柴金解郁安神片调控CaMKII和Cofilin双信号通路改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑

目的探讨柴金解郁安神片调控钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)和Cofilin双信号通路,改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑的分子机制。方法皮质酮联合脂多糖建立抑郁症体外细胞模型,实验设正常组、模型组、GR阻断剂组、GR激动剂组、CX3CR1阻断剂组、CX3CR1激动剂组、柴金解郁安神片组、柴金解郁安神片联合GR激动剂组、柴金解郁安神片联合CX3CR1激动剂组,观察星形胶质细胞、小胶质细胞、前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)和海马神经元形态结构变化;检测ACC和海马谷氨酸能神经元激活及突触重塑情况;免疫荧光、Western blot分别检测海马谷氨酸能神经元内突触重塑相关谷氨酸受体2A(GRIN2A)、GRIN2B、CaMKII、MK2、Cofilin蛋白表达水平。结果柴金解郁安神片能明显改善胶质细胞、ACC和海马神经元损伤,并抑制ACC和海马谷氨酸能神经元异常激活,同时下调GRIN2A、GRIN2B、MK2蛋白,上调CaMKII、Cofilin蛋白,继而改善海马谷氨酸能神经元突触可塑性损伤和突触重塑。结论柴金解郁安神片能有效改善抑郁症海马谷氨酸能神经元突触重塑,其分子机制与调节突触重塑相关NR/CaMKII、MK2/Cofilin信号通路有关。

临床药师对某院丙氨酰谷氨酰胺注射液应用干预分析

目的 探讨临床药师干预对降低某院丙氨酰谷氨酰胺注射液应用不合理率的成效性。方法 采取单纯随机抽样方式抽取医院2021年6月1日至8月31日(干预前)和2022年6月1日至8月31日(干预后)应用丙氨酰谷氨酰胺注射液的医嘱各200份,针对相应的问题进行对比分析。结果 干预后应用丙氨酰谷氨酰胺注射液的不合理率明显降低,由干预前的77.50%降至41.00%(P<0.05),其有统计学意义。结论 临床药师采取干预措施后,对降低不合理用药率有促进作用,但仍需持续跟踪和改进。

吲哚-3-丙酸通过调节脂肪组织代谢改善高脂饮食诱导代谢相关脂肪性肝病的作用及机制研究

目的 探索吲哚-3-丙酸(indole-3-propionic acid, IPA)在高脂饮食诱导代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease, MAFLD)发生发展中的作用,揭示脂肪组织代谢在其中的作用及相关机制。方法 建立高脂饮食(high-fat diet, HFD)喂养诱导的MAFLD动物模型,6~7周龄的雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为3组,即对照组(CON)、高脂饮食组(HFD)、高脂+IPA干预组(HFD+IPA)。CON组以对照饲料喂养,HFD组和HFD+IPA组均以60%高脂饲料喂养,实验周期为12周,第7周开始HFD+IPA组以20 mg/(kg·d)IPA灌胃6周。每周监测各组小鼠体质量与摄食量。干预结束后使用动物体成分分析仪检测小鼠体成分。小鼠处死后,HE染色观察肝脏和脂肪组织形态学和结构变化,全自动血生化仪和生化试剂盒检测血清及肝脏和脂肪组织中脂代谢相关指标,qRT-PCR检测脂代谢和炎性相关基因mRNA的表达。结果 与CON组相比,HFD组小鼠体质量和体脂肪比例显著增加,肝脏出现明显的脂质沉积,血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转氨酶以及肝脏甘油三酯和总胆固醇水平显著升高(P<0.05),肝组织脂肪酸转运分子CD36的mRNA水平明显升高(P<0.05),IPA干预显著逆转了上述变化(P<0.05)。IPA干预能够显著抑制高脂饮食诱导的内脏和棕色脂肪细胞增大,降低内脏脂肪组织(visceral adipose tissue, VAT)和血清中游离脂肪酸含量(P<0.05),增加VAT脂解基因(HSL、CGI58)和棕色化(Cidea、ND5、UCP1、Prdm16)以及棕色脂肪组织(brown adipose tissue, BAT)脂肪酸β氧化(Cpt1a、PPARα)相关基因的mRNA表达水平(P<0.05),同时降低VAT炎性因子TNF-α以及BAT中TNF-α、IL-1β、CXCL1、CCL2的mRNA表达水平(P<0.05)。结论 IPA可以改善高脂饮食诱导的MAFLD的发生,其机制可能与调节白色和棕色脂肪组织结构、代谢功能及炎性相关基因的表达有关。

胆碱能信号通路及离子通道介导精氨酸对结肠平滑肌收缩的促进作用

目的研究L-精氨酸对大鼠结肠收缩的影响,以阐明其对结肠动力的调节作用和机制。方法采用恒温机槽实验检测结肠平滑肌条自发性收缩活动的变化;采用全细胞膜片钳技术检测L-精氨酸干预前后结肠单个平滑肌细胞电压依赖的L-型钙离子通道(L-type voltage-dependent Ca^(2+)channels,VDCCs)电流和电压依赖钾离子通道(voltage-gated K^(+)channel,Kv)电流的变化。结果L-精氨酸(1 mmol·L^(-1))显著增强结肠纵行平滑肌(P<0.05)和环形平滑肌(P<0.01)自发性收缩活动,且该兴奋作用不被一氧化氮合酶抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸(Nω-nitro-L-arginine,L-NNA)(1 mmol·L^(-1))阻断(P>0.05)。而且,河豚毒素(1μmol·L^(-1))和阿托品(1μmol·L^(-1))显著减弱L-精氨酸对结肠平滑肌条收缩的兴奋作用(P<0.05)。此外,L-精氨酸(1 mmol·L^(-1))增加VDCCs峰电流,降低Kv电流(P<0.01)。结论L-精氨酸对大鼠结肠收缩具有促进作用,该作用不依赖内源性NO,可能由碱能信号通路介导。此外,平滑肌细胞VDCCs和Kv通道也参与L-精氨酸对结肠动力的调节。

复方氨基酸注射液的使用情况和合理用药探讨

目的提高临床复方氨基酸注射液使用的合理和安全性。方法通过医院信息系统(HIS)抽取2022年7月~2023年6月全院使用复方氨基酸注射液的医嘱,根据使用量从中抽取240份进行点评并进行分析。结果本次点评总共240份医嘱,医嘱合格率为37.9%,存在的主要问题有适应证不适宜、给药途径不适宜、给药剂量不适宜、遴选药物不适宜。结论医院在复方氨基酸注射液使用中存在诸多问题,因此临床药师需要对复方氨基酸注射液的医嘱进行审核,同时在使用过程中需要做好药学监护,确保复方氨基酸注射液使用的合理和安全性。

RASAL1在同型半胱氨酸致肺血管内皮通透性增加中的作用及机制研究

目的探讨同型半胱氨酸(homocystein,Hcy)对肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)通透性的影响及Ras蛋白样激活剂(Ras protein activator like,RASAL1)的作用及机制。方法CBS^(+/-)小鼠喂养高蛋氨酸饮食(HMD)16周复制高同型半胱氨酸血症(HHcy)动物模型;HE染色观察肺组织结构变化;qRT-PCR检测肺组织RASAL1、DNMT1 mRNA水平;Western blot检测RASAL1、DNMT1、ZO-1、VE-cadherin蛋白表达;MS-PCR检测RASAL1启动子区甲基化;PMVECs转染Ad-RASAL1检测ZO-1和VE-cadherin表达;si-DNMT1干扰片段转染PMVECs,检测RASAL1表达。结果HMD小鼠血清Hcy水平明显增加,HE染色显示肺组织结构严重紊乱,RASAL1、ZO-1、VE-cadherin表达降低而DNMT1表达增加,RASAL1启动子区甲基化程度增加。PMVECs转染Ad-RASAL1后ZO-1和VE-cadherin表达增加;敲低DNMT1后,RASAL1表达增加。结论Hcy可以导致PMVECs通透性增加,其机制与上调RASAL1甲基化水平有关。

甲硫氨酸摄入限制对LPS诱导急性肺损伤小鼠巨噬细胞的影响及作用机制

目的探究甲硫氨酸摄入限制(methionine restriction,MR)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠的巨噬细胞的影响及其作用机制。方法将36只体质量为(23±2)g的雄性C57BL/6J小鼠(6~8周龄)按随机数字表法分为3组(n=12):Sham组、LPS组和LPS+MR组。对各组小鼠的肺组织行HE染色和肺损伤病理评分。采用RT-qPCR和Western blot检测肺组织中脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)和Toll样受体-4(Toll-like receptor-4,TLR4)mRNA和蛋白的表达水平;利用免疫组化技术对各组肺组织巨噬细胞的浸润情况及其相关趋化因子巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor,M-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage-colony stimulating factor,GM-CSF)和C-C基序趋化因子配体3(chemokine C-C motif ligand 3,CCL3)的表达水平进行分析。结果与Sham组小鼠比较,LPS组小鼠肺组织损伤的病理评分显著升高(P<0.01)。LBP和TLR4的mRNA和蛋白表达均显著增加;CD11b和F4/80阳性细胞的数量增加,肺间质和肺泡巨噬细胞浸润明显;M-CSF、GM-CSF和CCL3的阳性细胞数量显著升高(P均<0.01)。MR可以显著改善LPS诱导的ALI,降低LPS组小鼠肺损伤病理评分(P<0.01);MR可以减少ALI小鼠肺组织LBP和TLR4 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);与LPS组小鼠相比较,LPS+MR组小鼠肺组织CD11b、F4/80M-CSF、GM-CSF和CCL3阳性细胞数量显著降低(P<0.01)。结论MR可通过抑制巨噬细胞趋化因子的表达、进而减少巨噬细胞浸润和活化、减轻LPS诱导的肺损伤。

硫化氢在H型高血压中的研究进展

硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)是一种参与血管张力调节的内源性气体传递素,具有多种生理特性,如抗高血压、血管松弛、抗炎和抗氧化潜能,在心血管调节中发挥重要作用。同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)与心血管疾病的发生、发展密切相关。高同型半胱氨酸血症(HCY≥10μmol·L^(-1))是冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑卒中等心脑血管疾病的危险因素,中国学者将伴有高同型半胱氨酸血症的原发性高血压定义为H型高血压,约占我国成年高血压患者的75%。H型高血压的治疗应同时降低血压和血浆HCY的水平。研究表明,H_(2)S能够拮抗高血压和高HCY,提示H_(2)S可能成为H型高血压的潜在治疗靶点。因此,该文就H_(2)S对高血压和HCY的作用机制进行总结。

谷氨酰胺对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响及机制探讨

目的观察不同浓度谷氨酰胺(glutamine,Gln)对结直肠癌HT-29细胞放射敏感性的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养HT-29细胞,将对数生长期的HT-29细胞按照Gln不同浓度设置对照组(2 mmol/L,培养基基础浓度)、实验组Ⅰ(4 mmol/L)、实验组Ⅱ(6 mmol/L)、实验组Ⅲ(8 mmol/L),预处理2 h后给予Co 60源放射。通过CCK-8法检测未放射与放射后不同浓度Gln对细胞活力的影响;克隆形成实验检测放射后不同浓度Gln对细胞放射敏感性的影响;活性氧(ROS)试剂盒检测放射后24 h细胞ROS水平;流式细胞仪检测放射后48 h细胞凋亡率;蛋白印迹法测定放射后各组细胞Nrf2、HO-1、cleaved-Caspase3蛋白的表达水平。结果未放射的HT-29细胞在Gln干预24 h后实验组Ⅱ、实验组Ⅲ细胞活力明显高于对照组、实验组Ⅰ(P<0.05)。HT-29细胞放射24 h后,各实验组细胞活力明显高于对照组(P<0.05);放射后14 d,各实验组细胞克隆形成数均高于对照组(P<0.05);放射后24 h,各实验组ROS水平均低于对照组(P<0.05);放射后48 h,各实验组细胞凋亡率均低于对照组(P<0.05)。实验组ⅠNrf2表达高于对照组(P<0.05);实验组Ⅱ、ⅢNrf2、HO-1表达均高于对照组和实验组Ⅰ(P<0.05),cleaved-Caspase3表达均低于对照组和实验组Ⅰ(P<0.05);实验组Ⅲcleaved-Caspase3表达低于实验组Ⅱ(P<0.05)。结论谷氨酰胺能显著降低HT-29细胞的放射敏感性,其机制与减轻氧化应激损伤和减少细胞凋亡有关,这可能不利于结直肠癌患者放疗。

盐酸赖氨酸(注射用)细菌内毒素检查法的研究

目的建立盐酸赖氨酸(注射用)细菌内毒素的检测方法。方法按2020年版《中国药典(四部)》通则1143细菌内毒素检查法,采用凝胶法对样品进行干扰试验和细菌内毒素检查,采用动态浊度法定量检测样品中细菌内毒素的含量。结果Tris缓冲液稀释供试品,调节pH值在6.0~8.0范围内,可有效消除盐酸赖氨酸(注射用)对细菌内毒素的干扰。凝胶法和动态浊度法试验均符合规定,动态浊度法的回收率为84.75%~96.12%,在50%~200%范围内。结论所建立的方法可行,可用于盐酸赖氨酸(注射用)细菌内毒素的检查。

γ-聚谷氨酸的生物活性研究进展

聚谷氨酸(Poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)是在一些特定的微生物中发现的天然聚氨基酸,是一种由L-谷氨酸或D-谷氨酸通过γ-酰胺键连接聚合而成的多功能肽,目前可以通过微生物发酵实现规模制备。γ-PGA具有促进矿物吸收、生物膜形成、植物促生、免疫调节、降血糖、抗氧化等一系列生物活性功能。为了更好地应用此种天然生物化学品,我们简单介绍了γ-PGA的结构,制备方法,从动物、植物、微生物三方面重点突出了其生物活性和应用前景,旨在探索其未来应用以及开发新型生物活性制品。

基于诺氏评估量表的氟比洛芬酯与低氧血症昏迷相关性分析

目的评价低氧血症昏迷与使用氟比洛芬酯注射液的相关性。方法以1例使用氟比洛芬酯注射液镇痛引起低氧血症昏迷患者为例,采用诺氏评估量表评价患者昏迷与所用药品的相关性。结果患者诺氏评估量表评分为2分,即低氧血症昏迷与使用氟比洛芬酯注射液“可能有关”。结论药师可采用诺氏评估量表为标准化工具,排除或确认患者发病与所用药品的关联性,促进临床安全用药。

L-精氨酸补充疗法在部分疾病治疗中的研究进展

L-精氨酸作为一氧化氮、多胺和其他具有巨大生物学意义的分子的前体,在营养和代谢中发挥着多种关键作用。对于某些疾病,L-精氨酸是关键的调节因素。通过代谢产生一氧化氮、鸟氨酸等多种下游产物,L-精氨酸有益于改善心血管内皮和免疫功能,对肿瘤生长也有调节作用,在新冠肺炎的感染治疗中也能发挥良好效应。L-精氨酸在许多常见健康问题方面都能发挥独特的治疗作用,在疾病的临床治疗上也有广泛的应用前景。

人肠道α-防御素5促进辐照诱导小鼠肠道损伤的修复

目的观察辐照对C57小鼠肠道的损伤作用及人α-防御素5(humanα-defensin 5,HD5)在其中的保护效应及功能。方法基于C57小鼠构建肠道α-防御素敲除小鼠(MMP7^(-/-)小鼠)模型,随后将HD5基因转入MMP7^(-/-)小鼠,构建HD5转基因小鼠(HD5tg小鼠)模型。将实验分为野生型C57小鼠组(WT组)、MMP7^(-/-)小鼠组和HD5tg小鼠组。利用5 Gy X射线(1.26 Gy/min)辐照各组小鼠后,统计分析30 d内小鼠生存状况,同时在0、2、10 d收取小鼠回肠组织。利用HE染色观察小鼠回肠病理损伤;TUNEL评估小鼠肠黏膜组织细胞凋亡;免疫荧光和PAS染色分析回肠肠道干细胞增殖、分化状态;Western blot检测TLR4、MyD88、NF-κB等蛋白表达;RT-qPCR检测肠黏膜IL-1、IL-6及IL-10等炎症因子转录水平。结果成功构建并繁育MMP7^(-/-)和HD5tg小鼠,WT组、MMP7^(-/-)组、HD5tg组辐照后30 d小鼠生存率分别为50%(10/20)、35%(7/20)和55%(11/20),WT组和HD5tg组小鼠生存率显著高于MMP7^(-/-)组(P<0.05),WT组和HD5tg组小鼠组间生存率无统计学差异。与MMP7^(-/-)组相比,HD5转入后显著改善小鼠辐照后小肠绒毛和隐窝结构病理损伤;抑制肠黏膜细胞发生凋亡;促进肠道干细胞增殖、分化;抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号通路活性,进而降低IL-1β、IL-6炎性因子表达水平(P<0.05)。结论HD5通过改善辐照诱导的小鼠肠道上皮屏障功能障碍,促进肠黏膜细胞更新和组织修复,抑制炎性损伤,进而增强C57小鼠抗辐照能力。

某院全肠外营养液住院医嘱分析

目的为住院患者全肠外营养液(TPN)中氨基酸、维生素等营养素的合理应用提供参考。方法参照专家共识、相关指南及药品说明书制订TPN用药合理性评价标准,选取南京医科大学附属淮安第一医院2019年至2021年的246例住院患者的267份TPN用药医嘱,对其氨基酸、维生素、葡萄糖、脂肪乳等营养素的应用进行合理性评价。结果246例TPN患者中,≥60岁152例(61.79%);肝胆胰外科收治145例(58.94%);平均疗程(7.19±5.18)d,疗程5~10 d 119例(48.37%)。267份TPN医嘱中,肝功能正常使用复方氨基酸(20AA)107份(40.07%),肝功能异常使用复方氨基酸(18AA-Ⅱ)及复方氨基酸(18AA-Ⅱ-SF)11份(4.12%);使用维生素合理22份(8.24%),使用脂溶性维生素未使用水溶性维生素233份(87.27%);使用甘油磷酸钠21份(7.87%)。结论TPN中各种复方氨基酸注射液和维生素的应用存在较多问题,较突出的是磷制剂和药理营养素应用比例较低。临床药师应加强TPN医嘱前置审核,促进TPN中各种复方氨基酸注射液和维生素制剂的合理、规范使用。

氨基酸的抑菌作用研究

目的研究 19种氨基酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用。方法用氨基酸饱和液滤纸片分别对上述菌的每个混菌液培养基平板做定性抑菌实验 ;将有抑菌作用的氨基酸不同浓度对此三种菌的LB培养基混菌液做定量抑菌实验。结果半胱氨酸对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用 ,最佳抑菌时间为 6h ,最适抑菌浓度为 0 .6 2 5 % ,此条件下抑菌率为 92 .6 2 %。结论半胱氨酸可以抑制金黄色葡萄球菌。

长柄扁桃仁的营养成分分析

目的深入研究长柄扁桃仁的营养价值。方法使用原子吸收和氨基酸分析仪等方法对长柄扁桃仁的微量元素和氨基酸进行分析。结果长柄扁桃仁中含有9种人体所需的微量元素,含量大小依次为K>Mg>Ca>P>Na>Fe>Zn>Mn>Cu,其中K,Ca,Fe,Zn的含量分别为6930.9 mg/kg,3396.8 mg/kg,8162.74 mg/kg,44.19 mg/kg,未检出Pb,Cd,Hg,As等有害元素;含有18种氨基酸,总量为21.187%,8种人体必需氨基酸总量6.301%,其他具有特殊药理作用的氨基酸如谷氨酸、天冬氨酸及甘氨酸等含量也很丰富。结论长柄扁桃仁营养丰富,具有进一步开发的价值。

谷氨酰胺的研究及开发进展

谷氨酰胺是一种条件必需性氨基酸，在生命活动中起着重要的作用。它是构成蛋白质的氨基酸，又是合成含氮生物物质的氮源，与组织生长和修补有着密切的关系。在不同组织中谷氨酰胺具有不同的代谢功用，起着重要的生理作用。它不仅是一种重要的生化试剂，也是一种极有发展前途的新药。

甘氨酸对内毒素诱导单核细胞产生IL-1和TNF的影响

内毒素（ＥＴ）是广泛存在于自然界的致病原，是引起临床发热的主要原因，而且又是引起休克、毒血症、霍乱、成人呼吸窘迫综合症、多器官功能衰竭等疾病或病理过程的重要因素。内毒素能激活单核细胞产生多种细胞因子导致体液因子的紊乱从而引起一系列的病理变化和功能失调...

补充左旋精氨酸对免疫功能影响的研究

目的:利用Wistar大鼠实验探讨补充L-Arg对机体免疫功能的影响。方法:观察补充L-Arg对体液免疫、细胞免疫功能,血、尿NOx^-水平以及脾脏形态学的影响,以及L-Arg对免疫抑制状态的调节作用。结果:一定剂量的L-Arg能够增强B细胞介导的体液免疫功能;对于体外培养的具有亲代B细胞活性的小鼠杂交瘤细胞株分泌功能无促进作用;不影响正常小鼠的T淋巴细胞转化功能;增强T细胞介导的Ⅳ型超敏反应;促进脾脏的免疫功能和淋巴小结增生;增加体内NO产生但不会造成NO及其代谢产物的蓄积。结论:补充一定剂量的L-Arg具有免疫增强作用。