诱变筛选Vc二步伴生菌

为了提高Vc二步发酵糖酸转化率,以巨大芽孢杆菌WS-05为出发菌株,采用微波和氯化锂复合诱变的方法进行诱变选育,筛选促进产酸菌生长和代谢的伴生菌。研究了微波-氯化锂诱变过程中不同的剂量、时间对Vc二步伴生菌存活率的影响,选取菌株存活率为55%~70%的3组诱变组合方式进行诱变,筛选能使小菌发酵产2-酮基-L-古龙酸产量高的伴生菌,经摇瓶发酵复筛,获得高产菌株D06,其转化率较出发菌株高2%。研究了发酵条件对新菌系的影响,结果显示:适当增加新菌系通气量(250 mL发酵摇瓶中装液20~25 mL)可以充分满足菌体代谢产酸对氧的要求,最适底糖浓度为7%,最适生长温度为31℃;经传代实验证明,其遗传性状稳定,4代平均转化率可达87.84%。

提高维生素C二步发酵种子质量的方法

通过在维生素C二步种液培养基中添加半胱氨酸或(和)氯化钙的方法,研究了这2种物质对二步菌种生长和产2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的影响。结果表明,在二步种子培养基中加入适量的半胱氨酸和(或)氯化钙能够促进普通生酮基古龙酸菌生长,提高菌体密度,协调混菌比例,提高种子质量,并提高后续发酵2-酮基-L-古龙酸生成速率,缩短发酵周期。在种子培养基中同时加入0.3 g/L半胱氨酸和0.6 g/L氯化钙培养效果最显著:种液中普通生酮基古龙酸菌浓度提高30.77%,发酵周期缩短8.33%,2-酮基-L-古龙酸生成速率提高9.31%。

维生素C二步发酵过程动力学模型的研究

本文系统地分析了L-山梨糖到2-酮基-L-古龙酸的生物转化过程,提出了生长因子的假定,对发酵机理进行了新的探讨,对发酵过程做了必要与合理的简化。首次建立了维生素C第二步发酵过程的动力学模型。运用多面体最优化法和Runge-Kutta积分法等数学方法处理模型,获得最佳模型参数。结果表明,模型计算值与实验值得到良好的吻合,从而证明动力学模型是正确的和有效的。

从D-葡萄糖直接发酵产生维生素C前体——2-酮基-L-古龙酸——Ⅰ.菌株的诱变选育和代谢产物的鉴定

2-酮基-L-古龙酸是合成维生素C的前体,以D-葡萄糖为原料经两种微生物串联发酵直接制备。本文报道了用紫外线照射和硝基胍处理等方法对2-酮基-L-古龙酸及其中间体2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(盐)产生菌的诱变选育。葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter sp.)SCB 611在含D-葡萄糖、玉米浆和碳酸钙的培养基中,经48小时培养后,可生成2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(盐)。同时也选出了一株欧文氏菌(Erwinia sp.)SCB 247,它的产酸能力比前者明显要高。棒状杆菌(Corynebacterium sp.)SCB 3058在以D-葡萄糖作为氢载体的情况下,经过三天摇瓶发酵,能将经SDS处理的2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(盐)有效地转化为2-酮基-L-古龙酸。上述菌株的代谢产物经分离提取后用熔点测定、元素分析、红外和紫外吸收光谱测定等鉴定,可以确证菌株SCB 611或(SCB 247)及菌株SCB 3058的代谢产物分别是2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(盐)和2-酮基-L-古龙酸。

维生素C冷却结晶研究进展

本文论述了维生素C的晶体结构、结晶热力学与动力学测定及冷却结晶工艺开发的研究结果 。

维生素C生产工艺进展

综述了维生素 C生产中发酵、提取和转化过程的工艺进展 ,并对高新技术—— DNA重组技术和膜分离技术在维生素 C生产中的应用作了介绍。

改善维生素C钙颜色的工艺与设备优化

因维生素C易氧化变色,以其为原料生产的维生素C钙,外观很难做到白度极高。为了提高产品白度,增加市场竞争力,本文对现有工艺进行分析,发现颜色加深一方面是料液久置导致的,另一方面是因醇水、甲醇的洗涤不充分。为此采用低温延缓料液变色的方法,并设计了一个循环洗涤系统,洗去母液颜色的同时,可将表面水分降低至0.83%,并减少甲醇消耗量。通过以上工艺的优化,最终产品的白度得到明显提高。本研究结果可为相关企业提供参考。

维生素C生产技术

介绍了维生素C的性质、功能和用途。综述了维生素C生产技术的演变过程和发展趋势。着重探讨了微生物发酵法的生产工艺进展。介绍了二步发酵法与葡萄糖直接发酵法的研发现状 ,探讨了 2 -酮基 -L-古龙酸的分离提取工艺。展望了我国维生素C生产技术的前景。指出 。

维生素C二步发酵中巨大芽孢杆菌对氧化葡萄糖酸杆菌生长和产酸的影响

通过测定氧化葡萄糖酸杆菌转化L－山梨糖中成ZKGA的细胞酶活性、摇瓶发酵及中长变化，研究了Vc:步发酵中巨大茅孢杆菌对氧化葡萄糖酸杆菌生长和产酸作用的影响。结果显示：巨大芽孢杆菌胞外液和胞内液均可促进氧化葡萄糖酸杆菌的增殖，主要表现为缩短其中长周期中的延迟期；巨大芽孢杆菌通过所产生的部分生物活性物质增强氧化葡萄糖酸杆菌产酸的细胞酶活性，促进氧化葡萄糖酸杆菌转化L一山梨糖生成2KGA.

Vc二步发酵伴生菌巨大芽孢杆菌的选育

巨大芽孢杆菌经紫外线诱变，获得2株耐低pH、抗KGA的菌株：Bn，B5。在pH6.7～7．0的发酵培养基中与氧化葡萄糖酸杆菌发酵，Bn和B5的平均糖酸转化率分别提高3.5％，3．3％.在pH6．2的发酵培养基中，平均糖酸转化率提高11．4％，12．3％。在pH6．2和pH7．0含3％KGA的培养基中，2菌提前3～6h到达对数生长期，稳定期延长3～6h.经连续30代转接，特性稳定。

2-酮基-L-古龙酸产生菌原生质体的属间融合

用配对法筛选得一株氧化葡萄糖酸杆菌 (Gluconobacter oxydans) 10 - 3的优良伴生菌短小芽孢杆菌 (Bacilluspumilus) 970 0 2。混合菌发酵产生 2 -酮基 - L-古龙酸 ,山梨糖的转化率达 90 %左右。两菌分别经诱变处理 ,获得耐利福平 B.pumilus 970 0 2 - 1- 6 Rifr和耐红霉素 G.oxydans 10 - 3- 2 0 Emr遗传标记菌株。并确定 B.pumilus 970 0 2 - 1- 6Rifr菌原生质体形成和再生最佳条件。初步尝试两菌属间原生质体融合。

L-抗坏血酸电喷雾串联质谱行为研究

采用电喷雾串联质谱(ESI-MSn)技术,结合氢/氘交换方法,研究了L-抗坏血酸在正、负离子模式下的质谱行为.实验表明,电喷雾质谱能够方便地观测到实验条件下L-抗坏血酸的特征裂解方式和相应碎片;实验发现毛细管温度对L-抗坏血酸的裂解方式产生显著的影响,从不同毛细管温度下的相应质谱信号强度变化能观察到L-抗坏血酸及其降解产物的热稳定性差异.因此,根据串联质谱所观测到的L-抗坏血酸特征碎片离子,提出了L-抗坏血酸的结构变化及其降解反应的可能机理和基本规律,为现代质谱技术快速测定复杂基体样品中的痕量抗坏血酸奠定了实验基础.

L-抗坏血酸肉桂酸酯的合成及其抗氧化活性研究

以L-抗坏血酸和肉桂酸为原料,采用酰氯法合成得到了L-抗坏血酸肉桂酸酯。用分光光度法研究了酯化产物的稳定性、清除羟自由基(OH)和二苯代苦味肼基自由基(DPPH)的能力,并与Vc和常用的油溶性抗氧化剂叔丁基对苯二酚(TBHQ)进行比较,结果表明:新合成的L-抗坏血酸肉桂酸酯与Vc相比,稳定性得以明显改善,其清除DPPH的EC50值为63.96μmol/L,清除能力与Vc相当,清除OH的EC50值为7.84 mmol/L,在浓度较高时优于TBHQ。

L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的合成和应用

对L-抗坏血酸的药理作用及改善其稳定性的方法进行了概括和总结,进而对L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的2种合成工艺进行了分析和探讨,指出了各反应的影响因素和特点,展望了L-抗坏血酸-2-磷酸酯镁的生物合成技术及其市场应用前景。

氧化葡萄糖酸杆菌原生质体的形成和再生研究

报道氧化葡萄糖酸杆菌原生质体的形成和再生的方法。将最佳生长条件下对数生长后期的培养物以溶菌酶处理,YE培养基上再生原生质体、原生质体形成率约99%,再生率2.93%。

维生素C化学转化工艺研究进展

介绍了维生素C工业生产现状,着重对化学转化工艺现状及研究进展进行了述评,对比了酸、碱2种转化方法的优点与不足,指出碱法转化具有条件温和、操作简便、产品质量好等优点,通过分析工业中存在的问题,指出了维生素C化学转化的研究方向。

L-抗坏血酸-2-聚磷酸酯的合成

研究了L 抗坏血酸与磷酸化试剂在水介质中制备L 抗坏血酸 2 一聚磷酸酯和L 抗坏血酸 2 三聚磷酸酯 ,当n(L 抗坏血酸 )∶n(三偏磷酸钠 )∶n(催化剂 ) =1 .0 0 0∶1 2 0 0∶0 1 50、溶液pH值为 8时 ,L 抗坏血酸 2 三聚磷酸酯的收率为 71 34% ,Vc效价为 32 1 0 %。作为饲料添加剂使用 ,可同时给动物补充钙和磷。

超滤应用于维生素C提取工艺

采用国产中空纤维超滤设备,分离维生素C发酵液中的残留菌丝体及蛋白质等杂质,可简化α-酮基古龙酸提取工艺,降低成本和能耗,并提高维生素C的收率和质量。