原发性肝癌survivin基因表达及靶向survivin治疗

目的:研究原发性肝癌survivin基因表达及治疗靶点作用.方法:收集肝癌和癌旁组织40例.Westernblot法检测survivin蛋白表达,RT-PCR法检测survivinmRNA.原位末端标记法检测组织凋亡指数.设计合成survivin反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASODN)转染hepG2细胞,设置空白对照组、脂质体组、正义链组和各浓度ASODN组.流式细胞术检测凋亡指数,MTT法检测化疗药物对细胞生长抑制率.建立原位荷肝癌鼠模型并分为3组:反义survivin链组、空白对照组及脂质体组.V=ab2/2计算肿瘤体积,以V治疗后/V治疗前×100%计算生长指数.结果:肝癌细胞株和34/40例肝癌组织表达survivin蛋白及mRNA,癌旁组织无survivin表达.肝内转移组(93.5%)和门静脉癌栓组(92.8%)survivin蛋白表达阳性率显著高于阴性组(55.6%)和无癌栓组(66.7%)(p<0.05)肝内转移组(1.105±0.396)和门静脉癌栓组(1.137±0.404)survivinmRNA水平显著高于阴性组(0.572±0.082)和无癌栓组(0.627±0.122)(P<0.05).Survivin阳性组织凋亡指数为1.15±0.33%,显著低于阴性组(4.50±0.83%)(P=0.00002).ASODN组survivin表达减弱,凋亡指数增高,200nmol/L组为10.50±0.76%,400nmol/L组为12.99±0.42%,600nmol/L组为22.21±1.26%,明显高于对照组(P<0.05).化疗药物对ASODN组生长抑制率增高,200nmol/L组为47.7±4.6%(5-FU)、59.7±3.5%(DDP),400nmol/L组为56.8±4.0%(5-FU)、68.2±2.1%(DDP),600nmol/L组为85.2±2.3%(5-FU)、79.9±3.7%(DDP),明显高于对照组(P<0.05).23/25裸鼠成功建立原位荷肝癌动物模型.ASODN组肿瘤生长指数为51.0±24.2%,显著低于空白对照组(70.2±23.4%)和脂质体组(168.0±28.6%)(P<0.05).ASODN组凋亡指数为21.97±2.11%,显著高于空白对照组(3.21±0.57%)和脂质体组(3.07±0.81%)(P<0.05).结论:survivin在HCC发生中有重要作用.survivinASODN转染能下调survivin表达,诱导细胞凋亡,增加HCC细胞对化疗药物敏感性.survivinASODN对荷HCC鼠有一定治疗作用.

膀胱移行细胞癌中survivin及其剪接变异体survivin-2B和survivin-ΔEx3的表达及意义

目的:研究survivin及其剪接变异体survivin-2B和survivin-ΔEx3在膀胱移行细胞癌中的表达,探讨其临床意义。方法:应用免疫组化及实时荧光定量PCR检测膀胱移行细胞癌、癌旁和正常膀胱组织survivin、survivin-2B和survivin-ΔEx3表达。结果:Survivin、survivin-2B和survivin-ΔEx3在膀胱移行细胞癌中均表达,与对照组差异有统计学意义。随着病理分级、临床分期升高,survivin和survivin-ΔEx3表达升高(P<0.05),且两者正相关(0<r<1,P<0.05);而survivin-2B的表达则降低(P<0.05)。结论:Survivin、survivin-2B和survivin-ΔEx3可能在膀胱移行细胞癌的发生发展中起不同作用,为膀胱移行细胞癌的诊断治疗提供新的思路。

miR-145-5p调控Survivin通过凋亡通路对食管癌生物学行为的影响

目的:探讨miR-145-5p靶向调控Survivin及凋亡信号通路对食管癌凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测食管癌组织和细胞系中miR-145-5p、Survivin mRNA相对表达量。双荧光素酶报告基因分析验证miR-145-5p和Survivin的靶向调控关系。通过RT-qPCR法测定细胞转染后miR-145-5p和Survivin mRNA的相对表达量。Western blot检测凋亡通路中BCL2、MDM2和Caspase-3蛋白的表达。通过MTT、流式细胞术、划痕愈合实验及Transwell小室实验检测TE-1细胞存活能力、凋亡率、迁移率及侵袭能力。结果:与癌旁组织相比,miR-145-5p在癌组织中表达低,而Survivin表达高(P<0.05)。与正常食管黏膜上皮HEEC细胞相比,食管癌TE-1细胞中miR-145-5p低表达,Survivin高表达(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-145-5p和Survivin间存在靶向调控关系。与未转染和转染miR-145-5p对照物的TE-1细胞相比,转染miR-145-5p模拟物后可显著增加miR-145-5p的表达,抑制Survivin mRNA的表达,同时BCL2和MDM2蛋白的表达下降,Caspase-3表达上升,促进细胞凋亡,抑制了细胞活性、侵袭和迁移能力(P<0.05)。结论:通过miR-145-5p的负向调控,Survivin表达被抑制,凋亡通路被激活,从而促进细胞凋亡,抑制食管癌细胞存活,侵袭和迁移能力。

超声收缩期峰值血流速度、阻力指数与乳腺癌组织中Survivin、基质金属蛋白酶-11、人类表皮生长因子受体2关系研究

目的:探讨超声收缩期峰值血流速度(PSV)、阻力指数(RI)与乳腺癌组织中Survivin、基质金属蛋白酶-11(MMP-11)、人类表皮生长因子受体2(HER2)的关系。方法:选取60例乳腺癌患者作为观察组,另选择同期60例乳腺良性病变患者作为对照组。均行手术治疗,术前经超声检测,比较两组患者术前RI值、PSV值,免疫组化法检测术后癌组织中Survivin、MMP-11、HER2的表达,分析Survivin、MMP-11、HER2表达与超声RI、PSV值的关系。结果:观察组RI、PSV值高于对照组(均P<0.05)。观察组癌组织中Survivin、MMP-11、HER2表达阳性率高于对照组(均P<0.05)。不同病灶直径、临床分期患者RI、PSV值,不同病灶直径、临床分期及是否淋巴结转移患者癌组织中Survivin、MMP-11、HER2表达比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。癌组织中Survivin、MMP-11、HER2表达与PSV、RI值呈正相关(均P<0.05)。结论:超声检测RI、PSV值对术前判断乳腺癌有一定价值,RI、PSV值与乳腺癌癌组织Survivin、MMP-11、HER2表达均相关,Survivin、MMP-11、HER2在乳腺癌的发生、发展过程中发挥重要作用。

miR-203a-3p对食管癌细胞侵袭迁移能力的影响及其与Survivin的靶向调控关系

目的观察微小RNA(miR)-203a-3p对食管癌细胞侵袭、迁移能力的影响并分析其与Survivin的靶向调控关系。方法收集对数生长期的食管癌细胞TE-1及正常食管黏膜上皮细胞HEEC,RT-qPCR法检测细胞miR-203a-3p、Survivin mRNA。双荧光素酶报告基因检测法分析miR-203a-3p与Survivin的靶向调控关系。将TE-1细胞分为对照组、miR-203a-3p模拟组、miR-203a-3p抑制组及阴性对照组。miR-203a-3p模拟组转染miR-203a-3p mimic,miR-203a-3p抑制组转染miR-203a-3p inhibitor,阴性对照组转染miR-203a-3p NC,对照组不进行转染,RT-qPCR法验证转染效率。采用MTT法检测转染后2、12、24、36、48 h的细胞活力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果食管癌细胞中miR-203a-3p mRNA表达低于正常食管黏膜上皮细胞,Survivin mRNA表达高于正常食管黏膜上皮细胞(P均<0.05)。TargetScan数据库分析显示,Survivin基因在3′UTR端存在7个连续的可以与miR-203a-3p互补的核苷酸序列;双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染Survivin-WT和miR-203a-3p mimic质粒的TE-1细胞荧光素酶活性低于其他细胞(P<0.05)。培养12、24、36、48 h时细胞活力miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05);细胞迁移距离及侵袭细胞数miR-203a-3p抑制组>对照组、阴性对照组>miR-203a-3p模拟组(P均<0.05)。结论miR-203a-3p高表达可抑制食管癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能与靶向负调控Survivin有关。

甲状腺乳头状癌患者Survivin和VEGF-C表达水平及在淋巴转移中的协同作用

目的 探讨甲状腺乳头状癌患者Survivin和血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-c, VEGF-C)表达水平及其在淋巴转移中的协同作用。方法 前瞻性纳入2019年1月到2020年12月甲状腺乳头状癌患者86例为研究对象,入院时测量所有受试者Survivin和VEGF-C表达水平,采用Pearson相关系数分析Survivin和VEGF-C表达水平的相关性,后随访1年,根据患者是否发生淋巴转移分为转移组和非转移组;使用Logistic回归方程分析Survivin和VEGF-C表达水平对甲状腺乳头状癌患者淋巴转移的影响,绘制ROC曲线分析其预测效能。结果 86例甲状腺乳头状癌患者随访1年后,共7例失访,其中29例患者出现淋巴转移,为转移组,50例患者未出现淋巴转移,为未转移组。Survivin和VEGF-C表达水平转移组高于未转移组,Pearson相关系数分析显示Survivin与VEGF-C表达水平呈正相关(r=0.418,P<0.05);Logistic回归方程分析显示Survivin(OR=1.952)、VEGF-C(OR=1.790)高表达均为甲状腺乳头状癌患者淋巴转移的危险因素,ROC曲线分析显示Survivin和VEGF-C的曲线下面积分别为0.878、0.776。结论 甲状腺乳头状癌患者Survivin和VEGF-C表达水平呈正相关,且在促进甲状腺乳头状癌淋巴转移中起协同作用。

Survivin联合CXCL13对宫颈上皮内瘤变病变程度的评估价值

目的探讨Survivin联合CXC亚家族趋化因子配体13(CXCL13)对宫颈上皮内瘤变(CIN)病变程度的评估价值。方法选取2020年1月—2023年1月淄博市妇幼保健院手术切除的101例CIN组织石蜡标本作为研究组,其中CIN 3级(高级别宫颈病变)组织石蜡标本38例,CIN 2级(高级别宫颈病变)42例,CIN 1级(低级别宫颈病变)21例。另选取同期该院因子宫肌瘤行子宫切除的正常宫颈组织石蜡标本101例作为对照组。采用免疫组织化学染色测定不同宫颈组织标本中Survivin、CXCL13蛋白表达;采用多因素逐步Logistic回归分析CIN病变程度的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Survivin、CXCL13蛋白评估CIN病变程度的诊断效能。结果CIN 3级宫颈组织Survivin蛋白阳性表达率均高于CIN 1、2级宫颈组织、正常宫颈组织(P<0.05),CXCL13蛋白阳性表达率均低于CIN 1、2级宫颈组织、正常宫颈组织(P<0.05);CIN 2级宫颈组织Survivin蛋白阳性表达率均高于CIN 1级宫颈组织、正常宫颈组织(P<0.05),CXCL13蛋白阳性表达率均低于CIN 1级宫颈组织、正常宫颈组织(P<0.05);CIN 1级宫颈组织中Survivin蛋白阳性表达率高于正常宫颈组织(P<0.05),CXCL13蛋白阳性表达率低于正常宫颈组织(P<0.05)。不同级别病变组年龄、体质量指数、受教育年限、性伴侣>1个占比、妊娠次数、流产次数、分娩次数、初孕年龄、盆腔炎病史占比、阴道炎病史占比、收缩压、舒张压、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐、尿酸、白细胞计数、血小板计数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。高级别病变组初次性交年龄低于低级别病变组(P<0.05),高级别病变组口服避孕药、高危型HPV感染、P16阳性、Ki-67阳性占比均高于低级别病变组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,口服避孕药[OR=3.114(95%CI:1.281,7.569)]、高危型HPV感染[OR=5.613(95%CI:2.309,13.640)]、Survivin蛋白阳性[OR=3.435(95%CI:1.413,8.348)]、CXCL13蛋白阳性[OR=3.347(95%CI:1.377,8.134)]是影响CIN病变程度的因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,Survivin、CXCL13及两者联合评估CIN病变程度的敏感性分别为72.50%(95%CI:0.612,0.816)、67.50%(95%CI:0.560,0.773)、81.25%(95%CI:0.707,0.888),特异性分别为71.43%(95%CI:0.477,0.878)、76.19%(95%CI:0.525,0.909)、90.48%(95%CI:0.682,0.983),曲线下面积分别为0.726(95%CI:0.629,0.822)、0.712(95%CI:0.604,0.819)、0.898(95%CI:0.834,0.963)。结论Survivin、CXCL13与CIN病变程度有关,随着CIN病变程度升级,Survivin蛋白阳性表达呈上升趋势、CXCL13蛋白阳性表达呈下降趋势,两者联合评估CIN病变程度效能良好,具有一定的临床价值。

Ets-1和survivin在宫颈鳞状细胞癌中的表达研究

目的 探讨宫颈鳞状细胞癌(宫颈鳞癌)Ets-1和survivin表达与患者临床病理指标的关系。方法应用免疫组化EliVision^(TM) plus二步法检测72例宫颈鳞癌手术标本及30例癌旁宫颈组织Ets-1和survivin表达,分析其表达与患者年龄、癌灶大小、浸润深度、分化等级、TNM分期、术前淋巴转移、术后5年内复发转移7项指标的关系。结果 Ets-1阳性染色可见于细胞核及细胞质,survivin阳性染色多见于细胞质,少见于细胞核。癌组织Ets-1和survivin阳性率(分别为63.9%,72.2%)均显著高于癌旁组织(分别为13.3%,3.3%)(P<0.05)。患者年龄、癌灶大小均与Ets-1和Survivin表达阳性率无关(P>0.05);浸润深度、分化等级、TNM分期、术前淋巴转移、术后5年内复发转移5项指标均与Ets-1和survivin表达阳性率相关(P<0.05)。72例患者Ets-1和survivin共阳率为58.3%,共阴率为22.2%,两者表达呈正相关(r=0.49,P<0.05)。结论 Ets-1和survivin与宫颈鳞癌的发生发展密切相关,两者高水平表达预示癌组织侵袭能力强、分化等级低、病情发展快、淋巴转移早、患者预后差。

Survivin、p53和bcl-2在脑星形细胞肿瘤中的表达及相关性研究

背景与目的:近年来发现胶质瘤生长、分化有着其特定的分子机制,胶质瘤恶性程度与特定基因的突变、丢失或扩增表达有密切的关系。本研究探讨凋亡抑制基因Survivin、抑癌基因p53和癌基因bcl-2在人脑星形细胞肿瘤中的表达、相互关系及其意义。方法:按制定的人组标准选择45例脑星形细胞肿瘤标本,应用免疫组化技术检测Survivin、p53、bcl-2在不同级别脑星形细胞瘤中的表达。结果:45例脑星形细胞肿瘤标本中33例表达Survivin蛋白,阳性率为73.3%,并随星形细胞肿瘤病理分级的增加而增高(P<0.05);胶质母细胞瘤的p53阳性水平要高于星形细胞瘤:bcl-2阳性水平星形细胞瘤显著高于胶质母细胞瘤;Survivin表达与 p53表达密切相关,与bcl-2表达无相关性。结论:Survivin高表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关;Survivin的表达与脑星形细胞瘤中p53异常表达密切相关。

Survivin反义寡核苷酸对k562细胞周期及c-myc的影响

目的探讨凋亡抑制基因survivin的反义寡核苷酸对白血病细胞k562细胞周期及cmyc的影响。方法实验分反义组、无义组、脂质体组、空白组,转染后24、48小时流式细胞仪检测细胞周期;免疫组织化学方法检测survivin、cmyc蛋白水平。结果反义寡核苷酸作用后,k562细胞被阻滞在G0/G1期,G0G1期细胞明显增多,S期及G2M期细胞明显减少,细胞周期进程受到明显阻滞,而无义组、脂质体组、空白组细胞周期进程无明显变化(P<0.05);反义寡核苷酸作用24小时后细胞内survivin及cmyc的表达水平下降,但与无义组、脂质体组、空白组比较无显著性差异(P>0.05),而48小时后survivin及cmyc表达水平进一步降低,与各对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论survivin反义寡核苷酸能阻滞K562细胞于G0/G1期、并下调cmyc蛋白的表达。

抑制Survivin缓解小细胞肺癌依托泊苷耐药的功能及机制研究

目的探究Survivin对小细胞肺癌依托泊苷耐药细胞株增殖和凋亡的影响及机制。方法构建小细胞肺癌细胞NCI-H82和NCI-H446依托泊苷耐药细胞株(NCI-H82/ER和NCI-H446/ER),检测NCI-H82/ER和NCI-H446/ER的IC50及耐药指数,qRT-PCR和蛋白质印迹检测细胞株中Survivin表达。NCI-H82/ER和NCI-H446/ER细胞中转染Survivin siRNA(si-Survivin组)或Survivin siRNA Negative Control(si-NC组),CCK8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹检测PI3K、AKT、mTOR磷酸化水平。结果NCI-H82/ER和NCI-H446/ER的IC50分别为154.5μmol/L和130.5μmol/L,耐药指数分别为5.40和6.21。相比于NCI-H82和NCI-H446细胞,NCI-H82/ER和NCI-H446/ER细胞中Survivin mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.001),相比于si-NC组,si-Survivin组NCI-H82/ER和NCI-H446/ER细胞增殖能力显著降低(P<0.05),凋亡水平显著增加(P<0.001),PI3K、AKT、mTOR磷酸化均显著降低(P<0.001)。结论抑制Survivin可抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路影响依托泊苷耐药小细胞肺癌细胞的增殖和凋亡。

胃癌前病变及胃癌组织中survivin和caspase-3蛋白表达的意义

目的:检测survivin和caspase-3蛋白在胃癌前病变及胃癌组织中的表达情况,探讨其与胃黏膜癌变的关系及作用机制.方法:采用Envision免疫组化学二步法检测不同胃黏膜病变组织131例(包括慢性炎症44例、单纯肠化生31例,异型增生40例和胃癌16例)中survivin和caspase-3蛋白的表达情况.结果:慢性炎症,单纯肠化生,异型增生和胃癌中的survivin蛋白阳性表达率分别为4.5%(2/44),51.6%(15/31),100.0%(40/40)和93.8%(15/16).胃癌组织和异型增生组survivin蛋白表达显著高于单纯肠化生组(P<0.05).胃癌survivin蛋白表达阳性组caspase-3蛋白表达(3/13,23.1%)显著低于survivin蛋白表达阴性组(2/3,66.7%,P<0.05).结论:胃癌survivin蛋白表达水平与异型增生相当,高于单纯肠化生,survivin可能通过阻抑caspase-3促进胃癌的演进.

葡萄籽提取物通过抑制Survivin的表达而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖

目的观察GSE对乳腺癌细胞增殖的影响及其作用的分子信号途径,为寻找新的乳腺癌临床治疗药物奠定一定的理论基础。方法倒置显微镜观察不同浓度GSE作用后MCF-7细胞生长的形态学变化;PI单染后流式细胞仪检测MCF-7细胞的周期改变;半定量RT-PCR观察Survivin mRNA的表达;Western blot检测Survivin和Caspase-3的蛋白表达变化;荧光素酶试剂盒检测Survivin核心启动子的活性;半定量RT-PCR观察与Survivin核心启动子活性相关的转录因子Sp1、E2F-1和HIF-1α的表达变化。结果经GSE作用24h后,MCF-7细胞形态发生改变,细胞变圆、脱壁,并聚集成团;细胞生长周期发生改变,细胞阻滞于S期,G2/M期细胞明显减少;Survivin mRNA表达降低,Survivin蛋白表达减少;Caspase-3蛋白有活性片段产生;Survivin核心启动子活性明显降低,与其活性相关的转录因子Sp1、HIF-1α mRNA表达降低,E2F-1 mRNA表达升高。结论GSE通过调节Survivin核心启动子活性相关转录因子的表达而抑制Sur-vivin核心启动子的活性,下调Survivin基因的表达同时激活Caspase-3蛋白的活性,抑制了乳腺癌MCF-7细胞的生长,同时可能还诱导了肿瘤细胞的凋亡。

视网膜母细胞瘤组织survivin、p16和Bcl-2表达意义

目的:研究视网膜母细胞瘤(retinoblastom,RaB)组织survivi、np16和Bcl-2表达。方法:RB标本采用免疫组织化学方法观察sur-vivin、p16和Bcl-2表达水平。结果:RB标本中survivi、np16和Bcl-2阳性检出率分别是:36例RB组织中19例survivin蛋白呈阳性表达,阳性率为53%(19/36),对照组6例组织未见survivin蛋白阳性表达,两组比较差异有显著性的意义,分化型为50%(10/20),未分化型为56%(9/16),两型之间差异无显著性(P>0.05)。36例RB组织P16蛋白阳性表达率为47%(17/36),分化型为55%(11/20),未分化型为38%(6/16),两型比较差异有显著性(P<0.05)。36例RB组织中BCL-2蛋白表达阳性率为50%(18/36),分化型中为35%(7/20),未分化型为69%(11/16),两型比较差异有显著性(P<0.05)。结论:survivi、np16和Bcl-2在RB的发生和发展过程中起重要作用。

小分子Survivin干扰RNA逆转肺癌细胞耐药的研究

目的探讨小分子Survivin干扰RNA(siRNA-Survivin)逆转人肺癌耐药细胞(A549DDP)耐药性的研究。方法应用RT-PCR法及Western-blot方法证明Survivin基因在人肺腺癌耐药细胞系(A549DDP)细胞系呈现高表达;并采用脂质体为转染介质,将Survivin小片段RNA导入A549DDP细胞沉默Survivin基因;应用MTT法观察顺铂、多西他赛、吉西他滨、表阿霉素对沉默Survivin基因后的A549DDP细胞的细胞增殖抑制及半数抑制浓度的变化。结果 1,Sur-vivin-mRNA、Survivin蛋白在A549DDP细胞系表达水平均显著高于A549细胞系;2,顺铂、多西他赛、吉西他滨、表阿霉素对沉默Survivin后A549DDP细胞的细胞增殖抑制与对照组(A549DDP细胞s、iRNA-control A549DDP细胞)相比明显增加,半数抑制浓度(IC50)明显下降,差异显著(P<0.01)。结论 Survivin参与了肺腺癌细胞耐药的形成;小分子Sur-vivin干扰RNA沉默Survivin可以提高耐药的肺癌细胞对化疗药物的敏感性。Survivin可能成为临床监测肿瘤耐药性变化,逆转肺癌耐药的一个新的靶点。

Survivin反义寡核苷酸对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究

目的探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法3 0只裸鼠建立人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机分3组,每组1 0只。分别于瘤周及瘤体注射阳离子脂质体(lipofectin,Lip),ASODN/Lip及NODN/Lip,每5天1次,共3次。观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和裸鼠体重的变化。用TUNEL法,透射电镜观察体内瘤体的细胞调亡情况;用W estern-blot检测各组肿瘤的survivin蛋白表达情况。结果成功建立了裸鼠皮下移植瘤模型。ASODN/Lip治疗组的肿瘤体积在治疗期内减少,抑瘤率达7 0.1 0%;而NODN/Lip治疗组和Lip对照组肿瘤体积增加。各组裸鼠体重无明显变化。ASODN/Lip组细胞凋亡率为3 8.6%明显高于其他两组,差异有显著性(P<0.0 5)。ASODN/Lip组肿瘤的survivin蛋白表达明显降低。结论survivin反义寡核苷酸可有效地抑制人乳腺癌裸鼠皮下肿瘤的生长速度,并促进诱导肿瘤细胞的凋亡。

Survivin在乳腺癌中的表达及其与Caspase-3、PCNA表达的关系

目的探讨Survivin在乳腺癌发生、发展中的作用及其与Caspase-3蛋白表达和细胞增殖的相互关系。方法用免疫组化S-P法检测Survivin在正常乳腺组织(10例)、乳腺囊性增生组织(18例)、不典型增生组织(20例)和乳腺癌组织(50例)中的表达以及Caspase-3、PCNA在乳腺癌组织中的表达。结果Survivin蛋白在正常乳腺组织无表达,在乳腺囊性增生组织、不典型增生组织、乳腺癌组织中的阳性率分别为5.6%(1/18)、45.0%(9/20)、72.0%(36/50),差异有显著性(P<0.05)。Survivin蛋白的表达与临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、是否绝经、肿瘤大小和组织学分级均无关。Survivin与Caspase-3的表达呈负相关(P<0.01)。Survivin蛋白表达阳性的乳腺癌PCNA的标记指数明显高于Survivin蛋白表达阴性的乳腺癌细胞PCNA的标记指数(P<0.01)。结论Survivin蛋白在乳腺癌中表达上调,提示其通过抑制凋亡在乳腺癌发生、发展中起重要作用,可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点。Survivin通过与激活的Caspase-3结合,抑制其活性,从而阻止细胞凋亡。Survivin不仅参与凋亡的调控,还促进了细胞增殖。

Survivin基因在喉癌组织中的表达

目的探讨Survivin基因在喉癌组织中的表达,并分析与p53基因的表达、微血管形成以及临床病理因素的关系。方法应用免疫组化SP法检测Survivin、p53、CD34蛋白在40例喉癌组织中的表达情况,并与临床病理资料一起进行统计分析。结果Survivin蛋白在正常喉黏膜组织中不表达,40例喉癌组织中23例表达阳性,占57.5%。在P53蛋白表达阳性、阴性的喉癌组织标本中,Survivin蛋白阳性率分别为73.1%(19/26)和28.6%(4/14)(P=0.007)。Survivin蛋白阳性表达的病例中,平均瘤内微血管密度明显高于Survivin蛋白阴性表达的病例(P<0.001)。Survivin蛋白异常表达与喉癌临床分期、病理分级、颈淋巴结病理转移有关。结论Survivin基因在喉癌中存在高表达,并与p53基因突变、肿瘤微血管形成关系密切,Survivin异常表达可能在喉癌发生、发展及转移过程中发挥重要的抗凋亡作用。

Survivin启动子介导自杀基因与突变体融合基因真核表达载体的构建

目的:构建Survivin启动子介导自杀基因胞嘧啶脱氨酶(CD)与SurvivinCys84Ala突变体(SurMut)融合基因的重组腺相关病毒质粒(pAM/SurP-CDglySurMut),探讨其在肿瘤细胞中有效表达融合基因的能力.方法:PCR扩增E.coliCD基因和带有甘氨酸(gly)连接体的Survivin突变体片段,亚克隆至具有Survivin启动子的腺相关病毒载体pAM/SurP,获得重组表达载体pAM/Sur P-CDglySurMut.重组载体瞬时转染胃癌细胞,Western blot检测融合蛋白的表达.结果:经PCR扩增成功克隆E.coliCD基因和带有gly连接体的Survivin突变体片段.重组阳性克隆经限制性酶切鉴定和基因测序,证实目的基因CDglySurMut已正确插入pAM/SurP载体中.Westernblot证实Survivin启动子能够驱动CDglySurMut融合基因在胃癌细胞中表达.结论:pAM/SurP-CDglySurMut载体能够在肿瘤细胞中表达融合蛋白,为进一步探讨其靶向治疗肿瘤奠定了实验基础.

血清survivin抗体及基因表达检测对肺癌的诊断价值

目的探讨血清survivin抗体及基因表达对肺癌的诊断价值。方法收集47例肺癌患者和30例健康对照组的外周血标本,分别采用ELISA法、RT-PCR法检测血清中survivin抗体和survivin mRNA的表达水平。结果肺癌患者血清中survivin抗体和survivin mRNA表达水平均高于对照组(P均<0.05),肺癌患者血清血清survivin抗体表达与血清survivin mRNA的表达呈正相关(r=0.367,P<0.01)。结论血清survivin基因及抗体检测对临床肺癌诊断有重要价值。