恶性胸膜间皮瘤细胞培养条件及CDKN2B对癌细胞的作用

目的探讨不同培养条件(RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液)对人恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)组织中分离的MPM细胞传代的影响以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(cyclin dependent kinase inhibitor 2B,CDKN2B)对MPM细胞增殖、侵袭和凋亡的作用。方法从MPM组织中分离细胞分别用RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液培养。CCK-8检测细胞增殖,细胞核及染色体利用瑞氏-吉姆萨染色观察,免疫荧光实验检测MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1荧光强度。RT-qPCR和Western blot分别检测CDKN2B的mRNA和蛋白表达能力。Transwell检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果建立的MPM细胞在RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液中传至第10代仍具有较好的活力,且MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1在细胞中均表达,MPM细胞在RPMI-1640培养液中活力较为稳定。CDKN2B在MPM细胞中低表达(P<0.05),过表达CDKN2B显著抑制MPM细胞的增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.05)和上皮间质转化(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。结论建立的MPM细胞可在RPMI-1640培养液中稳定传代,CDKN2B可作为MPM诊断和治疗的潜在靶标。

人恶性胸膜间皮瘤DNA从头测序及基因突变分析

通过DNA从头测序分析人胸膜间皮瘤发生的高关联度突变基因。提取恶性胸膜间皮瘤(MPM)组织和正常胸膜组织DNA,构建基因文库,用Illumina HiSeqX Ten PE 150平台测序,将测序结果与人类基因组数据库的参考序列进行比对、注释,并对测序结果进行过滤、错误率分布检查、GC含量分布检查分析。MPM组织DNA平均过滤37829946 bp,错误率小于0.12%,GC含量占41.17%,而正常胸膜组织DNA平均过滤39089681 bp,错误率小于0.1%,GC含量占41.7%,两者测序质量均在Q 30(≥80%)以上,MPM为87.43%,正常胸膜为88.36%。以上高质量测序数据通过BWA比对到参考基因组(GRCh 37/hg 19),得到最初比对序列,利用重复标记后的比对序列进行覆盖度、深度等统计,覆盖深度达到10 X以上该突变位点可信。结果显示,实验病例XL14覆盖深度达到10 X的占98.59%,覆盖率达到99.83%;对照病例Z5占98.50%,覆盖率达到99.79%。对该序列进行基因注释分析,发现一系列单核苷酸多态性、基因插入缺失、基因结构变异、基因拷贝数变异,筛选出总变异位点数29277个,可能致病的变异位点数22个,致病性的变异位点数5个,不确定变异有害性的位点数为3353个,其余变异位点均为良性。进一步对突变基因进行富集、关联性分析,预测出突变基因TXNDC2与人胸膜间皮瘤的发生高度相关,相关系数达到0.8以上;突变基因PIEN、ABCC1、UGT1A7、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A9、ALDH3B1、UGT1A5等与人胸膜间皮瘤有一定关联性,关联度在0~0.2之间。基因TXNDC2、PIEN、ABCC1、UGT1A7、UGT1A3、UGT1A4、UGT1A9、ALDH3B1、UGT1A5的变异可能与人胸膜间皮瘤的发生发展有关。本实验为人胸膜间皮瘤分子诊断提供了参考。

恶性胸膜间皮瘤靶向治疗的研究进展

恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma, MPM)是侵袭性极强的罕见胸膜表面恶性肿瘤,危险因素包括吸入石棉、遗传因素、基因突变等。现有的化疗、抗血管生成治疗、免疫治疗的效果均不佳,患者的生存期极短。亟需寻找治疗MPM的潜在靶点,目前发现有基因突变靶点如BRCA1相关蛋白1(BRCA associated protein1, BAP1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase 2A, CDKN2A)等;表观遗传靶点如组蛋白赖氨酸去甲基酶4A[lysine (K)-specific demethylase 4A, KDM4A]和赖氨酸特异性去甲基酶1(lysine-specific demethylase1, LSD1)等;信号蛋白靶点如葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP78)及信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)等。迄今为止,可查询的临床试验有组蛋白甲基转移酶抑制剂Tazemetostat、多聚ADP-核糖聚合酶[poly (ADP-ribose) polymerase, PARP]抑制剂Rucaparib和细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinases 4 and 6, CDK4/6)抑制剂Abemaciclib的II期临床试验,以及靶向间皮素的嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy, CAR-T)细胞胸腔注射、TEA结构域家族成员(TEA domain family member, TEAD)抑制剂VT3989和IK-930的I期临床试验,显示出一定的临床疗效。

间皮瘤患者^(18)F-FDG PET/CT影像学表现及其在诊断中的应用

目的:分析胸膜和腹膜间皮瘤患者^(18)F-氟代脱氧葡萄糖正电子发射扫描/计算机断层扫描(^(18)F-FDG PET/CT)影像学表现,以期提高对该病的诊断水平。方法:回顾性分析经病理证实的22例胸膜和腹膜间皮瘤患者(其中恶性间皮瘤21例,良性间皮瘤1例)^(18)F-FDG PET/CT影像资料和免疫组织化学结果,对其影像表现和葡萄糖代谢特征进行归纳总结。结果:恶性胸膜间皮瘤患者多表现为单侧胸膜弥漫性增厚伴放射性摄取增高,厚度为1.0~10.6 cm,平均半定量最大标准摄取值(SUV_(max))为10.1,其中半数以上并发少量胸腔积液;恶性腹膜间皮瘤患者多数表现为腹膜、网膜和肠系膜弥漫增厚伴放射性摄取增高,厚度为1.2~6.6 cm,平均SUV_(max)为8.4,其中半数以上并发大量腹腔积液。恶性间皮瘤患者除原发部位外其他转移部位出现结节状、条片状和团块状不同程度异常放射性摄取17例,考虑为转移灶,平均SUV_(max)为7.4,大部分以病灶周围淋巴结转移为主,恶性胸膜间皮瘤患者可见骨骼和肌肉转移,恶性腹膜间皮瘤患者未见骨骼和肌肉转移。1例良性胸膜间皮瘤患者表现为双侧胸膜弥漫性增厚,厚度约3.5 cm,未见明确异常放射性摄取,并发少量胸腔积液。结论:胸膜和腹膜间皮瘤患者^(18)F-FDG PET/CT影像学表现具有一定的特征性,通过其胸膜和腹膜增厚方式及厚度、有无氟代脱氧葡萄糖(FDG)摄取及摄取程度可初步判断间皮瘤的良恶性,对间皮瘤临床早期诊断有一定的参考价值。PET/CT全身显像可确定间皮癌患者有无其他部位转移,对临床分期有一定的帮助。

手术治疗巨大胸腔孤立性纤维瘤1例并文献复习

胸腔孤立性纤维瘤是一种罕见的原发性胸膜肿瘤,其临床表现不典型,随着肿瘤的增大会出现相应部位的压迫症状,因具有潜在恶性及恶性可能,目前公认的首选治疗方式仍是外科手术完整切除肿瘤病灶。我科近年收治1例巨大孤立性胸腔纤维瘤患者,为提高临床对该病的认识水平,现将其诊治经过总结报道如下。

PTEN抑制剂逆转靶向microRNA-24抑制宫颈癌发生、发展的机制探索

目的探讨microRNA-24(miR-24)在宫颈癌(CC)的发生、形成中的作用和调控机制.方法使用HELA S3细胞系进行裸鼠皮下成瘤实验,采用免疫组织化学(IHC)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞相关蛋白Ki-67、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达来研究miR-24和张力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)对肿瘤生长的影响.结果miR-24抑制剂组肿瘤重量降低;Cyclin D1、Ki-67表达量降低,细胞增殖能力被抑制;E-cadherin表达增强,Vimentin表达被抑制.miR-24抑制剂+si-PTEN组的检测结果显示:si-PTEN逆转了miR-24抑制剂的效果.结论miR-24抑制剂抑制CC细胞系增殖和侵袭能力,而PTEN的下调可逆转miR-24抑制剂对CC细胞系增殖和侵袭的影响.靶向miR-24可能为预防和治疗CC提供一种新的治疗策略.

从正虚邪实论治恶性胸膜间皮瘤伴急性呼吸困难思路探析

恶性胸膜间皮瘤是肿瘤内科恶性程度较高的癌种之一,近年国内外指南中的治疗方案有限且疗效欠佳,同时伴随药物毒副反应较大,致使该类患者较其他癌种的预后更差。恶性胸膜间皮瘤常常侵犯胸膜及纵隔,伴随呼吸困难、胸痛咳嗽等一系列不适症状,严重影响了患者的生活质量及后续的规范治疗。中医学认为恶性胸膜间皮瘤多因长期邪毒侵袭以及素体内虚所致,属于中医学“胸痹”范畴。本病病因病机以脾肾亏虚为主,气滞血瘀及痰瘀互结贯穿疾病全程。恶性胸膜间皮瘤伴急性呼吸困难的治疗应注意从正虚邪实论治,运用健脾化痰止咳、清热解毒平喘、活血散瘀利水三联疗法,在此基础上灵活运用对药和角药辨证辨病施治,获效显著。

ZIC1基因过表达激活P53信号通路抑制胸膜间皮瘤细胞增殖

目的探讨小脑锌指结构1(ZIC1)基因过表达对胸膜间皮瘤SMC-1细胞增殖、凋亡的影响以及相应的机制。方法用携带ZIC1基因的慢病毒颗粒转染SMC-1细胞作为过表达组,用空载慢病毒颗粒感染SMC-1细胞作为空载体组,将常规培养未进行转染的SMC-1细胞作为空白对照组,采用Western blot在蛋白水平检测3组细胞中ZIC1蛋白的表达情况;采用CCK-8细胞增殖试验检测各组细胞增殖能力,Hoechst-PI双染法检测各组细胞凋亡情况;采用Western blot检测P53介导的细胞凋亡信号通路的主要基因P53、P21、MDM2及P53磷酸化位点Ser392蛋白表达水平。结果与空载组和对照组相比,ZIC1过表达组中ZIC1蛋白的表达明显增高,差异有统计学意义(F=4.665,P=0.036);ZIC1过表达组中肿瘤细胞的增殖活性明显减弱,而肿瘤细胞的凋亡明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);ZIC1基因过表达组中P53信号通路中的主要基因P53、P21、MDM2及P53-Ser392蛋白表达均明显增加(P<0.05)。结论ZIC1基因过表达可以抑制胸膜间皮瘤SMC-1细胞增殖,促进其凋亡,其可能的机制为通过上调P53基因磷酸化位点的表达激活P53基因介导的细胞凋亡信号通路来实现。

卡度尼利单抗致恶性胸膜间皮瘤患者高热性抽搐1例报告

卡度尼利单克隆抗体是一种PD-1/CTLA-4双特异性抗体[1],用于治疗一系列实体瘤,包括宫颈癌、胃/胃食管交界处癌、食管鳞状细胞癌等[2-4]。卡度尼利单克隆抗体于2022年06月在中国获批用于基于铂类的化疗中或化疗后进展复发或转移性癌症患者。卡度尼利单克隆抗体等免疫药物在治疗恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)方面取得了显著效果[5]。免疫治疗药物的应用也伴随着一系列的不良反应,然而罕见卡度尼利单克隆抗体输液后出现高热抽搐不良反应的报道[6-7]。因此本文通过报告一例恶性胸膜间皮瘤患者在使用卡度尼利单克隆抗体后出现高热性抽搐的病例,总结治疗经验,并结合相关文献进行复习和讨论。

胸膜尤文肉瘤病例报告2例

尤文肉瘤是一种较为罕见的小圆细胞恶性肿瘤,它常发于长骨及骨盆,是儿童第二常见的原发性骨恶性肿瘤[1],其生长及发展速度较快,容易发生转移,如转移至肺、骨及骨髓等,且远期预后较差[2]。原发性胸膜骨外尤文肉瘤是一种罕见的疾病,目前临床诊断困难,关于该病的报道和参考经验很少,导致临床参考数据不足,该病的诊断需要与放射科、病理学及临床科室等共同讨论分析,防止误诊和漏诊,以期为患者争取更多生存机会。

帕博利珠单抗联合化疗治疗晚期恶性胸膜间皮瘤的成本-效用分析

目的从我国卫生医疗系统视角出发,评估帕博利珠单抗联合化疗一线治疗晚期恶性胸膜间皮瘤的经济性,为临床用药和卫生决议提供经济学参考。方法以IND227试验为基础,构建分区生存模型,周期为21 d,模拟至99%的患者死亡。模型产出指标为质量调整生命年(QALY),采用成本-效用分析法评价帕博利珠单抗联合化疗相对于单纯化疗治疗晚期恶性胸膜间皮瘤的经济性,并通过单因素敏感性分析和概率敏感性分析证明基础分析结果的稳健性。结果基础分析结果显示,与单纯化疗方案相比,帕博利珠单抗联合化疗方案的增量成本-效用比(ICUR)为1447296.58元/QALY,大于以3倍我国2023年人均国内生产总值(GDP)(268074元/QALY)作为的意愿支付(WTP)阈值,不具有经济性。患者在接受慈善赠药的情况下,ICUR为102236.18元/QALY,低于WTP阈值。单因素敏感性分析结果显示,帕博利珠单抗成本、效用贴现率和单纯化疗组支持治疗费用对结果的影响更显著。概率敏感性分析结果显示,基础分析结果稳健性较好。结论在WTP阈值为3倍我国2023年人均GDP时,与单纯化疗方案相比,帕博利珠单抗联合化疗治疗晚期恶性胸膜间皮瘤不具有经济性。但若患者接受慈善赠药,则帕博利珠单抗联合化疗方案更具有经济性。

恶性胸膜间皮瘤43例临床分析

目的回顾性分析43例恶性胸膜间皮瘤的临床特点，以提高恶性胸膜间皮瘤的诊治水平。方法分析43例胸膜间皮瘤的临床资料，包括年龄、石棉接触史、临床表现、影像学检查、实验室检查，用Kaplan—Meier模型的log—rank检验分析年龄、性别、侵犯范围、分期和汾疗方式等因素与预后的关系，用Cox模型分析影响预后的独立危险因素。结果43例患者均无明确石棉接触史；24例患者曾被误诊为结核性胸膜炎。43例均有不规则胸膜增厚。弥漫性增厚者共36例，局限性胸膜增厚有7例。40例可见纵隔胸膜受累，2例胸水中查到恶性间皮细胞。43例弥漫性恶性胸膜间皮瘤患者的中位生存时间为637月（范围0．23～90．30月），在单因素生存分析中，用单因素生存分析，侵犯范围、年龄和分期与预后相关，多因素Cox回归模型分析发现，局限型恶性胸膜间皮瘤预后较好。结论胸膜活检及免疫组化是确诊恶性胸膜间皮瘤的主要方法，侵犯范围是预后的独立影响因素。

安罗替尼治疗胸部肿瘤所致罕见不良反应——干眼症1例报道

0引言安罗替尼是一种多靶点抑制剂,通过抑制血管内皮生长因子受体(VEGFR)、血小板源性生长因子受体(PDGFR)、干细胞生长因子受体(cKit)等多个激酶[1],从而发挥抑制肿瘤生长、拮抗肿瘤血管生成的双重功效,已广泛用于晚期非小细胞肺癌、软组织肉瘤、小细胞肺癌、晚期甲状腺髓样癌等多种肿瘤的治疗,不良反应安全可控。既往报道的不良反应包括:高血压、乏力、促甲状腺激素升高、厌食、高甘油三酯血症、手足综合征、口腔溃疡、蛋白尿等[2-3]。随着用药日益增多,其所引发的少见或罕见的不良反应也备受关注。我们在临床治疗中发现1例胸部肿瘤患者服用安罗替尼期间出现干眼症症状,现报道如下。

自噬相关基因5在人恶性胸膜间皮瘤中的表达及其意义

目的探讨自噬相关基因5(ATG5)在人恶性胸膜间皮瘤(MPM)细胞和组织中的表达情况,分析ATG5与MPM患者临床病理参数和预后的相关性。方法实时定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测正常人胸膜间皮细胞和MPM细胞、非MPM胸膜间皮组织和MPM组织中ATG5的表达差异。应用TCGA数据库分析ATG5与MPM患者临床病理特征和预后的相关性。构建Cox回归模型,分析影响MPM患者预后的因素。GEPIA数据库评估ATG5与MPM肿瘤标志物和新型血清标志物的相关性。TIMER数据库分析ATG5与MPM免疫细胞浸润和关键免疫调节基因的相关性。结果ATG5在MPM细胞和组织中显著高表达,且与MPM患者的肿瘤分期呈正相关(P<0.05)。生存分析显示,ATG5高表达组MPM患者的预后更差,肿瘤病理类型可能是患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ATG5与多种MPM肿瘤标志物(MTAP、SETD2、NF2、FIB3)和新型血清标志物(HMGB1、SMPR、THBS2、KRAS)显著相关(P<0.05)。ATG5表达与MPM中免疫细胞浸润(B细胞、CD4^(+)T细胞和巨噬细胞)和免疫相关基因(CD28、CUL48B、CD166、MMP14)呈显著正相关(P<0.05)。结论ATG5在MPM中表达上调,且与患者不良预后和免疫浸润水平相关,有望成为MPM早期筛查、诊断和预后评估的重要生物标志物。

基于铁死亡基因的恶性胸膜间皮瘤风险预测模型构建及其肿瘤免疫微环境研究

目的:筛选恶性胸膜间皮瘤(MPM)预后相关的铁死亡基因,探索铁死亡与肿瘤免疫微环境的联系,为MPM患者的靶向及免疫治疗提供新的视角。方法:分析GEO数据集中MPM肿瘤组和正常组的差异表达基因(DEGs),与铁死亡基因取交集得到MPM中铁死亡相关的DEGs(DE-FRGs);进行GO、KEGG功能富集和蛋白-蛋白互作(PPI)等分析明确DE-FRGs主要参与的信号通路;通过单因素COX分析鉴定出预后相关的铁死亡基因,LASSO回归分析筛选建立风险预测模型的最佳DEFRGs,并通过多因素COX分析建立基于最佳DE-FRGs的风险预测模型,对模型的预测效果进行一系列验证。最后通过CIBERSORT等算法对模型进行肿瘤免疫细胞浸润分析及免疫微环境评价。结果:筛选出24个预后相关的DE-FRGs,主要富集于铁死亡、转录调控和对无机物的反应,建立并验证了1个基于5个铁死亡相关基因(ALDH3A2、CAV1、HRAS、CDCA3、RRM2)的MPM风险预测模型,模型中高风险组CD8+T细胞、巨噬细胞比例较高,而B淋巴细胞占比较低。此外,免疫检查点PD-1、CTLA-4及其配体在高风险组中有更高的表达状态。结论:建立了基于5个铁死亡相关基因的MPM风险预测模型,并明确了模型中的免疫状态。为MPM的靶向及免疫治疗提供了一定的研究基础,该模型在MPM中的预测能力需要临床上进一步验证,以更好地预测疾病分层和治疗管理。

miRNA在胸膜间皮瘤耐药中的作用研究进展

胸膜间皮瘤(PM)是来源于胸膜的一种罕见恶性肿瘤,大多数患者确诊时已为晚期,患者总体生存率低。微RNA(miRNA)作为肿瘤表观遗传修饰的关键调节因子,与PM耐药性之间有着彼此交错的互作网络。PM对化疗药物的耐药机制包括增加药物外流、减少药物摄取、增强DNA修复、改变药物靶点等;对靶向治疗药物的耐药机制则包括激活替代的信号通路、建立有利的肿瘤微环境、触发上皮-间充质转化等。miRNA在上述耐药机制中发挥了重要作用,部分miRNA可增强癌细胞的药物敏感性,但部分miRNA则具有增强耐药性的作用。鉴于这些关键调控作用,通过使用miRNA拮抗剂或miRNA模拟物靶向纠正耐药形成过程中内源性miRNA的表达失调,可能是逆转PM耐药一种有效的治疗策略。

恶性胸膜间皮瘤化疗抵抗机制研究进展

恶性胸膜间皮瘤(MPM)是一种发病率不高,但侵袭性强、预后差、致死率高的肿瘤,生存期为4个月~1年,5年生存率仅为10%左右。MPM具有很强的化疗抵抗性,顺铂联合培美曲塞或者雷替曲塞的常规治疗只在20%左右患者中有一定的效果。近年来,随着对MPM遗传特征研究的不断深入,对MPM化疗抵抗分子机制的研究也取得一定进展。本文总结了近年来MPM化疗抵抗分子机制的研究进展,包括BAP1基因突变、MicroRNA、MTA1介导的DNA损伤修复通路、GITR-GITRL通路、TGFa通路、肿瘤干细胞、EGFR、PTEN等,旨在为探索MPM新治疗靶点、新联合治疗方案提供参考。

原发性巨大胸膜恶性外周神经鞘瘤1例

恶性外周神经鞘瘤(malignant peripheral nerve sheath tumors,MPNST)是一种罕见的、侵袭性的具有神经分化潜能的恶性肿瘤,发病率在1/100000左右,占软组织肉瘤的1/20~1/10。MPNST几乎可发生于身体任何部位,主要分布于四肢(尤其上下肢近端)、躯干及头颈部、腹膜后[1];胸部神经鞘瘤多见于后纵隔、胸壁,发生于肺内、胸膜的恶性外周神经鞘瘤则较为罕见。本文报道1例原发性胸膜恶性外周神经鞘瘤,结合相关文献分析其临床表现、影像学特征、诊断、治疗及预后,以加强临床医生对该病的认识。

复合原位疫苗模式用于双免疫治疗后仍进展的胸膜间皮瘤1例报告及文献复习

胸膜间皮瘤是一种相对罕见而恶性度极高的肿瘤,预后较差,虽PD-1单抗与CTLA-4单抗双免疫治疗可显著改善患者的总生存期,但对于双免疫治疗失败的患者仍需探索更佳的治疗模式。原位疫苗是免疫治疗中深受瞩目的一种肿瘤疫苗技术。本研究采用大分割放疗、瘤内注射免疫佐剂以构建复合原位疫苗,并在此基础上联合免疫检查点抑制剂以增强抗肿瘤免疫效应。本文报道1例本科室收治的68岁男性恶性胸膜间皮瘤患者,该患者前期经双免疫治疗后仍进展,后采用复合原位疫苗模式治疗,在9周期PD-1单抗应用后观察到经瘤内注射及大分割放疗的目标病灶持续缩小且代谢减低,目前病情稳定。因此,复合原位疫苗模式可为难治性晚期实体瘤患者尤其是恶性胸膜间皮瘤患者的治疗提供新思路。

治疗1例ⅢB期恶性胸膜间皮瘤患者实现长期生存的报告

恶性胸膜间皮瘤(Malignant pleural mesothelioma,MPM)是一种原发于胸膜间皮细胞且具有极强侵袭性和致死性的恶性肿瘤。MPM较为罕见,不仅起病隐匿、早期诊断率低,而且恶性程度高、预后极差。患者平均中位生存期不足1年,5年生存率不足1%。虽然MPM在临床中较为罕见,但此病的发病人数和病死人数呈逐年上升趋势。目前,临床上MPM的治疗方法主要包含外科手术、化学治疗、放射治疗以及靶向治疗等,但效果均不太理想。文章报道运用中西医结合方法治疗1例ⅢB期MPM患者,此患者最初诊断后总生存期达5年零7个月,以期为MPM的治疗提供新思路。