AS_2O_3对消化道肿瘤细胞凋亡作用的研究

目的研究AS3O3对10种消化道肿瘤细胞株的致凋亡作用。方法采用形态学观察、流式细胞仪检测及DNA电泳分析。结果发现两株细胞经AS2O3作用后有明显凋亡，三株细胞无凋亡，其余有少量凋亡。结论AS2O3对不同的消化道肿瘤细胞有不同的作用，提示AS2O3对不同细胞的致凋亡作用可能存在不同的机理。

STI571及As_2O_3诱导K562细胞凋亡机制的研究

目的 :探讨比较STI5 71和As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡及抑制其生长的可能机制 ,为进一步揭示慢性粒细胞白血病 (CML)的发病机制及STI5 71和As2 O3 的临床应用提供理论依据。方法 :采用细胞培养、台盼蓝染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法研究STI5 71和As2 O3 分别对K5 6 2细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用 ,检测两种药物在诱导K5 6 2细胞凋亡的过程中某些凋亡相关蛋白的表达。结果 :STI5 71和As2 O3 均可抑制K5 6 2细胞的增殖、诱导其凋亡。两种药物均可下调Bcl-XL的表达 ,并裂解caspase - 3。As2 O3 作用浓度为 2 μmol/L时其下调Bcl-XL的作用与 1μmol/L时没有明显的差别 ,但是其裂解caspase - 3的作用较后者更加明显。 结论 :STI5 71作为凋亡诱导剂 ,可通过抑制Bcl-XL的表达从而激活caspase - 3,诱导K5 6 2细胞凋亡 ;As2 O3 诱导K5 6 2细胞凋亡过程中伴有caspase - 3的激活 。

烟气中As_2O_3的氧化脱除试验

以芬顿(Fenton)溶液作为吸收剂,在自制的小型鼓泡反应器内,进行了Fenton氧化法脱除气态As_2O_3的试验,考察了反应温度和模拟烟气成分等因素对烟气中As_2O_3脱除效率的影响。研究结果表明:在H_2O_2浓度为0.2 mol/L、Fe^(2+)浓度为5 mmol/L、Fenton吸收液初始pH值为5.5、反应温度为50℃时,烟气中As_2O_3的脱除效率可达100%。模拟烟气中SO_2和NO质量浓度、O_2和CO_2质量分数等因素对As_2O_3脱除效率影响显著。同时,采用高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法,对液相离子产物进行了定性与定量检测,得到As_2O_3脱除产物主要为As(V)。

血管内皮生长因子反义核酸增强HL60和K562细胞对As_2O_3的敏感性

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义核酸能否提高HL60和K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性。方法:采用经筛选所得的最优反义核酸(A7),20个碱基经过全硫代修饰;以脂质体介导转染细胞,反义核酸和As2O3联合作用72h以后,用MTT法检测细胞生长情况,求IC50值;用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白的浓度,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数。结果:VEGF反义核酸可显著降低HL60、K562细胞对As2O3的IC50值,下调VEGF蛋白的表达,增加As2O3诱导的HL60、K562细胞凋亡作用。结论:VEGF反义核酸具有增强HL60和K562细胞对As2O3的敏感性,增强As2O3诱导的HL60和K562细胞凋亡作用;提示内源性VEGF蛋白具有使细胞产生耐药性的作用。

As_2O_3节拍化疗抑制HepG2荷瘤裸鼠血管生成拟态的研究

为研究三氧化二砷(As_2O_3)节拍化疗对HepG2荷瘤裸鼠血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响,并探讨可能的机制。采用构建HepG2肝癌荷瘤裸鼠模型的方法,用As_2O3_对荷瘤动物模型进行节拍化疗,观察治疗效果及其毒副作用;用HE、过碘酸-雪夫反应(糖原染色,PAS)检测血管生成拟态(VM),免疫组织化学法检测瘤体组织CD31的表达。结果显示,肝癌HepG2细胞在活体模型中可表达内皮相关分子CD31,形成PAS染色阳性、类似血管的管腔样结构。As_2O_3节拍化疗组血管生成拟态受到抑制,而最大耐受剂量组却无此作用。由此可知,As_2O_3节拍化疗可抑制荷瘤裸鼠肝癌的发生发展。

乳腺癌耐药细胞中mdr-1与mrp基因的表达及As_2O_3对其表达的影响

目的:探讨人乳腺癌阿霉素(ADM)耐药细胞系MCF-7/ADM的mdr-1基因和mrp基因表达,观察三氧化二砷(As_2O_3)对上述基因表达的影响。方法:采用MTT法检测As_2O_3的细胞毒性及非细胞毒性剂量,应用RT-PCR检测mdr-1基因和mrp基因的转录表达。结果:As_2O_3的非细胞毒性剂量为0.2μmol/L,低毒计量为0.8μmol/L。mdr-1基因和mrp基因在MCF-7/ADM细胞中均呈过表达,而且mdr-1的基因表达强于mrp基因,在MCF-7/S细胞中未见表达。As_2O_3可下调上述基因的表达,而且As_2O_3低毒剂量的下调作用强于无毒剂量。结论:人乳腺癌MCF-7/ADM细胞获得阿霉素抗药性,与mdr-1基因和mrp基因过表达有关,As_2O_3可通过多种机制部分逆转MCF-7/ADM细胞的耐药性。

As_2O_3诱导K_(562)细胞株凋亡的形态学方法研究

[目的]研究三氧化二砷对人红白血病细胞株K562凋亡作用及凋亡推测办法.[方法]姬姆萨染色,胎盘兰排染法,双苯并咪唑,碘化丙啶排斥法等.[结果]As2O3诱导12h,K562细胞开始出现凋亡.凋亡细胞随药物浓度的增加和作用时间的延长而增加.各种凋亡推测方法利弊存在差异.[结论]建议使用较有效的Hoechst33342法检测凋亡.

AS_2O_3促进实验兔生长繁殖的适宜浓度

目的 :本文通过对实验兔饲喂不同AS2 O3含量的饲料进行研究 ,旨在为生产中提供合理的含AS2 O3的饲料。方法 :根据饲料中AS2 O3含量将实验兔随机分为 4组 (实验组 :0 .5mg/kg、1.0mg/kg、1.5mg/kg和对照组 :不含AS2 O3) ,定期称重 ,10周后对 4 0只进行交配繁殖 ,通过产仔数、窝重、离乳率测定其繁殖性能。结果 :1.0mg/kgAS2 O3实验组与对照组相比差异显著P <0 .0 1,0 .5mg/kgAS2 O3实验组与对照组比较差异不显著P >0 .0 5 ,1.5mg/kgAS2 O3实验组具有中毒症状。结论 :上述结果为实验兔饲料添加合理AS2

体外高热联合α-IFN或As_2O_3对白血病骨髓净化的实验研究

目的 研究体外高热联合α IFN或As2 O3对白血病骨髓的净化。方法 12例白血病病人及 10例正常对照骨髓 :①在高热 42℃ 1h、α IFN 30 0U ml条件下 ,测定持续高热与间歇高热对CFU GM和CFU L产率的影响。②在 37℃、42℃条件下 ,不同As2 O3浓度对CFU GM和CFU L抑制率的影响。结果 间歇高热联合α IFN与持续高热联合α IFN相比 ,前者对CFU GM具有保护作用 (P <0 0 5 ) ,两者对CFU L杀伤无明显差异 (P >0 0 5 ) ;37℃条件下 ,随着As2 O3浓度提高 ,对CFU L和CFU GM抑制率增加 ,高热 42℃联合As2 O3具有协同净化作用 ,As2 O3浓度以10 - 6 mol L为佳。结论 间歇高热联合α IFN净化有利于减少CFU GM损伤 ;高热联合As2 O3对白血病骨髓具有协同净化作用。

三氧化二砷诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的实验研究

MTT法、AO/EB荧光染色法和流式细胞仪分析法观察As_2O_3对人肝癌细胞林SMMC－7721的作用。结果发现：AS_2O_3可显著抑制SMMC－7721细胞的生长；经药物作用后，AO/EB染色时，肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变；在流式细胞仪上可见亚Gl峰；凋亡呈剂量、时间依赖性特点；AS_2O_3使细胞周期阻止于G_2／M期。以上表明：As_2O_3可诱导人肝癌细胞株凋亡，可望为临床应用砷剂治疗肝癌提供实验依据。

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌裸鼠移植瘤细胞分化的研究

背景与目的:既往研究发现三氧化二砷(As2O3)可诱导白血病细胞的分化,但对实体瘤细胞的诱导分化作用报道甚少。本实验拟探讨As2O3对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的影响,重点观察其诱导鼻咽癌细胞分化的作用。方法:以人鼻咽低分化鳞癌鼠移植癌细胞株CSNE-1为研究对象,观察腹腔注射As2O3(5mg·kg-1·d-1连续10天后,每周给药3次,连续3周)对人鼻咽癌移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长情况的影响。用光学显微镜和电子显微镜观察移植瘤细胞形态变化,用免疫组化法检测瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:腹腔注射As2O3后,人鼻咽癌BALB/C裸鼠移植瘤生长被抑制,抑瘤率为75.4%。同时,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。癌细胞PCNA在阴性对照组呈高表达,PI(PCNA阳性细胞指数)为(95.2±5.0)%,而As2O3组癌细胞PCNA表达明显减少,PI为(53.6±7.0)%(P<0.001)。结论:As2O3抑制人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的生长,这种抑制作用可能与其诱导癌细胞向成熟方向分化有关?

氧化砷诱导结肠癌细胞凋亡及其分子机制

目的 观察不同浓度As2 O3 对结肠癌Lovo、LS 174T细胞株生长的影响。方法 0 12 5～ 2 μmo1/L的As2 O3 与结肠癌细胞株Lovo、LS 174T共同孵育 ,观察不同浓度As2 O3 作用不同时间对结肠癌细胞的生长抑制作用、细胞形态学改变、DNA的变化。结果 1～ 2 μmol/LAs2 O3 作用的结肠癌细胞呈凋亡特征性改变 :细胞膜不发生破裂 ,细胞核出现核浓缩、核碎裂和凋亡小体形成 ;流式细胞仪检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰 ;细胞DNA抽提琼脂糖凝胶电泳呈凋亡特征性条带。结论 1～ 2 μmol/LAs2 O3 可诱导结肠癌细胞凋亡 ,肿瘤细胞凋亡与Fas、Fas

三氧化二砷诱导肺癌上皮细胞株凋亡

采用碘化丙啶和FITC TUNEL标记法 ,经流式细胞仪和透射电镜观察As2 O3 对肺癌A5 49细胞株的凋亡诱导作用和形态学变化。结果发现 1及 2 5 μmol/LAs2 O3 对肺癌A5 49细胞株 2 4h的凋亡诱导率为 2 2 80 %及 30 15 % ,48h的凋亡诱导率为 41 75 %及 6 0 0 4% ,72h的凋亡诱导率为 5 6 38%及 73 30 % ,均分别高于相应时间点的 5 FU的作用 ;透射电镜下见细胞体积缩小 ,核膜完整 ,核染色质聚集于核膜边缘的典型凋亡细胞。结果表明 ,As2 O3 能够诱导肺癌A5

高三尖杉酯碱联合三氧化二砷诱导人急性髓系白血病U937细胞株凋亡的实验研究

目的:本探讨高三尖杉酯碱(HHT)联合三氧化二砷(As_2O_3)对人急性髓系白血病细胞株U937细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用及相关机制。方法:用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测不同浓度HHT及As_2O_3单用及联用对U937细胞增殖的影响;应用Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞术检测二者单用或联用对U937细胞的凋亡诱导作用,Western blot方法检测U937细胞内P-Akt^(Ser473)、P-Akt^(Thr308)、BCL-XL、BID、MCL-1与P-MCL-1等蛋白的表达。结果:HHT和As_2O_3均可明显抑制U937细胞的增殖,诱导其凋亡,两药联合可明显增加U937细胞早期凋亡率,且两药联合作用后U937细胞P-Akt^(Ser473)、P-Akt^(Thr308)、MCL-1、P-MCL-1与BCL-XL蛋白表达明显下调,而BID蛋白表达无明显变化。结论:HHT与As_2O_3联合可通过抑制PI3K/Akt信号通路及下游MCL-1蛋白协同抑制U937细胞。

三氧化二砷对鼻咽癌细胞Cx43表达的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)抑制鼻咽癌的作用机制。方法:采用流式细胞仪(FCM)、激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和荧光技术,检测人鼻咽癌细胞株(CNE1)经As2O3诱导后细胞连接蛋白43(Cx43)表达的变化。结果:FCM显示,经过浓度为4μmol L的As2O3处理后,其Cx43阳性细胞计数率明显升高,与未经As2O3处理和经2μmol L的As2O3处理的CNE1比较,其差异具有非常显著性意义(p<0.01);LSCM图像观察到,经4μmol LAs2O3处理后,标记Cx43的绿色荧光显著增强,集中分布于细胞膜。结论:较高剂量浓度的As2O3能提高鼻咽癌细胞Cx43的表达率,升高细胞膜Cx43的含量。As2O3抑制鼻咽癌细胞生长的作用机制之一,是通过恢复细胞间隙连接通讯功能来实现的。

c-Myc和Fas在三氧化二砷体外诱导HL-60细胞凋亡中的变化与作用的研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)在体外诱导急性早幼粒白血病(acute promyelo-cytic leukemia,APL)细胞HL-60凋亡的分子机制。方法:采用MTT方法检测As2O3对HL-60细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和Fas蛋白表达,RT-PCR检测c-Myc和Fas的mRNA表达。结果:4.0μmol/L的As2O3作用96h可抑制70%的HL-60细胞,并使细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡,P<0.01;Fas蛋白表达升高,作用72h后阳性率由对照组的9.63%增加为32.84%,P<0.01;Fas mRNA表达升高,c-Myc的mRNA表达降低,P<0.01。结论:As2O3诱导HL-60细胞凋亡的机制在于引起细胞周期阻滞,上调Fas蛋白及mRNA表达,下调c-Myc的mRNA表达。

砷盐净化工艺的研究

本文叙述了目前湿法炼锌主要的净化工艺,着重介绍了株洲冶炼厂引进的OT砷盐净化工艺的反应机理及工艺流程。

全反式维甲酸与三氧化二砷联合对急性早幼粒细胞白血病的有效性评价

目的观察并探讨全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(AS_2O_3)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的临床疗效和安全性。方法选择自2010年4月至2012年6月治疗的APL患者96例,按照随机分组法将96例患者分为两组,观察组和对照组各48例。对照组单用ATRA诱导方案。观察组在对照组基础上联合AS_2O_3诱导。统计两组患者早期死亡(EDR)发生率、完全缓解(CR)率、复发率、达CR时间、第一年、第二年和第三年总生存率以及不良反应。结果观察组EDR、CR和达CR时间分别为4.2%(2/48)、91.7%(44/48)和(24.2±4.1)d,对照组为6.3%(3/48)、79.1%(38/48)和(36.4±4.6)d,观察组CR明显高于对照组,其复发率明显低于对照组,达CR时间明显短于对照组(P<0.05);观察组患者第一年、第二年和第三年总生存率与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);观察组不良反应率为22.9%(11/48),对照组为16.7%(8/48),两组不良反应发生率相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论ATRA联合AS_2O_3诱导方案治疗APL可缩短达到CR时间,让患者尽快解除痛苦,其疗效显著,且不良反应可耐受,值得在临床上进一步推广。

转铁蛋白受体的单克隆抗体OX26偶联三氧化二砷免疫脂质体对鼠脑胶质瘤细胞系的体外抑制作用

目的探讨转铁蛋白受体单克隆抗体(OX26)偶联三氧化二砷(As_2O_3)免疫脂质体对鼠脑胶质瘤细胞株的体外抑制作用。方法体外培养C6脑胶质瘤细胞,实验分为盐水组,As_2O_3(6μmol·L^(-1))组和OX26偶联As_2O_3脂质体(6μmol·L^(-1))组;采用四唑盐比色法(MTT),检测OX26偶联As_2O_3免疫脂质体对脑胶质瘤细胞生长的抑制作用,DAPI染色观察OX26偶联As_2O_3免疫脂质体对脑胶质瘤细胞促凋亡的影响。免疫印迹法检测OX26偶联As_2O_3免疫脂质体对脑胶质瘤细胞胶质瘤胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白表达的影响。结果 MTT比色法检测显示:OX26偶联As_2O_3免疫脂质干预对脑胶质瘤生长的抑制率为40.21%,显著高于As_2O_3组的25.77%,比较差异有统计学意义(P<0.05);核染显示:与盐水组和As_2O_3组比较,OX26偶联As_2O_3免疫脂质组脑胶质瘤细胞的光密度和面密度值显著减少,比较差异有统计学意义(P<0.01);Westernblot检测显示:OX26偶联As_2O_3免疫脂质组脑胶质瘤细胞GFAP蛋白的表达较盐水组和As_2O_3组少。结论 OX26偶联As_2O_3免疫脂质体对鼠脑胶质瘤细胞具有明显的体外抑制作用,其作用机制可能与促进脑胶质瘤细胞凋亡和GFAP蛋白的表达相关。

氟、砷及氟砷联合经口染毒对大鼠肝UDS细胞影响的研究

本文用程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验方法检测氟、砷及氟砷联合染毒对大鼠肝脏ＤＮＡ的损伤及修复的影响。将雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为四组：氟组、砷组，氟砷联合组及对照组。分别饮用含氟化钠１２５ｐｐｍ、三氧化二砷７５ｐｐｍ、氟化钠１２５ｐｐｍ加三氧化二砷７５ｐｐｍ的水及蒸馏水。结果染毒３个月的大鼠肝脏，在氟组其ｃＰｍ均值为１５８０．７±１９６，明显高于对照组３７７±３４。砷组的ｃＰｍ均值为２３９．３±１０４，低于对照组。氟砷联合组的ｃＰｍ均值为３０９．３±５３，接近于但略低于对照组。染毒６个月脾大鼠肝脏，氟、砷及氟砷联合组的ｃＰｍ均值均低于对照组，其掺入百分率分别为对照组的４８．３％（氟组）、３８％（砷组）、８７％（氟砷联合组）。此结果说明慢性氟、砷及氟砷联合中毒可以引起大鼠肝细胞的ＤＮＡ损伤，并影响其修复损伤的能力。另外，本实验的结果还表明氟与砷有拮抗作用。