含RGD基元多肽结合型长循环脂质体抗癌转移效果的研究

目的 研究RGD结合型长循环脂质体对黑色素瘤在小鼠体内肺转移的抑制作用。方法 以RGD结合型长循环脂质体与黑色素瘤细胞混合或直接静脉间隔给药 ,按设计时间处死动物 ,然后检查肺转移癌灶数目。结果 RGD结合型长循环脂质体对小鼠黑色素瘤实验性肺转移与自发性肺转移具有显著的抑制作用 (P <0 .0 1)。结论 含RGD基元多肽结合型长循环脂质体可能对新生肿瘤具有抑制与治疗作用。

mdr1基因转染小鼠骨髓细胞在化疗中药物耐受量的研究

肿瘤细胞对抗癌药物多药耐药性的产生及化疗中出现的骨髓抑制是目前临床治疗恶性肿瘤面临的主要问题。多药耐药基因(mdr1)编码产生的相对分子量为170 kD的跨膜蛋白(P-gp),可将多种化疗药物排出细胞外,从而避免药物对细胞的损害。正常骨髓造血于祖细胞mdr1基因表达水平极低,故化疗中易产生骨髓抑制。本研究旨在探讨将已转染mdr1基因的小鼠骨髓细胞回输入同种小鼠体内后,受体鼠对化疗药物骨髓毒性的耐受性有无增强,从基因水平寻找一种解决化疗中骨髓抑制的措施。

三氧化二砷对HL-60细胞hTERT基因表达和端粒酶活性的影响

目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3)处理HL 60细胞前后人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因表达和端粒酶活性的改变。方法 采用姬姆萨染色及碘化丙锭染色置流式细胞仪检测来观察细胞的凋亡 ;以RT PCR分析hTERT基因的mRNA表达水平 ;应用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白含量 ;利用多聚酶链反应 酶联免疫反应 (PCR ELISA)方法检测As2 O3处理HL 60前后端粒酶活性的改变。结果 2 μmol/LAs2 O3诱导HL 60细胞凋亡的过程中 ,hTERTmRNA表达水平显著下调 ,细胞内hTERT蛋白含量也相应降低 ,其端粒酶活性明显受到抑制。结论 As2 O3可通过下调hTERT基因的表达而抑制HL

^3H—TdR掺入法选择肿瘤化疗方案的研究

本文用３Ｈ－ＴｄＲ（氚－胸腺嘧啶核苷）掺入的方法，检测了６８例大肠癌、２４例乳腺癌、２０例卵巢癌肿瘤细胞的体外药物敏感性。结果显示，对大肠癌和乳腺癌以５－氟脲嘧啶（５－ＦＵ），丝裂霉素（ＭＭＣ），环磷酰胺（ＣＴＸ）的抑制率为高。且两药合用效果比单一药物效果好，三种以上药物联合使用可进一步提高疗效。卵巢癌的病例中，我们对每一组药物都作了亚甲蓝增敏试验，结果亚甲蓝增敏组的抑制率全部大于相应药物无亚甲蓝增敏组（Ｐ＜０．０１），提示亚甲蓝可以用作增敏剂提高化疗药的疗效。用本方法可筛选出对特定病人肿瘤灵敏的药物，具有简便、快速、有效、价廉的特点。

乳腺癌SRC法药敏试验19例临床观察

报道SRCA抗癌药敏试验用于指导中、晚期乳腺癌化疗的临床观察结果。19例中,完成治疗观察的17例,共中 CR4例.PR19例.SD4例.治疗反应有效率为76.4%。化疗前后组织病理学对比分析表明,经此模型选择有效药物的治疗,可导致癌细胞退变,癌组织解离,甚至消退。为SRCA 药敏试验临床应用的可行性提供了初步证据。

ATRA对NB细胞增殖抑制及诱导分化作用的研究

目的 :通过对神经母细胞瘤 (NB)细胞系SH SY5Y和SMS KCNR的体外实验 ,探讨全反式维甲酸 (A TRA)对NB细胞增殖抑制的可能分子机制及脑源性神经营养因子 (BDNF) TrkB信号转导途径在NB细胞分化中的作用。方法 :通过台盼蓝拒染计数活细胞 ,用倒置相差显微镜观察加药处理前后细胞形态学变化。结果 :5 μmol/LATRA抑制NB细胞系SMS KCNR和SH SY5Y细胞增殖 ,而 5nmol/LATRA无此作用 ;ATRA可诱导SMS KCNR细胞分化成熟 ,对SH SY5Y细胞诱导分化作用极弱 ;BDNF可使经ATRA处理的SY5Y细胞发生显著形态学分化。结论 :5 μmol/LATRA对人NB细胞系SMS KCNR和SH SY5Y细胞的体外增殖有抑制作用 ;ATRA能诱导人NB细胞系SMS KCNR细胞分化成熟 ,ATRA与BDNF共同作用可使SH SY5Y发生显著形态学分化 ;BDNF TrkB信号转导途径的激活可能是ATRA体外诱导NB细胞分化逆转的分子生物学机制之一。

P-170在亲本S-180和抗药S-180-R瘤细胞中的表达

①目的探讨ＭＤＲ基因产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－１７０）在亲本Ｓ－１８０及抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中的表达。②方法用ＡＢＣ免疫组化方法，按日本ＤＡＫＯ公司免疫药盒程序进行，单抗为Ｃ２１９，ＬｉｎＫｉｎｇｒｅａｇｅｎｔ１∶４００，Ｓｔｒｅｐｔａｉｖｉｄｉｎｒｅａｇｅｎｔ１∶４００，ＤＡＢ染色，苏木精复染。③结果Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞中，有明显的Ｐ－１７０表达，亲本Ｓ－１８０细胞则无此表达。抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞比抗阿霉素Ｐ３８８／ＡＤＲ细胞有更多的Ｐ－１７０表达。④结论ＭＤＲ基因产物Ｐ－１７０的过表达是抗阿霉素细胞系Ｓ－１８０－Ｒ的抗药标志之一。

胸部肿瘤SRCA药敏预测与临床用药的相关性

多年来人们试图寻找方法,能在用药之前就能测出个体肿瘤患者对哪些抗肿瘤药物敏感,以便于设计合理的化疗方案。目前研究的方法很多。1985年我们把Bogden的正常免疫小鼠肾包膜下移植人体肿瘤(Subrenal Capsule Assay,SRCA)作了改进后,又试用于临床[1,2]期实验显示的敏感药物,与经验认为的敏感药物作了对比研究。

BSO与RSU 1069合并使用时对细胞及KHT肿瘤的作用

本文研究了细胞GSH合成抑制剂BSO对中国仓鼠V79细胞和小鼠KHT肉瘤中GSH含量的影响,以及当BSO与RSU 1069合并使用时,后者对V79细胞及KHT肉瘤毒性作用的变化。结果表明,BSO能有效地降低细胞及组织中的GSH水平,并能提高硝基咪唑类化合物RSU 1069的毒性作用。

PIC-BE对K_(562)/ADM多药耐药细胞mdr-1和bcl-2基因表达的影响

本文以多药耐药(MDR)细胞株K_(562)/ADM作为实验模型,研究了β-榄香烯吗素(PIC-BE)对该细胞中mdr-1、bcl-2和bax基因及其编码蛋白(P-gp、Bcl-2和Bax)表达的影响。结果显示,PIC-BE可显著抑制K_(562)/ADM细胞中mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达,并在一定的范围内呈现对浓度和时间的依赖性。相同条件下,PIC-BE对该细胞中Bax的表达虽有所促进,但统计学上无显著差异,提示PIC-BE对K_(562)/ADM细胞MDR的逆转作用可能是通过其直接或间接地影响到该细胞mdr-1、bcl-2及P-gp和Bcl-2的表达或功能而实现。

R6G和R6Gzn的体内抗肿瘤作用研究

本文研究了Ｒ６Ｇ和Ｒ６Ｇｚｎ对小鼠Ｓ１８０和Ｕ１４实体瘤的生长抑制作用。证明，Ｒ６Ｇ和Ｒ６Ｇｚｎ的剂量在４ｍｇ／ｋｇ时，对Ｓ１８０的抑制率分别为３５．２％和３５．２％，对Ｕ１４瘤的抑制率分别为３６％和３２．４％，两者无明显差异。Ｒ６Ｇ和Ｒ６Ｇｚｎ对小鼠的１．Ｄ５０分别为２５．１４±２．４７ｍｇ／ｋｇ和２８．７４±９．９７ｍｇ／ｋｇ；对荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数均有降低的趋势。本文还对罗丹明类的抗癌机理进行了讨论。

阿霉素诱导亲本 S-180 和抗药 S-180-R 细胞凋亡的差异

①目的探讨阿霉素对抗阿霉素细胞系Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡的作用。②方法用低剂量（３．２５μｇ）和高剂量（６．５０μｇ）阿霉素分别处理亲本Ｓ－１８０和抗药Ｓ－１８０－Ｒ细胞腹腔接种的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠，７２ｈ取腹水，用流式细胞仪测定细胞ＤＮＡ相对含量。③结果低剂量阿霉素７２ｈ使亲本Ｓ－１８０细胞出现６２．５％的凋亡，使抗药Ｓ－１８０－Ｒ仅出现１３．０％的凋亡细胞，高剂量阿霉素７２ｈ使亲本Ｓ－１８０细胞几乎全部死亡，使Ｓ－１８０－Ｒ出现２０．０％的细胞凋亡。低剂量阿霉素处理７２ｈ，亲本Ｓ－１８０细胞鼠腹腔出现大量淋巴细胞；抗药Ｓ－１８０－Ｒ细胞鼠腹腔只有少量淋巴细胞出现。高剂量阿霉素处理亲本Ｓ－１８０细胞仍保留很多淋巴细胞，其他Ｓ－１８０细胞几乎全部死亡，而抗药Ｓ－１８０－Ｒ细胞中淋巴细胞消失。④结论细胞抗凋亡是细胞抗药性的明显标志之一。抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ细胞接种的小鼠腹腔内淋巴细胞的数量与阿霉素的剂量有关。

Investigation on the Antitumor Activity of Organotin Compound

Changes in the surface structure of cell membrane and the contents of membrane pro- teins and nuclear DNA of human gastric cancer (BGC-823) cells treated with organotin compound (Et_2SnCl_2phen) were studied with a scanning electron microscope (SEM),a scanning tunneling,micro- scope (STM),and a cytofluorophotometer.It was found that Et_2SnCl_2Phen not only inhibited the cell growth but also remarkably changed the surface structure of the membrane of cancer cells.The surface of Et_2SnCl_2phen treated cancer cells was relatively smooth and showed fewer microvilli under SEM. STM images showed an uneven and loose distribution of the surface of the cell.In comparison with the untreated cancer cells,there was an evident decrease in the content of membrane proteins and nuclear DNA in Et_2SnCl_2phen treated cells.

基因重组构建MDR基因表达载体及其表达研究

利用基因重组技术，成功地构建了人ＭＤＲＩ基因片断的表达载体ｐＧＥ－Ｈｍｄｒ－１，用氯化钙方法转化Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１，挑选２０个克隆扩增培养，经提质粒，酶切，Ａｇａｒｏｓｅ电泳检测证实：其中４个克隆含有重组质粒，选用含重组质粒载体的菌株扩增培养，经ＩＰＴＧ诱导，超声波破碎，抽提蛋白，ＧＳＨ－ａｇａｒｏｓｅ亲和层析纯化，ＳＤＳ－ｐＡＧＥ电泳检测证实：此重组载体已表达所需的目的蛋白（ＧＳＴ－ｍｄｒ融合蛋白）．该表达载体的构建，为基因工程制备人ＭＤＲ基因产物Ｐ－糖蛋白奠定了基础，纯化的Ｐ－糖蛋白将用作抗原制备特异的抗Ｐ－糖蛋白的单克隆抗体，也可用于筛选逆转ＭＤＲ药物的底物。

雄黄对NB4和HL-60细胞的形态,PML mRNA及蛋白的表达影响

本研究以NB4 ,HL 60细胞为研究对象 ,采用Wright′s染色法及荧光染色法、免疫荧光技术及RT PCR法 ,探讨雄黄对NB4 ,HL 60细胞的形态、PMLmRNA及蛋白的表达影响。结果发现 :①经雄黄处理后 ,各组均出现细胞凋亡的形态学上改变。②雄黄处理后NB4细胞内融合蛋白降解 ,PML蛋白聚积于POD结构 ,随后降解 ;在HL 60细胞中PML蛋白发生相似改变。③雄黄处理后各组细胞PMLmRNA表达均无显著影响。结论指出 ,在雄黄诱导下PML在蛋白水平参与诱导白血病细胞凋亡机制 ,雄黄能诱导NB4 ,HL 60细胞凋亡 。

逆转录病毒转染法建立耐药性大鼠CRBH-7919细胞系

目的 :建立高效、稳定的大鼠 CRBH- 7919多药耐药细胞系。 方法 :利用逆转录病毒转染法将带有 mdr1c DNA全序列的逆转录病毒载体 p Ha MDR转入到大鼠 CRBH- 7919细胞中 ,MTT法检测细胞系在不同化疗药物作用下的存活率 ;免疫组化检测细胞的 P-糖蛋白 (P- GP)表达 ,RT- PCR检测细胞内 mdr1m RNA的表达量 ,PCR检测 mdr1基因转移到细胞内的基因片段。 结果 :转基因的细胞系对阿霉素、丝裂霉素的耐药性分别提高 9和 7.9倍 ,免疫组化见转基因细胞系 P- GP表达增加 ,RT- PCR示细胞内 mdr1m RNA的表达量增加 ,PCR表明转基因细胞内扩增出 m dr1片段。结论 :利用逆转录病毒转染法成功建立了大鼠 CRBH - 7919多药耐药细胞系 ,该细胞系具有耐药强度高。

高剂量阿霉素对亲本S-180和抗药S-180-R瘤细胞凋亡的影响

①目的探讨高剂量阿霉素对亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞凋亡的影响。②方法用高剂量（１００μｇ）阿霉素处理经亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞腹腔接种的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠，０～２４ｈ后取腹水，用流式细胞仪测定细胞相对ＤＮＡ含量。③结果阿霉素处理６，９，２４ｈ后，亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞流式图上均未出现凋亡细胞峰；在抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞被杀伤的同时，鼠腹腔出现淋巴细胞，并且随时间推移逐渐增多，但却不能刺激Ｓ－１８０细胞接种鼠腹腔淋巴细胞的增殖。④结论高剂量（１００μｇ）阿霉素对亲本Ｓ－１８０和抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞的杀伤不是由细胞凋亡诱导的。高剂量阿霉素对抗阿霉素Ｓ－１８０－Ｒ瘤细胞鼠腹腔中的淋巴细胞有轻微刺激增殖作用，但对Ｓ－１８０鼠腹腔的淋巴细胞却有免疫抑制作用。

VP16对S-180和S-180-R细胞凋亡的作用

①目的探讨ＶＰ１６对细胞凋亡的作用。②方法用两种剂量（３．１２，６．２５μｍｏｌ）的ＶＰ１６处理腹腔接种Ｓ－１８０瘤细胞和抗阿霉素瘤细胞（Ｓ－１８０－Ｒ）的ＢＡＢＬ／Ｃ鼠。０，６，９ｈ分别取腹水，用流式细胞仪测定细胞相对ＤＮＡ含量。③结果ＶＰ１６在３．１２，６．２５μｍｏｌ剂量时，均可诱导Ｓ－１８０细胞凋亡，而剂量效应并不明显。在６．２５μｍｏｌ时，也可诱导Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡，且ＶＰ１６诱导Ｓ－１８０和Ｓ－１８０－Ｒ两种细胞凋亡差别不明显。④结论ＶＰ１６是Ｓ－１８０和Ｓ－１８０－Ｒ细胞凋亡的诱导剂。ＶＰ１６诱导的凋亡与其抗药表型关系不大，但与免疫机制似乎有一定的关系。

Bromelain对HL-60细胞的诱导分化作用

目的：为获得对ＨＬ－６０细胞具有高效低毒作用的天然诱导分化剂而进行的研究。方法：以菠萝酶Ｂｒｏｍｅｌａｉｎ为药物，对人前髓细胞性白血病细胞株ＨＬ－６０进行作用，通过不同浓度及不同作用时间的药物作用，统计ＨＬ－６０细胞的增殖率、生化变化及形态学的变化。结果：发现Ｂｒｏｍｅｌａｉｎ在高浓度下（８μｇ／ｍｌ）作用４天即可诱导ＨＬ－６０细胞发生显著的诱导分化，其ＮＢＴ阳性率及形态学指标均达到６０％以上，电镜下核异染色质浓聚，出现特异性颗粒。结论：Ｂｒｏｍｅｌａｉｎ对ＨＬ－６０细胞具有明显的诱导分化作用，但其作用机理仍需进一步研究。

维甲酸及Forskolin抑制成瘤作用的实验研究

维甲酸是促分化的生物活性分子；Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ则系天然植物中的腺苷酸环化酶特异激活剂，能促进细胞内ｃＡＭＰ的积累而有抑增殖作用。实验发现，维甲酸与Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ均能使胃癌及肺癌细胞在裸鼠中的成瘤受到不同程度的抑制，软琼脂集落形成缩小。在昆明种小鼠中，维甲酸与Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ也能抑制Ｅｈｒｌｉｃｈ腹水癌的生长，提高其存活率。