新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及上皮内淋巴细胞和杯状细胞的数量变化

应用组织学和组织化学方法研究了1日龄和20日龄新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及部分黏膜免疫相关细胞的分布与数量变化规律。结果显示，从1日龄到20日龄，小肠绒毛变短，尤其十二指肠的绒毛长度约缩短了61．58％（P〈0．05），绒毛长度与隐窝深度比值（V／C比值）减小了59．04％～91．32％（P〈0．05）；而黏膜和肌层厚度分别增加了8．66％～41．28％和36．22％～299．10％。小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量随年龄增长而逐渐增多（P〈0．05），20日龄比1日龄分别增加了78．80％～163．05％和28．23％～101．46％；但比较同一年龄的小肠不同肠段，从十二指肠至回肠，上皮内淋巴细胞的数量逐渐减少，而杯状细胞的数量则呈增多趋势。

鸡盲肠扁桃体中B淋巴细胞的发育

通过免疫组织化学方法,应用IgMI、gG和IgA单克隆抗体研究了IgM＋I、gG＋和IgA＋B淋巴细胞在鸡盲肠扁桃体中的出现、迁移、组织定位分布以及数量变化规律等一系列发育过程。结果显示,IgM＋细胞在胚胎20日龄时开始出现,而IgG＋和IgA＋细胞均在雏鸡出壳后1日龄时出现。在定位分布变化上,4日龄之前,B淋巴细胞主要分布在黏膜上皮下固有层中;4~7日龄时,B淋巴细胞则主要分布在黏膜固有层的中上部区域,随后各日龄B淋巴细胞均匀地分布在黏膜固有层中;14日龄时,黏膜固有层中出现主要由B淋巴细胞组成的生发中心,21日龄时可见轮廓更清晰的生发中心存在于黏膜固有层中下部区域,并且生发中心中存在大量的IgM＋I、gG＋和IgA＋细胞。在数量变化上,B淋巴细胞随着日龄增长数量持续增加,直至35日龄时趋于稳定,各日龄的B淋巴细胞数量始终以IgM＋细胞最多,IgA＋细胞次之,IgG＋细胞最少。证实,鸡出壳后初期盲肠扁桃体的体液免疫功能逐渐增强,并在35日龄时达到成熟水平。

山羊肥大细胞组织化学及形态学研究

用甲苯胺蓝和阿尔辛蓝组织化学方法,对山羊肥大细胞的组织化学特性及形态学结构进行研究。结果表明,山羊组织采用Carnoy氏液固定,甲苯胺蓝和阿尔辛蓝染色对所有的肥大细胞均可获得良好的染色反应。但中性福尔马林固定的组织仅有少量肥大细胞着染。对山羊粘膜肥大细胞进行超微结构观察,胞浆颗粒内除有无定形颗粒状基质外,可见蜂窝状、空泡状、旋涡状、指纹状及杆状等特殊结构。山羊粘膜肥大细胞和结缔组织肥大细胞之间存在着组织化学及形态学异质性。

小鼠空肠肥大细胞组织化学及超微结构研究

通过对小鼠小肠肥大细胞(MC)的分布特征及显微结构进行研究,揭示MC在小肠中可能的功能。将组织固定于Carnoy’s液中,常规包埋、切片,甲苯胺蓝染色法显示MC,采用透射电镜对MC的超微结构进行观察。结果显示:①MC主要分布于小肠的黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜,小肠绒毛上皮细胞间亦可见较多的MC存在;②透射电镜观察发现在上皮细胞间也可见有MC分布,MC颗粒未见特殊结构。MC广泛分布于小肠各层,尤其在上皮细胞间有大量MC存在,表明其可能是构成小肠黏膜免疫和调节小肠运动的重要细胞。

乌骨山羊皮肤黑色素细胞的分布及特征

试验采用免疫组织化学染色对乌骨山羊不同被毛颜色皮肤中的黑色素细胞进行定位,再用多巴组织化学染色法对皮肤中有黑色素分泌的黑色素细胞进行定位,以HE染色法对黑色素细胞的形态进行观察。免疫组织化学染色结果显示,乌骨山羊皮肤中的黑色素细胞主要分布在表皮基底层和毛囊中;多巴组织化学染色结果显示,表皮中没有阳性反应,黑色被毛毛球部及外根鞘均有阳性反应,白色被毛毛球部及外根鞘则没有阳性反应,说明黑色被毛毛球部及外根鞘有成熟的黑色素细胞存在并能合成黑色素。HE染色结果显示,黑色被毛毛囊外毛根鞘中的黑色素细胞和周围细胞区分明显,呈空泡状和活化状态,周围有大量黑色素颗粒分布,白色被毛毛囊外根鞘黑色素细胞呈椭圆状,没有黑色素产生,和周围细胞难以区分。因此,乌骨山羊黑色被毛毛囊外根鞘中黑色素细胞的活化可能参与了乌骨山羊毛色和乌质性状的形成。

Enramycin在鸡体内残留分析研究

本文报道了Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ在鸡体内的残留分析结果。供分析的组织经胃蛋白酶消化，甲醇及盐酸混合液抽提，ＸＡＤ－２柱分离杂质、薄层层析及枯草杆菌ＡＴＣＣ６６３３生物显像，进行定性及定量分析。此法在肝、肾、肌肉、脂肪组织和血中Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ的回收率分别为５７．７０％、４６．６５％、１４．８０％、３９．３５％及４６．６０％，其敏感度为２５ｐｐｂ。测试样来自喂饲１０ｐｐｍＥｎｒａｌｎｙｃｉｎ８周的试验鸡，分别于停药后０、２４、４８ｈ取样。采用上述方法进行分析，结果显示即使停药后立即采样，组织抽提物均不出现Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ抑菌圈，说明其残留量低于２５ｐｐｂ。

Masson三色染色与HE染色在豚鼠牙齿组织石蜡切片中的比较研究及应用

针对牙齿组织形态学研究的难点,选择适宜固定液,用EDTA-2Na进行脱钙,完成了牙齿组织石蜡切片的制作。通过确定染色程序及各种染料的最佳作用时间,分别利用Masson三色染色法、传统的苏木精和伊红(HE)染色法对牙齿组织切片进行了染色观察。染色结果表明,与HE染色法相比,Masson三色染色更能使牙齿的各主要成分以不同颜色显现出来,色彩对比鲜明,亮丽润眼,为牙齿组织生理及病理组织形态学研究奠定了基础。针对机体中硬组织的相似特性,该试验方法可以在骨骼、软骨等硬组织的形态学研究中参考、改进并推广使用。

山羊子宫内肽能神经分布及妊娠时的变化

采用免疫组化方法 ,研究了山羊子宫内含 P物质 ( SP)和含血管活性肠肽 ( VIP)神经的分布。结果 ,妊娠及未妊娠山羊子宫颈内有粗细不等的神经束行经于外膜和肌层中 ,神经分支形成丛状分布于血管壁 ,子宫颈部未见 SP神经元胞体及 VIP神经元胞体 ;未妊娠山羊子宫角内 SP神经和 VIP神经均呈丛状围绕血管并分布于血管壁 ;妊娠中期的孕角和非孕角均有胎盘形成 ,除胎盘内无神经分布外 ,SP神经及 VIP神经同样分支形成丛状分布于血管壁。结果提示 ,山羊子宫内 SP神经和 VIP神经主要支配子宫内血管 ,妊娠时除胎盘内无神经分布外 ,SP神经及

热应激大白鼠脾脏和肝脏组织HSP70和NOS的表达变化

随机选用42只6月龄健康雄性SD大白鼠,研究热应激处理1 h后恢复0、2、4、8、12、48 h6个时段脾脏和肝脏组织热应激蛋白70(HSP70)和一氧化氮合成酶(NOS)免疫组织的化学变化规律.结果表明:(1)热应激处理后恢复4 h,大白鼠脾脏组织HSP70的阳性表达达到高峰,大量细胞破裂,8 h后呈逐渐下降的趋势;恢复0、2、4、8、12 h的阳性表达与对照的差异均达极显著水平(P<0.01),恢复48 h的阳性表达与对照的差异不显著(P>0.05).(2)热应激处理后各恢复期肝脏组织HSP70的阳性表达与对照的差异均不显著(P>0.05).(3)热应激处理后恢复8 h,肝脏组织NOS的阳性表达达到高峰,而后逐渐下降;恢复0、2、4、8、12 h的阳性表达与对照的差异均达极显著水平(P<0.01);恢复48 h的阳性表达与对照的差异不显著(P>0.05),恢复0、2、4、8、12 h间的阳性表达差异均达极显著水平(P<0.01);(4)热应激处理后各恢复期脾脏组织NOS的阳性表达与对照的差异均不明显.

影响免疫组化染色的因素分析

免疫组织化学染色是应用抗体结合组织中特异性抗原的特殊染色方法,广泛应用于肿瘤病理诊断和神经解剖学。但是,免疫组化试验操作步骤繁多,在实际操作过程中经常遇到一些问题,这就需要认真分析问题的原因,找到解决问题的方法。笔者就此问题展开论述。

禽类输卵管精子腺组织学与组织化学研究

采用解剖学、组织学及组织化学方法,观察了鸡、鸭、鹅、鹌鹑的输卵管精子腺形态学特点。结果表明,禽类输卵管精子腺是由单层柱状上皮或锥形细胞围绕而成的单管状腺,分布于黏膜固有层内;含输卵管精子腺的环状黏膜带的宽度因输卵管的机能状态及种类不同存在差异;鸡、鹌鹑和鹅的输卵管精子腺细胞,在产卵期和休止期均呈过碘酸雪夫染色(PAS)阳性反应,而鸭呈PAS阴性反应;产卵期和休止期鸡精子腺细胞,均呈脂肪染色强阳性反应,而鸭、鹅、鹌鹑的精子腺细胞呈阴性反应。

促性腺激素释放激素在不同品种母牛垂体中的免疫组化定位

为了掌握促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体在不同品种母牛垂体中的变化规律,采用免疫组化SP染色法分别对广西沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛、广西本地黄牛垂体中GnRH的分布表达进行对比研究。结果表明,不同品种母牛垂体中均发现有呈棕黄色或黄褐色的GnRH阳性物质存在,经Image-Pro Plus 6.0软件统计发现,摩拉杂交母水牛的GnRH免疫阳性细胞较其他3个品种的大(P<0.05),而平均光密度值介于荷斯坦母奶牛和广西本地母黄牛之间(P>0.05)。在神经垂体中仅发现GnRH免疫阳性纤维,而未发现GnRH免疫阳性细胞;在腺垂体远侧部的细胞均呈GnRH免疫反应阳性,阳性物质主要分布在腺垂体远侧部嫌色细胞和嗜色细胞胞质内。说明GnRH对腺垂体激素分泌的调节可能是直接通过神经调节,而神经垂体可能只是GnRH调节过程的通路。

猪卵巢发育的组织学观察及磷酸二酯酶3A的表达研究

为研究母猪卵巢在不同发育阶段的组织学变化规律和探讨磷酸二酯酶3A(PDE3A)在卵巢发生发育和成熟过程中的生物学意义,选用二花脸母猪胎90日龄及1日龄、20日龄、120日龄和180日龄的母猪卵巢进行组织学观察,并利用RT-PCR检测PDE3A mRNA的表达情况。结果显示:胎90日龄主要由原始卵泡组成;1日龄、20日龄、120日龄卵巢内特征发育明显;180日龄卵巢内的形态特点与120日龄相似。卵巢PDE3A mRNA表达水平在20日龄时与其他各个阶段相比显著降低。提示:PDE3A在猪从原始卵泡募集到初级卵泡形成过程中可能具有生物学作用。

不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响

通过比较不同冷冻保存方法和冷冻保护剂对小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻-解冻复苏后细胞存活率、48h贴壁率和细胞生长曲线的影响,筛选适宜的小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存方法和冷冻保护剂。结果表明,以100mL/L二甲基亚砜(DMSO)作为冷冻保护剂进行小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存时,方法3处理组解冻复苏后细胞存活率和培养48h细胞贴壁率均高于方法2处理组(P>0.05),并分别极显著高于方法1和方法4。采用方法3进行冷冻保存时,以100mL/L DMSO作为冷冻剂的细胞贴壁率显著高于100mL/L甘油(GL)组(P<0.05),且冷冻解冻后的细胞呈现正常的分裂增殖生长模式。因此,宜选择100mL/L胎牛血清(FBS)+100mL/L DMSO+DMEM作为冷冻保护液,采用方法3进行小鼠耳皮肤成纤维细胞的冷冻保存。

流感病毒受体在三种动物气管和肺脏分布的组织化学检测

利用凝集素组织化学染色的方法,对岭南黄鸡、番鸭和BALB/C小鼠的气管和肺脏进行了流感病毒受体分布的检测。结果表明:在岭南黄鸡、番鸭和小鼠的气管粘膜层、粘膜下层、肺脏的细支气管和肺泡上皮细胞均有禽流感病毒受体的分布。番鸭和小鼠气管和肺脏的人流感病毒受体的分布范围和细胞类型与禽流感病毒受体的分布稍有差异,岭南黄鸡气管和肺脏未检测到人流感病毒受体的分布。研究结果为探讨流感病毒的感染机制和宿主特异性的差异提供了基础数据。

促性腺激素释放激素在不同品种水牛卵巢中的免疫组化定位

【目的】了解促性腺激释放激素(GnRH)在广西沼泽型水牛与摩拉杂交水牛卵巢中定位表达的异同点,为深入阐明GnRH调节卵巢功能的机制提供理论依据。【方法】采用免疫组化SP染色法对广西沼泽型水牛和摩拉杂交水牛卵巢中GnRH及其受体的分布表达进行对比研究。【结果】两种不同品种水牛卵巢中均存在大量的GnRH阳性细胞,且主要位于颗粒层细胞和黄体粒细胞的胞质内;通过比较显示,两种不同品种水牛卵巢GnRH阳性细胞个数差异极显著(P<0.01),但GnRH阳性细胞大小及其平均光密度的差异均不显著(P>0.05)。【结论】不同品种水牛卵巢的GnRH分布差异可能与繁殖性能有关,但主要分布于巢卵颗粒层细胞和黄体粒细胞的胞质内。

天然草场土壤、牧草中重金属含量对放牧家畜的影响

对青海省3个主要天然放牧草场中土壤、牧草和家畜中汞、砷、镉、铅重金属的累积与迁移规律进行研究。结果表明,黄南州河南县和海南州共和县土壤中汞含量超过限量值,海北州祁连县土壤中镉含量超过限量值,其他指标均符合标准要求。牦牛肌肉、羊肌肉中铅含量与饲养环境中土壤、牧草中铅含量均无显著相关关系(P>0.05),与饲养环境牧草中砷、汞含量也无显著相关关系(P>0.05),牦牛肌肉中汞、镉含量与饲养环境土壤、牧草中汞、镉的含量具有显著相关关系(P<0.05),羊肌肉中砷含量与饲养环境土壤、牧草中砷的含量具有显著相关关系(P<0.05)。从总迁移系数看,汞的迁移系数最大,其次为砷。汞、砷向羊肌肉中的迁移系数大于牦牛肌肉,镉向牦牛、羊肌肉迁移的系数最小。

促性腺激素释放激素在不同品种公牛睾丸中的免疫组化定位

为了掌握促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体在不同品种公牛睾丸中的变化规律,采用免疫组化SP染色法分别对广西沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛、广西本地黄牛睾丸中GnRH的分布表达进行对比研究。结果表明,不同品种公牛睾丸生精细胞和间质细胞中均有GnRH免疫阳性物质存在,经Image-Pro Plus 6.0软件统计发现,荷斯坦奶牛睾丸的GnRH阳性细胞个数最多、胞体最大,而广西本地黄牛睾丸的GnRH阳性细胞数量最少、胞体最小,说明GnRH在不同品种公牛睾丸的分布差异可能与生产性能有关,也提示GnRH在生殖调控中除能刺激垂体分泌FSH、LH外,可能直接与生殖器官发生作用,通过旁分泌、自分泌、神经分泌等多种方式调节蛋白类、多肽类激素的分泌及类固醇激素的产生,进而调节这些靶细胞和靶器官的功能活动。

橙皮素对铅致大鼠脑组织氧化损伤的保护效应

为研究铅暴露所致大鼠脑组织氧化损伤和橙皮素的保护作用机制,大鼠用醋酸铅(500mg Pb/L)和橙皮素(50mg/kg)处理。处理结束后测定大鼠脑组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量。结果表明,铅可显著提高大鼠脑组织中MDA含量(P<0.05),极显著降低GSH含量(P<0.01)和显著降低SOD和CAT活性(P<0.05);与铅处理组相比,橙皮素却能显著降低铅处理脑组织MDA含量(P<0.05),极显著提高GSH含量(P<0.01)和显著提高SOD和CAT活性(P<0.05)。说明铅可导致大鼠脑组织脂质过氧化损伤,橙皮素对铅致脑损伤具有一定保护作用。

羊驼副性腺结构的组织化学研究

为了解羊驼的生殖生理特性,采用大体解剖与组织学方法对羊驼副性腺的形态结构进行了研究。结果显示,羊驼副性腺有前列腺和尿道球腺,没有精囊腺。尿道球腺呈圆形,位于坐骨弓处,前列腺位于尿生殖道起始部的背侧,每一腺体都有腺管开口于尿生殖道;羊驼副性腺的基本组织结构和其他哺乳动物相似,但有较小的差异。尿道球腺为有许多弯曲分枝的复管泡状腺,分泌物较为黏稠,PAS染色强阳性,呈鲜红色;前列腺为复管泡状腺,前列腺的分泌物是一种稀薄的蛋白样液,PAS染色阳性,染色较浅。结果证实,羊驼前列腺和尿道球腺可分泌较多的糖物质,使精子生存较长时间;羊驼繁殖慢的特点可能与其生存环境差,易造成流产或妊娠期长且为单胎有关,而并不是精液本身的问题。