肾综合征出血热疫苗预防效果和免疫策略研究

“八五”、“九五”期间连续观察肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）沙鼠肾细胞Ⅰ型灭活疫苗（简称：沙鼠苗）、乳鼠脑纯化Ⅰ型灭活疫苗（简称：鼠脑苗）和地鼠肾细胞Ⅱ型灭活疫苗（简称：地鼠苗）在ＨＦＲＳ疫区试验人群中的安全性、血清学和预防效果，并提出免疫策略建议。采取现场与实验室结合的方法。现场试验人群采用整群随机分组，分为疫苗接种组和对照组。实验室血清抗体检测采用间接免疫荧光法（ＩＦＡＴ）、微量细胞病变中和试验（ＭＣＰＥＮＴ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和血凝抑制试验（ＨＩ）。研究结果表明３种疫苗安全性良好。在接种人群中的中强反应率较低：沙鼠苗为０５６％，地鼠苗１５７％，鼠脑苗３２６％。在接种疫苗的１４３，５８１人中，４年内临床上未出现免疫（感染）增强反应的病例。接种组１７例病人与对照组３６２例病人比较，临床类型差异无显著性（Ｐ＞０１）。１１９例疫苗接种者，以ＩＦＡＴ证实，再次自然感染汉坦病毒（ＨＶ）后，未出现临床症状。３种疫苗血清学效果较好。从３种疫苗全程基础免疫后１４天、１年（和加强免疫后１４天）、２年、３年４年时，中和抗体和荧光抗体的抽样检出情况看，在基础免疫后１４天和相隔１年加强免疫后１４天，中和抗体平?

流行性出血热(EHF)地鼠肾细胞(GHKC)灭活疫苗的初步人体观察

用流行性出血热(EHF)病毒L99株(家鼠型)感染金黄地鼠肾细胞(GHKC),经福尔马林(0.025％)灭活制备EHF灭活疫苗(88-17批),经检定批准,肌肉(1ml)接种志愿者12人(IO人于0、7、28天,2人分别于0、7天及0、28天各一针),进行了安全性及抗体反应的初步人体观察。结果显示,此种疫苗对人体接种无明显不良反应。接种后,12名接种者IFA、ELI-SA及中和抗体(EFRNT)全部阳转,180天和360天后仍分别有10人血清中和抗体阳性。初步表明,此疫苗是安全的,可以有效诱导抗体产生,其中和抗体多数可持续一年以上。

双价纯化肾综合征出血热地鼠肾原代细胞疫苗的免疫效果

目的 考核双价肾综合征出血热地鼠肾原代细胞纯化疫苗 (汉滩型 +汉城型 )对人体的安全性及免疫原性。方法 分别选择南方和北方两个观察点 ,分别接种 5 18人和 6 5 0人 ,观察接种对象的副反应 ,并测定血清荧光抗体和中和抗体。结果 在观察中仅有 2人呈现度局部副反应 ,总反应率为 0 .5 0 %。IFA抗体阳转率为89.95 % ,ELISA抗体阳转率为 10 0 % ,GMT为 1735。中和抗体阳转率大于 87.38%。结论 该疫苗对人体安全 。

首次从青海省绵羊血清中检出新疆出血热病毒IgG抗体

1988年7～8月,采集青海省海西自治州乌兰县郭里木乡231只改良绵羊血清,用间接免疫荧光方法检出新疆出血热病毒IgG抗体5份;自该县蓄集乡825只改良绵羊血清中检出新疆出血热抗体6份。鉴于这些绵羊均为本地所产,证实海西州乌兰县是新疆出血热自然疫源地。

流行性出血热患者外周血单核细胞产生IL-1和PGE_2的水平及其与IL-2的关系

本文对流行性出血热(EHF)患者外周血单核细胞(PBM)在脂多糖刺激下产生白细胞介素-1(IL-1)和前列腺素E_2(PGE_2)的能力及其与淋巴细胞产生IL-2活性之间的关系作了初步研究。结果表明,EHF患者各病期PBM产生IL-1的能力基本正常,而PGE_2的分泌水平在发热期和低血压少尿期明显增高;IL-2活性在病程早期下降,且与PGE_2水平呈负相关,并发现PGE_2水平增加与EHF病毒感染PBM有关,提示EHF病毒感染导致单核细胞免疫调节功能失常是造成本病早期非特异性细胞免疫功能低下的一个重要原因。

应用PCR技术对现场捕获的携带HFRS病毒的动物肺组织进行血清分型的初步研究

本研究应用聚合酶链式反应（PCR），对现场捕获的携带肾综合征出血热（HFRS）病毒的动物肺组织，进行了病毒分离前后的分型扩增及扩增产物的限制性内切酶酶切分析比较，并与单克隆抗体（McAb）间接荧光法分型结果作了比较。初步表明，该方法可直接应用于现场捕获的动物肺所携带的HFRS病毒的血清分型研究。用PCR分型方法对不同宿主动物所携带的HFRS病毒的扩增特性还表明，黑龙江省黑河地区大林姬鼠和狗所携带的HFRS病毒，与黑线姬鼠所携带的HFRS病毒，可能存在较大的差异。

流行性出血热地鼠肾细胞灭活疫苗人体试用细胞免疫反应观察

观察了20位志愿者在接种试验性流行性出血热(EHF)地鼠肾细胞(GHKC)双价灭活疫苗后的细胞免疫反应,并以其体液免疫反应作对照观察。用淋巴细胞转化试验测定细胞免疫水平。结果首针疫苗接种后42天和56天,特异性刺激指数(SSI)和非特异性刺激指数(NSI)均较免疫前显著增高(P_(SSI)<0.001;P_(NSI)<0.02),免疫后SSI累计阳转率为100％,NSI累计阳转率为60％,免疫后6个月二者均降低至正常水平。免疫后56天测定抗体,荧光抗体阳转率为100％;微量感染性中和试验表明,针对家鼠型病毒L99株中和抗体阳转率为95％,而针对野鼠型病毒JR株阳转率为65％。

建德市肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗随机对照现场试验

在建德市肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗随机对照现场，采集免前ＨＦＲＳ抗体阳性者系列血清，检测血清中间接免疫荧光抗体（ＩＦＡ）和中和抗体（ＭＣＰＥＮＴ）；观察疫苗保护发病的效果。结果疫苗副反应率为３７８％。免后二周、加强前、加强后二周、加强后二年和三年血清抗体ＩＦＡ和ＭＣＰＥＮＴ阳性率分别为６５６％、５００％、３８％、００％、８３３％、７５０％，１６７％、６７％、１２０％、４０％；其血清抗体ＩＦＡ和ＭＣＰＥＮＴ滴度分别是１３３、３９、５１、２５，１４１、４９、１７、１１、１３、１１。经过４８个月（４年）的随访期，全程接组种无一病例发生，全程对照组发病１５人，其余未种组发病２０人，疫苗保护率１００％。在３５例ＨＦＲＳ病例中，Ⅰ型病例２３人，Ⅱ型病例１０人，２例未分型。表明疫苗的中期防病效果较好，免后四年抗体水平下降很快；该现场还需继续随访以获得更长时间疫苗保护发病的情况。

肾综合征出血热疫苗效果免疫(感染)增强和免疫策略研究专题报告

在疫苗试区全程接种了１０１７８人，并设对照组人群１６２０３人。１９９５年８月～１９９８年９月３年时间里从疫苗开始接种到加强后两年，观察了ＨＦＲＳⅠ型鼠脑灭活纯化疫苗的安全性和流行病学保护率效果等。纵观结果：证明该疫苗除了因疫苗中的蔗糖引起较重较普遍的局部反应外，疫苗的安全性是有保证的。从血清免疫效果看，８６例全程接种后两周的免疫者血清，ＩＦＡ抗体阳转率达１００％，中和抗体阳转率为４４４４％（８／１８）。１年后，ＩＦＡ抗体和中和抗体阳性率分别下降到２８５７％和１４８０％。但加强后两周的血清，ＩＦＡ抗体和中和抗体分别反弹至８３３３％和５５５６％，其抗体几何平均滴度也随之回升，但不十分明显。此外，在加强后２年的ＩＦＡ和中和抗体阳性率已下降到较低水平，分别为２２５％和２６０％。在全程接种人群中除１例因接种２针，１例虽接种３针，但未按规定接种程序进行接种而发病外，至今接种组未发生其他病例。而对照组人群中已发病２２例，其３年平均保护率达９５７０％。总之，该疫苗是安全和有效的，结果证实疫苗有较好的血清免疫效果和较好的流行病学防病效果。其中似乎存在免疫增强反应，但没有发现感染增强反应（接种组２例病人临床表现?

血凝抑制试验鉴别肾综合征出血热疫区类型

应用抗肾综合征出血热病毒(HFRSV)R22、76—118及Hallnas株的10株单克隆抗体的免疫荧光反应发现,Z-20及SR-11病毒株的反应分别类同于野鼠型和家鼠型病毒株.用这两株病毒接种Vero-E6细胞获得的血凝素做血凝抑制(HI)试验证实,来自浙江的肾综合征出血热病人血清,对Z-20株病毒血凝素的HI抗体平均滴度比对SR-11高6.62倍,而来自河南及山西的病人血清,则对SR-11的HI抗体平均滴度分别高于对Z-20血凝素的4.93和4.67倍,来自上海的病人血清,对两株病毒血凝素的HI抗体滴度差异仅为2 11倍.根据血凝抑制试验,有可能对我国不同地区来源的肾综合征出血热病人血清进行分型。

肾综合征出血热Ⅱ型灭活疫苗加强免疫血清学效果及3年期防病效果观察

赣榆县于１９９４年底在厉庄乡开展肾综合征出血热Ⅱ型（ＨＦＲＳ—Ⅱ型）灭活疫苗约５０００人的大规模接种显示该苗是安全的，并具有良好免疫原性和近期防病效果〔１〕。为进一步考核该苗加强免疫的血清学效果及３年期防病效果，我们于加强免疫后继续对该苗进行观察。现...

肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗预防接种成本效益和效果分析

对肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗进行成本效益和效果分析，为肾综合征出血热免疫预防策略的制定提供依据。以建德市肾综合征出血热Ⅰ型灭活疫苗现场效果考核资料为基础，分５个不同年龄组队列，计算各组的效益费用比（ＢＣＲ）和费用效果比（ＣＥＲ）。各年龄组ＢＣＲ和ＣＥＲ均分别小于１和大于０。３０～３９岁年龄组ＣＥＲ值１１０８０８２元最小，接近于人均国民生产总值（１０８万元），其他各组ＣＥＲ均较大，灵敏度分析显示疫苗费、保护率和保护期对ＣＥＲ和ＢＣＲ影响大。高危人群２０～２９、３０～３９和４０～４９岁年龄组ＣＥＲ均小于人均国民生产总值。结论：预防接种肾综合征出血热灭活疫苗未获正效益；３０～３９岁年龄组，其次是４０～４９岁和２０～２９岁年龄组是首选接种人群；１５～５９岁高危人群均需接种疫苗，其中２０～４９岁是重点接种人群。

大林姬鼠为传染源的肾综合征出血热特征的研究

大林姬鼠为传染源的肾综合征出血热特征的研究沈阳军区军事医学研究所（沈阳１１００３１）蔡增林李忠义刘江秋范永星魏仰华张兴旺近些年来国内外有关肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）的研究进展较快。国内已分离出Ⅰ型（汉滩病毒，ＨＴＮＶ）和Ⅱ型（汉城病毒，ＳＥＯＶ）病毒...

浙江省肾综合征出血热纯化灭活疫苗的免疫效果和免疫策略研究

目的：观察HFRS（Ⅰ型）鼠脑纯化灭活疫苗全程和加强免疫后18个月的流行病学。血清学效果。方法：采用免疫荧光法检测微量细胞病变试验，分别检测血清中的特异性抗体及中和抗体。结果：全程免疫后15天，中和抗体阳性率为40％，GMT为4．06；360天降为阴性，GMT为2.50；加强后2周抗体阳性率为50％，GMT为4.35.全程免疫后15天IFA抗体阳性率为100％，GMT为81．75；至360天阳性率降至12．50％，GMT为5．69；加强后2周阳性率升至81．25％，GMT为1297。加强免疫6363例，仅2例出现弱反应，无中、强反应。免后18个月经流行病学调查，1年内（经春、秋两个流行高峰）接种组发病2例，发病率为19.12／10万；对照组发病12例，发病率为74.06／10万，保护率为74.18％，保护指数为3.87；加强1针后的6个月中，接种组无病例，对照组发病3例，发病率47.15／10万，保护率达100％。结论：该疫苗安全性好；有较好的免疫应答；近期和中期流行病学防病效果良好。

流行性出血热病毒感染鼠的细胞毒T细胞功能中性红比色分析法

建立中性红比色分析法用于测定流行性出血热(EHF)细胞毒T细胞(CTL)功能,并对EHF地鼠肾细胞(GHKC)灭活疫苗免疫动物的CTL活性进行了初步观察。中性红比色法是用EHF病毒(EHFV)免疫主要组织相容性抗原为H-2~d的纯系Balb/C小鼠,取其脾细胞在体外用感染EHFV的同系鼠腹腔巨噬细胞刺激后作为效应细胞,以EHFV感染的同系鼠腹腔巨噬细胞经中性红染色后作为靶细胞,最后用酶联免疫检测仪测定未被杀伤的靶细胞的中性红量来分析CTL活性。结果表明,此法灵敏度高,特异性强,因不使用同位素,比较安全、经济。EHFV活毒免疫动物的CTL活性随着“效应细胞/靶细胞”(E:T)比值的增加而增加。野鼠型EHFVA9株及JR株免疫动物的CTL间表现明显的交叉免疫反应,提示同型毒株结构蛋白上存在有CTL识别的共同位点。家鼠型EHFV L99株与野鼠型JR株免疫动物的CTL间也有较低的交叉杀伤作用。以EHF-金黄色地鼠肾细胞制备的灭活疫苗免疫的动物表现有较低的类似CTL活性。

流行性出血热外周血淋巴细胞亚群的变化及特异性免疫球蛋白对它的影响

用淋巴细胞分化抗原的系列单抗隆抗体,动态观察流行性出血热(EHF)外周血淋巴细胞亚群的变化。发现CD_8^+细胞数在2—5及9—12病日明显增加,CD_4^+/CD_8^+比值倒置或下降,16—19病日逐渐恢复正常。B^+、IL-2R^+和HLA-DR^+细胞数在病程的不同阶段均显著增高。在疾病的早期重、中型患者B^+、IL-2R^+及HLA-DR^+细胞数高于轻型患者。特异性免疫球蛋白治疗后B^+、IL-2R^+和HLA-DR^+细胞数与对照组相比明显降低。提示:EHF患者细胞免疫功能增强,细胞免疫可能参与本病的发病机制。特异性免疫球蛋白的应用似有改善细胞免疫功能紊乱的作用。

流行性出血热灭活疫苗人群免疫及流行病学效果观察

为了观察EHF灭活疫苗的免疫力和流行病学效果,选择一个发病率在380～860/10万的集体单位职工作为疫苗接种组,并以该单位所在地的同一景观生活的农民作为对照组(发病率在170～120/10万之间)。1989年10月首次免疫接种后,抗EHF病毒NT抗体阳转率为148/150,HI抗体为149/150;2种抗体的几何平均滴度分别为80.67和38.68。1年后抗体阴转为20～25%。1990年9月加强免疫接种后,NT抗体阳转率为100%,几何平均滴度为81.85,1年后阴转率为5～8%。经3年的流行病学效果观察,观察点再未发生EHF病例,认为该疫苗足以控制本病流行。

肾综合征出血热病毒50kD结构蛋白的抗原位点分析

采用23株抗HFRS病毒McAb,以放射免疫沉淀及ELISA等试验,证实HFRS病毒的50kD蛋白为该病毒的核蛋白(NP)。用抗NP的McAb对经亲和层析纯化的NP以ELISA阻断试验进行抗原位点分析,结果表明该蛋白与一般有囊膜病毒的NP相比,有两点明显的不同。一是HFRS病毒的NP上不仅有组特异性抗原位点,而且有型特异性抗原位点,两者都至少分布在2个区域,这些抗原位点及其分布区域之间有部分重叠或比较靠近。二是HFRS病毒的NP上可能存在中和抗原及血凝抗原位点。

用双价肾综合征出血热灭活疫苗加强接种HNT型单价疫苗免疫者的效果观察

对１９８８年经过ＨＮＴ型疫苗初免３针，并于１９８９年加强１针的７名志愿者，于１９９７年加强１针双价疫苗后１４天采血，测定对ＨＮＴ型和ＳＥＯ型ＨＦＲＳ病毒的中和抗体。结果经加强双价疫苗的７名志愿者血清中，均检出ＨＮＴ型和ＳＥＯ型病毒的中和抗体，其中对ＨＮＴ病毒的中和抗体较高，对ＳＥＯ型病毒的中和抗体也能达到规定的要求，表明双价ＨＦＲＳ灭活疫苗可用于过去接种ＨＮＴ型疫苗人群的加强。