、治疗及判断预后具有重要的指导意义。

定量检测慢性乙型肝炎患者肝组织HBV-DNA的临床意义

对２４例慢性乙型肝炎（下称慢乙肝）患者于肝穿同日留取血清，分别进行肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ、血清ＨＢＶ－ＤＮＡ定量检测及血清ＨＢｅＡｇ量的测定， 并比较肝组织与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ定量的差异，分析肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ定量与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ定量、ＨＢｅＡｇ量及肝功能指标之间的相关性，比较各型慢乙肝肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ定量的差异。结果显示，肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ定量明显高于血清ＨＢＶ－ＤＮＡ定量，二者的对数值呈显著相关；肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ定量与ＨＢｅＡｇ量呈中度相关，与血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）、总胆红素（ＴＢＩＬ）、白蛋白与球蛋白之比（Ａ／Ｇ）无关，各型慢乙肝肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ定量无统计学差异。提示肝组织ＨＢＶ－ＤＮＡ定量较血清ＨＢＶ－ＤＮＡ定量、ＨＢｅＡｇ量更能反映肝内ＨＢＶ复制水平，具有重要的临床意义。

应用错配PCR和限制性片段长度多态性分析技术检测HBV YMDD变异株

目的 建立简便易行的检测乙型肝炎病毒 (HBV)多聚酶基因 (P基因 )上YMDD变异株的方法 ,评价运用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者对此变异的影响。方法 采用套式 /错配聚合酶链反应 (PCR)结合限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术对 10 8例治疗前HBVDNA(PCR)阳性正在拉米夫定治疗中的慢性乙型肝炎患者的HBVYMDD变异情况进行检测。结果 运用上述技术能有效区分HBVYMDD野生株和变异株 ;上述 10 8例患者经拉米夫定治疗后 ,HBVDNA阴转者 63例 (5 8 3 % ) ,HBVYMDD野生株和变异株分别为 2 3例 (2 1 3 % )和 2 2例 (2 0 4% )。结论 建立的套式 /错配PCR -RFLP分析技术可用于HBVYMDD变异株的临床监测 ;

乙型肝炎病毒DNA定量检测及意义

目的 检测血清中乙型肝炎病毒 DNA拷贝数 ,并了解 HBV感染的不同血清学指标组合相应的 HBV- DNA含量分布 ,以指导临床 .方法 采用 Ampli Sensor PCR定量方法 ,检测 2 0 8份不同临床类型血清标本的 HBV- DNA含量 ,再用EL ISA方法测定 HBV- M,统计不同免疫指标组合的 HBV-DNA平均含量 .结果 病毒量分为高、中、低三度 ,大于 10 7拷贝· m L- 1 为高滴度 ;10 7～ 10 5 拷贝· m L- 1 为中等滴度 ;10 5拷贝· m L- 1 以下为低滴度 .6 0例 HBs Ag(+) HBe Ag(+)HBc Ab(+)血清 ,HBV- DNA全部阳性 ,平均含量为 1.8× 10 8拷贝· m L- 1 ;48例 HBs Ag(+) HBe Ab(+) HBc Ab(+)血清 ,HBV- DNA平均含量为 6 .4× 10 6 拷贝· m L- 1 ;30例 HB-s Ag(+) HBc Ab(+)血清 ,HBV- DNA平均含量为 8.5× 10 5拷贝· m L- 1 ;13例 HBs Ab(+) HBe Ab (+) HBc Ab(+)血清 ,HBV- DNA平均含量为 2 .1× 10 5拷贝· m L- 1 .结论 定量 PCR可真实反应 HBV感染、复制及病程变化 。

乙型肝炎患者淋巴细胞转化功能和可溶性白细胞介素2受体的观察

本文用~3HTdR掺入法及双抗体夹心ELISA法测定了69例急性和慢性乙型肝炎病人的淋巴细胞转化功能(淋转)和血清可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)的变化。结果显示患者淋巴细胞在体外经ConA刺激后的转化和增殖功能明显低于正常人。乙肝病人血清SIL-2R水平均显著升高,其中急性肝炎和慢活肝较慢迁肝升高更为明显。血清ALT水平高低与HBV标志物和ALT有密切关系。提示急、慢性乙肝病人均存在淋巴细胞功能障碍,血清SIL-2R检测可望做为观察病程、临床诊断分型及判断疗效的指标。

病毒性乙型肝炎患者血清sFas、TNF-α、IL-6和IL-8的检测及临床意义

目的探讨病毒性乙型肝炎患者血清sFas、TNF-α、IL-6、IL-8水平与肝细胞凋亡/坏死之间的关系。方法抽取各型乙型肝炎患者静脉血5mL,ELISA法检测sFas、TNF-α、IL-6和IL-8的水平。结果上述4项指标的检出水平基本上依次为:重型乙型肝炎SH-B>慢性乙肝重度CHB-H>慢性乙肝中度CHB-M>急性乙肝AH-B>慢性乙肝轻度CHB-L,各组间差异显著。结论sFas、TNF-α、IL-6和IL-8,4项指标的水平,能够反映肝细胞损害的程度,且与病毒复制、肝细胞凋亡和坏死有内在联系。

分级定量PCR检测血清HBV DNA

目的利用竞争ＰＣＲ法建立分级测定ＨＢＶＤＮＡ含量的定量方法．方法设立３个标准竞争模板（１０２ｃｏｐ，１０４ｃｏｐ，１０６ｃｏｐ），分别和恒量的待测模板混合，分别进行４０，３０，２０次循环的ＰＣＲ扩增，最后凝胶电泳分离待测模板和竞争模板的ＰＣＲ产物，测定两者的荧光强度的比值，计算待测模板的初始量．结果对乙型肝炎血清ＨＢＶＤＮＡ定量表明，１２份ＨＢｅＡｇ阳性血清，ＨＢＶＤＮＡ的血清浓度在６×１０７～１×１０１１ｃｏｐ／Ｌ，而１２份ＨＢｅＡｂ阳性血清只有７份可检出ＨＢＶＤＮＡ，它们的血清浓度均在３×１０８ｃｏｐ／Ｌ以下，其余５份用该ＰＣＲ方法，检测不到．

PCR-ELISA检测HBV DNA方法学建立及初步临床应用

建立PCR ELISA检测HBVDNA的方法学 ,探讨其最佳实验条件并初步评价其临床应用价值。常规PCR引物用地高辛标记 ,使扩增产物带有地高辛标记成份 ,再通过亲合素 生物素系统把生物素标记探针包被在固相聚苯乙烯板小孔中 ,通过固相探针与HBVDNA扩增产物进行杂交 ,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应 ,经NPP显色 ,根据其A4 0 5nm值大小 ,推算样品中HBVDNA模板含量。建立PCR ELISA的最佳实验条件为PCR循环次数为 30次 ,杂交温度 37℃ ,杂交时间 1h ,批内变异系数为 9 4% ,批间变异系数 16 9% ,在 6 0例乙肝患者血清标本检出率为 70 % (4 2 /6 0 ) ,而常规凝胶电泳检出率为 46 7% (2 8/6 0 ) ,两者具有显著性差异 (χ2 =6 6 7 P<0 0 1)。

患者的ELISA一步法检测乙型肝炎抗-HBc、抗-HBe存在假阳性

为证实酶联免疫吸附试验（ELISA）一步法检测抗-HBc和抗-HBe之间的相互交叉反应，用国产试剂对166例临床标本及266例体检标本，采用一步法和两步法检测并与Abbott产品结果比较发现其相对特异性，抗-HBc依次为50％、67．7％和98．2％、97．5％。抗-HBe依次为89．3％、88．6％和98．8％、99．2％，一步法均明显低于两步法。将两法结果不符的再与Abbott产品结果比较，抗-HBc检测临床标本存在30％和体检标本存在16％的差异，抗-HBe也分别存在12．2％和11．9％的差异，这些差异主要是试剂特异性低引起的非特异性交叉反应。因此一步法检测抗-HBc和抗-HBe存在假阳性。

HBV DNA定量与乙型肝炎临床及病理关系的探讨

目的 探讨HBVDNA定量与各型乙型肝炎临床及病理的关系。方法 采用美国PE公司生产的 5 70 0型荧光定量PCR仪 ,对 83 8例乙型肝炎病毒单纯感染的各型肝炎患者行HBVDNA定量检测 ,并同时检测其它乙型肝炎病原学标志物 ,对部分患者行肝穿刺病理检查。结果 慢性乙型肝炎、肝硬变、慢性重型肝炎中 ,HBVDNA定量检测与乙型肝炎血清学标志有明显的一致性。HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性模式、HBsAg、HBcAb阳性模式和HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性模式与HBVDNA阳性的符合率分别为 94.3 8%、3 8.5 6%、2 7.3 0 %。各型肝炎的HBVDNA定量比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,但慢性乙型肝炎HBVDNA阳性率明显高于肝硬变及慢性重型肝炎组 (P <0 .0 0 1)。 15例患者的HBVDNA定量与肝脏病理学分析 ,HBVDNA定量与肝组织炎症及纤维化无明显相关。结论 HBVDNA定量检测特异性强 ,灵敏度高 ,与HBeAg阳性呈正相关 ,是乙型肝炎诊断和观察抗病毒治疗的一项可靠的判断指标。但与肝组织炎症及纤维化无明显相关。

逆转录-聚合酶链反应在乙型脑炎诊断中的建立

目的 运用逆转录 -半套式 -聚合酶链反应技术 (RT -semi-nested -PCR) ,建立一种新的早期快速检测乙型脑炎病毒的方法。方法 收集临床诊断的 37例乙脑和 15例非乙脑病人标本 (包括血清、脑脊液 )分别为 6 3份和 30份 ,同时用RT -semi-nested -PCR、IgM捕获法ELISA(MacELISA)进行检测。 结果 血清和脑脊液中可成功检测出JEVRNA ,经1 5 %凝胶电泳 ,出现特异性条带 ,符合预计值 4 0 0bp。结论 RT -semi-nested -PCR对检测JEV感染 ,从实验设计到实验条件 ,都是合理的 ,有较高的敏感性和特异性。可用于乙脑的早期诊断。

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞分泌细胞因子的检测及其意义

目的 :探讨白细胞介素 10和干扰素γ在病毒性肝炎的诊断、治疗和预后判断等方面的意义。方法 :采用植物血凝素(PHA)刺激 89例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞 (PBMC)分泌 IL- 10和 IFN- γ,采用 EL ISA法检测其水平。结果 :随着患者病情的加重 ,IL- 10和 IFN- γ水平均降低 ,且与肝脏损伤程度有密切关系。结论 :IL- 10和 IFN- γ参与了肝炎的病理过程。当两者产生水平低于正常水平近一半时 ,预示肝脏受损较重 ,病情较重 ,预后较差。

荧光定量PCR与普通PCR检测HBV DNA的对照分析

目的 比较普通ＰＣＲ（Ｃｏｍｍｏｎ ＰＣＲ）和实时荧光定量ＰＣＲ（Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ，ＦＱ－ＰＣＲ）检测人血清ＨＢＶ ＤＮＡ结果之间的相互关系，为临床提供最有效的诊断方法。方法 对 １１７份血清标本用两种方法同时进行检测，分析其相关性，比较其差异。结果 荧光定量ＰＣＲ不仅能几乎１００％检测出普通ＰＣＲ阳性的标本，还能在其阴性的７６份标本中检测出３６份阳性，其拷贝数均在较低水平。在不同的血清标志物模式下，定量方法的阳性率均明显高于定性方法。结论 荧光定量ＰＣＲ具有一定优势，尤其适合于使用抗病毒药物的病人的疗效观察和病情预测。