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基于组学分析优化兽疫链球菌的透明质酸发酵生产
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作者 胡云箫 吴俊俊 +2 位作者 赵北辰 王阳 康振 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期10-16,共7页
透明质酸具有保湿、润滑等多种生理功能,广泛应用于食品、医药和化妆品领域。目前透明质酸主要依赖于兽疫链球菌发酵生产。然而,遗传背景不清晰等问题,限制了兽疫链球菌作为底盘细胞的相关改造以及透明质酸发酵水平的提升。该研究首先... 透明质酸具有保湿、润滑等多种生理功能,广泛应用于食品、医药和化妆品领域。目前透明质酸主要依赖于兽疫链球菌发酵生产。然而,遗传背景不清晰等问题,限制了兽疫链球菌作为底盘细胞的相关改造以及透明质酸发酵水平的提升。该研究首先对兽疫链球菌WSH-24的全基因组和转录组数据进行了测序分析,发现该菌株具有高效的糖酵解和乳酸合成能力,以及不完整的三羧酸循环和多种氨基酸合成途径的缺失。结合生长曲线分析,进一步明确该菌株为缬氨酸、谷氨酰胺、精氨酸和色氨酸4种氨基酸缺陷型。在此基础上,通过外源添加对应的氨基酸使透明质酸产量达到(2.65±0.02)g/L。其次,结合转录组测序数据,确定了维生素B5、维生素B7和维生素B12相关合成基因的转录水平过低。通过外源添加对应的维生素有效提高透明质酸的合成,使其产量达到(2.46±0.07)g/L。最后,通过培养基优化,在3 L发酵罐上透明质酸发酵质量浓度达到5.63 g/L,生产强度为0.31 g/(L·h),相较优化前提高了33.33%。该研究为进一步改造兽疫链球菌WSH-24奠定了基础,为透明质酸的产量提升提供了支撑。 展开更多
关键词 透明质酸 兽疫链球菌 全基因组 转录组 发酵优化
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己二酸生物合成的途径改造以及发酵条件优化
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作者 支睿 李国辉 +1 位作者 毛银 邓禹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期38-44,共7页
逆己二酸降解途径因可用于己二酸合成受到了广泛的关注,但因其代谢途径较长、途径基因表达不平衡,难以对其异源的表达进行调控。因此,该研究将逆己二酸降解途径模块化,更换各模块的启动子以实现该途径在底盘细胞中表达水平的调控,从而... 逆己二酸降解途径因可用于己二酸合成受到了广泛的关注,但因其代谢途径较长、途径基因表达不平衡,难以对其异源的表达进行调控。因此,该研究将逆己二酸降解途径模块化,更换各模块的启动子以实现该途径在底盘细胞中表达水平的调控,从而提高己二酸产量。利用己二酸生物传感器开展高通量筛选验证,获得最优组合模块菌株己二酸产量达到120.66 mg/L,提高至对照的8.35倍。通过理性分析确定了合成途径关键酶,最终实现了异源基因的有效表达调控。在此基础上,开展发酵条件优化,己二酸产量达到240.49 mg/L,较对照提高了16.65倍。该研究通过模块化改造,协调平衡异源途径基因表达,为己二酸生物合成研究提供了新思路。 展开更多
关键词 己二酸 组成型表达 逆己二酸降解途径 高通量筛选 模块化改造
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大肠杆菌发酵低廉生物质产乙醇酸及其分离纯化研究
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作者 胡成杰 毛银 +1 位作者 李国辉 邓禹 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期21-29,共9页
碳中和背景下全生物基乙醇酸得到了广泛的关注,但其高昂发酵成本、匮乏的下游分离纯化工艺研究,限制了后续的工业生产应用。该研究以重组大肠杆菌为对象,采用统计学方法在摇瓶水平上对发酵培养基成分进行优化,并基于5 L发酵罐进行初步... 碳中和背景下全生物基乙醇酸得到了广泛的关注,但其高昂发酵成本、匮乏的下游分离纯化工艺研究,限制了后续的工业生产应用。该研究以重组大肠杆菌为对象,采用统计学方法在摇瓶水平上对发酵培养基成分进行优化,并基于5 L发酵罐进行初步放大验证和下游分离纯化研究。最终利用低廉的玉米芯水解液等成分,摇瓶水平乙醇酸产量达到4.77 g/L,较初始培养基提高2.58倍;5 L罐乙醇酸产量达42 g/L,提高至优化前的1.4倍;通过初步的生物分离纯化,成功获得生物基乙醇酸,晶体纯度达到99.3%,符合市售标准要求。该研究通过发酵培养基优化、5 L发酵罐放大验证以及下游生物分离纯化,初步构建了生物基乙醇酸的低成本生产体系,为生物基乙醇酸的工业化生产应用奠定基础。 展开更多
关键词 乙醇酸 大肠杆菌 发酵优化 分离纯化 工艺优化
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复合诱变条件优化结合过表达乳酸脱氢酶高效合成苯乳酸
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作者 丁心成 孙瑞杰 +3 位作者 王浩源 谭之磊 侯颖 贾士儒 《食品研究与开发》 CAS 2024年第17期184-194,共11页
乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)作为新型生物防腐剂苯乳酸(phenyllactic acid,PLA)的天然生产菌,在自然界中普遍存在,但由于其胞壁较厚、机械强度较大,导致外源基因难以导入。为使LAB自身高效合成PLA,该研究以实验室筛选的乳酸片球菌... 乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)作为新型生物防腐剂苯乳酸(phenyllactic acid,PLA)的天然生产菌,在自然界中普遍存在,但由于其胞壁较厚、机械强度较大,导致外源基因难以导入。为使LAB自身高效合成PLA,该研究以实验室筛选的乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici GM)作为出发菌株,采用复合诱变选育出活力更高、产量更大的突变菌株,即先采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变50 s,再采用0.8%硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES)诱变25 min,并在培养基中加入PLA以提高菌株抗性,进行摇瓶发酵验证和遗传稳定性验证。为解决外源基因难导入的问题,使外源DNA得到高效转化,该研究通过单因素试验对氨基酸、缓冲液、溶菌酶、菌体生长状态和电转化参数进行优化,得到最优电转化条件:添加0.75%L-苏氨酸的MRS培养基培养菌体至OD600=0.8,使用洗涤缓冲液Ⅲ(0.5 mol/L蔗糖,7 mmol/L Na_(2)HPO4,7 mmol/L NaH_(2)PO_(4),20 mmol/L MgCl_(2))洗涤菌体,溶菌酶浓度30 mg/mL于37℃处理菌体30 min,电场强度20 kV/cm。为进一步提高LAB合成PLA的产量,本研究利用基因工程手段,将质粒载体pMG36e自带启动子P32(强度低)替换为Pldh(强度高),构建L型乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)过表达质粒,并在最优电转化条件下成功转化于P.acidilactici GM中,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析表明LDH基因ldh表达上调,经过5 L罐发酵培养,添加苯丙酮酸(phenylpyruvic acid,PPA)后,PLA产量提高至56.3 g/L,转化率提高至94.8%。 展开更多
关键词 苯乳酸 乳酸片球菌 乳酸脱氢酶 电转化 重组表达
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不同初始pH值对白菜尾菜与羊粪混合厌氧发酵的影响 被引量:1
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作者 申岳 蔡立群 +2 位作者 陈晓龙 王勇智 周生虎 《热带农业工程》 2024年第1期119-124,共6页
探究不同初始pH对白菜尾菜与羊粪混合厌氧发酵的影响,为尾菜沼气工程预处理技术提供理论基础。利用自制小型发酵装置,以白菜尾菜为主要原料,添加适量羊粪防止发酵系统酸化,导致产气停滞,将白菜尾菜与羊粪按总固体含量(TS)2∶1进行混合,... 探究不同初始pH对白菜尾菜与羊粪混合厌氧发酵的影响,为尾菜沼气工程预处理技术提供理论基础。利用自制小型发酵装置,以白菜尾菜为主要原料,添加适量羊粪防止发酵系统酸化,导致产气停滞,将白菜尾菜与羊粪按总固体含量(TS)2∶1进行混合,设置4个不同初始pH值处理(T1:pH值未调节,pH=7.1±0.1;T2:pH=6.5±0.1;T3:pH=7.5±0.1;T4:pH=8.5±0.1),高温条件下(55±1)℃进行湿式厌氧发酵。研究不同初始pH值对白菜尾菜和羊粪混合发酵过程中产甲烷效能、发酵基质有机质水解、发酵系统稳定性的影响。与T1相比,T3处理能有效增加白菜尾菜与羊粪混合厌氧发酵的产甲烷效能;碱性条件下能进一步促进固态有机物的水解,提高发酵液中有机质含量;各发酵系统均能较稳定运行,更有利于白菜尾菜与羊粪厌氧发酵的进行。本结论可为白菜尾菜沼气化利用提供一定的理论及应用参考。 展开更多
关键词 PH值 尾菜 混合发酵 羊粪 甲烷
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丹皮酚分析检测的研究进展 被引量:1
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作者 张毅 薛美玲 +3 位作者 王会盈 刘毅 杨阳 门靖 《化工与医药工程》 CAS 2024年第2期60-64,共5页
丹皮酚是一种具有良好镇痛、镇静、抗炎、解热、抗氧化、降血压以及抑制变态反应的天然产物。现阶段丹皮酚的研究十分活跃,其分析检测技术及相关产品的质量控制尤为重要。综述了近年来丹皮酚在中药材、中成药、纳米乳、体外溶出、日用... 丹皮酚是一种具有良好镇痛、镇静、抗炎、解热、抗氧化、降血压以及抑制变态反应的天然产物。现阶段丹皮酚的研究十分活跃,其分析检测技术及相关产品的质量控制尤为重要。综述了近年来丹皮酚在中药材、中成药、纳米乳、体外溶出、日用化学品等方面的分析检测研究进展,总结了高效液相色谱法、超高效液相色谱、一测多评法、气相色谱-质谱联用法等分析测试技术的应用实例,以期为丹皮酚的检测技术开发与应用提供参考。 展开更多
关键词 丹皮酚 中药材 纳米乳 天然产物 检测 高效液相色谱法
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基于出芽短梗霉发酵法制备β-聚苹果酸
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作者 谭昕 康建平 +3 位作者 李佳逸 何雨静 王燕来 何勇 《纺织科技进展》 CAS 2024年第1期15-18,25,共5页
通过改变出芽短梗霉Aureobasidium pullulans的培养与发酵的工艺条件,实现β-聚苹果酸的生成量和分子量的提高。试验表明,最佳培养条件和培养组分为:100 g/L葡萄糖,35 g/L蛋白胨,2 g/L丁二酸铵,0.1 g/L KH2PO4,0.3 g/L MgSO4·7H2O,... 通过改变出芽短梗霉Aureobasidium pullulans的培养与发酵的工艺条件,实现β-聚苹果酸的生成量和分子量的提高。试验表明,最佳培养条件和培养组分为:100 g/L葡萄糖,35 g/L蛋白胨,2 g/L丁二酸铵,0.1 g/L KH2PO4,0.3 g/L MgSO4·7H2O,0.5 g/L KCl, 0.05 g/L MgSO4,20 g/L CaCO3,0.5 g/L亮氨酸,pH值4.0,发酵温度25℃,培养时间6 d。在该条件下进行发酵培养,β-PMLA的产量提高到24.3 g/L,分子量提高到8 948 Da。 展开更多
关键词 出芽短梗霉 β-聚苹果酸 发酵 工艺优化
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Synergetic Bioproduction of Short-Chain Fatty Acids from Waste Activated Sludge Intensified by the Combined Use of Potassium Ferrate and Biosurfactants
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作者 CHEN Yanyan YAO Shuo +2 位作者 ZHANG Dahai LI Xianguo FENG Lijuan 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2024年第3期695-709,共15页
The synergetic effect and underlying mechanism of potassium ferrate(PF)with tea saponin(TS,a biosurfactant)in producing short chain fatty acids(SCFAs)from anaerobic fermentation of waste activated sludge(WAS)were expl... The synergetic effect and underlying mechanism of potassium ferrate(PF)with tea saponin(TS,a biosurfactant)in producing short chain fatty acids(SCFAs)from anaerobic fermentation of waste activated sludge(WAS)were explored in this work.Experimental results showed that 0.2 g PF(g TSS)^(-1)(total suspended solid)combined with 0.02 g TS(g TSS)^(-1) could further improve SCFAs’production,and the maximum SCFAs content reached 2008.7 mg COD L^(-1),which is 1.2 and 4.5 times higher than those with PF and TS individually added,respectively,and 5.3 times higher than that of blank WAS on Day 12.In the model substrates experiments,the degradation rates of bovine serum albumin and dextran with combination of PF and TS were 41.3%±0.1% and 48.5%±0.06%,respectively,on Day 3,which are lower than those in blank WAS(with degradation rates of 72.3%±0.5%and 90.3%±0.3%).It was revealed that the oxidative effect of PF and the solubilization of TS caused more organic matters to be dissolved out from WAS,providing a large number of biodegradable substances for subsequent SCFAs production.While WAS pretreated with the combination of PF and TS,the relative abundances of Firmicutes increased from 6.4%(blank)to 38.6%,and that of Proteobacteria decreased from 41.8%(blank)to 21.8%.The combination of PF and TS promoted the hydrolysis process of WAS by enriching Firmicutes,and then increased acetic acid production by inhibiting Proteobacteria that consumed SCFAs.Meanwhile,at the genus level,acidogenesis bacteria(e.g.,Proteiniclasticum and Petrimonas)were enriched whereas SCFAs consuming bacteria(e.g.,Dokdonella)were inhibited. 展开更多
关键词 waste activated sludge anaerobic fermentation potassium ferrate BIOSURFACTANT PRETREATMENT
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表面活性剂及聚乳酸塑料对餐厨垃圾发酵产酸特性影响
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作者 全翠 陈常祥 +1 位作者 高宁博 陆丽芳 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期5791-5804,共14页
餐厨垃圾的产量逐年升高,由于其高含水、易腐败等特性,传统处理方法并不能将其妥善处置。厌氧发酵在处理餐厨垃圾方面具有成本低廉、二次污染小等优势,其主要产物挥发性脂肪酸(VFAs)附加价值高、应用范围广、便于存储和运输,是一种极具... 餐厨垃圾的产量逐年升高,由于其高含水、易腐败等特性,传统处理方法并不能将其妥善处置。厌氧发酵在处理餐厨垃圾方面具有成本低廉、二次污染小等优势,其主要产物挥发性脂肪酸(VFAs)附加价值高、应用范围广、便于存储和运输,是一种极具潜力的餐厨垃圾资源化利用方法。然而汇集在餐厨垃圾中的外源物质(如表面活性剂、聚乳酸塑料等),进入厌氧发酵系统后会对产酸发酵的过程造成影响。基于此,本文首先介绍了餐厨垃圾产生、理化特性以及危害,对目前采用的餐厨垃圾处理方法进行综述,然后在梳理餐厨垃圾发酵产挥发性脂肪酸原理的基础上阐述了餐厨垃圾发酵产挥发性脂肪酸的研究现状,最后论述了表面活性剂、聚乳酸塑料等外源物质对餐厨垃圾产酸发酵的影响,以期为餐厨垃圾的发酵产酸过程调控提供参考。 展开更多
关键词 餐厨垃圾 挥发性脂肪酸 表面活性剂 聚乳酸塑料 厌氧发酵
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微生物合成3-羟基丙酸的研究进展
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作者 赫庆雯 丁鑫垚 +1 位作者 梁丽亚 刘嵘明 《生物加工过程》 CAS 2024年第6期645-658,670,共15页
3-羟基丙酸(3-HP)作为一种重要的平台化学品,是多种化合物的前体,展现出重要的科学及应用价值。本文综述了近年来微生物合成3-HP的研究进展,针对3-HP微生物合成中研究较多的丙二酰辅酶A途径、甘油途径、β-丙氨酸途径以及其他途径,在新... 3-羟基丙酸(3-HP)作为一种重要的平台化学品,是多种化合物的前体,展现出重要的科学及应用价值。本文综述了近年来微生物合成3-HP的研究进展,针对3-HP微生物合成中研究较多的丙二酰辅酶A途径、甘油途径、β-丙氨酸途径以及其他途径,在新型底盘、碳源拓展、关键酶及途径优化等方面进行了系统性总结。此外,对人工设计的非天然代谢途径以及部分特殊合成途径进行了整理,并对未来进一步提升微生物合成3-HP的研究方向进行了展望。 展开更多
关键词 3-羟基丙酸 甘油途径 丙二酰辅酶A途径 β-丙氨酸途径
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污泥厌氧发酵产酸的研究进展
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作者 严博 罗阳 《工业微生物》 CAS 2024年第4期48-50,共3页
污泥厌氧发酵是污水处理厂对污泥实现部分稳定化、减量化和资源化的常用策略。污泥厌氧发酵会产生短链脂肪酸(VFA),且由于发酵时间短、经济价值高、应用范围广而广受关注。综述污泥厌氧发酵产酸的研究进展,有助于污泥的资源化回收。本... 污泥厌氧发酵是污水处理厂对污泥实现部分稳定化、减量化和资源化的常用策略。污泥厌氧发酵会产生短链脂肪酸(VFA),且由于发酵时间短、经济价值高、应用范围广而广受关注。综述污泥厌氧发酵产酸的研究进展,有助于污泥的资源化回收。本文讨论了C/N值、pH、温度,以及污泥停留时间等工艺参数对污泥厌氧发酵产酸的影响,并总结了4种预处理方式(物理预处理、化学预处理、生物预处理、联合预处理)对污泥厌氧发酵的影响,以期为提高污泥厌氧发酵产酸效率提供参考。 展开更多
关键词 污泥 厌氧发酵 VFA 预处理
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微生物代谢途径调控下的丙酮酸发酵工艺优化与可持续发展
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作者 李莹 赵烁 王震 《工业微生物》 CAS 2024年第4期111-113,共3页
随着当前时代下可持续发展和环境保护意识的不断增强,传统化学合成途径已经无法满足时代发展的要求,而生物发酵作为生产丙酮酸的一种环境友好型方法,受到了相关领域的重点关注。丙酮酸是一种关键的化学中间体,在化工、食品以及医药产业... 随着当前时代下可持续发展和环境保护意识的不断增强,传统化学合成途径已经无法满足时代发展的要求,而生物发酵作为生产丙酮酸的一种环境友好型方法,受到了相关领域的重点关注。丙酮酸是一种关键的化学中间体,在化工、食品以及医药产业等领域扮演着重要角色。文章主要探讨了微生物代谢途径下的丙酮酸发酵工艺优化与可持续发展的策略及方法,旨在实现丙酮酸的高效、低成本和环境友好的合成。 展开更多
关键词 丙酮酸发酵 微生物代谢途径调控 基因工程 发酵工艺优化
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丙酮酸的微生物发酵生产中的菌种筛选与改良
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作者 李莹 赵烁 王震 《工业微生物》 CAS 2024年第1期143-145,共3页
丙酮酸作为一种关键的化学中间体,在许多工业生产过程中扮演着重要的角色,尤其是在药物合成、食品添加剂和生物塑料制造等领域已经得到了广泛应用。传统的化学合成方法虽然能够大规模生产丙酮酸,但往往伴随着能源消耗大和环境污染严重... 丙酮酸作为一种关键的化学中间体,在许多工业生产过程中扮演着重要的角色,尤其是在药物合成、食品添加剂和生物塑料制造等领域已经得到了广泛应用。传统的化学合成方法虽然能够大规模生产丙酮酸,但往往伴随着能源消耗大和环境污染严重等问题。近年来,微生物发酵作为一种可持续且环境友好的替代方法引起了人们的广泛关注。文章将分析野生菌种在丙酮酸生产过程中的筛选与改良,筛选并优化酿酒酵母和大肠杆菌等微生物菌种,旨在提高丙酮酸的生产效率和产量。 展开更多
关键词 丙酮酸 微生物发酵 菌种筛选 菌种改良
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反相HPLC同时测定产琥珀酸放线杆菌发酵液中的有机酸与葡萄糖 被引量:19
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作者 白冬梅 杜国民 +4 位作者 沈菲 付卫明 赵学明 李鑫钢 徐世民 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期15-18,共4页
提出了一种利用高效液相色谱法同时分析产琥珀酸放线杆菌发酵液中葡萄糖和有机酸的方法。在EclipseXDB C8(150mm×Φ4.6mm,5μm)色谱柱上,以5mmol LH2SO4溶液(pH2.5)作流动相,流速为1mL min,采用示差折光检测器,一次进样可同时定性... 提出了一种利用高效液相色谱法同时分析产琥珀酸放线杆菌发酵液中葡萄糖和有机酸的方法。在EclipseXDB C8(150mm×Φ4.6mm,5μm)色谱柱上,以5mmol LH2SO4溶液(pH2.5)作流动相,流速为1mL min,采用示差折光检测器,一次进样可同时定性及定量分析待测试样中的有机酸及葡萄糖,每一样品的分析时间不超过9min。确定了测定各物质的工作曲线的回归方程、线性范围、相关系数和检出限。测定发酵液中葡萄糖、琥珀酸和副产物乳酸的相对标准偏差在0.41%~0.89%范围内,平均回收率在99.6%~100.8%之间。 展开更多
关键词 琥珀酸 放线杆菌 发酵液 有机酸 葡萄糖 同时测定 反相高效液相色谱
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玉米籽皮稀酸水解液脱毒发酵制备丁二酸的可行性 被引量:14
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作者 吴昊 姚嘉旻 +4 位作者 刘宗敏 陈可泉 左鹏 姜岷 韦萍 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第2期267-272,共6页
丁二酸是一种重要的碳四平台化合物,利用非粮生物质替代淀粉制备丁二酸可保证粮食安全并降低原料成本。玉米籽皮是一种廉价的非粮生物质,该文采用稀酸水解玉米籽皮制备混合糖液,并对玉米籽皮稀酸水解液的脱毒条件进行了优化,优化结果为... 丁二酸是一种重要的碳四平台化合物,利用非粮生物质替代淀粉制备丁二酸可保证粮食安全并降低原料成本。玉米籽皮是一种廉价的非粮生物质,该文采用稀酸水解玉米籽皮制备混合糖液,并对玉米籽皮稀酸水解液的脱毒条件进行了优化,优化结果为:活性炭用量1%(m/V)、pH4.0、作用温度30℃、作用时间30 min。在此工艺条件下,水解液的脱色率为92.27%,糠醛脱除率75%,5-羟甲基糠醛脱除率53%,多酚类化合物脱除率98%,总糖损失低于5%。经过脱毒处理后,产琥珀酸放线杆菌NJ113均能利用水解液中的葡萄糖、木糖、阿拉伯糖,培养基总糖浓度为50 g/L时,丁二酸分批发酵的质量收率可达0.68 g/g,浓度可达34.2 g/L,生产强度达0.83 g/(L·h),总糖浓度为68.2 g/L时,丁二酸质量收率仍可达0.62 g/g,浓度42.3 g/L,生产强度0.98 g/(L·h)。发酵试验表明脱毒的玉米籽皮稀酸水解液作为碳源厌氧发酵制备丁二酸具有可行性。 展开更多
关键词 水解 脱毒 发酵 玉米籽皮 丁二酸
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强化厌氧表达dld基因以提高大肠杆菌工程菌发酵产L-乳酸的光学纯度
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作者 余杰 李正 +3 位作者 王金华 王永泽 高娃 赵筱 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第8期115-121,共7页
为去除廉价发酵原料中的D-乳酸从而提高发酵最终产物L-乳酸的光学纯度,该研究通过构建带有不同厌氧诱导启动子(pflBp6、pnirB、pflBp6-pnirB)的D-乳酸脱氢酶基因(dld)的表达质粒,并将其分别转入大肠杆菌(Escherichia coli)HBUT-L,加强... 为去除廉价发酵原料中的D-乳酸从而提高发酵最终产物L-乳酸的光学纯度,该研究通过构建带有不同厌氧诱导启动子(pflBp6、pnirB、pflBp6-pnirB)的D-乳酸脱氢酶基因(dld)的表达质粒,并将其分别转入大肠杆菌(Escherichia coli)HBUT-L,加强其在发酵产L-乳酸的同时消除外源D-乳酸的能力。通过装液量与转速的单因素试验筛选最优的质粒表达条件及菌株,并在无机盐培养基与玉米浆培养基中进行发酵验证。结果表明,在装液量为200 mL/250 mL、转速为150 r/min的条件下,含有启动子pflBp6-pnirB的表达质粒的工程菌株HBUT-L4发酵18 h时D-乳酸脱氢酶活力最高,为81.1 U/g。在此条件下进行无机盐培养基和玉米浆培养基发酵时,工程菌株HBUT-L4相对于出发菌株HBUT-L,D-乳酸消耗速率分别提高250%、217%,L-乳酸的光学纯度分别从96.32%、98.48%提升至99.95%、99.98%。在大肠杆菌工程菌发酵L-乳酸的过程中,带有厌氧诱导启动子pflBp6-pnirB的表达质粒可提高D-乳酸脱氢酶活力,强化菌株消除外源D-乳酸,进而提高L-乳酸的光学纯度的能力,具有重要的工业化应用价值。 展开更多
关键词 L-乳酸 光学纯度 启动子 D-乳酸脱氢酶基因 大肠杆菌
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构建大肠杆菌合成生物群落利用混合糖同步发酵生产L-乳酸
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作者 邱炜玥 李敏 +3 位作者 陈思宇 赵锦芳 王金华 赵筱 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期208-218,共11页
目的:实现大肠杆菌混合糖发酵产L-乳酸过程中对葡萄糖-木糖的同步利用。方法:以L-乳酸工程菌大肠杆菌JH16(E.coli B,△frdBC△pflB△ackA△adhE,ldhA::ldhL)为出发菌株,通过RED同源重组技术敲除木糖转运及代谢基因xylFGH、xylE和xylA,... 目的:实现大肠杆菌混合糖发酵产L-乳酸过程中对葡萄糖-木糖的同步利用。方法:以L-乳酸工程菌大肠杆菌JH16(E.coli B,△frdBC△pflB△ackA△adhE,ldhA::ldhL)为出发菌株,通过RED同源重组技术敲除木糖转运及代谢基因xylFGH、xylE和xylA,获得不能利用木糖的菌株大肠杆菌JH16031。以大肠杆菌JH2705(E.coli JH16,△ptsG△mglB)为出发菌株,敲除葡萄糖转运及代谢基因crr、malX和galP,获得不能利用葡萄糖的菌株大肠杆菌JH27071,以构建大肠杆菌合成生物群落。通过摇瓶和5 L发酵罐试验确定该合成生物群落在混合糖发酵时较优的混合接种比例。结果:以60 g/L葡萄糖和40 g/L木糖为碳源进行发酵,当JH16031与JH27071初始接种比为1∶50,初始OD_(600nm)=0.5,混合糖的利用率最高,在84 h内消耗97%的糖,并在96 h内结束发酵。葡萄糖消耗速率为705 mg/(L·h),木糖消耗速率为435 mg/(L·h),L-乳酸产率为951 mg/(L·h),L-乳酸产量达到92 g/L,糖酸转化率为91%。结论:构建大肠杆菌合成生物群落可实现利用混合糖发酵产L-乳酸过程中葡萄糖和木糖的同步利用。研究结果为工业发酵生产中,使用低成本的木质纤维素为原料,降低发酵成本,提高混合糖利用率提供技术支持。 展开更多
关键词 大肠杆菌 合成生物群落 混合糖 L-乳酸
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糖质原料直接发酵生产L-苹果酸的工艺条件 被引量:9
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作者 刘建军 赵祥颖 +4 位作者 田延军 李丕武 张家祥 刘丽萍 韩延磊 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期5-9,共5页
以黄曲霉HA5 80 0为出发菌株 ,研究探讨了不同碳源、氮源、无机盐类以及温度等因素对糖质原料直接发酵生产L 苹果酸的影响 ,产L 苹果酸突变株黄曲霉HA5 80 0适合于多种原料的L 苹果酸发酵 ,如液化淀粉、脱脂玉米粉、葡萄糖、淀粉水解糖... 以黄曲霉HA5 80 0为出发菌株 ,研究探讨了不同碳源、氮源、无机盐类以及温度等因素对糖质原料直接发酵生产L 苹果酸的影响 ,产L 苹果酸突变株黄曲霉HA5 80 0适合于多种原料的L 苹果酸发酵 ,如液化淀粉、脱脂玉米粉、葡萄糖、淀粉水解糖等 ;氮源以玉米浆与硫酸铵配合使用为最佳 ;实验中确定了较优培养基组成和发酵工艺条件 ,适宜的发酵温度为 34~ 36℃ ;向培养基中添加CaCO3 是L 苹果酸有效积累的必要条件 ,初糖控制在 10 0~ 12 0 g/L时 ,适宜的CaCO3 用量为70~ 80 g/L ,L 苹果酸产率达 80~ 90g/L。 展开更多
关键词 L-苹果酸 发酵生产 原料 CACO3 工艺条件 培养基组成 玉米浆 玉米粉 淀粉水解糖 发酵温度
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稀酸水解玉米芯制备丁二酸 被引量:14
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作者 姚嘉旻 姜岷 +1 位作者 吴昊 陈可泉 《生物加工过程》 CAS CSCD 2010年第3期66-72,共7页
利用正交设计得到稀H2SO4水解玉米芯制备混合糖液的优化工艺:玉米芯料液比1∶5(质量体积比),物料粒径250~380μm、H2SO4用量3%(体积分数)、水解温度126℃、反应时间2.5 h。此工艺条件下的总糖收率达90%,总糖质量浓度为60 g/L,发酵... 利用正交设计得到稀H2SO4水解玉米芯制备混合糖液的优化工艺:玉米芯料液比1∶5(质量体积比),物料粒径250~380μm、H2SO4用量3%(体积分数)、水解温度126℃、反应时间2.5 h。此工艺条件下的总糖收率达90%,总糖质量浓度为60 g/L,发酵抑制物糠醛含量为0.87 g/L,5-羟甲基糠醛含量为0.68 g/L。在此基础上利用活性炭吸附和Ca(OH)2中和对玉米芯混合糖液进行脱毒及脱盐处理,SO42-脱除率达96%,色素脱除率为96%,糠醛、5-羟甲基糠醛及多酚类物质脱除率均高于50%。处理后的玉米芯多组分糖液作为产琥珀酸放线杆菌(Actinobacillus succino-genes)NJ113的发酵C源,当培养基中初始总糖质量浓度为50 g/L时,丁二酸收率为61.68%,丁二酸质量浓度为30.8 g/L;初始总糖质量浓度为70 g/L时,丁二酸收率仍可达50%以上,丁二酸质量浓度为35.2 g/L。发酵实验表明,将经过脱毒脱盐处理的玉米芯多组分糖液替代葡萄糖作为C源发酵制备丁二酸具有可行性。 展开更多
关键词 水解 脱毒 脱盐 玉米芯 发酵 丁二酸
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氧化还原电位调控对Actinobacillus succinogenes厌氧发酵产丁二酸的影响 被引量:13
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作者 姜岷 李建 +3 位作者 陈可泉 王益娜 马江锋 韦萍 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1250-1253,1261,共5页
对氧化还原电位调控在产琥珀酸放线杆菌厌氧发酵产丁二酸过程中的代谢产物分布的作用进行了研究。在血清瓶发酵培养过程中,筛选出对发酵过程无抑制作用的氧化剂铁氰化钾和还原剂二硫苏糖醇作为发酵体系的氧化还原电位调节剂。在3L发酵... 对氧化还原电位调控在产琥珀酸放线杆菌厌氧发酵产丁二酸过程中的代谢产物分布的作用进行了研究。在血清瓶发酵培养过程中,筛选出对发酵过程无抑制作用的氧化剂铁氰化钾和还原剂二硫苏糖醇作为发酵体系的氧化还原电位调节剂。在3L发酵罐上利用铁氰化钾和二硫苏糖醇调节发酵体系氧化还原电位值在-100~-450mV,结果表明-350mV为菌体生长和产丁二酸的最佳电位,丁二酸生产速率由0.75g/(L·h)提高到1.18g/(L·h),产物丁二酸与副产物乙酸的质量浓度比由2.5提高到3.9。 展开更多
关键词 氧化还原电位 琥珀酸放线杆菌 丁二酸 厌氧发酵
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