人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成机制研究

目的 人参皂甙 Rg3抑制肿瘤新生血管的机制。方法 采用鸡胚 CAM和小鼠 Lewis肺癌模型及免疫组化方法探讨 Rg3抑制新生血管形成的机制。结果 Rg3浓度为 0 .1 m M、0 .5 m M时 ,抑制鸡胚 CAM的血管指数 (BI)分别达到 6 2 .4%、45 .6 %。而给予小鼠 Rg3灌胃剂量分别为 5、1 0、2 0 mg/kg/隔日 ,连续 2 0天后 ,观察到 3组的抑瘤率分别为 2 3.0 4%、31 .30 %、47.1 0 % ,同时观察到 Rg3组的新生血管数也明显减少。免疫组化证实 Rg3可明显抑制肿瘤组织内 b FGF的表达。结论 Rg3可明显抑制 Lewis肺癌的生长并抑制了肿瘤新生血管形成。

大鼠实验性腺胃粘膜癌变过程中Ha－ras基因第12位密码子点突变的研究

大鼠实验性腺胃粘膜癌变过程中Ｈａ－ｒａｓ基因第１２位密码子点突变的研究李春启，刘为纹，吕有勇，张青云，邓国仁，房殿春（第三军医大学西南医院消化内科）６３００３８癌基因的激活和抗癌基因的失活是肿瘤发生、发展的分子基础。ｒａｓ基因家族是目前研究得较深入的...

藻蓝蛋白（phycocyanin）─铜激光对大肠癌细胞株HR─8348的杀伤效应

大肠癌细胞株ＨＲ－８３４８用含有１００ｕｇ／ｍｌ，５０ｕｇ／ｍｌ和２５ｕｇ／ｍｌ（藻蓝蛋白１６４０培养液处理后，用波长为６３０ｎｍ的脉冲铜激光照射细胞１２Ｊ／ｃｍ２，继续培养２４小时后用ＭＴＴ法测得细胞存活率为２２．１％，３７．６％和８９．７％，显示出一定的剂量效应，与市售光敏剂蚕砂叶啉对比观察，证明其杀伤肿瘤细胞的效力优于蚕砂叶啉。实验表明藻蓝蛋白有明显的光敏效果。藻蓝蛋白无毒、无副作用，其粗制品已用于强化营养食品，提纯后应用于肿瘤的激光治疗，可望成为一种有发展前途的光敏剂。

RGD多肽结合型长循环脂质体的肿瘤靶向性研究

目的 :研究RGD(精氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸 )多肽结合型长循环脂质体的肿瘤靶向性。方法 :将长循环脂质体 ,通过共价键反应与RGD基元多肽进行结合 ,然后研究其在荷瘤小白鼠体内的肿瘤靶向性。结果 :RGD结合型长循环脂质体在Colon26荷瘤小白鼠体内具有较好的肿瘤靶向性。结论

rIL－6抗癌机理初探（Ⅱ）：rIL－6对小鼠LAK细胞体内外调节效应

为探讨ｒＩＬ－６对ＬＡＫ细胞的调节效应，进行了ｒＩＬ－６对小鼠脾脏ＬＡＫ细胞功能影响的体内外实验研究。实验采用Ｃ_（５７）ＢＬ／６荷瘤或正常小鼠，给予ｒＩＬ－６或生理盐水，１５ｄ后取小鼠脾细胞诱导活化后进行ＬＡＫ杀伤功能测定。结果表明①ｒＩＬ－６在体外对ＬＡＫ杀伤活性有明显的促进作用并在一定范围内呈剂量反应关系；②体内注射ｒＩＬ－６后对正常鼠和荷瘤鼠ＬＡＫ细胞的诱导及杀伤活性均有促进作用；③荷瘤对正常鼠ＬＡＫ细胞功能有抑制作用，而ｒＩＬ－６对荷瘤所致ＬＡＫ细胞功能下降有一定的预防作用。提示ｒＩＬ－６对小鼠脾脏ＬＡＫ细胞杀伤活性的促进效应可能是ｒＩＬ－６发挥抗癌作用的一个途径。

VEGF受体KDR克隆及其对内皮细胞增殖和血管新生的影响

目的 :克隆VEGF受体KDR基因膜外 5 7区 ,探讨其生物学活性。方法 :提取脐静脉血管内皮细胞总RNA ,克隆KDR基因膜外部分 5 7区 ,并使之在QIA表达系统进行表达 ;镍柱亲和层析纯化、复性、生物学活性鉴定。结果 :该系统能表达KDR基因片段 ,表达量约占菌体蛋白总量的 5 %左右。经复性 ,可溶性蛋白具有与VEGF特异结合功能 ,并能抑制VEGF促使脐静脉内皮细胞增殖和鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用。结论 :KDR基因片段能在QIA表达系统中得到表达 ,复性后表达蛋白具有与VEGF结合的生物学功能。

RGD和YIGSR衍生物的抗肿瘤侵袭、转移活性

目的 研究抗肿瘤转移肽Arg Gly Asp(RGD)和Tyr Ile Gly Srg Arg(YIGSR)的均叉、杂叉聚合肽的抗肿瘤侵袭、转移作用。方法 MTT法测定药物对PG和LA795细胞粘附Matrigel能力的影响 ;Transwell细胞培养小室测定药物对PG细胞侵袭重组基底膜能力的影响 ;观察药物对LA795小鼠肺腺癌细胞自发肺转移模型抗肿瘤转移的影响。结果 在 5 0～ 10 0 μg/ml浓度范围 ,RGD和YIGSR的杂叉肽WF12和YIGSR的均叉肽WF2 7的抗粘附作用强于RGD和YIGSR肽 ;以上二肽在 10 0 μg/ml浓度的抗肿瘤侵袭作用优于RGD和YIGSR肽 ;以上二肽 10 0 μg/只 ,静脉给药仅 5次可显著抑制移植LA795细胞肺转移小鼠的肺脏重量和肺转移结节数。结论 RGD与YIGSR的杂叉肽WF12和YIGSR的均叉肽WE2 7具有较强的抗肿瘤侵袭、转移活性。

ELISA法定量检测长春新碱诱导的K562及K562/VCR凋亡

细胞凋亡是一种不同于细胞坏死的细胞死亡方式，具有特殊的形态学及生物化学特征。其生物化学变化主要表现为内源性核酸内切酶的激活。它依赖于Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋的核酸内切酶从核小体间连接处将双链ＤＮＡ切断，形成以１８０ｂｐ为最小单位的ＤＮＡ片断，经琼脂糖电泳分...

植酸和魔芋干预二甲肼诱发ICR小鼠大肠癌的初步研究

饮食与大肠癌的关系极为密切,植酸(PA)和魔芋(KM)均为天然食物。本实验表明在二甲肼诱发ICR 小鼠大肠癌过程中,2%PA 饮水25周能使肿瘤发生率和浸润性生长发生率分别从100.0%和70.0%下降至42.9%14.3%;5～10%KM 饲料喂饲25周能使肿瘤发生率从100.0%下降至50.0%,但未能观察到 PA 和 KM协同抑癌作用。PA 和 KM 也能显著地减轻与肿瘤密切有关的超氧化物歧化酶、丙二醛等生化指标的变化程度。

^(186/188)Re-MAG_3-McAb在肿瘤治疗中的最新进展

应用于肿瘤放射免疫治疗中的放射性核素最好应发射β或α粒子,而不发射或少发射γ射线,β能量以小于IMeV为宜,通过理论计算,^(186)Re和^(188)Re是两种比较理想的核素,近几年来受到了人们的重视.采用双功能整合剂MAG_3将^(186/188)Re和McAb偶联的技术,使该交联物具有良好的体内外稳定性,因而在肿瘤的导向治疗中具有潜在的应用价值.本文从^(186/188)Re的核素性能、^(186/188)Re标记McAb技术的发展以及^(186/188)Re-MAG_3-McAb交联物的生物学特性三个方面介绍了该放免治疗剂在肿瘤治疗中的应用现状,并对放免治疗中存在的问题进行了评述和展望.

树舌多糖对小鼠HepA瘤细胞P16、Rb基因表达的影响

本文通过树舌多糖对P16基因、Rb基因表达影响的研究,进一步阐明树舌多糖抗肿瘤作用的机理。研究结果表明,树舌多糖作用后,小鼠HepA瘤细胞P16基因表达显著增强(P<0.01),Rb基因表达增强(P<0.05),树舌多糖对小鼠HepA瘤细胞P16、Rb基因有激活作用。

抗癌iRNA诱生干扰素抗癌细胞增殖效应

用抗癌免疫核糖核酸(iRNA)在人体内诱生IFN—α,并经提纯获得高活性IFN—α,用于癌细胞的抑制试验,并将IFN-α标记为^(125)I—IFN—α,检测癌细胞表面IFN—α受体。结果表明,提纯的IFN—α对胃癌7901细胞、Hep—2细胞、Hela细胞、L929等细胞于37℃4h孵育后,细胞膜上有^(125)I—IFN—α吸附,并与IFN—α有竞争性抑制,表现在cpm数值的增高或降低。

应用Southern印迹杂交法检测转移基因在宿主细胞中的整合

目的 应用Southern印迹杂交法 (Southernblot)证实转移基因整合至宿主细胞基因组DNA。方法 酚氯仿法提取基因转导的PA317/AIM及K5 6 2 /AIM细胞基因组DNA ,以聚合酶链反应 (PCR)扩增转移基因片段 ;随机引物法标记3 2 P -DNA探针 ,与经BamHI酶切、琼脂糖凝胶电泳、转移至尼龙膜的基因组DNA进行Southern杂交反应 ,检测转移基因的整合。结果 PCR反应和Southernblot分析证实转移基因存在于受体细胞基因组DNA中。结论 Southern印迹杂交法证实转移基因稳定整合至逆转录病毒生产细胞PA317/AIM及靶细胞K5 6 2 /AIM中。

rhIL-6对小鼠腹腔巨噬细胞抗癌作用调节的实验研究

用Ｃ５７ＢＬ／６小鼠进行的体外实验中，在１２．５～２００Ｕ／ｍｌ剂量范围内，腹腔巨噬细胞的杀伤作用有所提高，并呈剂量依赖关系。整体实验中，将正常鼠及荷瘤鼠分别注射ｒｈＩＬ－６和生理盐水，连续１０ｄ，第１５天杀鼠取腹腔巨噬细胞观察其杀伤能力，结果发现，不论在荷瘤或未荷瘤鼠中，ｒｈＩＬ－６均可提高腹腔巨噬细胞的杀瘤功能；与对照组相比，杀伤率平均增加２１．３１％和３８．６０％，与此同时腹腔巨噬细胞总量亦有所增加。

人rδT淋巴细胞抗肿瘤特性的研究

分别采用4h51Cr释放法及3H—TdR掺入法检测人rδT淋巴细胞对各种肿瘤细胞的杀伤作用。结果显示：rδr细胞对XG—7、K562、Daudi、U937、Jurkat等肿瘤细胞株皆可介导高效杀伤作用；对自体及异体新鲜白血病细胞亦有明显的细胞毒效应；对正常的自体及异体淋巴母细胞却无明显的杀伤作用；同时，INF－α、IL－4等细胞因子可协同提高rδT细胞对肿瘤细胞的杀伤活性．

雄黄对NB4和HL-60细胞的形态,PML mRNA及蛋白的表达影响

本研究以NB4 ,HL 60细胞为研究对象 ,采用Wright′s染色法及荧光染色法、免疫荧光技术及RT PCR法 ,探讨雄黄对NB4 ,HL 60细胞的形态、PMLmRNA及蛋白的表达影响。结果发现 :①经雄黄处理后 ,各组均出现细胞凋亡的形态学上改变。②雄黄处理后NB4细胞内融合蛋白降解 ,PML蛋白聚积于POD结构 ,随后降解 ;在HL 60细胞中PML蛋白发生相似改变。③雄黄处理后各组细胞PMLmRNA表达均无显著影响。结论指出 ,在雄黄诱导下PML在蛋白水平参与诱导白血病细胞凋亡机制 ,雄黄能诱导NB4 ,HL 60细胞凋亡 。

几种不同方式诱导Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19的表达

为探讨一个新的细胞凋亡相关基因———TFAR19所参与的凋亡途径 ,我们研究了几种不同方式诱导白血病细胞株Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19表达的变化。采用去除血清 ,VP 16作用及Fas单抗活化受体等方法诱导Jurkat细胞凋亡后 ,以RT PCR方法检测mRNA水平TFAR19的表达 ,用流式细胞术及Western印迹检测蛋白水平TFAR19的表达。实验结果显示 ,Jurkat细胞在去除血清 12小时 ,VP 16作用 2小时 ,以及Fas单抗诱导细胞凋亡 2小时后 ,在mRNA及蛋白水平TFAR19的表达都呈增高趋势。结论提示 ,TFAR19参与了去除血清、DNA损伤及死亡受体激活所诱导的细胞凋亡过程 ,它在细胞凋亡过程的早期开始发挥作用 ,TFAR19是细胞凋亡途径中的“终末共同通路”的参与者。

HER-2基因打靶对HeLa细胞生长的抑制

构建具有正、负筛选特性的HER-2基因打靶载体,promoter pPNT 1305。用电穿孔法把线性promoter pPNT 1305导入HeLa细胞,经G418正筛选及丙氧鸟苷负筛选,选出敲除了HER-2单等位基因的打靶命中细胞(HER-2^(-1)细胞)。Northern杂交表明,HER-2^(-1)细胞的HER-2 mRNA水平低于HeLa细胞;Western blot结果显示其HER-2蛋白水平下降,亦低于HeLa细胞。流式细胞计分析表明,HER-2单等位基因敲除后,细胞周期时相左移,G1期比例上升,G2+M期比例下降。可见敲除HER-2基因对HeLa细胞生长具有抑制作用。