基于RPA等温扩增的松材线虫快速检测技术体系建立

利用松材线虫Bursaphelenchus xylophilus基因组分析和等温扩增技术,设计生产松材线虫野外快速检测技术产品并测试其效果。结果表明:比较分析松材线虫和拟松材线虫Bursaphelenchus mucronatus基因组发现松材线虫特异性基因Bx-gene12,以此为基础设计特异性扩增引物和探针,对采集自不同地区的松材线虫、拟松材线虫和松树内其他线虫株系采用研磨颗粒以1500 r/min转速震荡5 min的破碎方法有效释放线虫DNA,40℃等温扩增15 min反应条件下可有效区分松材线虫和其他线虫,检测灵敏度达到100 fg或1条线虫;该快速检测方法在25 min内有效检测出染病黑松Pinus thunbergii和赤松Pinus densiflora松木内的松材线虫。利用RPA等温扩增技术实现25 min内对野外环境下松材线虫的快速检测,可为松材线虫病及时有效防控提供支持。

松材线虫侵染对油松的生理生化影响

为研究油松Pinus tabuliformis感染松材线虫Bursaphelenchus xylophilus后针叶内一些生理生化物质的变化规律,以5 a生油松盆栽苗为对象,在接种松材线虫后0,5,10,20,30 d测定油松针叶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及渗透调节物质和次生代谢物质的含量。结果表明:接种松材线虫后,油松针叶POD活性整体表现为较低水平,接种后5,20 d处理组POD活性均显著低于对照组;CAT活性在接种后30 d显著高于对照组;SOD活性呈现先小幅下降后逐渐升高的趋势,接种后30 d达到峰值,显著高于对照组;PAL活性呈现出持续升高趋势,且在接种后20 d和30 d与对照组相比达到极显著差异水平;可溶性蛋白含量表现为先升高后降低,在接种后10 d达到峰值,在接种后10 d和20 d时显著高于对照组;甜菜碱含量总体呈现较高水平,接种后5 d,处理组甜菜碱含量达到峰值,显著高于对照组;黄酮含量呈现出先升高后降低的变化趋势,且在接种后20 d和30 d,处理组黄酮含量极显著高于对照组。油松幼苗被松材线虫侵染时多种防御酶活性及生理生化物质会发生动态变化,诱导植株产生防御反应。

树干注药技术的基本原理与应用

树干注药技术具有施用精准、药物利用率高、接触风险低和环境污染少等优点。当喷洒和灌根施药等手段难以发挥作用或对环境造成污染时,树干注药是更为合适的手段,其开发和应用已引起国内外广泛关注。概述树干注药技术的树木生理学原理和影响树干注药的因素,系统介绍国内外无压力注射、打孔压力注射和微孔压力注射的技术设备和特点,以及树干注药技术在防治松材线虫病等病虫害中的应用,旨在为树干注药技术的发展和优化提供参考。

粘质沙雷氏菌BRC-CXG2对松材线虫的防治效果及全基因组分析

为验证粘质沙雷氏菌Serratia marcescens BRC-CXG2对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus的杀线活性,挖掘有效的杀线代谢产物,明确菌株生防机制,利用生物学测定验证粘质沙雷氏菌BRC-CXG2菌株杀线活性,基于Nanopore测序平台对菌株进行全基因组测序,采用生物信息学技术进行预测和功能注释,并通过生测检验从粘质沙雷氏菌BRC-CXG2菌株分离出的灵菌红素对松材线虫的毒力。结果表明:粘质沙雷氏菌BRC-CXG2对松材线虫具有较强的毒力,处理48 h的杀线LC_(50)为4.36×10^(4)CFU/mL。全基因组长5462607 bp,GC含量为59.36%,预测编码基因5087个,长4767972 bp。基于Nr数据库共注释基因5062个,其中包含灵菌红素、几丁质酶等杀线代谢物的相关基因。灵菌红素同样具有良好的杀线活性,处理48 h的杀线LC_(50)为20.17 mg/L。该结果可为该菌株的研究和开发利用提供参考。

浙江数字森防应用场景设计与实现

为推进林业生物灾害防控管理精细化,结合浙江省松材线虫病疫情监测和防控工作实际,分析疫情防控监管存在的问题,设计开发了智能化、可视化“数字森防”管理系统,初步实现了疫情普查、疫木除治、抽样检测、即现即清、打孔注药和检疫监管等方面的集成与场景应用。“数字森防”平台2021年11月上线至2023年底,共汇集各类业务数据7800余万条、图片影像3200余万张,形成了全链条闭环管理体系,在松材线虫病疫情监测和防控管理中发挥了积极的引领和示范作用。

基于系统动力学的松材线虫病防治效果模型构建

利用系统动力学方法,通过对松材线虫病不同防治措施的防治效果进行调查,建立松材线虫病防治效果预测动力学模型,对不同防治措施下病害未来发生情况和改变政策方案后的防治效果进行模拟研究,结果表明,通过模型仿真能够预测不同防治方法下未来几年的防治效果,通过仿真测定显示采取增加飞防覆盖率、增加经费投入、提供飞防和砍伐补贴等政策,可以实现有效治理松材线虫疫情的目的。综合来看,运用系统动力学方法进行不同防治模式的评价和优化选择,能够为松材线虫疫情防治方案的制定提供一定参考。

五种药剂对松材线虫生殖发育的胁迫作用

为避免长期使用单一药剂产生耐药性,亟待探索有效防治松材线虫Bursaphelenchusxylophilus的交替药剂。将甲维盐和阿维菌素分别与氟吡菌酰胺复配,制成10%氟吡菌酰胺悬浮剂(SC)+2%阿维菌素微乳剂(ME)和10%氟吡菌酰胺SC+1%甲维盐ME,并与2%甲维盐ME、1.8%阿维菌素ME和5%氟吡菌酰胺SC单剂做毒力测定比较,同时定量分析药剂在亚致死浓度(LC20)下松材线虫的产卵量、卵孵化率、发育进度、性别比例和体长等生殖发育指标。结果表明:2%甲维盐ME对松材线虫2龄幼虫毒力最强,用药36 h后LC50为0.0172 mg/L,其次是10%氟吡菌酰胺SC+2%阿维菌素ME,LC50为0.0585 mg/L;与对照组相比,2%甲维盐ME抑制作用最强,用药后雌虫产卵量(3.73±0.43)粒、卵孵化率(49.56±5.85)%、线虫性成熟比例(25.33±2.83)%、雌雄性别比(2.15±0.04)和雌虫体长(925.43±10.68)μm,均显著降低;其次为10%氟吡菌酰胺SC+2%阿维菌素ME,用药后雌虫产卵量(6.80±0.47)粒、卵孵化率(61.08±0.71)%和线虫性成熟比例(36.56±1.46)%,显著降低。2%甲维盐ME和复配药剂10%氟吡菌酰胺SC+2%阿维菌素ME能够有效抑制松材线虫的生殖和发育,可交替使用防治松材线虫病,延缓松材线虫的耐药性。

松材线虫病疫情绩效承包综合治理示范——以广西兴业县为例

为探索科学有效的松材线虫病疫情管理模式和综合治理措施,提高防控成效,总结广西兴业县开展松材线虫病疫情防控绩效承包示范经验教训,提出有针对性对策建议。兴业县2019—2022年采用绩效承包防控松材线虫病疫情管理新模式和及时全面清理枯死疫木消除疫源、科学挂设诱捕器诱捕媒介昆虫松褐天牛Monochamus alternatus成虫、设置诱木引诱松褐天牛成虫集中产卵并进行除害处理等综合治理措施,疫情发生面积、枯死疫木数量和松褐天牛种群密度较治理初期分别下降40.97%、80.52%和86.65%,疫情危害程度逐年减轻,有效遏制了疫情持续上升势头,为高质量实现松材线虫病疫情防控五年攻坚行动目标奠定了坚实基础。

从典型案件谈松材线虫病疫木管理

松材线虫病疫木管理是松材线虫病疫情防控的重点和难点,全国松材线虫病疫情防控五年攻坚行动以来,松材线虫病疫情防控体系进一步完善,取得了阶段性防控成效。2023年湘潭“4.27”妨害植物防疫检疫专案的侦破,充分暴露了当前松材线虫病疫区和疫木管理存在的薄弱环节,亟需总结经验,研究解决方法。通过典型案例分析疫木管控存在的漏洞和不足,从法制建设、政策策略和监管措施等方面提出对策建议,以期通过规范疫木管理,实现疫情可防可控。

六安市松材线虫病影响因子分析及防治措施

为摸清六安市松材线虫病疫木伐桩松褐天牛分布情况,为松材线虫病差异化防治提供理论和实践依据,采用GIS方法分析影响六安市各县区疫情小班数量及感病株数的因子,实地调查六安市松材线虫病疫木伐桩内外虫体、虫洞数量。结果表明:裕安区、金安区、叶集区、舒城县、霍山县、金寨县、霍邱县的松材线虫病疫情小班数分别为共98、40、54、781、193、268、34个小班,它们的感病株数分别为7241株、6099株、9532株、39161株、11079株、49876株、4853株;六安市松材线虫病多发于海拔较高、土壤类型以稻田土为主、年降雨量高于2062 mm、年平均气温低于16.2℃的霍山县、舒城县和金寨县,松材线虫病发病株数与海拔高度和年降雨量均呈正相关,与年平均气温呈负相关;不同海拔、伐桩高度、伐桩地径的松材线虫病疫木虫体数量和虫洞数量非常少。得出松材线虫病疫木伐桩以后可以进行差异化处理,可对伐桩进行剥皮处理的结论,这一结论可为今后差异化防治提供理论和实践依据。

东北地区松材线虫病媒介昆虫与潜在媒介昆虫

在松材线虫病逐渐向北扩张的态势下,前瞻性研究是势在必行的,媒介昆虫是疫情扩散中必不可少的一环,该文通过总结东北地区松材线虫病2种媒介昆虫的研究成果,以及8种潜在媒介昆虫的分布、危害和发生规律等基本信息,为科学防控松材线虫病和防止松材线虫病继续北扩提供理论基础。

松材线虫病疫木闭环监管的探索与实践——以浏阳市为例

松材线虫病是世界最具危险性和毁灭性的森林病害,清理病死松树是松材线虫病防控的核心,目的是减少侵染源和传播媒介,其防控成效取决于疫木清理、监管的力度和质量。以浏阳市为例,分析常规疫木监管模式存在的弊端,基于闭环式管理理论,探索构建疫木闭环监管模式,推行疫木集中无害化处置,设置分段工价计算体系,实施疫木信息化平台监管,努力做到疫情监测、疫木除治、枝丫焚烧、疫木转运、疫木处置、质量验收、信息反馈等全流程闭环监管,总结闭环监管经验教训,提出相关对策建议,为科学防控松材线虫病疫情提供参考。

谈松材线虫病疫情防控责任——以江西省为例

强化责任落实是确保松材线虫病疫情防控成效的关键。梳理松材线虫病防控相关法律法规,以江西省为例,总结构建松材线虫病疫情防控责任体系的实践经验,分析责任落实过程中存在的突出问题,有针对性地提出压实防控主体责任对策建议,助力松材线虫病疫情防控五年攻坚行动。

落叶松自然条件下感染松材线虫初报

对2018年辽宁抚顺市出现枯死现象的长白落叶松Larix olgensis、日本落叶松L.kaempferi和华北落叶松L.principis-rupprechtii取样调查,通过显微镜形态学鉴定和实时荧光定量PCR方法确定3种落叶松体内均含松材线虫Bursaphelenchus xylophilus。由此确定松材线虫在我国自然条件下侵染落叶松。这是我国关于落叶松自然感染松材线虫的首次报道。

我国松树寄生线虫分类检索

到目前为止,在我国松树体内已经发现有寄生线虫46个已知种和一些未定种。分属于3目9科17属。其中,滑刃目(Aphelenchida)线虫数量最多,包括滑刃科(Aphelenchidae)滑刃线虫属(Aphelenchus)、伞滑刃线虫属(Bursaphelenchus),外滑刃科(Ektaphelenchidae)外滑刃线虫属(Ektaphelenchoides)、外真滑刃线虫属(Ektaphelenchus)、隐滑刃线虫属(Crytaphelenchus),长尾科(Seinuridae)长尾线虫属(Seinura)等,总共40个已知种。垫刃目(Tylenchida)包括粒科(Anguini-dae)茎线虫属(Ditylenchus),伪垫刃科(Nothotylenchidae)柱形垫刃线虫属(Cylindrotylenchus),纽带科(Hoplolaimidae)拟盘旋线虫属(Pararotylenchus),环科(Criconematidae)小环线虫属(Cri-conemella)、鞘线虫属(Hemicycliophora)等,共6个已知种。矛线目(Dorylaimida)仅有1个未定种。根据不同目、科、属、种的线虫主要形态鉴定特征,编制了46种松树寄生线虫分类检索表,从而有利于人们方便地鉴定和区分松树寄生线虫。

松材线虫病媒介昆虫的天敌及其应用研究进展

目前,在全球范围内已证实可传播松材线虫的媒介昆虫共7种,均属于墨天牛属Monocha-mus;北美、亚洲和欧洲的松材线虫病分布区均有1~2种与本地寄主树紧密相关的墨天牛是主要传播媒介;笔者归纳了各分布区主要媒介昆虫的天敌种类和已在应用的种类。中国和日本是利用天敌资源防控松材线虫病媒介昆虫最多的国家,防控对象是松褐天牛Monochamus alternatus和云杉花墨天牛M.saltuarius。球孢白僵菌Beauveria bassiana、花绒寄甲Dastarcus helophoroides、肿腿蜂Sclerodermus spp.是当前利用最多且最成熟的生防天敌。从这3类天敌的发现、发展到应用等方面综述了国内外利用天敌资源防控松材线虫病媒介昆虫的研究和应用进展。提出了各种天敌资源应用的优缺点和未来发展方向。媒介昆虫的防治不仅需要多种天敌资源协调使用,更重要的是要与其他的防治方式互相配合,才能达到理想效果。

松材线虫侵害马尾松林后群落谱系多样性和结构动态

调查松材线虫Bursaphelenchus xylophilus侵害马尾松Pinus massoniana林不同时间的4个群落和邻近的1个常绿阔叶林群落,利用群落净谱系亲缘关系指数(NRI)和净最近种间亲缘关系指数(NTI)等,分析松材线虫侵害马尾松林后群落谱系结构和谱系多样性动态。结果表明:松材线虫侵害后,群落物种和谱系多样性下降,侵害12 a后与常绿阔叶林的多样性最接近,侵害4,8 a群落内的物种和谱系与常绿阔叶林相似性最高,侵害0 a的与常绿阔叶林相似性最低;松材线虫侵害0,4,8 a的整个群落的谱系结构发散,侵害12 a与常绿阔叶林的谱系结构聚集。松材线虫侵害后,马尾松林群落向常绿阔叶林演替,同时,环境过滤对整个群落物种的组成起主要筛选作用。

相似穿孔线虫消毒方法筛选及其对线虫繁殖量的影响

通过比较不同消毒方法对相似穿孔线虫的消毒效果和对其活力的影响,筛选出5种消毒方法,再通过接种胡萝卜愈伤组织繁殖线虫的方法,测定了这些消毒方法对相似穿孔线虫繁殖量的影响.结果表明:供试的5个相似穿孔线虫种群,用硫酸链霉素进行消毒后的雌虫平均繁殖量最大,用次氯酸钠处理后的雌虫平均繁殖量最小,而用氯化汞、洗必泰+氯化汞和硫酸链霉素+氯化汞进行处理后的雌虫平均繁殖量介于上述两者之间,综合消毒效果和对繁殖量的影响2个因素,其中洗必泰+氯化汞是最合适的消毒方法.

疫木保湿直接培养松材线虫的研究

选用来自松材线虫Bursaphelenchus xylophilus(Steiner & Buhrer)Nicle病疫区的6株病树和1块沙发板条作为试验材料,进行了培养温度和时间对疫木直接保湿培养松材线虫分散型3龄幼虫发育成熟影响的研究。结果表明,30℃恒温条件下培养72 h,幼虫的成虫率25%,高于25℃的成虫率。30℃培养72 h,25℃培养96 h以上时进行松材线虫快速检验,结果受疫木中线虫的分布和含量影响较小。

从黄山抵御疫情之措施思考我国松材线虫病防控策略

通过对黄山及周边地区松材线虫病防控工作现状的分析,从坚持政府主导,强化资金、技术保障和落实三项防治措施等方面,提出进一步做好我国松材线虫病防控工作的策略。