热应激对鸡肠道屏障的影响及损伤机制研究进展

热应激通过上调皮质醇激素,升高血清内毒素含量,上调肠道内炎症、氧化、凋亡水平增加肠道通透性,最终引发机体系统性炎症反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍(MODS),给养殖业造成损失。近年来全球温度持续上升,热应激造成的畜牧业损失引起广泛关注。本文总结了热应激影响鸡生产性能、肠道形态结构、肠道屏障功能(包括炎症反应、氧化应激、凋亡水平)的相关研究及机制,旨在为防治家禽高温应激提供理论参考。

产蛋鸡子宫部钙离子转运及调控的研究进展

鸡蛋蛋壳品质下降会造成经济效益损失和食品安全风险。产蛋鸡子宫部无机钙离子(Ca^(2+))的转运涉及不同的跨膜途径、离子稳态、相关转运基因和载体的表达,是蛋壳矿化及调控的重要环节。本文综述了子宫部Ca^(2+)转运途径、Ca^(2+)转运对蛋壳矿化和蛋壳品质的影响、营养因素对Ca^(2+)转运的调控作用,旨在为通过调节蛋壳矿化,改善鸡蛋蛋壳品质提供参考。

靶向鸡糖皮质激素受体基因的microRNA预测与鉴定

[目的]本文旨在预测和筛选靶向调控鸡糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达的microRNA。[方法]用TargetScan、PicTar和miRDB软件分别预测靶向鸡GR 3′UTR microRNA并取交集;构建包含鸡GR 3′UTR的重组质粒及突变质粒,通过双荧光素酶试验鉴定microRNA和鸡GR 3′UTR的靶向性;用TargetScan和miRDB软件分别预测候选microRNA的靶基因,用DAVID软件对预测出的共同靶基因进行GO功能分析;用Western blot检测过表达候选microRNA对鸡DF1细胞GR蛋白表达的影响。[结果]miR124-3p、miR142-3p、miR204/211、miR183、miR18-5p和miR181a/181b是3种软件预测靶向GR 3′UTR的交集microRNA;双荧光素酶试验结果表明miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合GR 3′UTR。2种软件预测3个候选microRNA的靶基因中都有GR且富集分子功能不同;在DF1细胞中过表达3个候选microRNA后,miR142-3p和miR204/211显著降低GR蛋白的表达水平(P<0.05)。[结论]miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合鸡GR 3′UTR,且miR142-3p和miR204/21可以降低鸡DF1细胞中GR蛋白的表达水平。

PTEN基因在鸡肝脏中的发育性变化

为了研究抑癌基因PTEN在家禽肝脏发育过程中的表达变化,试验选取50枚海兰褐受精蛋,在孵化的第15,18,20天[E15、E18、E20(啄壳为准)]和出壳后第1,5,10,15天(D1、D5、D10、D15)各取6枚(只)鸡胚/雏鸡,用乙醚麻醉后颈椎脱臼致死,取肝脏并提取基因组,采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法对PTEN基因在家禽肝脏发育过程中的表达变化进行研究。结果表明:PTEN基因相对表达量随着胚龄/日龄的增长而增加,但在啄壳当天,PTEN基因相对表达量会暂时下降。PTEN蛋白在出壳前期主要分布在部分肝血窦内皮细胞的细胞核和肝细胞的细胞核中,在细胞质中基本无表达;在出壳后,PTEN蛋白在肝细胞核和细胞浆内均有分布。E20,免疫阳性PTEN蛋白的表达量下降,和E15水平相当(P>0.05),在其他胚龄/日龄时均显著高于E15(P<0.05)。肝细胞核PTEN蛋白免疫阳性率在E18显著高于E15(P<0.05);在E20和D15,肝细胞核PTEN蛋白免疫阳性率急剧下降,均显著低于E18(P<0.05);在D5~D15,肝细胞核PTEN蛋白免疫阳性率逐渐增加,均显著高于E15(P<0.05)。PTEN基因的这种表达模式和鸡胚/雏鸡肝脏的发育模式基本一致,说明家禽PTEN基因在肝脏发育和代谢中发挥重要作用。

雏鸡脂肪肝冰冻切片制作过程中苏丹Ⅲ染色条件的探索

为探讨在雏鸡脂肪肝冰冻切片制作过程中苏丹Ⅲ染色的最佳条件,取7日龄雏鸡的肝脏组织,用冰冻切片机制作成切片,然后设置不同条件,用苏丹Ⅲ染色液对切片进行染色,观察染色效果,进行对比.结果表明:用苏丹Ⅲ染料染色9 min明显好于5 min和30 min,70%乙醇溶液冲洗5次明显好于2次和9次,蓝化3 min比未蓝化效果更佳.将肝组织冰冻切片标本用苏丹Ⅲ浸染9 min、70%乙醇溶液冲洗5次、苏木素浸染1 min、在自来水中蓝化3 min,肝组织的脂肪部位被明显染成橘红色,观察效果最好.

鸡肌纤维生长发育及调控机制的研究进展

骨骼肌是动物体内的重要组成部分。鸡肌纤维的生长发育与生产效率和肌肉品质密切相关。鸡肌纤维的研究对提高鸡肉产量和品质,了解肌肉生长发育、修复再生机制具有非常重要的意义。本文主要综述了肌纤维类型及影响鸡肌纤维发育的重要因素、关键基因在肌纤维发育和成肌细胞分化中的作用,旨在为鸡肌纤维生长发育规律和调控机制的研究及家禽生产提供参考。

快速型黄羽肉鸡生长模型及营养沉积规律的研究

旨在研究0~56日龄快速型黄羽肉鸡湘佳黄鸡2号的生长规律及营养物质动态沉积规律,构建体重、日增重的生长曲线以及能量、体蛋白、体脂肪、总氨基酸等养分的沉积模型,为快速型黄羽肉鸡的精准饲养提供科学依据。本研究选择同批次出雏、健康的0日龄快速型黄羽肉鸡湘佳黄鸡2号672只(公母各半),于第0、7、14、21、28、35、42、49、56日龄分别对公鸡和母鸡进行生长性能及体成分测定。结果发现,随日龄增加,湘佳黄鸡2号公鸡和母鸡的体重、空体重、羽毛重、日增重、能量沉积量、体蛋白沉积量、体脂肪沉积量和总氨基酸沉积量均显著升高(P<0.001)。分别采用Gompertz、Logistic和Bertalanffy三种非线性函数对体重、日增重和能量、体蛋白、体脂肪及总氨基酸等养分的重量进行拟合,根据回归模型的决定系数、残差平方和、均方误差和赤池信息准则的值判断模型准确性,结果表明,Gompertz模型对各项指标的拟合准确性最高。利用Gompertz函数公式,拟合并建立了湘佳黄鸡2号体重和日增重的生长曲线,同时构建了能量、体蛋白、体脂肪及总氨基酸的重量的生长或沉积模型。本研究发现,Gompertz模型能精准预测湘佳黄鸡2号的体重、日增重及体成分的需要量增长规律,这为湘佳黄鸡2号的能量、脂肪、蛋白质和氨基酸的动态需要量研究和精准饲养提供了数据支撑。

香菇多糖的生物活性及在鸡、猪养殖中的应用研究进展

香菇多糖(Lentinan,LNT)是香菇的主要活性成分之一,是典型的真菌β-葡聚糖,其单糖组成包括甘露糖、半乳糖和葡萄糖等,立体结构呈三螺旋,该结构使LNT具备免疫调节、抗氧化、促肠道健康、抗炎和抗肿瘤等多种生物活性,广泛应用于医学、食品、养殖等领域。LNT作为饲料添加剂已进入《饲料添加剂品种目录》。本文主要综述了LNT的生物活性及在鸡、猪生产中的应用研究进展,以期为LNT作为新型饲料添加剂应用于鸡、猪养殖提供思路和理论支撑。

鸡肠上皮细胞体外模型的构建及应用

鸡肠上皮细胞作为体内更新最快的细胞,具有消化、吸收、分泌等重要的生理功能。细胞体外模型的建立为肠道疾病、营养物质的吸收消化机制及上皮细胞的凋亡、增殖、分化等研究提供了一套快速可靠的方法,为研究生理、营养、疾病控制及其他未知因素提供理想模型。本文对营养性添加、非营养性添加和病原微生物在肠上皮细胞中的研究作用机制进行综述,以期为禽业、兽药改良和研发提供参考。

表皮生长因子对蛋鸡十二指肠生长发育的影响

为探明表皮生长因子对蛋鸡十二指肠生长发育的影响,以24羽260日龄体重相近的白来航蛋鸡为研究对象,通过饲料中添加不同浓度外源性表皮生长因子(EGF),其浓度分别是0(对照)、0.2、0.4、0.8 g/kg,测量蛋鸡的体重和十二指肠重量、长度和直径。结果表明,与对照相比,0.2、0.4、0.8 g/kg EGF处理蛋鸡体重、十二指肠体质量和相对重量均增加,其中0.8 g/kg EGF处理差异显著。表明外源性EGF能提高蛋鸡十二指肠的重量、长度和直径,从而提高十二指肠的消化吸收能力。

藏母鸡不同生长阶段的血液生化指标分析

本研究对藏母鸡开产前、产蛋初期、产蛋高峰期、产蛋后期4个生长阶段的血液生化指标进行检测并分析。结果表明:藏母鸡的血清总蛋白、白蛋白、总胆固醇、血清钙在产蛋高峰期的含量均显著高于其他生长期(P<0.05),甘油三酯在产蛋高峰期的含量和产蛋后期的含量高于开产前和产蛋初期的含量,且甘油三酯在产蛋后期的含量与开产前和产蛋初期的含量差异显著(P<0.05)。谷丙转氨酶、谷草转氨酶在产蛋高峰期和产蛋后期的含量显著高于开产前和产蛋初期的含量。通过本研究,为进一步保护和开发利用藏鸡资源提供参考。

瑶山鸡公鸡300日龄体尺性状与屠宰性能的相关性及主成分分析

为探究瑶山鸡公鸡体尺性状与屠宰性能之间的关系,试验对300日龄瑶山鸡公鸡体尺(体斜长、龙骨长、胸围、胫长、髋骨宽)及屠宰性能(宰前活重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重)的11个指标进行测定,并进行简单相关性分析及主成分分析。结果:瑶山鸡公鸡的屠宰率、全净膛率分别为86.92%、77.87%,除胸肌重、腿肌重外其他指标变异系数均低于10%。宰前活重、屠体重、半净膛重、全净膛重与体斜长、胫长、胸围均呈极显著正相关(P<0.01),与髋骨宽呈显著负相关(P<0.05);体斜长与腿肌重呈极显著正相关(P<0.01),与胸肌率呈显著负相关(P<0.05);胫长与胸肌重、腿肌重、屠宰率呈极显著正相关(P<0.01),与半净膛率、全净膛率呈显著正相关(P<0.05);胸围与胸肌重、胸肌率呈极显著正相关(P<0.01),与腿肌重呈显著正相关(P<0.05)。提取的前3个主成分分别与屠宰质量、胸肌重、髋骨宽密切相关,累计贡献率达83.952%。结论:300日龄瑶山鸡公鸡的胸肌重、腿肌重具有较大的选育空间,体斜长、胫长、髋骨宽可作为公鸡屠宰性能的间接选择指标。

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3对鸡前脂肪细胞分化的抑制作用

【目的】解析细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(cyclin-dependent kinase inhibitor 3,CDKN3)在鸡前脂肪细胞分化中的作用,为阐明脂肪沉积的分子机制奠定理论基础。【方法】构建荧光表达载体pECFPCDKN3,转染至鸡永生化前脂肪细胞系(immortalized chicken preadipocyte cell line,ICP1),观察CDKN3蛋白的亚细胞定位;采用油酸钠诱导ICP1分化,qRT-PCR检测分化过程中CDKN3 mRNA表达水平;将pCMVHA-CDKN3和pCMV-HA分别转染到ICP1中,转染24 h后进行诱导分化,通过油红O染色检测脂肪细胞分化情况,并利用qRT-PCR检测过表达CDKN3后脂肪分化相关基因的mRNA表达水平。【结果】转染了pECFP-CDKN3的细胞主要在细胞核中呈青色荧光信号,提示鸡CDKN3定位于细胞核;在诱导ICP1成脂分化的过程中,CDKN3 mRNA表达量逐渐升高;油红O染色结果显示:过表达CDKN3细胞内脂滴聚集减少,且脂肪分化相关基因C/EBPα、PPARγ、FABP4和FAS的表达水平均呈下降趋势,其中FAS显著下降(P<0.05),PPARγ极显著下降(P<0.01)。【结论】CDKN3是核蛋白,可抑制鸡前脂肪细胞分化。

不同产蛋阶段藏鸡与罗曼粉、海兰褐蛋鸡生殖系统解剖生理特性的比较研究

为探究藏鸡与高产蛋鸡(罗曼粉、海兰褐)产蛋量差异的解剖生理学基础,在一个产蛋周期内对三种鸡血清促卵泡素(FSH)和雌激素(E_(2))值、输卵管发育解剖学及组织学的变化规律进行研究。按品种分3组,选用开产前期、开产期、产蛋高峰期、产蛋后期(分别为16、25、36、68周)的藏鸡、罗曼粉蛋鸡和海兰褐蛋鸡各80只,测定3种鸡不同时期血清FSH、E_(2)水平;在各周龄段随机取20只鸡,观察输卵管的发育情况及组织学特征。结果显示:①各组组间比较显示,在产蛋后期藏鸡组与海兰褐组血清FSH水平存在显著差异(P<0.05),其他时期藏鸡组与罗曼粉、海兰褐组FSH水平差异不显著(P>0.05);组内比较结果显示,3组鸡血清FSH水平在产蛋高峰期最高,与开产前期差异显著;3组鸡血清E_(2)水平组间比较显示在4个时期藏鸡血清E_(2)水平与罗曼粉、海兰褐蛋鸡存在显著差异(P<0.05),其中罗曼粉蛋鸡和海兰褐蛋鸡血清E_(2)水平差异不显著(P>0.05);组内比较显示,产蛋高峰期E_(2)水平最高,与开产前期和产蛋后期差异显著(P<0.05);②藏鸡组输卵管长度、重量与其他两组在不同产蛋阶段均有显著差异(P<0.05);组内比较结果显示,3组鸡产蛋高峰期输卵管的长度、重量指标均显著高于产蛋前期和产蛋后期(P<0.05);③藏鸡组在不同产蛋阶段输卵管各段黏膜皱襞高度、宽度指标(除开产前期峡部黏膜皱襞宽度外)均显著低于其他两组(P<0.05)。藏鸡生殖激素水平在不同产蛋阶段与高产的罗曼粉、海兰褐蛋鸡均存在差异,进而造成了藏鸡与其他两种蛋鸡在解剖学、组织学上的差异。生殖激素及输卵管的发育与鸡的产蛋性能密切相关,因此要提高藏鸡的产蛋性能和繁殖性能,需要进一步找到调控藏鸡生殖激素分泌的体内外因素。

鸡新城疫抗体消长规律及血清抗体稳定性

为研究鸡新城疫灭活疫苗免疫后抗体消长规律及血清抗体稳定性,采用血凝抑制试验方法测定新城疫病毒-禽流感病毒(H9亚型)二联灭活疫苗免疫鸡血清新城疫抗体效价及经室温、4℃、-20℃、-80℃反复冻融和加热等不同方式处理的血清中新城疫抗体效价。结果表明,试验鸡于1日龄和21日龄用灭活疫苗免疫两次后,在第二次免疫后14 d新城疫抗体平均效价达到8.1 log_(2),35 d达到最高值为8.9 log_(2);免疫后70 d抗体效价保持在7.8 log_(2),且自二免后14~70 d,新城疫抗体效价维持在7.8 log_(2)~8.9 log_(2)。血清新城疫抗体在室温和4℃相对稳定,室温下放置13 d对新城疫抗体效价几乎无影响;但4℃保存9 d,对新城疫抗体效价有一定影响,且差异显著(P<0.05);56℃下30 min对新城疫抗体效价无影响;反复冻融3次对新城疫抗体效价影响极显著(P<0.01)。肉鸡于1日龄和21日龄用灭活疫苗免疫两次后,新城疫抗体水平高,且高水平抗体维持时间长。鸡血清新城疫抗体可耐56℃加热,室温保存活性稳定,反复冻融则影响其效价。

输卵管的结构及其对蛋壳膜形成的影响

鸡蛋是国民餐桌上不可或缺的食物,市场对鸡蛋的需求量巨大,了解鸡蛋的形成过程及其相关的影响因素,对提高蛋鸡养殖产业的经济效益十分重要。鸡蛋主要由蛋黄、蛋清、蛋壳膜和蛋壳等几部分组成。蛋壳膜可分为壳内膜和壳外膜两层,在蛋壳最外层又覆盖一层蛋白质透明薄膜,称为角质膜(胶护膜),具有重要的保护和调节功能。蛋壳膜是影响鸡蛋品质的重要因素之一.

基于系统生物学分析探究热应激诱导鸡肠道损伤的作用机制

【目的】利用系统生物学分析和鸡胚十二指肠上皮细胞模型探究热应激诱导肠道损伤的作用机制,筛选出家禽热应激诱导肠道损伤的作用靶标,为缓解热应激诱导的肠细胞氧化应激提供理论支撑。【方法】基于NCBI数据库筛选热应激诱导肠道损伤的作用靶标,通过GO功能注释和KEGG信号通路富集分析获得相关代谢通路;分离鸡胚十二指肠上皮细胞构建42℃热应激模型,通过检测细胞损伤病理、细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性、抗氧化酶活性、丙二醛(MDA)含量及关键基因(Nrf2和HSP70)表达情况等,进一步确认热应激对肠细胞的损伤作用。【结果】将热应激作用靶标与肠道损伤作用靶标取交集,共获得23个热应激诱导肠道损伤的作用靶标,分别是BCL2、CD4、CFTR、ERN1、FOXM1、FOXP3、HMOX1、HSF1、HSP90AA1、HSP70、HSPA4、HSPA8、JUN、MAPK1、MTOR、NFKB1、NLRP3、PLK1、RHOB、SIRT1、SUMO_(2)、TP53和YAP1。KEGG信号通路富集分析发现热应激诱导肠道损伤与NOD-样受体信号通路、沙门氏菌感染、凋亡、细胞衰老及内质网内蛋白加工等有关;GO功能注释分析发现热应激诱导肠损伤与细胞缺氧反应、细胞对镉离子反应、细胞对热反应及热休克蛋白结合等有关。鸡胚十二指肠上皮细胞体外热应激模型验证发现,热应激能导致鸡胚十二指肠上皮细胞空泡变性,严重时则导致细胞核浓缩深染的变性坏死;热应激还会引起鸡胚十二指肠上皮细胞的活性降低,而细胞上清液中的LDH含量升高;此外,随着热应激时间的延长,鸡胚十二指肠上皮细胞内的MDA含量不断上升,而超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性均呈下降趋势;热应激导致鸡胚十二指肠上皮细胞内Nrf2基因表达下调、HSP70基因表达上调。【结论】细胞内氧化—抗氧化失衡是热应激诱导肠道损伤的重要因素,而热休克蛋白是机体激活细胞抵御热应激损伤的重要保护机制。

边鸡及其杂交组合肌肉品质的比较分析

试验通过比较广西麻鸡与边鸡杂交F_(1)代和回交1代及纯繁边鸡的肉质指标差异,探讨其杂交改良效果,随机选取112日龄的广西麻鸡(♂)与边鸡(♀)杂交F_(1)代、杂交F_(1)代(♂)与边鸡(♀)回交1代和纯繁边鸡母鸡各18只,测定肌肉的常规营养成分、脂肪酸含量和氨基酸含量,并进行营养价值评价。结果表明,边鸡和回交1代腿肌粗脂肪含量显著高于F_(1)代(P<0.05);F_(1)代胸肌粗蛋白含量最高,腿肌粗蛋白含量显著高于回交1代和边鸡(P<0.05);边鸡腿肌的各类脂肪酸含量显著高于F_(1)代和回交1代(P<0.05);F_(1)代胸肌鲜味氨基酸含量显著高于回交1代和边鸡(P<0.05),回交1代和边鸡甜味氨基酸含量显著高于F_(1)代(P<0.05),边鸡腿肌的芳香类氨基酸含量显著高于F_(1)代和回交1代(P<0.05)。综上可得,杂交组合的肉品质具有高蛋白、低脂肪、鲜味氨基酸含量高的特点,且杂交F_(1)代在提高边鸡生长性能的同时还提升了边鸡胸肌的鲜味。

基于图像处理的鸡冠面积和色级测定方法研究

鸡冠形态是鸡第二性征中最明显最主要的特征,测定鸡冠的面积和色级对于科研和生产具有重要的指标参照与辅助判断作用。为准确获取鸡冠的真实性状,设计一种通过对鸡冠图像处理并提取特征进行面积和色级测定的方法,以500只健康的90日龄邵伯鸡(公母各半)作为样本,采集样本图像中鸡冠部位进行分析,获得颜色特征数据,采用K-means聚类法提取7个聚类中心作为色级指标。制作带有参照块图案的专用测定板,利用参照块对测定图像进行畸变矫正与偏色校正调整,通过轮廓离散点集像素面积算法与色差距离算法得到鸡冠的面积与色级。以数字平面成像模拟验证法进行测定结果验证:面积测定值与设定值的相对误差范围为0.11%~4.84%,平均相对误差为2.24%;色级准确率为96.67%。结果表明该方法测定准确性高,为快速有效获取鸡冠性状参数提供一种全新的测定方法。

淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前卵泡颗粒细胞发育的影响

为探究淫羊藿素和山柰酚对鸡卵泡发育的作用,试验通过MTT法分析不同浓度的淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前颗粒细胞活性的影响并确定最佳浓度,通过实时荧光定量PCR检测淫羊藿素和山柰酚对鸡等级前颗粒细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、促卵泡素受体(FSHR)和雌激素受体α(ERα)mRNA表达的影响;通过卵巢组织离体培养,分析淫羊藿素和山柰酚对卵巢组织卵泡发育的影响。结果显示:淫羊藿素和山柰酚均在浓度为1×10^(-4)mol/L时可以显著促进颗粒细胞的增殖,同时可以促进颗粒细胞中PCNA、FSHR和ERαmRNA的表达(P<0.01);淫羊藿素和山柰酚作用的卵巢组织中的卵泡数量明显增多,且颗粒细胞由单层增殖至多层。研究表明,淫羊藿素和山柰酚能够促进等级前卵泡颗粒细胞的增殖,促进FSHR和ERαmRNA的表达,从而促进等级前卵泡向等级卵泡的发育。