影响和牛冷冻胚胎移植妊娠率的因素分析

为研究不同因素对和牛冷冻胚胎移植妊娠率的影响,采用Ovsynch方法对受体荷斯坦牛进行同期发情,共计移植受体557头。结果表明,A级和B级胚胎的移植妊娠率(57.72%,56.63%)差异不显著(P>0.05);不同黄体直径CL-1(<1.0 cm)、CL-2(1.0~1.5 cm)和CL-3(>1.5 cm)时的移植妊娠率(54.50%,59.72%和55.24%)差异也不显著(P>0.05);左侧和右侧子宫角移植妊娠率(56.92%,57.41%)差异不显著(P>0.05);子宫角前段移植妊娠率(59.04%)显著高于子宫角中段移植妊娠率(40.35%)(P<0.05);不同移植完成时间T-1(6~9 min)和T-2(10~13 min)内完成的移植妊娠率(60.65%,54.17%)显著高于T-3(14~24 min)内完成的移植妊娠率(26.67%)(P<0.05)。说明胚胎质量、移植部位和黄体直径对胚胎移植妊娠率均无显著影响,胚胎输送位置和移植完成时间对胚胎移植妊娠率有显著影响。

中国荷斯坦牛3个SNP位点与乳房炎、产奶性状的关联分析

试验旨在开展奶牛群体高乳房炎抗性功能基因的筛选与验证,通过分析SNP位点多态性及其与体细胞数和产奶性状的相关性,探讨其对乳房炎的抗病情况。本研究对北京地区568头中国荷斯坦牛DCK、HIST1H2BK基因的多态性进行了检测,并对3个多态位点不同基因型与体细胞数、产奶性状进行了关联分析。结果表明,DCK基因的SNP位点6:g.86337334 A>G与体细胞数极显著相关(P<0.01),SNP位点6:g.86322040 C>T [rs43472176]与体细胞数也呈现极显著相关(P<0.01);HIST1H2BK基因的SNP位点23:g.31354269 T>G[rs41654340],与体细胞数呈显著关联(P<0.05),与乳脂率和乳蛋白率呈极显著关联(P<0.01)。本研究结果表明DCK、HIST1H2BK基因位点与体细胞数性状显著相关,其可能通过直接或间接的途径影响奶牛的乳脂率或乳蛋白率性状。本研究为荷斯坦牛后续的标记辅助选择奠定了良好的基础。

81家规模化牧场奶牛酮病、生产性能、疾病及淘汰情况调查分析

为了解我国规模化牧场奶牛酮病、泌乳性能、繁殖性能、疾病和淘汰状况,本次问卷调查选择了全国81个规模化牧场在2021年的记录数据。根据牧场中奶牛临床、亚临床和合计的酮病发病率(临床酮病和亚临床酮病发病率共计)高中低分组进行统计分析。结果表明:调查的牧场中奶牛亚临床酮病高于临床酮病约2倍;奶牛临床酮病发病率与牛乳尿素氮呈显著负相关,与临床低血钙发病率呈显著正相关,临床酮病发病率升高使乳尿素氮降低和临床低血钙发病率升高;亚临床和合计的酮病发病率与隐性乳房炎、亚临床低血钙和合计低血钙发病率(临床低血钙和亚临床低血钙发病率共计)及全年死淘率呈显著正相关,亚临床酮病发病率升高使乳体细胞(SCC)、隐性乳房炎发病率、亚临床低血钙症发病率和合计低血钙发病率升高;合计酮病发病率升高也使得头胎牛始配月数降低,而隐性乳房炎发病率、亚临床低血钙发病率、合计低血钙发病率和全年死淘率升高。由此可见,牧场奶牛酮病发病率高对奶牛乳成分、疾病、淘汰和繁殖有不利影响,应及早开展牛群酮病监测,完善酮病预防措施,以便减少牧场经济损失。

青年和成年中国荷斯坦母牛在不同月份的繁殖性能比较

为分析不同月份青年母牛和成年中国荷斯坦母牛群的繁殖性能差异,本实验收集并分析了30000多头(次)青年和成年中国荷斯坦母牛2009—2022年的配种率、受胎率、流产率等繁殖性状指标数据。结果表明:青年母牛的配种率在4月最高,成年母牛的配种率在5月最高,7—8月青年母牛和成年母牛受胎率和配种率等性状最差;青年牛的受胎率、产犊率均高于成年母牛(P<0.01),流产率、配孕每头消耗冻精和配种指数均低于成年母牛(P<0.01)。可见,青年牛的整体繁殖性能优于成年母牛,建议在奶牛养殖过程中,减少在夏季实施繁育计划,加强青年阶段奶牛的饲养管理,及时淘汰高胎次牛,以提高牛群的整体繁殖效率和经济效益。

褪黑素对肉牛同期发情和情期受胎率的影响

为探究外源褪黑素(Melatonin,MT)在肉牛体内代谢情况及其对2次氯前列醇钠法处理母牛同期发情率、情期受胎率、血液抗氧化水平和生殖激素的影响,本研究首先将12头牛随机分为4组,早8时注射0 mg、0.464 mg、4.64 mg和46.4 mg褪黑素,测定不同时间点血液褪黑素浓度;其次将80头牛随机分为4组,在第2次氯前列醇钠注射和人工输精时,注射0 mg、0.464 mg、4.64 mg和46.4 mg褪黑素,统计发情率和情期受胎率,测定血浆抗氧化水平和生殖激素含量。结果表明,肉牛皮下注射不同剂量褪黑素后,血浆褪黑素在0.5 h处于较高值且极显著高于对照组(P<0.01),然后呈下降趋势,其中注射0.464 mg褪黑素经8 h代谢至正常水平,4.64 mg或46.4 mg褪黑素经14 h代谢至正常水平;同期发情处理中,皮下注射46.4 mg褪黑素可以显著提高肉牛发情率(P<0.05),情期受胎率呈现高于对照组的趋势;4.64 mg或46.4 mg褪黑素处理可显著降低血浆丙二醛(MDA)的含量(P<0.05),显著提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量(P<0.05),极显著提高超氧化物歧化酶(SOD)的含量(P<0.01);46.4 mg褪黑素处理可显著提高配种时血浆中促卵泡素(FSH)和促黄体生成素(LH)的浓度(P<0.05),4.64 mg褪黑素可以显著提高配种时FSH和雌二醇(E 2)的浓度(P<0.05),并且显著提升配种后第7天血浆孕酮(P 4)值(P<0.05)。本研究表明,外源褪黑素通过提升机体抗氧化水平和改变生殖激素浓度提高2次氯前列醇钠法母牛同期发情率和情期受胎率,以注射46.4 mg褪黑素的效果最好。

母牛生殖道微生物与繁殖性能相关性研究进展

母牛生殖道拥有独立的微生物菌群,这些微生物菌群在生命早期就已经建立。生殖道结构的连续性使不同生殖器官之间的微生物菌群具有一定关联性。拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门是所有生殖器官主要的共生菌,其次是放线菌门、梭杆菌门和特内里菌门。在母牛配种或产犊期间,外界微生物进入母牛生殖系统会改变原本微生物菌群的结构,对生殖道微生物菌群结构进行干预可治疗相关生殖疾病。本文综述了母牛生殖道微生物对繁殖性能的影响,以期为母牛繁殖的优化管理提供参考。

中国荷斯坦牛繁殖性状的基因型与环境互作

旨在估计奶牛繁殖性状在不同地区的遗传参数,检测同一繁殖性状在不同地区之间的基因型与环境互作(G×E)效应。本研究利用全国6个地区2064个牧场2005至2022年的荷斯坦牛群繁殖记录,计算了2个重要繁殖性状:初产日龄(AFC)和产犊间隔(CI),共包含1787590和2476422条表型数据。同时对该原始表型数据进行详细的质控和分组。随后,通过BLUPF90软件的airemlf90模块利用单性状动物模型和重复力模型对6个地区的2个繁殖性状进行了遗传分析,使用双性状动物和重复力模型估计同一性状不同地区之间的遗传相关,作为基因型与环境之间效应(G×E)的检测指标。结果表明,研究所设定的质控条件能够剔除分布异常的表型值;AFC的遗传力较高且在地区间差异较大(0.06~0.40),而CI的遗传力较低且各地区间差异较小(0.02~0.04);在大多数地区组合下,2个繁殖性状皆检测到了显著的G×E效应(P<0.05)。综上,同一繁殖性状在不同地区的遗传表现存在差异,且部分区域之间存在显著的G×E效应。因此,对我国奶牛繁殖性状进行遗传改良时需考虑区域性差异及G×E效应对遗传进展的影响。

热应激对牛卵子及其胚胎表观遗传修饰与发育能力的影响

旨在探究热应激对牛卵子及其胚胎表观遗传修饰与发育能力的影响。本研究将卵子置于体外热应激条件下培养(41℃12 h+38.5℃12 h),进行体外成熟(in vitro maturtion, IVM)和体外受精(in vitro fertilization, IVF),检测对照组(38.5℃24 h)和热应激组牛卵子和胚胎的发育能力及表观遗传修饰组蛋白H1、组蛋白H2、组蛋白H4和DNA甲基化的修饰水平。本研究还检测了卵子活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨm)水平及与表观遗传修饰和发育能力相关基因的表达水平。结果表明,热应激处理组卵子成熟率((59.21±4.29)%)、卵裂率((57.78±4.58)%)和囊胚率((22.31±1.67)%)均显著低于对照组((85.10±6.75)%、(78.64±2.46)%、(42.64±1.38)%,P<0.05);热应激组牛卵子及各阶段胚胎表观遗传修饰组蛋白H1、组蛋白H2、组蛋白H4、DNA甲基化水平显著低于对照组(P<0.05);热应激组牛卵子ΔΨm水平显著低于对照组(P<0.05);热应激组牛卵子ROS水平显著高于对照组(P<0.05);热应激组牛卵子表观遗传修饰相关基因DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、Histone H2A、SMYD3、IGF-2R的mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05);热应激组牛卵子发育能力相关基因C-MOS、GDF-9和POU5F1的mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05)。本研究表明,热应激显著降低了牛卵子和胚胎表观遗传修饰组蛋白H1、组蛋白H2、组蛋白H4、DNA甲基化水平,显著降低了牛卵子ΔΨm水平及与表观遗传修饰和发育能力相关基因的mRNA表达水平,显著提高了ROS水平,降低了卵子质量。

褪黑素通过改善线粒体动力学缓解棕榈酸诱导的牛子宫内膜上皮细胞损伤

旨在探究褪黑素对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的牛子宫内膜上皮细胞(bovine endometrial epithelial cells,BEECs)线粒体动力学的影响及机制。本试验以BEECs为研究对象,分为3组:对照组、PA组和褪黑素组,其中,对照组添加0.2 mmol·L^(-1)BSA溶剂,PA组添加0.2 mmol·L^(-1)PA,褪黑素组同时添加0.2 mmol·L^(-1)PA和100 nmol·L^(-1)褪黑素。本研究通过CCK8法(n=4)和Annexin V-FITC/PI双染法(n=3)检测细胞活力和凋亡情况;利用细胞流式术检测细胞线粒体内的ROS水平(n=3);进一步使用Seahorse XFe96细胞代谢呼吸动态分析仪检测耗氧率、基础呼吸值、ATP合成能力等线粒体呼吸功能的相关指标(n=4);qRT-PCR法检测线粒体动力学相关基因MFN1、DRP 1和PGC1-α的mRNA表达变化量(n=3);最后通过Western-Blot法检测线粒体动力学相关蛋白MFN1、p-DRP1、DRP1和PGC1-α的表达变化量(n=3)。结果显示:与PA组相比,1)添加褪黑素能显著降低BEECs线粒体ROS水平(P<0.05),并显著提高BEECs活力和显著降低BEECs凋亡率(P<0.05);2)Seahorse结果提示,添加褪黑素能显著提高线粒体基础呼吸值、ATP产量和最大耗氧量(P<0.05),此结果表明褪黑素能改善线粒体功能,促进线粒体有氧呼吸,增加ATP产量;3)qRT-PCR结果表明,添加褪黑素能显著降低MFN1、DRP 1的mRNA表达量,显著提高PGC1-α的mRNA表达量(P<0.05);4)Western-Blot检测发现褪黑素组中MFN1蛋白表达量显著下降(P<0.05),p-DRP1/DRP1和PGC1-α蛋白表达量显著上升(P<0.05)。综上,本研究表明褪黑素可能通过改善BEECs线粒体动力学功能,从而缓解PA诱导下的线粒体氧化应激和提高线粒体呼吸功能,最终增强BEECs活力和降低BEECs凋亡;本研究初步探究了褪黑素对PA诱导BEECs损伤的作用机制,为提高严重NEB奶牛低繁殖力提供了理论依据。

不同孕酮含量硅胶阴道栓对牦牛生殖激素及排卵率的影响

孕酮硅胶阴道栓(CIDR)能有效调控牦牛的同期发情,提高牦牛的发情率。试验旨在探究不同孕酮(P_(4))含量CIDR对牦牛血浆中生殖激素及发情率的影响。选择24头3~4岁、体况相近、无产科疾病的经产母牦牛,随机分为高剂量组、低剂量组和无栓组,CIRD中P_(4)含量分别为1.5、0.3、0 g/个,每组8头,于6—8月在相同饲养条件下进行同期发情试验。试验第1天,采集血液后放置CIDR,肌肉注射戈那瑞林注射液;第7天撤栓并采集血液,肌肉注射氯前列醇钠注射液,用排卵测定仪测定阴道黏液电阻数值。检测血浆中雌二醇(E_(2))、P_(4)、促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)、抗缪勒氏管激素(AMH)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、抑制素(INH)及总胆固醇(TC)的浓度。结果表明:试验第7天,高剂量组E_(2)、FSH、LH、GnRH以及IGF-1的浓度高于低剂量组和无栓组(P<0.05),P4浓度低于低剂量组和无栓组(P<0.05);各组AMH、INH以及TC浓度差异不显著,但高于试验第1天;高剂量组、低剂量组、无栓组发情率分别为100%、75%、62.5%(P<0.05)。由此可见,含1.5 g/个P4的CIDR能更好诱导牦牛发情。

水苏糖对秦川牛精液冷冻保存效果的影响

试验主要探究在牛精液冷冻稀释液中添加水苏糖对秦川牛精液冷冻保存效果的影响。添加不同浓度(0、20、40、60、80 mg/mL)水苏糖到牛精液冷冻基础稀释液中,检测冷冻-解冻后秦川牛精子运动性能、质膜完整性、顶体完整率、线粒体活性及抗氧化性相关指标。结果表明,与对照组相比,40 mg/mL水苏糖处理显著(P<0.05)提高冷冻-解冻后精子活力(43.83%)和顶体完整率(78.70%);质膜的完整性和线粒体活性在随着水苏糖浓度的增加显著提升,但质膜的完整性在不同水苏糖浓度之间差异不显著(P>0.05);同时,40 mg/mL水苏糖组显著提高GSH-Px酶和CAT酶的活性(P<0.05),并显著降低精子细胞中的MDA含量(P<0.05)。综上表明,40 mg/mL水苏糖处理显著提升冷冻-解冻后牛精子品质和抗氧化能力,对秦川牛的冷冻精液具有较好保存效果。

奶牛卵泡颗粒细胞在卵泡发育中的作用机制

随着奶牛产奶量的提高,我国奶业产业链也在不断优化和升级,朝着现代化、规范化和国际化的方向迈进。然而,高产奶牛的繁殖性能却在逐渐降低,目前,这已成为奶牛相关研究工作者面临的共同问题。卵泡发育与繁殖效率关系密切,卵泡正常发育是奶牛发情、排卵等繁殖活动的先决条件。其中,卵泡颗粒细胞能够与卵母细胞和卵泡膜细胞相互作用分泌多种激素和因子,同时,作为多种激素和细胞因子的受体影响卵泡发育。因此,本文总结了关于卵泡颗粒细胞功能与卵泡发育的相关研究,并以卵泡颗粒细胞在卵泡发育过程中的作用和颗粒细胞对卵母细胞的影响为重点进行综述,以期为今后相关研究提供理论参考。

千金藤素对牛卵母细胞体外成熟中抗氧化能力的影响

为探究千金藤素(Cepharanthine,Ceph)对牛卵母细胞抗氧化能力的影响及作用机制,本实验在牛卵母细胞体外成熟培养基中添加0、10、100、500、1000μmol/L Ceph进行培养,统计第一极体排出率,筛选出Ceph的最佳浓度,根据浓度将分为对照组和Ceph处理组,通过免疫荧光染色法检测活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)表达水平以及线粒体膜电位水平(JC-1);使用实时荧光定量PCR检测囊胚内抗氧化相关基因(SIRT-1、SOD-1、SOD-2)mRNA转录水平。结果表明:与对照组相比,添加500、1000μmol/L Ceph可显著提高牛卵母细胞第一极体排出率,而10、100μmol/L Ceph组第一极体排出率显著降低,后续采用500μmol/L Ceph用于实验;与对照组相比,添加500μmol/L Ceph显著降低了ROS水平,GSH及JC-1水平显著升高,SIRT-1、SOD-1、SOD-2 mRNA表达水平也显著升高。由此可知,在体外成熟培养基中添加500μmol/L Ceph可以缓解氧化应激损伤,维持线粒体膜电位,从而提高卵母细胞体外发育质量。

同期发情处理后荷斯坦奶牛外周血生殖激素水平变化

为了提高奶牛同期发情-定时输精技术的受胎率,试验研究同期发情处理后荷斯坦奶牛外周血中生殖激素含量的变化,探讨荷斯坦奶牛的人工授精最佳时间。选择24头空怀青年荷斯坦奶牛,使用抑制素(INH)结合同期发情-定时输精(TAI)程序处理,分别在第一次肌肉注射抑制素抗原和布舍瑞林前(记作第0天)、第一次肌肉注射PG前(记作第7天)、第二次注射布舍瑞林前(记作第9天),以及第一次人工输精前(记作第10天)采集外周血,采用ELISA法检测外周血中抗缪氏管激素(AMH)、INH(以抑制素B即INHB为代表)、促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的浓度,分析母牛在同期发情处理前后外周血中生殖激素水平的变化、生殖激素浓度的相关性和各个阶段的差异性。结果表明:第7天试验牛外周血中LH含量极显著高于第0天、第9天以及第10天(P<0.01),并且第9天试验牛外周血中LH含量显著高于第10天(P<0.05);第9天试验牛外周血中FSH含量极显著高于第0天和第10天(P<0.01),并且第7天试验牛外周血中FSH含量极显著高于第10天(P<0.01);而AMH、INHB含量没有显著变化(P>0.05),且不同个体之间不同激素含量的变化波动明显减小,达到相对一致水平。说明INHB、AMH在调控卵泡期FSH的分泌过程中发挥了重要的作用,促进了卵泡的发育;在奶牛同期发情-定时输精过程中,可以通过监测奶牛体内的INHB、AMH、FSH、LH等生殖激素水平,精确判断排卵和人工授精时间,从而提高奶牛同期发情-定时输精效果。

获能物质及微流控精子分离器对牛性控精子的影响

实验旨在研究获能物质及微流控精子分离器(MFSS)对牛性控精子的影响。在BO液中添加获能物质(空白对照组、10μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组)对牛性控精子进行获能,比较各组性控精子活率、活力及运动参数;利用MFSS(MFSS分为入口A储精室、B培养液室和出口C运动不良精子分离室、D运动良好精子分离室4个小室)分离获能效果较好的牛性控精液,测定A、C、D各小室精子的活率、活力、密度以及运动参数,分离后的精子经JC-1染色,流式细胞仪检测各小室精子线粒体相对活性和线粒体活性均衡精子。结果表明:空白对照组、10μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组精子获能后的精子活力、活率、运动性能均无显著差异。5 mmol/L咖啡因组经MFSS分离5 min后D室中精子活力、活率和线粒体相对活性高于A室和C室(P<0.05),精子密度低于A室(P<0.05),其他各组间差异均不显著。由此可见,获能物质咖啡因能够诱导牛精子体外获能,但作用效果不显著;MFSS能分离出高活力、高运动性能的精子,且精子的活力、运动性能与精子线粒体活性有关。

IGF1、CoQ10、MT联合添加缓解热应激对牛IVF囊胚的影响

旨在探明胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factors 1,IGF1)、辅酶Q10(coenzyme Q10,CoQ10)及褪黑素(melatonin, MT)联合添加对牛卵母细胞和胚胎发育以及热应激囊胚的影响。本研究于屠宰场采集牛离体卵巢,于实验室抽取卵丘卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs),在牛卵母细胞体外成熟(in vitro maturation, IVM)液及牛胚胎体外培养(in vitro culture, IVC)液中添加IGF1、CoQ10及MT,检测各添加方式对牛卵母细胞发育能力、牛卵母细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨm)的影响;在囊胚期施加41℃热应激,检测热应激及联合添加对牛IVF囊胚发育能力及凋亡水平的影响,并利用qRT-PCR检测囊胚中胚胎质量相关基因mRNA表达水平。各组试验均重复3次。结果表明,与未添加组(CT-0组)相比,联合添加IGF1、CoQ10及MT组(ICM组)卵母细胞成熟率((90.40±2.06)%vs.(65.41±0.63)%)、卵裂率((93.33±1.96)%vs.(59.77±2.93)%)及囊胚率((51.43±5.34)%vs.(26.92±3.24)%)均显著提高(P<0.05);ICM组牛卵母细胞ROS水平显著降低;ΔΨm显著提高(P<0.05)。与热应激组(HS组)相比,联合添加IGF1、CoQ10及MT(ICM+HS组)显著提高了囊胚扩张率((62.00±2.97)%vs.(30.77±8.66)%,P<0.05),抑制了热应激囊胚细胞凋亡,并提高了IGFBP3、ATP1A1、DSC2及IFNT2的mRNA表达水平(P<0.05)。综上表明,联合添加IGF1、CoQ10及MT有效提高牛卵母细胞发育能力,降低ROS水平,提高ΔΨm。热应激降低牛囊胚扩张率,促进牛囊胚细胞凋亡,影响囊胚质量,而联合添加IGF1、CoQ10及MT缓解了热应激损伤。

发情期和妊娠早期孕酮对奶牛繁殖的影响及调控方法

奶牛发情期和妊娠早期体内孕酮水平不足是导致其繁殖效率低的重要因素之一。较高的孕酮水平能够提高卵母细胞质量、调节激素分泌、调控子宫内环境以及促进胚胎发育,从而提升奶牛的繁殖效率。因此,发情期和妊娠早期孕酮水平与奶牛繁殖效率之间的关系受到广泛了关注。本文总结了孕酮对奶牛发情期及妊娠早期不同阶段的影响,并探讨了在这些关键时期提高孕酮水平的方法,以期为奶牛养殖产业提供生产指导,助力奶牛繁育工作提质增效。

还原型谷胱甘肽对西门塔尔牛精液低温保存效果的影响

本实验旨在探究还原型谷胱甘肽(GSH)对西门塔尔牛精液低温保存(0℃)的影响。在精液稀释液中分别添加0(对照组)、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛(MDA)水平、三磷酸腺苷(ATP)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明:在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组(P<0.05);在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组(P<0.05),MDA水平低于其他组(P<0.05)。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。

TGFA过表达对水牛卵巢颗粒细胞功能的影响

本试验旨在探索转化生长因子α(Transforming Growth Factor alpha,TGF-α)的编码基因TGFA对水牛卵巢颗粒细胞(BGCs)增殖、凋亡和类固醇激素分泌能力的影响,为进一步探明TGFA在调控水牛卵泡发育中的作用提供理论支持。构建TGFA过表达载体,采用脂质体将其转染至BGCs,CCK-8、EdU、流式细胞术、ELISA等技术分别检测细胞活力、增殖、凋亡和类固醇激素分泌情况,同时运用qRT-PCR和WesternBlot检测相关基因和蛋白的表达变化。结果表明,TGFA过表达后BGCs活力显著提高,EdU阳性细胞率显著升高,增殖相关基因PCNA和CyclinD1的表达量显著上调。同时,细胞凋亡率显著降低,促凋亡基因CASPASE 3、BAX和P53的表达量显著降低,促凋亡蛋白CASPASE3的表达量显著下调;雌激素(Estradiol,E2)和孕酮(Progesterone,也称黄体酮,缩写:PROG)的分泌量显著降低,类固醇激素合成相关基因3-βHSD和CYP19A1的表达量显著下调,其蛋白表达量也显著降低。综上,TGFA过表达促进BGCs增殖,抑制细胞凋亡和类固醇激素分泌,从而调节水牛卵泡发育。

水牛早孕诊断方法比较研究

本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现:配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9~8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。