p53反义RNA对人肺癌细胞表型和顺铂敏感性的影响

目的：研究外源P53反义RNA对有P53基因248密码点突变的人肺癌细胞系恶性表型和顺铂敏感性的影响。方法：构建反义P53cDNA真核细胞表达载体，PEGFP－P53（AS），经酶切图证明反向联结质粒，Lipofectin介质转染有P53基因248密码点突变的人肺癌细胞系801－D，经G418筛选获耐受克隆，稀释法建立单细胞克隆系，PCR检测外源基因，荧光显微镜检测细胞绿荧光蛋白表达，P53单抗免疫组化染色检测P53突变蛋白表达，体外集落形成，检测细胞恶性生长。流氏细胞仪检测细胞周期，MTTI地检测细胞对顺铂药物敏感性。结果：酶切图证明了P53－cDNA反向联结于质粒，构建了PEGFP－P53（AS），建立了转染单细胞克隆系PEGFP－P53（AS）－801D及空载细胞系PEGFP－801D。PCR检测外源P53基因和neo基因存在于转染细胞PEGFP－P53（AS－801D。荧光显微镜下发现胞浆有绿荧光蛋白表达，免疫组化染色P53突变蛋白801D细胞系为阳性，而PEGFP－P53（AS）－801为阴性，证明外源反义P53封闭转染细胞内源突变蛋白表达。与母系相比PEGFP－P53（AS）－801D集落形成抑制率为61％（P＜0．01），流氏细胞仪检测PEGFP－P53（AS）－801D细胞G1期细胞数明显增加，出现G1期阻止的表现，MTT检测PEGFP－P53（AS）－801D对顺铂比母系更为敏感。结论：有P53基因248密码点突变的801D细胞恶性增殖明显，对顺铂耐药，外源P53反义RNA可封闭突变蛋白表达，抑制801D细胞体外恶性增殖，增加对顺铂的药物敏感性，证明P53突变的恶笥表型可以被抑制或野生型P53功能可得到恢复。

人低分化鼻咽癌上皮细胞系(CNE—2Z)裸小鼠移植模型的建立及其特性研究

本文报告人低分化鼻咽癌裸小鼠移植模型的建立及其生物学特性的研究,实验动物为NC系裸小鼠(少量Swiss系),使用CNE—2 Z细胞(1×10~6/0.5ml细胞)皮下接种,历时二年,在203只动物传代30次,移植成功率为100％。组织学及超微结构显示为低分化鳞状细胞癌特征,染色体显示人类肿瘤细胞染色体,有EB病毒基因组存在及EB病毒核抗元(EBNA)、膜蛋白(LMP)表达。我们所建立人低分化鳞状细胞癌裸鼠移植模型,具有移植成功率高,呈进行性生长,恶性程度高,不会自行消退等特点,可供进一步研究鼻咽癌生物学特性及实验性治疗之用。

KBv200裸鼠移植瘤模型的建立及其耐药特性的探讨

目的 建立一种人多药抗药性 (MDR)细胞株的裸鼠移植瘤模型并探讨其MDR特性 ,为筛选MDR逆转剂进行体内逆转MDR的研究提供模型。方法 按SPF级动物常规饲养裸鼠 ,鼠腋窝皮下接种 1× 10 7个细胞 ,观察成瘤率及生长特性 ,并比较裸鼠体内细胞与原代细胞耐药特性。细胞毒测定采用MTT法。P糖蛋白 (Pgp)的测定采用流式细胞仪法。结果 KBv2 0 0裸鼠移植瘤的成瘤率为 10 0 % ;在本研究的饲养条件下 ,19d瘤重可达 1 0～ 2 5 g ,平均 (2 1±0 4) g。原代及裸鼠体内KBv2 0 0对长春新碱 (VCR)的IC50分别为 1 479和 1 472 μmol·L-1,两者比较差异无显著性(P >0 0 5 )。原代及裸鼠体内KBv2 0 0的Pgp的表达率分别为 92 1%、91 9% ,二者差异无显著性 ;二者荧光强度亦未见明显改变 ,即Pgp表达量未见改变。 结论 以KBv2 0 0细胞所建立的裸鼠移植瘤模型 ,成瘤率高 ,在实验期间 15～ 2 0d内仍保持其MDR的特性 ,可提供做为MDR研究的体内模型。

双β-羧乙基锗倍半氧化物对小鼠和裸鼠移植性肿瘤生长的影响

我们研究了双β-羧乙基锗倍半氧化物(Ge—132)的抗瘤作用,结果表明对小鼠Harding—Passey黑色素瘤(M—HP)、艾氏腹水癌实体瘤(ESC)和裸鼠移植人肺鳞癌的生长有明显的抑制作用,并发现Ge—132与DDP合并应用对抗裸鼠移植人肺鳞癌有协同作用。

透明质酸对CNE-2Z裸鼠移植瘤毛细淋巴管形成的影响

目的：研究透明质酸（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ，ＨＡ）对ＣＮＥ－２Ｚ裸鼠移植瘤组织内毛细淋巴管形成的影响。方法：将ＣＮＥ－２Ｚ接种到裸鼠皮下并注射ＨＡ（每次３００μｇ／周，共１８００μｇ），取移植瘤作冰冻切片、组织化学染色和常规ＨＥ染色，光镜下观察癌组织内毛细淋巴管的形态和分布，并用图像分析技术对癌间质面积进行定量测量。结果：实验组部分癌组织内见毛细淋巴管存在，其余部分癌组织及对照组所有癌组织切片均未见毛细淋巴管；癌组织坏死明显，甚至在毛细血管旁的癌组织，坏死亦明显；两组间癌间质面积差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：透明质酸可促进鼻咽癌组织内毛细淋巴管形成，癌组织坏死与癌组织缺乏淋巴循环有关，透明质酸对癌间质形成无明显促进作用。

小鼠实体型肝癌H_(22)移植实验条件探讨

小鼠实体型肝癌Ｈ２２移植实验条件探讨黄承钰曾令福徐亚林△金帆△彭恕生Ｈ２２肿瘤细胞为高度侵袭性和高度转移性的癌细胞，很容易在多种品系的小鼠体内生长繁殖〔１〕。做小鼠肿瘤移植实验时，先按常规抽取腹水型荷瘤小鼠的腹水，按一定浓度稀释后接种在小鼠前肢腋下形...

S_(180)肉瘤,艾氏腹水瘤肿瘤移植模型建立的研究

目的 应用小鼠S1 80 肉瘤 ,小鼠EAC腹水瘤实体型两种瘤株 ,进行BALB c小鼠、昆明小鼠两种动物移植瘤模型的研究。方法 试验共设BALB c小鼠模型组 ,BALB c小鼠阳性组 ,昆明小鼠模型组 ,昆明小鼠阳性组 ,比较给药 10d后实体瘤大小及其病理学变化特征。结果 BALB c小鼠较之昆明小鼠实验前后体重变化小 ,个体间瘤重差异小 ,其组内标准差占平均值的比例较小 ,肿瘤生长较均衡 ;与此同时 ,病理学观察模型组和阳性组间 ,瘤体切面积和瘤细胞坏死率差异均有极显著性 ,两模型组的小鼠肝脏内均发现有瘤细胞转移。

人鼻咽癌裸鼠移植瘤(NCN-Z1)建立的初步报告

自从1969年 Rygaard和 Povlsen首次报道人结肠癌裸小鼠移植成功以来,至今几乎所有人类恶性肿瘤均可在裸小鼠成功移植。但国内外关于人鼻咽癌组织裸小鼠移植成功的报道仍很少。作者自1985年底至今曾将38例人鼻咽癌活检组织接种于探小鼠进行移植研究,其中有一例获成功并已在裸鼠间连续传九代,建立了人鼻咽癌裸鼠移植瘤——湛江1(Nasopharyngeal Carcinoma-Nude mice-Z1)。现将该移植瘤的建立过程及其某些生物学特性初步研究结果报道如下。

外源精氨酸摄入对移植瘤生长的抑制作用

目的:研究精氨酸 (Arginine ,Arg)对移植瘤生长的影响及初步机制。方法 :建立小鼠S180移植瘤模型并胃灌精氨酸 (Arg)、精氨酸 -精氨酸甲酯 (Arg -NAME)及甘氨酸 (Gly) ,检测脾T、B细胞增殖反应程度及肿瘤重量。结果 :Arg补充达 6 .0mg/ (g·d)时 ,T、B细胞增殖反应程度提高至与对照组差异显著 (Arg -Tcell:0 .0 0 5± 0 .0 13,Gly -Tcell:- 0 .0 6 8± 0 .0 2 5 ,P <0 .0 1;Arg -Bcell:0 .0 73± 0 .0 18,Gly -Bcell:- 0 .0 30±0 .0 43,P <0 .0 1) ;Arg -NAME可显著抑制Arg造成的T、B细胞功能的增强 (Arg -Tcell:0 .0 0 5± 0 .0 13,Arg-Bcell:0 .0 73± 0 .0 18;Arg -NAME -Tcell:- 0 .0 2 4± 0 .0 0 7,Arg -NAME -Bcell:- 0 .0 33± 0 .0 10 ,P <0 .0 1) ;Arg补充达 6 .0mg/ (g·d)可产生较Gly组与Arg -NAME组显著较小的瘤重 (0 .78g± 0 .2 1g ,P <0 .0 1)。结论

光动力结合环磷酰胺对小鼠移植瘤影响的实验研究

目的 :观察PDT结合环磷酰胺对小鼠移植肿瘤的杀伤效应。方法 :应用光敏剂加氩离子激光照射结合应用环磷酰胺对小鼠移植肿瘤进行治疗。结果 :激光光动力结合环磷酰胺治疗对小鼠移植瘤的杀伤作用较单独应用激光光动力或单独应用环磷酰胺的杀伤作用更明显 (P <0 0 1)。结论

人类肿瘤异种移植和癌生物学研究

人类肿瘤异种移植已有近百年的历史,近二十年来,由于遗传突变的先天性免疫缺陷动物的发现,才有了迅猛的发展。1969年,Rygaard首次报道人体肿瘤移植于裸鼠获得成功,70年代初Giovanella等也相继将体外培养的人癌细胞系成功地移植于裸鼠,这些移植的人类肿瘤生长良好并可长期传代。

造血干细胞移植治疗实体瘤20例随访报告

目的 :长期随访并综合评价自体造血干细胞移植治疗恶性实体瘤的治疗效果、安全性及可行性。方法 :2 0例实体瘤患者自体骨髓移植 6例 ,自体外周血造血干细胞移植 14例 ,预处理方案为全身照射加大剂量化疗或大剂量化疗 ,动态观察移植后治疗效果、生活质量及移植相关并发症。结果 :2 0例中完全缓解 12例 (60 % ) ,部分缓解 3例 (15 % ) ,总体治疗反应率 75 % ,中位随访时间 16个月 (4～ 3 2个月 ) ,生活质量Karaofsky评分 10 0分 13例 ,80～ 90分 3例 ,80分以下仅 3例。移植相关并发症以感染和消化道毒副作用常见。移植相关死亡 2例 (10 % )。结论 :自体造血干细胞移植可提高恶性实体瘤的缓解率 ,延长无病生存期 ,严重相关并发症少 。

六种人癌细胞系裸小鼠移植瘤转移的研究

人癌裸小鼠移植瘤是目前最接近人类肿瘤的人体外整体实验模型,但移植后能否保持其原浸润转移的恶性生物学行为,研究结果意见不一。七十年代认为人癌裸鼠皮下移植多呈“良性”局限性生长,不发生或罕见转移。八十年代以来,有人癌裸鼠移植瘤转移的报道.

蝎毒抗癌多肽对移植性肿瘤的抑制作用

目的：观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓｍａｒｔｅｎｓｉｖｅｎｏｍ，ＡＰＢＭＶ）对小鼠肝癌（Ｈｅｐａｔｏｍａ２２，Ｈ２２）和小鼠黑色素瘤（ｍｅｌａｎｏｍａＢ１６）两种动物移植性肿瘤的抑制作用。方法：采用肿瘤质量和肿瘤生长抑制以及带瘤小鼠外周血白细胞计数和脾脏指数为观察指标。将接种Ｈ２２和Ｂ１６２４ｈ后的带瘤小鼠分为对照组，５Ｆｕ治疗组和ＡＰＢＭＶ的３个治疗组。ＡＰＢＭＶ治疗组小鼠分别给予ＡＰＢＭＶ０．０３ｍｇ·ｋｇ－１，０．０４ｍｇ·ｋｇ－１和０．０６ｍｇ·ｋｇ－１腹腔注射，５Ｆｕ组和对照组分别给予５Ｆｕ２０ｍｇ·ｋｇ－１和等体积生理盐水；给药１０ｄ后处死带瘤小鼠，取实体瘤称重并计算肿瘤生长抑制率。Ｈ２２带瘤小鼠于处死前眼球取血，计数外周血细胞，并取小鼠脾脏，称重，计算脾脏指数（ｓｐｌｅｅｎｉｎｄｅｘ，ＳＩ）。结果：ＡＰＢＭＶ在应用的３个剂量范围内对Ｈ２２均具有明显的抑制作用，抑制率均＞３０％，与对照组相比差异显著（Ｐ＜０．００１）；ＡＰＢＭＶ的中、高剂量对Ｂ１６具有显著的抑制作用，抑制率分别为４０．３６％和４４．５８％，其对Ｂ１６的抑制作用强于５?

肾囊膜下移植人体肿瘤法及其在临床肿瘤化疗中的应用

1978年Bogden首先建立了人体肿瘤块裸鼠肾囊膜下移植法(Subrenal Capsule Assay,SRCA),随后又成功地把这一方法应用于免疫功能健全的小鼠。这一方法学上的重大进展有力地推动了肿瘤的实验及临床治疗。目前美国国立癌症研究所(NCI)已将该方法列为研究抗癌新药的系列方法之一。本文结合个人体会就该方法的技术关键,影响因素和应用作一概述。 一、SRCA的设计原理 人体肿瘤SRCA异种移植成功的先决条件为:(1)适宜的生长环境;(2)宿主不产生(裸鼠)

人食管癌裸鼠移植瘤株建立及其应用的研究

用人食管癌组织直接接种于裸鼠,建立两株裸鼠移植瘤株,分别命名为人食管鳞状细胞癌裸鼠移植瘤(HEC_2)和人食管腺鳞癌裸鼠移植瘤(HEC_6),两瘤株的鼠间传代达40余代,历时3年,生长稳定,潜伏期短,移值成功率达100％。并应用于抗癌药物和放射增敏的实验研究,结果表明:平阳霉素对HEC_6有明显的抑制作用,重复两次,抑制率分别为56.5％和8.87％;血卟啉衍生物(HPD)对HEC_2 X线分次照射有明显增敏作用。

人和动物肿瘤移植于免疫缺陷和正常小鼠脾内后肝转移形成及其机制探讨

为了探讨肝转移形成机制和生物学特性,用人类鼻咽癌(CNE—2Z)和小鼠子宫颈癌(U14)分别在裸鼠和615近交系小鼠脾内移植。结果人类鼻咽癌脾内移植后43—50天有8/10例(80％)在脾一端形成瘤结节的同时肝内也形成转移瘤,其中4例合并肺转移;小鼠子宫颈癌在615小鼠脾内移植后,13—14天处死,结果1和3天切除原发瘤,分别有11％和63％发生了肝转移,而未切除原发瘤有73％发生肝转移。同时有程度不等的肺和淋巴结转移。结果表明凡有足够的癌细胞接种到脾内均可发生原发瘤,继而沿血流系统进入肝脏,在肝内形成转移瘤。

洋地黄毒甙体内抗肿瘤活性及其增效作用

目的探讨洋地黄毒甙（ＤＴ）体内抗肿瘤活性及时常用化疗药５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）和环磷酰胺（ＣＴＸ）的增效作用。方法 应用小鼠移植性肿瘤模型，观察药物对小鼠生命延长率或肿瘤抑制率的影响。在可耐受的剂量（０．１ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１，ｉｐ）下治疗小鼠腹水瘤ＥＡＣ，Ｈ２２，Ｐ３８８及实体瘤Ｓ１８０，Ｕ１４。结果 对腹水瘤无对抗作用，对实体瘤有一定抑制作用，抑瘤率分别为３４．６％，３５．１％。ＤＴ与５－ＦＵ（２００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１×１，ｉｐ）合用能显著提高５－ＦＵ对腹水瘤小鼠的生命延长率，分别达到５９．３％，７７．４％和９３．２％；与轻度抑瘤作用剂量（２０ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１×２，ｉｐ）的ＣＴＸ合用，对实体瘤的抑瘤活性高于单独给药组，抑瘤率分别为７８．８％，８０．８％。结论 ＤＴ和５－ＦＵ或ＣＴＸ合用具有增强疗效的作用，毒性无明显相加。

移植瘤株冷冻保护的实验研究

本文介绍人肝癌细胞株细胞及其移植瘤组织经冻存、复苏后检测琥珀酸脱氢酶(SDE)活性、成瘤率和电镜检查。选择10％DMSO或10％甘油作为冷冻保护剂来冻存细胞。它们先在冰箱里缓慢降温冷却（-0．8℃／min），后在液氮罐口的液氮气中冷冻（-10℃／min）1天。最后置入液氮内。冷冻保护后的冻存或组织复苏后显示高的SDE活性，10％DMSO冻存的细胞SDE活性比10％甘油者高，两者相比有显著差别（P＜0．01）。尽管两组复苏后的接种成瘤率相同（80％），但它们移植25天后，前者移植瘤瘤重比后者重1．66倍。电镜下，两种冻存液冻存的细胞都有“暗”和“明”细胞，它们都有完整的线粒体膜和质膜。推荐10％DMSO作为移植瘤冷冻保护液。

裸小鼠繁殖群自发性肿瘤发病情况的研究

对本室六年中饲养于SPF条件下的466只NC系裸鼠繁殖群动物的自发性肿瘤发病情况进行了观察研究,其中纯合子鼠(雄nu/nu)164只,杂合子鼠(雌,un/+)302只。每只动物平均观察时间均达7个月以上,淘汰时均经详细解剖学检查,检出病变者进行病理组织学及透射电镜观察确诊。多数肿瘤病例结合裸鼠间可移植性鉴定.共检出自发性肿瘤7例,发生于纯合子裸鼠5例,杂合子鼠2例。结果表明,在相同饲养环境下,裸鼠(雄,nu/nu)的自发性肿瘤发病率(3.04％)比其同系有胸腺杂合子鼠(雌,nu/+)(0.66％)明显增高(P<0.05),且前者的平均发瘤鼠龄比后者为短,其自发瘤以恶性上皮性肿瘤为主。结果支持了免疫功能缺陷的裸鼠比其同系免疫功能正常鼠有更高的自发性肿瘤的观点。作者还提出了评价裸鼠群体自发性肿瘤发病率的方法.