银狐源沙门菌的分离鉴定、致病性及耐药性检测

为了解秦皇岛地区不同养殖场中银狐源沙门菌致病性、耐药情况及耐药基因的携带情况,本研究2019—2021年采集秦皇岛地区不同养殖场中患腹泻病银狐的肛拭子、粪便等病料组织194份,采用RT-PCR、PCR方法对采集的样品检测其犬瘟热病毒、轮状病毒及犬细小病毒;采用细菌常规分离鉴定、PCR方法进行沙门菌鉴定,采用人工感染小白鼠试验、K-B药敏纸片法和PCR法分别检测沙门菌的致病性、耐药性及耐药基因型。结果显示,犬瘟热病毒、冠状病毒及犬细小病毒检测为阴性;从194份病料组织中分离得到101株沙门菌,其中78株沙门菌分离菌株对小白鼠具有致病,死亡率为40%~100%;78株致病性沙门菌对氨苄西林、阿莫西林、土霉素等9种药物耐药率在50%以上,对其他药物耐药率为5.1%~32.1%,以耐12、11、10种药物为主;耐药基因Sul1、Sul2、Sul3、aac(3)-Ⅰv、aac(6')-Ⅰb、TetA、TetM、TetR检出率在48.7%以上,其他耐药基因检出率为7.7%~21.8%,除了多粘菌素类药物,耐药表型与耐药基因之间存在相关性。本研究对该地区银狐源沙门菌病防控提供参考依据。

阿留申病毒阳性水貂选种简易方法的建立与效果评估

通过从阿留申病毒阳性水貂筛选具有抵抗力的水貂,达到抗病毒育种的目的。第1年选留种后通过临床观察,把不健康水貂直接淘汰。第2年选种方法,除临床表现不健康的水貂淘汰外,趾尖采血,淘汰血浆比例高于50%以上水貂;第3年,除第2年的方法外,应用血清折光仪测定血浆中总蛋白的值,按35%比例从高往低淘汰。3年时间不同选种方法对比,逐年检测和淘汰,通过红细胞和血浆比例筛查及血清折光仪检测后,水貂产仔数接近阿留申病毒阴性水貂,可以应用此法逐年筛选出抗阿留申病毒的水貂种群,提高产仔数减少农场的损失。

一例赤狐耳血肿病例的诊治

耳血肿是犬科动物常见疾病之一。为探讨赤狐耳血肿诊治技术,上海动物园对1只患耳血肿的赤狐进行诊治。结合患病赤狐的发病情况、临床检查及实验室检测结果进行诊断,保守治疗效果不佳,复发后采用手术疗法进行治疗,耳血肿症状改善,患病赤狐恢复健康。

卵黄抗体在毛皮动物疾病防治中的应用

毛皮动物疾病防治对于促进毛皮动物养殖产业可持续发展具有深远意义,为降低因毛皮动物疾病引发的毛皮动物养殖产业发展滞后的情况,本研究通过卵黄抗体在毛皮动物疾病防治中的应用进行讨论,分析与讨论了卵黄抗体在毛皮动物防治中的优势,提出了卵黄抗体在毛皮动物防治中的应用,并提出相应措施及方法,以此为有关学者提供参考帮助及建议。

石家庄地区貉源大肠杆菌分离鉴定及毒力与耐药性分析

为了探明河北石家庄地区5个貉养殖场发生肺炎死亡的原因,对病貉肺脏组织进行病原菌分离鉴定,共分离到5株大肠杆菌(DC1、DC2、DC3、DC4和DC5),并对分离菌的耐药性、耐药基因、致病性和毒力基因等进行研究。分离菌在MAC、SS和EMB培养基上长出菌落颜色分别为粉红色、红色和绿色金属光泽,革兰氏染色为革兰氏阴性短杆菌;生化试验结果符合大肠杆菌特性;16S rRNA测序结果与大肠杆菌序列的同源性超过99%;5株分离菌对青霉素、阿莫西林、四环素、甲硝唑和林可霉素的耐药率为100%;blaTEM和tetC耐药基因检出率均为100%,tetA检出率为80%;小鼠致病性试验结果显示,5株分离菌均可导致小鼠死亡,但小鼠死亡时间和只数范围存在差异;ECs3703和ECs3737毒力基因检出率为100%,iutA和iucD检出率为80%。研究表明,本次从石家庄地区分离到的貉大肠杆菌具有很强的耐药性和致病力,且携带有多种耐药基因和毒力基因。

水貂缓慢葡萄球菌和奇异变形杆菌混合感染的病原分离与鉴定

为探明辽宁省大连市某养殖场水貂死亡原因,本研究从送检死亡水貂的趾间溃烂病灶、肺脏、肝脏和脾脏等组织样品中分离得到2株病原菌,进行细菌鉴定、动物致病性试验和药敏试验,经16S rRNA基因序列比对和系统进化分析表明,2株病原菌分别为缓慢葡萄球菌和奇异变形杆菌。动物致病性结果显示,2株病原菌均能引起小鼠死亡。药敏试验结果表明,缓慢葡萄球菌对氨基糖苷类多数抗生素敏感,其他类抗生素偶有敏感,奇异变形杆菌对β-内酯胺类和氨基糖苷类抗生素敏感。此次引起水貂死亡的病原菌为缓慢葡萄球菌和奇异变形杆菌,具有较强的致病性和多重耐药性,治疗首选药物为氨基糖苷类抗生素。

狐妊娠期化脓性子宫内膜炎诊治

狐子宫内膜炎是母狐子宫黏膜的黏液性或化脓性炎症,是母狐常见的一种生殖器官疾病,多见于产后。近几年来临床发现部分妊娠母狐由于配种期饲养管理不当,时有化脓性子宫内膜炎发生。该病多发生在母狐配种后25 d左右,多数由假单胞菌属中的绿脓杆菌感染造成。该病常在部分养狐场的配种期流行,其多与配种时母狐阴道黏膜损伤有关,易导致母狐败血症,死亡率较高。

貉子黄脂肪病的防治技术要点

在貉子的养殖过程中,貉子黄脂肪病一年四季均可发生,但以秋季节多见,多发生于当年生长迅速体质过胖的幼貉,成年貉也时有发生。狐黄脂肪病主要是由于长时间饲喂变质腐败的动物性饲料,特别是在冷库中贮存时间过久脂肪含量高的鱼类、鸡、鸭骨架和猪产品下脚料以及饲料中长期缺乏VE引起。笔者通过多年临床积累的经验现对貉子黄脂肪病的发生和防治进行梳理阐述,希望通过本文为广大的貉子养殖户朋友们提供借鉴依据,减少本病的发生。

2021年狐狸病毒性疾病检测分析

狐狸的病毒性疾病是威胁蓝狐生长繁殖的重要疾病类型之一,本文通过对2021年蓝狐的病毒性实验室诊断结果进行分析总结,以期初步掌握2021年蓝狐病毒性疾病发病情况。检测结果显示,蓝狐感冒病毒的检出率占比为65%,犬瘟热检出占比为29%,病毒性肠炎检测占比为6%,表明2021年蓝狐感冒病毒发病较为严重,犬瘟热和病毒性肠炎仍然有检出,提示广大养殖同仁应在生物安全和免疫程序等环节加以重视。

一例貉源细小病毒病的诊断与防治

山东泰安地区一貉养殖场发生疑似貉细小病毒病例,利用细胞接种、PCR扩增、间接免疫荧光实验等实验室诊断方法,成功分离鉴定一株貉细小病毒,经TCID50、血凝实验测得该细小病毒具有较强毒力。结果表明,貉细小病毒在泰安地区貉养殖场内持续存在,指导该养殖场进行药物治疗,紧急接种疫苗。针对细小病毒变异性强的特点,需要研制针对性强的疫苗进行免疫接种。

水貂蛋白质及氨基酸营养研究进展

针对我国水貂饲养的特点 ,回顾了国内外水貂蛋白质及氨基酸营养研究进展 ,分别从水貂消化道和蛋白酶分泌特性 ,不同蛋白质水平对水貂生长发育、繁殖和毛皮质量的影响 ,蛋白质合成、分解、转运 ,氨基酸需要以及葡萄糖动态平衡等方面进行了探讨 ,并提出了进一步的研究方向。

我国毛皮动物主要传染病防控现状及防控建议

文中对我国毛皮动物主要传染病流行特点和防控现状进行了概述,总结了毛皮动物传染病防控制剂研究现状,并提出了毛皮动物传染病防控建议。

毛皮动物自咬症与大脑神经细胞脂质过氧化关系初步分析

分析了当前一些解释肉食性毛皮动物自咬症产生原因的假说,指出了其中存在的矛盾和问题。并根据水貂等肉食性毛皮动物食物的结构,结合目前人类自咬症模型的产生机理等相关研究结果,认为水貂自咬症的产生可能与动物性食物脂肪氧化导致的大脑神经细胞脂质过氧化及动物机体的抗氧化能力有关。

水貂沙门氏菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为指导临床合理用药并为治疗患病水貂提供依据,本试验对山东省某水貂养殖场送检的7只疑似患有沙门氏菌病的病死水貂的肝脏和脾脏样品进行细菌分离鉴定及药物敏感性分析,通过分离纯化方法从样品中分离菌株,并采用革兰氏染色、生化鉴定和PCR方法对分离菌株进行鉴定。运用K-B药敏法检测菌株对临床常用药物的敏感性,并通过PCR方法检测菌株耐药基因及Ⅰ类整合子的携带情况。结果显示,本试验分离得到的7株菌均为革兰氏阴性、短小的杆菌;生化反应检测显示,分离菌株葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、MR试验、枸橼酸盐、硫化氢试验均表现为阳性,初步鉴定分离菌株为沙门氏菌;PCR产物测序结果进一步表明7株分离菌均为沙门氏菌;药敏试验结果显示,7株沙门氏菌对头孢曲松、左氧氟沙星、氟苯尼考和多黏菌素较敏感,对氨基糖苷类药物、四环素和氨苄西林表现为耐药;耐药基因检测结果显示,7株沙门氏菌共检测出8种耐药基因blaTEM-1、blaCTX-M-1G、aadA1、aac(3′)-Ⅳ、aac(3′)-Ⅱc、aph(4′)-Ⅰa、aph(3′)-Ⅶ和oqxAB,以及基因盒为aadA1、arr-3-aacA4和blaPSE-1的Ⅰ类整合子。综上可知,本试验在送检的7只患病水貂的肝脏和脾脏样品中分离到7株沙门氏菌,分离菌株均为耐药菌株,且主要表现为多重耐药现象;耐药基因呈多样性,且存在位于质粒上的耐药基因扩大了耐药基因的传播范围,增加了细菌的耐药性,为临床用药治疗带来困难。

水貂奇异变形杆菌的分离与鉴定

2005年7月,辽宁省某水貂养殖场出现了以零星散发、高死亡率和多种内脏器官出现出血性败血症为主要流行病学特点的病例。从病死水貂内脏中分离出1株细菌,经染色、镜检和生化试验鉴定为奇异变形杆菌。应用药敏试验筛选出了高度敏感的抗菌药,控制了该病的继续发生。

水貂犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子的细胞定位及组织分布

为探讨犬瘟热病毒受体——信号淋巴细胞激活因子(SLAM)的细胞定位、在水貂组织中的分布及病毒感染对受体表达水平的影响,本研究采用间接免疫荧光法(IFA)进行了SLAM细胞定位。以IFA检测感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织的犬瘟热病毒抗原,以半定量PCR和间接免疫组化法(IHA)检测健康水貂及感染水貂SLAM在以上组织中的分布。结果表明,在Vero-SLAM细胞膜及细胞质内可见SLAM特异性荧光;感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织均可见大量犬瘟热病毒抗原阳性细胞,健康水貂及感染水貂肝、脾、肺、肾、脑组织SLAM PCR阳性,IHA检出数量不一的SLAM阳性着色细胞,且感染水貂相应组织的SLAM阳性着色细胞显著多于健康水貂(P<0.05);感染水貂的肾、脾、肺组织中犬瘟热病毒阳性细胞显著多于SLAM阳性着色细胞。说明SLAM受体表达于细胞膜和细胞质,在肝、脾、肺、肾、脑组织中均有分布;犬瘟热病毒感染引起SLAM受体表达的上调;在水貂体内除了SLAM受体,还有其它犬瘟热病毒受体存在。

水貂绿脓杆菌分离鉴定及药物敏感性分析

本试验旨在通过对山东某水貂养殖场送检的5只具有典型出血性肺炎症状的病死水貂进行细菌分离鉴定及耐药情况分析,为临床用药和治疗提供依据和参考。通过细菌分离纯化、生化鉴定和PCR方法对分离菌株进行鉴定,采用K-B药敏法检测分离菌株对常用药物的敏感性,并通过PCR方法检测分离菌株耐药基因的携带情况。经鉴定共分离得到5株绿脓杆菌,药物敏感性试验结果显示,5株绿脓杆菌对氟喹诺酮类药物、第3代和第4代头孢类药物较敏感,对氨基糖苷类、四环素、氯霉素、青霉素类、第1代和第2代头孢类药物耐药。耐药基因检测结果显示,5株绿脓杆菌共检测出6种耐药基因aadA1、aac(3’)-Ⅱc、aac(6’)-Ⅰb、tetA、tetK、cat2。且每株分离菌均检测出3种以上耐药基因。结果表明,分离的5株菌株均为绿脓杆菌,主要引起水貂出血性肺炎。分离菌株耐药性较严重,主要表现为多重耐药现象。菌株携带的耐药基因呈多样性,可引起菌株对相应药物产生耐药现象。

貂源肺炎克雷伯菌耐药性、毒力及免疫原性分析

为分析山东地区貂源肺炎克雷伯菌(KPN)分离株的血清型、耐药性、毒力和免疫原性,本研究从临床患有肺炎症状的水貂肺脏组织中采用常规分离培养鉴定方法、16S rRNA PCR方法和分型PCR方法,分离鉴定出10株K2型KPN(QD/Kp1~QD/Kp10),采用109 cfu/mL的QD/Kp8腹腔注射健康易感水貂,进行动物回归试验,复制出与现地患貂症状等相似的肺炎病例,表明该克雷伯菌分离株为水貂肺炎的病原。进一步选用临床常用的氨基糖苷类药物、β-内酰胺类药物、喹诺酮类三大类药物对分离菌进行药敏试验,结果显示10株分离菌仅对头孢他啶高度敏感,对其他药物存在不同程度的耐药性。采用PCR方法进行耐药基因检测,结果显示,aac(3')-II、TEM、SHV、CTXM-8耐药基因检出率最高为100%,其次为QnrS为70%,aac(6')-Ib与aac(2)为60%。将10株分离菌液调至浓度为109 cfu/mL后0.2 mL/只腹腔注射小鼠,研究其致病性,结果显示感染组小鼠均呈急性发病,死亡率为80%以上。12种毒力基因PCR检测结果显示,10株分离菌均携带不同数量的毒力基因,uge、ureA、wabG和iucB基因检出率为100%。选取致病力最强的分离菌株QD/Kp8测定其对小鼠的LD50为10-8.375/0.1 mL。将分离菌株QD/Kp8制备成灭活疫苗免疫5只8周龄水貂,进行免疫保护试验,结果显示其免疫保护率达100%(5/5)。上述结果表明10株貂源KPN对临床常用药物产生了一定的耐药性,且毒力较强;用该菌制备成的灭活疫苗,对水貂免疫保护力良好,可作为候选疫苗株做进一步研究。本研究为山东地区水貂KPN病临床用药和疫苗研制提供了参考依据。

水貂犬瘟热CDV_3疫苗株基因组序列测定及H基因遗传稳定性分析

对水貂犬瘟热CDV3疫苗株基因组进行全序列测定与分析，以阐明该疫苗株的来源亲本毒株，基因特征及H基因遗传稳定性。将CDV3疫苗株基因组cDNA分9个重叠片段进行RT-PCR并克隆入pMD 18-T载体中，测定全长cDNA序列。并与CDV野毒参考株和疫苗株N、F和H基因氨基酸序列比对分析其基因变异情况。通过对CDV3疫苗株6个不同生产批次（Veto细胞培养代次）H基因序列测定以分析毒株的分子遗传稳定性。基因序列分析结果表明：CDV3疫苗株基因组全长15690bp，与CDV野毒株基因组同源性较低（93．0％～95．3％）。H基因核苷酸和氨基酸序列与Lederle疫苗株（EF418783）同源性最高，分别为99．6％和98．7％。而6个不同培养代次CDV3疫苗株H基因氨基酸序列无任何差异。由此证实CDV3疫苗株的亲本毒株与Lederle疫苗株有着最密切关系，不同培养代次的CDV3疫苗株H基因具有较高的遗传稳定性。