不同强度UVA对银杏杂交子代生理生化的影响

【目的】探究不同强度UVA对银杏杂交子代可溶性糖、可溶性蛋白、抗氧化酶活性、黄酮代谢相关酶活性以及总黄酮含量的影响,得出提高银杏总黄酮含量的最佳光质处理,为银杏的栽培与选育提供理论依据。【方法】以二年生银杏杂交子代实生苗为试验材料,设置不同强度的紫外光UVA(395~405 nm)处理,在相同强度的白光(300μmol·m^(2)·s^(-1))下分别添加2、4、6根UVA紫外灯,紫外光强为20μmol·m^(-2)·s^(-1)(UVA-2)、40μmol·m^(-2)·s^(-1)(UVA-4)、60μmol·m^(-2)·s^(-1)(UVA-6),以白光(300μmol·m^(2)·s^(-1))做为对照(CK)。【结果】不同强度UVA处理对银杏杂交子代各项生理指标都存在显著影响,随着UVA强度的增加,银杏杂交子代可溶性糖和可溶性蛋白含量呈现逐渐上升的趋势。金叶银杏SOD、POD、PAL、C4H、4CL酶活性随着UVA强度的增加呈现先增加后减小的趋势,绿叶银杏SOD酶活性随着UVA强度的增加而增加,而POD、PAL、C4H、4CL酶活性呈现先增后减的趋势。银杏杂交子代总黄酮含量、DPPH和ABTS自由基清除率呈现先增后减的趋势,在UVA-4处理20 d时达到最大,绿叶银杏总黄酮含量最高,为28.65 mg·g^(-1),比CK处理高56.3%。除了SOD和POD外,金叶银杏其他生理指标都低于绿叶银杏。相关性结果表明,银杏各生理指标间都呈现极显著正相关。多因素方差分析发现叶色、处理时间以及UVA强度对银杏各项生理指标都存在极显著影响,并且UVA强度和处理时间两者的交互效应对抗氧化酶活性、黄酮代谢相关酶活性、黄酮含量以及DPPH、ABTS自由基清除率存在极显著影响。【结论】不同强度UVA处理对银杏杂交子代各指标存都在显著影响,40μmol·m^(-2)·s^(-1)的UVA处理20 d绿叶银杏总黄酮含量最高。

UVA增强型棒状TiO_(2)复合材料的制备及紫外屏蔽性能研究

在低温水解条件下制备了一种长波紫外线(UVA)增强型棒状金红石TiO_(2),将Al(OH)_(3)均匀包覆在TiO_(2)表面,然后使用月桂酰赖氨酸(LL)对TiO_(2)/Al(OH)_(3)进行表面改性,最后在TiO_(2)/Al(OH)_(3)/LL表面包覆一层天然防晒剂白藜芦醇(RES),得到TiO_(2)/Al(OH)_(3)/LL/RES(TALR)复合材料。采用X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱仪、透射电子显微镜、扫描电子显微镜和热重分析仪等对样品的结构、形貌及热稳定性进行表征。结果表明:Al(OH)_(3)以非晶态形式均匀包覆在棒状金红石TiO_(2)表面,适宜包覆量为10%(质量分数);棒状TiO_(2)在中波紫外线(UVB)范围具有优异的紫外屏蔽能力,对UVA仍有令人满意的吸收效果;改性剂LL的最佳包覆量为12%,RES的最佳包覆量为15%(均为质量分数)。抗氧化实验及防晒指数测试结果表明,TALR复合材料具有良好的自由基清除能力和优异的紫外屏蔽效果。

8-MOP/UVA诱导培养真皮成纤维细胞衰老的作用

目的 探讨以 8 MOP/UVA作用于培养真皮成纤维细胞建立皮肤光老化模型的可行性。方法 采用光镜、电镜、流式细胞仪、酶组织化学、免疫组织化学等方法检测 8 MOP/UVA对培养真皮成纤维细胞多项细胞衰老相关指标的影响。结果 8 MOP/UVA作用后 ,培养真皮成纤维细胞迅速出现细胞衰老特征性的形态学及生物学特性改变 :细胞由分裂表型转化为无分裂活性表型 ,SA β Gal表达增加、p16蛋白表达增加。结论 8 MOP/UVA可诱导培养真皮成纤维细胞迅速出现具有细胞衰老特征性的形态学及生物学特性改变 ,以 8

扇贝多肽保护单次UVA氧化损伤HaCaT细胞

目的探讨扇贝多肽对单次长波紫外线辐射HaCaT角质形成细胞氧化损伤的保护作用机制。方法从栉孔扇贝中提取扇贝多肽(PCF,Mr=879)。UVA辐射强度为5J·cm-2。酶生化法测定胞质SOD,GSH-px活性,ROS、MDA水平;透射电镜观察细胞超微结构的改变;原位杂交技术检测细胞内p21mRNA的变化。结果在5J·cm-2UVA辐射下,在给定浓度范围内PCF能剂量依赖性降低胞质ROS、MDA水平;提高SOD,GSH-px活力;电镜下可见PCF可保护细胞超微结构;p21mRNA原位杂交发现PCF可明显抑制其表达。结论扇贝多肽对单次UVA诱导的人HaCaT细胞氧化损伤有保护作用。其机制与清除氧自由基、提高抗氧化酶活性、抑制p21mRNA表达及细胞凋亡有关。

防晒化妆品UVA区效果评价方法的研究

UVA能够穿透表皮直接损伤真皮层 ,使皮肤老化 ,纤维变性 ,诱发皮肤癌。如何评价防晒化妆品在UVA区的防护效果 ,国内尚缺乏检测方法。文章介绍了体内实验及体外实验的评价方法。体内实验采用MX 16黑色素 -红斑 -指数仪测试人的皮肤受到UVA照射后即时变成的一次性的灰色或棕色的光化学反应。这种着色称为黑化。体外实验为紫外分光光度计测试 32 0nm～ 40 0nm的吸光度值。两个方法显示了较好的相关性。体外方法具有操作简便、快速和重复性好等特点 。

十精丸对UVA致ESF-1细胞光老化保护作用的研究

目的:研究十精丸抗紫外线致ESF-1细胞光老化作用,并初步探讨其作用机制。方法:用40J/cm2的UVA照射人皮肤成纤维细胞建立光老化细胞模型,以不同浓度十精丸提取物处理光老化细胞,MTT法检测细胞活力,羟胺法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,TBA法检测丙二醛(MDA)含量。结果:UVA照射成纤维细胞后,细胞活力下降,SOD、GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P<0.01),十精丸水提液中(100μg/ml)、高(200μg/ml)剂量组能显著提高成纤维细胞细胞活力、SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论:十精丸水提液可抑制UVA引起的成纤维细胞活性下降,推测其机制为通过提高SOD活力、加速氧自由基的清除和减少氧自由基的产生,使细胞的脂质过氧化损伤程度降低有关。

吡咯喹啉醌对UVA诱导人皮肤成纤维细胞衰老的保护作用及机制研究

目的:研究吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinine,PQQ)对UVA诱导人皮肤成纤维细胞衰老的保护作用及其机制。方法:体外使用6孔板培养人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF),予以9 J/cm2照射,照射前后实验组加入80 ng/ml的8-甲氧基补骨脂(8-methoxypsoralan,8-MOP)和浓度为50、100、200 ng/ml的PQQ。UVA照射72 h后,对细胞进行衰老β-半乳糖苷酶染色、JC-1染色荧光显微镜检测线粒体膜电位变化、JC-1染色流式细胞仪检测线粒体膜去极化状况、real-time PCR检测衰老相关基因mmp1、mmp3的表达。结果:低剂量PQQ(50 ng/ml)实验组β-半乳糖苷酶染色呈阴性,JC-1染色后低剂量PQQ(50 ng/ml)实验组细胞线粒体膜电位改变的趋势有回转,JC-1染色后流式细胞仪检测PQQ对UVA诱导的衰老细胞线粒体去极化有保护作用,而且低剂量PQQ(50 ng/ml)实验组衰老相关基因mmp1、mmp3的表达也有明显降低。结论:吡咯喹啉醌对由UVA诱导的人皮肤成纤维细胞衰老有保护作用,而且这一作用可能是通过线粒体途径发挥作用的。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及扇贝多肽在UVA诱导HaCaT细胞凋亡中的作用

目的研究UVA对HaCaT细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumour necrosis factor related apoptosis inducing ligand，TRAIL）表达的影响；复制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡模型，探究TRAIL在UVA诱导的HaCaT细胞凋亡中的作用及扇贝多肽（Polypeptide from Chlamys farreri，PCF）对UVA诱导的TRAIL凋亡通路的影响。方法实验设计分为5组：对照组、UVA模型组、UVA＋5．69mmol·L^-1PCF组、UVA＋2．84mmol·L^-1PCF组、UVA＋1．42mmol·L^-1PCF组。Real-Time PCR检测TRAIL mRNA表达；蛋白质印迹法检测TRAIL蛋白表达及caspase-8活性；琼脂糖凝胶电泳分析TRAIL中和性抗体对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡的影响。结果8J·cm^-2UVA照射HaCaT细胞后TRAIL mRNA及蛋白表达增加，与对照组相比差异有显著性（P〈0．01）；TRAIL中和性抗体对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用；1．42～5．69mmol·L^-1剂量范围内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的HaCaT细胞TRAIL mRNA及蛋白表达（P〈0．05，P〈0．01）；PCF对UVA引起的HaCaT细胞caspase-8的活化有抑制作用，且呈量效关系。结论UVA可增强HaCaT细胞TRAIL表达；TRAIL参与了UVA诱导的HaCaT细胞凋亡；PCF对UVA诱导的HaCaT细胞TRAIL表达有抑制作用，也可减弱UVA诱导的caspase-8活化，以其抗氧化活性抑制TRAIL凋亡通路而发挥抗凋亡作用。

防晒化妆品抵抗UVA和UVB能力评价研究

以抵抗UVA和UVB能力为检测指标,采用体外紫外分光光度法,利用紫外线照射评价市售防晒霜、防晒液、粉底(液)、粉饼和眼霜的防晒功效和光稳定性,并研究随涂抹时间其防晒功效的变化情况。

SP600125抑制UVA激活皮肤成纤维细胞JNK通路的最佳浓度

【目的】研究抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞JNK通路的最佳SP600125浓度,为研究JNK信号通路在光老化中的作用机制奠定基础。【方法】原代培养取自儿童包皮的皮肤成纤维细胞。用CCK-8法结合荧光倒置显微镜研究不同剂量UVA和不同浓度SP600125及两者联合对皮肤成纤维细胞活性和形态的影响,以选择非细胞毒性的UVA剂量和SP600125浓度。再用Western-blot检测UVA辐照后不同时间点皮肤成纤维细胞中磷酸化c-Jun(P-c-Jun)表达以确定其被诱导表达的时间点。最后用Western-blot检测不同浓度SP600125对UVA上调的P-c-Jun表达的抑制。【结果】UVA和SP600125分别辐照细胞和孵育细胞时,UVA≤10 J/cm2和SP600125≤2μmol/L均能保持细胞活性在90%以上。10 J/cm2的UVA辐照不同浓度SP600125孵育的细胞时,≤800 nmol/L的SP600125孵育的细胞活性在90%以上;1μmol/L的SP600125使细胞活性明显下降至67.1%,镜下见部分细胞皱缩、碎裂、死亡;2μmol/L的SP600125使细胞活性进一步下降至7.6%,镜下见绝大部分细胞变形、碎裂、死亡。Western-blot结果显示P-c-Jun在UVA辐照后0.75 h、1.5 h均较0 h升高,3 h后恢复至0 h水平。200~800 nmol/L SP600125呈剂量依赖性地抑制UVA上调的P-c-Jun表达,差异有统计学意义。【结论】低于常用浓度的200~800 nmol/L SP600125即可抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞的JNK通路。JNK通路可能在UVA辐照的皮肤成纤维细胞中起抗凋亡作用。

UVA1照射对人工皮肤分泌MMP-1影响的初步研究

目的:探讨不同UVA1剂量照射对人工皮肤分泌MMP-1的影响,明确光致人工皮肤损伤的UVA1剂量。方法:通过ELISA法检测不同剂量的UVA1(0～90J/cm2)对人工皮肤表达MMP-1分泌的变化。结果:与0J/cm2相比,UVA1剂量为10J/cm2时MMP-1的分泌量无明显变化(P>0.05),当UVA1剂量大于20J/cm2时人工皮肤分泌MMP-1的量逐渐增高(P<0.05,P<0.0001),UVA1剂量在小于50J/cm2以前呈剂量依赖性增高,至70J/cm2以后分泌量较前有所降低。结论:引起人工皮肤光损伤的初始UVA1照射剂量为20J/cm2。

扇贝多肽通过调节c-jun和COX-2抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡

目的复制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡模型,研究UVA对细胞内c-jun和环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）的影响,从而探究扇贝多肽（Polypeptide from Chlamys far-reri,PCF）抑制UVA引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制。方法实验分为5组：正常对照组、UVA模型组、UVA＋5.69mmol·L^-1PCF组、UVA＋2.84mmol·L^-1PCF组、UVA＋1.42mmol·L^-1PCF组。应用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测细胞内c-jun的表达;RT-PCR结合蛋白质印迹法检测细胞内COX-2的表达;琼脂糖凝胶电泳分析PCF和COX-2特异性抑制剂celecoxib对UVA诱导HaCaT细胞凋亡的影响。结果预先加入PCF和celecoxib均可明显抑制8J·cm^-2UVA诱导的HaCaT细胞凋亡;UVA照射HaCaT细胞后COX-2mRNA及蛋白表达水平增加,与对照组相比差异有显著性（P〈0.01）;1.42-5.69mmol·L^-1剂量范围内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的细胞内COX-2mR-NA及蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）;PCF也抑制了UVA引起的HaCaT细胞内c-jun表达的增加,且呈量效关系（P〈0.05,P〈0.01）。结论UVA诱导HaCaT细胞发生凋亡时,细胞内COX-2和c-jun的表达明显增加,PCF通过抑制细胞内COX-2和c-jun的表达而发挥其抗凋亡作用。

防晒化妆品UVA防护效果评价方法研究进展

随着人们对UVA波段紫外线照射危害的了解,具有UVA防护效果的产品越来越受到消费者的青睐,其功效性评价也成为各方关注的重点。本文从人体测试和体外测试两方面介绍了化妆品UVA防护效果的评价及表示方法。

他克莫司对UVA照射后HaCaT细胞表达ICAM-1的影响

目的研究他克莫司(TM)对长波紫外线(UVA)照射后HaCaT细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响,以探讨TM治疗光敏性皮肤病的作用机制。方法采用ELASI和免疫组化法检测在不同强度UVA照射后,HaCaT细胞表达ICAM-1的情况。结果与未经UVA照射组细胞比较,未加TM组经UVA照射24h后,HaCaT细胞表达ICAM-1水平明显升高(P<0.01),而加入TM组的ICAM-1表达明显受到抑制(P<0.01)。结论TM对UVA照射后HaCaT细胞表达ICAM-1有抑制作用,提示对UVA引起的炎症有抑制作用。

桃红四物汤对UVA辐射后人真皮微血管内皮细胞表达氧自由基及ICAM-1的影响

目的:通过测定紫外线照射人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)建立的光损伤模型中清除自由基的酶SOD、CAT和细胞间黏附分子ICAM-1的含量,探讨中药汤剂桃红四物汤对UVA诱导的人真皮微血管内皮细胞光损伤后自由基形成和细胞间黏附分子的影响,进而探讨桃红四物汤对光损伤模型中人真皮微血管内皮细胞的保护作用,并从细胞分子层次阐明桃红四物汤拮抗光损伤的作用机理,为皮肤光损伤应用桃红四物汤来治疗提供了进一步深入研究的依据。方法:建造HDMEC细胞的培养与传代模型,通过ELISA方法检测抗氧化损伤标志物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、细胞间黏附分子(ICAM-1)来研究桃红四物汤在离体人类细胞层次上对于治疗光老化的作用。结果:UVA照射可使HDMEC细胞分泌CAT、SOD降低并提高ICAM-1表达水平。且桃红四物汤高、中、低剂量含药血清均能够促进HDMEC细胞分泌CAT、SOD升高并抑制ICAM-1表达水平,高剂量组效果最好。

全反式维A酸对UVA诱导人成纤维细胞胶原合成的影响

目的 探讨全反式维A酸 (at RA)对UVA诱导人成纤维细胞胶原生物合成的影响 ,为应用全反式维A酸治疗光老化皮肤病提供实验依据。方法 正常人来源的单层培养的皮肤成纤维细胞 ,经UVA照射后立即加入含不同浓度at RA的培养液 ,共 2天 ,用MTT法检测细胞增殖情况 ,3 H 脯氨酸检测细胞胶原合成情况。结果 在各组之间细胞增殖差别无显著性时 ,at RA浓度为 10 6mmol/L和 10 -5mmol/L的实验组比对照组的细胞胶原合成显著增高 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;而at RA浓度为 10 -4mmol/L的实验组比对照组的细胞胶原合成显著降低 (P <0 .0 1)。结论 在体外细胞培养情况下 ,相对低浓度的at RA(10 -6mmol/L ,10 -5mmol/L)可逆转UVA诱导人成纤维细胞胶原生物合成的降低 ,而相对高浓度 (10 -4mmol/L)

白藜芦醇对UVA照射HaCaT细胞的防护效应及其机制

采用Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)检测HaCaT细胞的增殖水平。Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测HaCaT细胞的凋亡率和死亡率。单丹磺酰尸胺(Monodansylcadaverine,MDC)荧光染色和二氯荧光黄二乙酸酯(Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针标记后,用激光共聚焦显微镜进行扫描,分别检测HaCaT细胞内自噬体和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平变化。Western blot检测HaCaT细胞内LC3B-II、磷酸化AKT(p-AKT)和总AKT蛋白表达变化。结果显示:经10~80 J/cm^2 UVA照射后,HaCaT细胞的增殖水平随受照剂量的增加逐渐降低(p<0.05);白藜芦醇预处理能显著促进UVA照射后HaCaT细胞增殖(p<0.01),降低其凋亡率和死亡率(p<0.05);经20 J/cm^2 UVA照射后3~24 h,HaCaT细胞内LC3B-II蛋白表达增强(p<0.01);白藜芦醇预处理能使UVA照射后HaCaT细胞内自噬增强(p<0.01),ROS水平降低(p<0.01),p-AKT蛋白表达增强(p<0.01)。提示白藜芦醇可能通过促进细胞自噬和AKT蛋白磷酸化,以及降低细胞内ROS水平,拮抗UVA导致的HaCaT细胞增殖抑制、凋亡和死亡。

京尼平苷对UVA诱导HSF细胞凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的:探讨京尼平苷对UVA诱导HSF细胞凋亡相关蛋白p53、Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响。方法:用20 J/cm的UVA照射HSF细胞,建立光损伤模型,以5×10^(-7)、5×10^(-6)、5×10^(-5) mol/L京尼平苷干预光损伤细胞,检测细胞活力、ROS相对含量、LDH活性,细胞凋亡率,实时定量PCR法检测p53、Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果:与空白对照组相比,UVA照射后,ROS相对含量增加,LDH活性增强,细胞活力下降,p53、Bax mRNA表达量升高(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达量的降低程度没有统计学意义(P>0.05);在给予京尼平苷干预后,ROS相对含量减少,LDH活性降低,细胞活力增加,p53、Bax mRNA表达量降低,Bcl-2 mRNA及表达量升高(均P<0.05)。结论:京尼平苷通过调控光损伤HSF细胞活力和细胞内ROS含量、LDH活性,调控p53、Bax和Bcl-2 mRNA表达,抑制凋亡相关通路,拮抗细胞的氧化损伤,减少细胞凋亡,起到防治紫外线对皮肤细胞损伤的作用。

他克莫司对UVA照射后HaCaT细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度他克莫司(TM)对不同强度长波紫外线(UVA)照射HaCaT细胞24h和48h后细胞增殖活性的影响。方法将培养的HaCaT细胞分别行2,4和8J/cm2的UVA照射,且照射前1h分别加入50,500和5000pg/mL的TM,对照组分别加入50,500和5000pg/mL的TM,但不行UVA照射。各剂量组分别照射24h和48h后在倒置相差显微镜下观察细胞的形态变化,MTT法检测细胞的增殖活性。结果HaCaT细胞经UVA照射24h后,细胞连接松散,细胞折光性较未照射组差,部分细胞死亡、脱壁;与未经UVA照射组相比,细胞增殖受到抑制(P<0.05),加入TM组无明显变化(P>0.05);照射48h后细胞虽有大量增殖,但体积较小;与未经UVA照射组相比,细胞增殖明显(P<0.05),加入TM组细胞增殖受到抑制(P<0.05)。结论TM可抑制UVA照射HaCaT细胞引起的过度增殖,对UVA照射后的HaCaT细胞有保护作用。

局部PUVA治疗儿童白癜风疗效及安全性观察

目的:观察局部光化学疗法(Psoralen plus UVA,PUVA)治疗儿童白癜风的临床疗效及安全性。方法:采用小型UVA灯(电压220V,电流0.34A,功率25.4W,主波峰长365nm,辐照度为1070uw/cm2)治疗56例白癜风患儿,30次为一个疗程,共观察3个疗程。结果:第一疗程、第二疗程及第三疗程结束后临床显效率分别达39.29%、48.21%和55.36%,未发现明显不良反应,其中病程短、局限性及面颈部白癜风患儿疗效佳。结论:局部PUVA治疗儿童白癜风安全、有效、不良反应小,小型UVA灯具有疗效好、治疗方便的优点。