猪丹毒杆菌SpaA优势表位的串联表达及其免疫效果分析

构建串联SpaA优势表位的猪丹毒亚单位疫苗,对其免疫原性进行研究。将猪丹毒杆菌表面保护抗原A优势表位串联表达,提取并经亲和层析纯化获得重组蛋白,制备亚单位疫苗,分别免疫小鼠和猪,21日后攻毒。成功制备串联SpaA优势表位的猪丹毒亚单位疫苗,2μg重组蛋白可为小鼠抵抗1000MLD强毒攻击提供100%保护,100μg重组蛋白可为猪抵抗1MLD强毒攻击提供100%保护,可为猪抵抗2MLD强毒攻击提供67%保护。串联SpaA优势表位的猪丹毒亚单位疫苗具有良好的免疫原性。

欧盟兽药上市许可途径介绍及EMA集中审评程序批准兽药情况分析

本文介绍了欧盟兽药上市许可途径,汇总了EMA(含EMEA)成立以来由集中审评程序(CP)批准的兽药情况,并从批准动物和批准用途等方面进行统计分析,希望能对我国的兽药研发和审评工作有一定指导意义。

美国FDA兽药上市许可途径介绍及近年来新批准兽药情况分析

介绍了美国FDA兽药上市许可途径,汇总了2018年1月至2024年3月美国FDA原始批准的新兽药申请(NADA)、简化新兽药申请(ANADA)和有条件批准(CA)三种类型的兽药品种,并从批准动物种类和批准用途种类等方面进行统计分析,希望能对我国新兽药研发和审评工作有一定的指导意义。

兽用化学药品血药浓度法生物等效性试验注册资料技术评审要点及常见问题

生物等效性试验作为兽药获批上市的关键试验,其研究过程和技术评审都要遵循特定的法规和指导原则。以药动学参数为终点的血药浓度法生物等效性试验是目前普遍采用的研究方法,适用于药物活性成分吸收进入体循环具有全身作用的剂型(大多数内服剂型和特殊注射剂)。本文根据生物等效性定义、相关法规和指导原则,结合近年来新兽药注册资料,对血药浓度法生物等效性试验资料的技术评审要点及常见问题进行梳理,旨在为新兽药的研发和注册提供参考。

猪、牛、羊和禽抗蠕虫药临床有效性试验研究要点

抗蠕虫药是指能杀灭或驱除人和动物寄生蠕虫的药物,市场需求巨大。为满足兽药行业发展和寄生虫病防控的实际需要,农业农村部兽药评审中心根据抗蠕虫药临床有效性试验评审现状,充分借鉴兽用药品注册技术要求国际协调会(International Coordination on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Veterinary Medical Products,VICH)的兽药研究指导原则和技术评审要求,组织制订了《猪/牛/羊/禽抗蠕虫药临床有效性试验技术指导原则》,科学指导抗蠕虫药研发和评审工作,促进兽药行业高质量发展。本文从《猪/牛/羊/禽抗蠕虫药临床有效性试验技术指导原则》的制订思路和主要内容,科学、系统阐述猪/牛/羊/禽抗蠕虫药临床有效性研究的要点,以期为抗蠕虫药物的研发、申报注册和技术评审提供科学指导和依据。

《兽药比对试验要求》修订变化与意义

开展兽药比对试验是兽药产品批准文号管理的重要政策之一。为科学规范兽药比对试验目录产品的批准文号申请,农业农村部畜牧兽医局在2016年发布实施的《兽药比对试验要求》基础上,结合国内兽药比对研究现状,2024年修订发布了《兽药比对试验要求》。本文详细阐述了兽药比对试验要求的修订背景、主要变化和修订意义,旨在加强研发单位或相关临床试验机构对该项政策的理解,并对开展兽药比对试验提供指导和帮助。

我国限制使用的兽药在食品动物中的残留概况

从我国食品动物禁用、停用、特定时期不得使用以及允许使用但不得检出等层面,对我国兽药使用的限制、相关残留检测方法标准适用范围以及相关问题的分析和建议进行综述,以期为养殖业规范用药、食品安全监管部门政策制定和调整、科研机构针对不得检出兽药残留标准相关研究的开展提供参考。

兽用中化药生产企业GMP监督检查情况分析与思考

对近年来中国兽医药品监察所组织实施的兽用中化药企业GMP监督检查发现的缺陷项目进行统计和分析,研究企业在生产质量管理中存在的主要问题并提出建议,以期帮助兽药生产企业提高自身GMP执行水平,确保产品质量,并为兽药监管部门提供参考。

卡洛芬注射液辅助治疗牛细菌性呼吸疾病的疗效研究

为评价卡洛芬注射液与泰拉霉素注射液联用治疗牛呼吸道疾病(bovine respiratory disease,BRD)的效果,并确定合理的给药剂量,试验选择64头患呼吸道疾病的牛,随机分为A、B两组,每组32头,其中A组皮下注射给予泰拉霉素注射液(推荐剂量2.5 mg/kg·bw),同时肌内注射给予卡洛芬注射液(II期临床试验确认剂量1.4 mg/kg·bw);B组只皮下注射给予泰拉霉素注射液(推荐剂量2.5 mg/kg·bw)。所有试验牛各种药均只给予1次。试验期间观察记录各组牛的临床症状,并对其进行评分;通过对各试验牛的炎症因子、致病菌、特定病原抗原/抗体的检测,评价卡洛芬注射液对牛呼吸道疾病的辅助治疗效果。试验结果显示,相比于单独使用泰拉霉素注射液,卡洛芬注射液与泰拉霉素注射液联用治疗BRD可以在更短时间内消除牛体内病原菌感染带来的炎症反应;泰拉霉素注射液单独使用或与卡洛芬注射液联用治疗BRD,给药3 d病牛的血清PCT浓度均明显下降(P<0.05),但两药联用的下降速度更加显著(P<0.05)。结果表明,临床上推荐卡洛芬注射液与泰拉霉素注射液联用,皮下注射,一次量为1.4 mg/kg·bw,可有效辅助治疗牛呼吸道疾病。

兽药产品批准文号药学研究资料常见问题浅析

本文通过对已审药学资料的审查分析,从产品信息、处方、工艺、质量标准、稳定性研究等方面对药学申报资料的常见问题加以分析总结并提出了针对性建议,旨在规范药学研究资料编写,以期对兽药产品批准文号申请有所帮助。

PLGA纳米粒及其在生物医学领域的应用潜力

聚乳酸-羟基乙酸(polylactic-co-glycolic acid, PLGA)是由单体乳酸和羟基乙酸构成的具有良好的可降解性和生物相容性的高分子聚合物,其作为新型载体和传递系统被广泛应用于生物学和医药学等领域。PLGA具有抗原展示和抗原包裹的功能,能保护包裹包括生物活性化合物(如蛋白质和多肽)、核酸及免疫调节分子在内的一系列物质,免受蛋白酶介导的黏膜表面降解,还能使药物或抗原缓慢释放,以减少免疫和用药次数,在肠道疾病治疗上有巨大的应用潜力。此外,还可将药物或抗原偶联到PLGA纳米粒表面起到抗原展示的作用,在疫苗研发和药物制备方面表现出优异特性。PLGA还可作为佐剂,增强疫苗的免疫保护效果。PLGA的表面修饰功能可用于药物的靶向递送,靶向递送治疗分子到身体的特定部位,既可减少不良副作用,同时还可提高局部原料药的浓度来提高药物疗效,是生物医学研究的一个活跃领域。PLGA纳米粒可单独或联合装载不同类型的药物,免疫原性小,且易于通过受控的化学合成进行调节,因此,PLGA作为生物医学领域应用潜力巨大的非病毒基因传递系统和药物传递平台,广泛用于疫苗制备和药物研发等领域。笔者重点综述了PLGA纳米粒的结构特征和制备方法,以及基于PLGA制备的纳米载体平台在疫苗研发和药物递送等领域的研究进展及应用前景,旨在为PLGA纳米粒的相关研究提供参考。

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒间接免疫荧光检测方法的建立与比较

为建立鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(MDV HVT)的间接免疫荧光方法,将MDV HVT病毒接种96孔细胞板培养(CEF),72 h后用鸡抗马立克氏病病毒阳性血清作为一抗和兔抗鸡荧光抗体作为二抗,对反应条件进行优化,建立了间接免疫荧光方法(IFA)。并与经典的马立克蚀斑计数方法进行病毒滴度的测定比较,运用统计学方法分析,P小于0.05,相关系数为0.995,说明两种方法相关性很好,两种方法均可用于马立克氏病病毒的滴度测定。IFA方法较蚀斑计数方法操作简便快捷,可代替蚀斑计数方法用于马立克氏病活疫苗的病毒含量的初步测定,同时为2025年版《中国兽药典》马立克氏病活疫苗增加IFA鉴别检验方法积累实验数据。

兽用中药与西方草药/植物药对比及国际化发展研究

对比研究兽用中药与西方草药/植物药的异同,分析我国与欧美国家在相关领域的管理政策;探索兽用中药国际化发展路径,以及兽用中药进入欧美市场的途径。研究提出坚持中兽医药理论,讲好兽用中药故事,为全球遏制细菌耐药性提供借鉴和参考。

饲料添加中药抗病促生长与替抗应用研究

重点回顾兽用中药抗病促生长的历史背景,对兽用中药饲料添加应用经验进行总结,提出兽用中药“替抗”应以饲料添加为主要应用方向。对农业农村部饲料药物添加剂品种、《饲料原料目录》、卫生部门发布的“食药物质”目录进行全面梳理,提出“药饲同源”品种名单,研究提出科学遴选和应用兽用中药“替抗”品种原则建议,在现有兽药国家标准和注册标准品种基础上,通过与“药饲同源”品种比对分析,筛选出21种“替抗”兽用中药制剂,为兽用抗菌药使用减量化提供参考。

电位滴定法与高效液相色谱法测定兽用复方制剂中巴比妥含量

分析比较电位滴定法与高效液相色谱法在巴比妥含量测定上的差异,以期为实际检测工作提供参考。采用916 Ti-Touch自动电位滴定仪,用硝酸银滴定液进行电位滴定。高效液相色谱法采用Xbridge C18色谱柱(150.0 mm×4.6 mm,5µm);流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(体积比25∶75,用三乙胺调节pH值至8.2);检测波长240 nm;柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样体积10µL。结果显示,电位滴定法加标回收率为100.2%~101.2%,RSD为0.1%;高效液相色谱法加标回收率为99.0%~101.6%,RSD为0.1%~0.2%。分别采用电位滴定法和高效液相色谱法测定12批不同厂家兽用复方氨基比林注射液和安痛定注射液中巴比妥含量,两种方法测定结果差异不显著(P>0.05)。高效液相色谱法耗时长,成本高,更适用于复方制剂中多种成分的同时测定;电位滴定法操作简便快速,准确度高,精密度好,更适用于巴比妥单一成分含量的测定。

高效液相色谱法测定白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量

本实验建立了高效液相色谱技术(HPLC)测定白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量。采用Hypersil GOLD(250 mm×4.6 mm,5um),以乙腈为流动相A、以0.1%磷酸溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,白术内酯Ⅰ检测波长为276 nm,白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ检测波长为220 nm,柱温为35℃,进样体积为20μL。白术内酯Ⅰ在0.10~1.60μg范围内线性关系良好,平均回收率为99.29%(RSD=2.25%);白术内酯Ⅱ在0.10~1.60μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.07%(RSD=2.59%);白术内酯Ⅲ在0.10~1.60μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.43%(RSD=2.20%)。结果表明该方法分离度好、准确度高、重现性好,可测定白术中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的含量。

不同鸡马立克病疫苗的免疫保护效果比较

【目的】对国内外共7个批次/品种(A~D,F~H)的CVI988或CVI988+HVT商品疫苗进行免疫保护分析,以期了解不同马立克病(MD)疫苗的保护效果,为该病的防控提供参考。【方法】将140只1日龄SPF鸡随机分为9组,G01~G09组,其中G01~G07组(15只/组)分别按推荐剂量免疫A~D及F~H马立克病疫苗,G08(攻毒对照组,15只)和G09(空白对照组,20只)组不免疫,7日龄时G01~G08组分别经腹腔注射马立克病病毒(MDV)超强毒Md5株(1000 PFU/只),所有鸡隔离饲养120 d。通过检测疫苗毒蚀斑数、疫苗毒复制情况、攻毒后体重差异、临床表现和病理变化综合评估各疫苗的保护力。【结果】7个批次疫苗的病毒蚀斑数均符合国家标准(2000 PFU/羽份),疫苗F的病毒蚀斑数最高(6467 PFU/羽份)。以1羽份剂量免疫1日龄SPF鸡后,疫苗F的复制速率相对较快。用Md5株攻毒后,攻毒对照组鸡体重减轻,且有93.3%(14/15)的鸡死亡,100%(15/15)剖检出现MD典型病变;G01~G07各免疫组鸡体重与空白对照组鸡相比,均无显著差异(P>0.05),死亡比例分别为0/14、3/15、5/15、0/14、0/13、0/15和1/15,剖检出现MD典型病理变化的比例为5/14、8/15、7/15、5/14、3/13、3/15和5/15,攻毒保护试验结果显示,7个批次的马立克病疫苗对鸡均具有一定保护力,保护指数为45.7%~73.3%。【结论】不同厂家生产的鸡马立克病疫苗对MDV超强毒Md5株的攻击具有相似的保护效果,二价苗的保护力(73.3%)高于单价疫苗。

卡洛芬注射液辅助治疗牛呼吸道疾病的临床疗效试验

为了评价卡洛芬注射液辅助治疗牛呼吸道疾病的临床疗效,将卡洛芬注射液分为低、中、高(0.7、1.4、2.8mg/kgbw)3个剂量组,在给予推荐剂量(2.5mg/kgbw)的泰拉霉素注射液基础上分别给患呼吸道疾病的病牛皮下注射,同时设硕腾公司的卡洛芬注射液为对照组,在给予推荐剂量(2.5mg/kgbw)的泰拉霉素注射液基础上按1.4mg/kgbw的剂量给药,另设只皮下注射推荐剂量(2.5mg/kgbw)的泰拉霉素注射液作为空白对照组。结果表明,卡洛芬注射液与泰拉霉素注射液联用治疗牛呼吸道疾病,与单独使用泰拉霉素注射液相比,可更加快速有效地控制病牛症状,消除炎症反应,提高治疗成功率。卡洛芬注射液中、高剂量的效果无显著差异(P>0.05),与使用推荐剂量硕腾公司生产的卡洛芬注射液的效果相当(P>0.05),均明显优于低剂量的卡洛芬注射液(P<0.05)。卡洛芬注射液按一次量,每1kg体重1.4mg皮下注射,与适宜的抗菌药连用,对牛呼吸道疾病有良好的治疗效果。

我国已上市动物布鲁氏菌病活疫苗的概况及新型疫苗研究方向

布鲁氏菌病(布病)是由布鲁氏菌引起的重要人畜共患传染病,严重危害公共卫生安全。疫苗免疫是预防布病的重要措施之一。目前我国已经获批上市的布鲁氏菌病疫苗共有七种,分别是S2株、M5/M5-90株、M5-90Δ26株、Rev.1株、A19株、A19ΔVirB12株和BA0711株。对上述疫苗的背景、免疫程序、基因组及保护力等方面进行系统阐述,旨在为动物布鲁氏菌活疫苗选用提供指导,并针对现有疫苗的优缺点,展望未来研发安全、高效、可鉴别诊断、不感染人的新型疫苗方向。

新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及对氟苯尼考纳米凝胶的药物敏感性研究

为了研究氟苯尼考纳米凝胶对新疆南疆地区乳源金黄色葡萄球菌的抑菌效果,试验从新疆南疆地区某奶牛场的乳房炎患病奶牛乳样中分离纯化金黄色葡萄球菌,采用生化试验、PCR扩增及测序等方法进行细菌鉴定,并通过比较氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌圈直径(DIZ)、最小抑菌浓度(MIC)和抑菌曲线分析氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌效果。结果表明:从乳样中分离到一株细菌,该分离株革兰氏染色、镜检后呈蓝紫色并排列成葡萄串状,触酶、血浆凝固酶和甘露醇发酵试验结果均为阳性,其基因组DNA中能扩增出金黄色葡萄球菌耐热核酸酶(nuc)基因,16S rDNA基因序列与金黄色葡萄球菌的相似性为99.7%,判断该分离菌为金黄色葡萄球菌。氟苯尼考原料药、氟苯尼考纳米凝胶和氟苯尼考注射液对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株均产生抑菌作用,DIZ大小为氟苯尼考纳米凝胶>氟苯尼考注射液>氟苯尼考原料药,均表现为高度敏感,其中氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株和金黄色葡萄球菌ATCC 29213株的DIZ均显著高于氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液(P<0.05)。3种药物对金黄色葡萄球菌分离株的MIC分别为4μg/mL、2μg/mL和4μg/mL。1μg/mL氟苯尼考纳米凝胶对金黄色葡萄球菌分离株的抑菌效果与2μg/mL氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液相当,当氟苯尼考纳米凝胶的浓度为4μg/mL时金黄色葡萄球菌分离株不再生长。说明从新疆南疆地区成功分离出一株乳源金黄色葡萄球菌;相比于氟苯尼考原料药和氟苯尼考注射液,氟苯尼考纳米凝胶对该分离株具有较好的抑菌效果。