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基于GCV的迭代Tikhonov正则化在测绘中的应用 被引量:2
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作者 邓伟 宋迎春 谢雪梅 《大地测量与地球动力学》 CSCD 北大核心 2023年第6期587-592,共6页
由于Tikhonov正则化(Tikhonov regularization,TR)法求解大地测量领域中的病态问题时,其求解质量过于依赖正则化参数的确定,且稳定性较差,因此提出改进的迭代Tikhonov正则化(iterated Tikhonov regularization,ITR)法,结合广义交叉验证... 由于Tikhonov正则化(Tikhonov regularization,TR)法求解大地测量领域中的病态问题时,其求解质量过于依赖正则化参数的确定,且稳定性较差,因此提出改进的迭代Tikhonov正则化(iterated Tikhonov regularization,ITR)法,结合广义交叉验证法(generalized cross-validation,GCV),可以有效克服上述缺点。算例结果表明,ITR-GCV法在解算精度、稳定性以及抗干扰性方面表现良好。 展开更多
关键词 病态问题 TIKHONOV正则化 迭代Tikhonov正则化 广义交叉准则
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鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB和伴侣蛋白Hfq对Ⅲ型分泌系统相关基因的调控 被引量:1
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作者 张家莉 潘永 +3 位作者 段世宇 令狐远凤 郑如雯 杨琦 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第4期512-518,共7页
细菌的Ⅲ型分泌系统(T3SS)与毒力密切相关。为探究鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB和伴侣蛋白Hfq对T3SS相关基因spaP、invC、invG、prgH、prgI、prgJ、prgK的调控,利用Red同源重组技术构建了上述基因与lacZ的融合菌株,在此基础上利用P22噬菌体转... 细菌的Ⅲ型分泌系统(T3SS)与毒力密切相关。为探究鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB和伴侣蛋白Hfq对T3SS相关基因spaP、invC、invG、prgH、prgI、prgJ、prgK的调控,利用Red同源重组技术构建了上述基因与lacZ的融合菌株,在此基础上利用P22噬菌体转导技术分别构建上述融合菌株与gcvB、hfq的单缺失菌株,通过qPCR和β-半乳糖苷酶试验分别检测gcvB、hfq缺失后各基因的转录水平和蛋白水平的变化。结果显示:与标准菌株相比,gcvB缺失后,spaP、invC、prgH、prgI、invG的转录水平和蛋白水平均上调;prgJ、prgK的转录水平上调,蛋白水平下调。hfq缺失后,spaP、invC、prgH、prgI、invG的转录水平和蛋白水平均上调,prgH、prgI、prgJ、prgK的蛋白水平下调。表明Hfq和GcvB均可对spaP、invC、invG、prgH、prgI、prgJ、prgK进行调控。上述结果可为鼠伤寒沙门菌sRNA GcvB和Hfq的作用机理研究提供参考。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 RED同源重组 gcvB HFQ Ⅲ型分泌系统
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Ganciclovir(GCV)与表达胸苷激酶的单纯疱疹病毒载体合用可使荷脑瘤大鼠长期存活
3
作者 鞠佃文 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第1期65-65,共1页
用单纯疱疹病毒(HSV)的缺陷株作为载体,感染肿瘤细胞治疗脑瘤的研究已取得了不少进展。本文报道将HSV—tk基因转移联合抗瘤药物GCV可使荷脑瘤大鼠长期存活。9L神经纤维肉瘤细胞用HSV载体hrR3转染,hrR3缺乏RNA还原酶,只能在肿瘤细胞... 用单纯疱疹病毒(HSV)的缺陷株作为载体,感染肿瘤细胞治疗脑瘤的研究已取得了不少进展。本文报道将HSV—tk基因转移联合抗瘤药物GCV可使荷脑瘤大鼠长期存活。9L神经纤维肉瘤细胞用HSV载体hrR3转染,hrR3缺乏RNA还原酶,只能在肿瘤细胞中复制而不能在神经细胞中复制存活.同时还携带病毒胸苷激酶(tk)基因,RH105无tk基因. 展开更多
关键词 脑瘤 胸苷激酶 长期存活 gcv 大鼠 合用 HSV 还原酶 RNA 载体
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1例白细胞及血小板降低的巨细胞病毒肺炎患者抗感染治疗分析
4
作者 刘萍 李静 《中外医药研究》 2024年第1期6-8,共3页
临床药师在工作中需评估用药风险,协助临床医生合理用药。该文介绍了临床药师参与1例白细胞及血小板(PLT)降低的巨细胞病毒肺炎患者使用更昔洛韦治疗的过程。临床药师评估患者PLT及白细胞降低的原因、使用更昔洛韦导致白细胞及PLT降低... 临床药师在工作中需评估用药风险,协助临床医生合理用药。该文介绍了临床药师参与1例白细胞及血小板(PLT)降低的巨细胞病毒肺炎患者使用更昔洛韦治疗的过程。临床药师评估患者PLT及白细胞降低的原因、使用更昔洛韦导致白细胞及PLT降低的风险以及肾功能减退情况,制定个体化方案,使患者得到有效治疗。通过此案例分析,以期为临床救治巨细胞病毒肺炎积累经验,为制定用药监护方案提供借鉴和参考。 展开更多
关键词 巨细胞病毒肺炎 更昔洛韦 白细胞 血小板 药学监护
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更昔洛韦联合雾化重组人干扰素α1b治疗对呼吸道合胞病毒感染肺炎患儿炎症因子及免疫功能的影响
5
作者 李宁 张春蕾 《黔南民族医专学报》 2024年第3期271-274,共4页
目的:分析更昔洛韦联合雾化重组人干扰素α1b治疗对呼吸道合胞病毒感染肺炎患儿炎症因子及免疫功能的影响。方法:选取本院收治的呼吸道合胞病毒感染肺炎患儿100例作为研究对象。根据随机数表法分为对照和观察两组,各50例;比较两组治疗... 目的:分析更昔洛韦联合雾化重组人干扰素α1b治疗对呼吸道合胞病毒感染肺炎患儿炎症因子及免疫功能的影响。方法:选取本院收治的呼吸道合胞病毒感染肺炎患儿100例作为研究对象。根据随机数表法分为对照和观察两组,各50例;比较两组治疗前、后的炎性因子降钙素原(PCT)、白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)与免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平,详细记录症状体征消失时间并分析治疗期间发生的不良症状。结果:治疗后两组比较,观察组持续发热、咳嗽、憋喘以及肺啰音消失时间短(P<0.05),血清PCT、IL-6与CRP水平低(P<0.05),血清IgG、IgA、IgM水平明显升高(P<0.05);治疗期间,两组恶心呕吐、白细胞降低、皮疹的总发生率比较无统计学意义(P>0.05)。结论:对呼吸道合胞病毒感染肺炎患儿实施更昔洛韦联合雾化重组人干扰素α1b联合用药可缩短症状体征消失时间,减轻机体炎症反应,提高机体免疫力,安全性相对较好。 展开更多
关键词 更昔洛韦 雾化重组人干扰素α1b 呼吸道合胞病毒感染 肺炎 免疫功能
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不同剂量更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的疗效
6
作者 郭佳佳 霍婉莹 +1 位作者 雷冰 张彦华 《深圳中西医结合杂志》 2024年第7期94-97,共4页
目的:比较不同剂量更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的疗效及安全性。方法:选取郑州大学第三附属医院2019年2月至2022年2月期间收治的50例新生儿先天性巨细胞病毒感染患儿,依据不同剂量更昔洛韦用药分为小剂量组(6.0 mg·kg^... 目的:比较不同剂量更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的疗效及安全性。方法:选取郑州大学第三附属医院2019年2月至2022年2月期间收治的50例新生儿先天性巨细胞病毒感染患儿,依据不同剂量更昔洛韦用药分为小剂量组(6.0 mg·kg^(-1))、大剂量组(7.5 mg·kg^(-1)),各25例,比较两组患儿临床症状评分、肝功能、病毒学检查结果、临床疗效、副作用发生情况。结果:两组患儿治疗后发热、呕吐腹泻、黄疸、肝大、原始反射异常评分均低于治疗前,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平及人类巨细胞病毒的脱氧核糖核酸(CMV-DNA)、基因拷贝数变异的免疫球蛋白G(CNV-IgG)、基因拷贝数变异的免疫球蛋白M(CNV-IgM)阳性率均低于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05),但两组组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);小剂量组患儿的副作用发生率低于大剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患儿总有效率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:大剂量和小剂量更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的疗效相当,但小剂量安全性更高。 展开更多
关键词 先天性巨细胞病毒感染 更昔洛韦 用药剂量 新生儿
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HSV-tk/GCV系统杀伤ACC-M细胞的机理研究 被引量:3
7
作者 孙春晓 何荣根 +3 位作者 张志愿 刘兴坤 周晓健 陈诗书 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期16-18,共3页
目的 为探索HSV-tk/GCV(单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因/羟甲基无环鸟苷)基因治疗系统杀伤人高转移性腺样囊性癌细胞ACC-M 的机理。方法 采用荧光染色荧光显微镜观察、细胞DNA 电泳、流式细胞仪检测等方法。结果 研究发现,荧光染... 目的 为探索HSV-tk/GCV(单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因/羟甲基无环鸟苷)基因治疗系统杀伤人高转移性腺样囊性癌细胞ACC-M 的机理。方法 采用荧光染色荧光显微镜观察、细胞DNA 电泳、流式细胞仪检测等方法。结果 研究发现,荧光染色有明显的细胞凋亡小体和染色质边聚现象;在GCV浓度较大(400 μm ol/L)作用时间较长(4 天)时有较明显的DNA 梯状现象;而FCM 发现在400 μm ol/LGCV 作用下有极明显的亚G1 峰。结论 HSV-tk/GCV基因治疗系统杀伤ACC-M 展开更多
关键词 HSV-TK/gcv 腺样囊性癌 基因治疗
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大鼠肝癌细胞HSV-tk/GCV自杀基因系统的构建及其旁观者效应 被引量:7
8
作者 谭宇蕙 吴映雅 +3 位作者 杜标炎 胡岳山 赵鹏 李杰芬 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第17期2069-2073,共5页
目的:构建针对大鼠肝癌细胞的HSV-tk/GCV(以下简称tk/GCV系统)自杀基因治疗系统,建立比较tk/GCV系统作用效果及其旁观者效应大小的细胞模型和检测方法.方法:用包装细胞PT67/tk分泌的重组逆转录病毒的活性颗粒感染大鼠肝癌CBRH7919细胞,... 目的:构建针对大鼠肝癌细胞的HSV-tk/GCV(以下简称tk/GCV系统)自杀基因治疗系统,建立比较tk/GCV系统作用效果及其旁观者效应大小的细胞模型和检测方法.方法:用包装细胞PT67/tk分泌的重组逆转录病毒的活性颗粒感染大鼠肝癌CBRH7919细胞,用G418筛选3wk获得高耐药性的重组子CBRH7919/tk,扩大培养.提取CBRH7919(tk-),CBRH7919/tk(tk+)细胞的DNA,把HSV-tk基因片段用Dig标记为探针后,与2种DNA及阳性对照DNA进行点杂交,以检测tk+细胞的DNA是否整合有HSV-tk基因.用0.1、1、10、50、100mg/L的GCV体外作用于tk-、tk+细胞,MTT检测存活率.用GCV体外分别作用于含不同比例tk+细胞的tk+、tk-混合细胞,MTT检测存活率,比较分析各组旁观者效应大小,确定后续实验的合适tk+比例.结果:用G418筛选3wk后获到高耐药性的CBRH7919/tk(tk+)重组细胞.HSV-tk基因片段用Dig标记为探针后进行点杂交,检测到tk+细胞DNA上已整合有HSV-tk基因,而tk-细胞DNA不含HSV-tk基因.GCV对tk+细胞生长抑制和细胞毒作用明显,而且有浓度、时间依赖性,而tk-细胞对GCV不敏感,说明HSV-tk基因已表达且表达产物具有生物学活性.GCV对含5%和10%tk+的混合细胞杀伤率分别为6.0%和25.2%,结果表明5-10%的tk+混合比例下自杀基因系统自身的旁观者效应较低,而且用MTT检测旁观者效应大小时灵敏度比较高,可作为后续研究中药活性成分对旁观者效应增效作用的tk+、tk-混合比例.结论:成功构建了针对大鼠肝癌的HSV1-tk/GCV自杀基因治疗系统,建立了体外快速筛选旁观者效应增效药物的稳定有效的细胞模型和检测方法. 展开更多
关键词 HSV1-tk/gcv自杀基因系统 肝癌 大鼠 旁观者 效应
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EB病毒LMP1通过NF-kB介导的HSV-tk/GCV治疗EBV相关肿瘤的研究 被引量:2
9
作者 杨力芳 王承兴 +5 位作者 胡智 唐敏 顾焕华 翁新宪 易薇 曹亚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第4期237-242,共6页
目的:研究EB病毒潜伏膜蛋白1(EBV-LMP1)通过活化NF-kB反式激活HIV-LTR进而启动自杀基困HSV-tk在EBV相关肿瘤治疗中的作用,为进一步开展肿瘤治疗提供科学的实验依据。方法:以鼻咽癌细胞为实验模型,将HSV-tk基因置于HIV-LTR调控序列之下,... 目的:研究EB病毒潜伏膜蛋白1(EBV-LMP1)通过活化NF-kB反式激活HIV-LTR进而启动自杀基困HSV-tk在EBV相关肿瘤治疗中的作用,为进一步开展肿瘤治疗提供科学的实验依据。方法:以鼻咽癌细胞为实验模型,将HSV-tk基因置于HIV-LTR调控序列之下,构建LMP1调控且依赖于NF-kB的HSV-tk/GCV系统,采用同位素方法检测tk活性来研究LMP1通过NF-kB调控HSV-tk转录的靶向性和表达特征,MTT方法检测在GCV处理下肿瘤细胞的生长状况。结果:成功构建受LMP1调控且依赖于NF-kB的HSV-tk表达质粒,发现其在GCV处理下,表达LMP1的肿瘤细胞的生长有显著的抑制。结论;携带有LMP1-HSV-tk的细胞对GCV治疗高度敏感,显示这一肿瘤治疗系统在EBV相关肿瘤中具有一定的应用前景。 展开更多
关键词 EBV-LMP1 BF-κB HSV-TK/gcv 肿瘤治疗 鼻咽癌
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基于GCV准则的小波图像去噪方法研究 被引量:5
10
作者 郑德忠 周颖慧 荆楠 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第z3期2268-2270,共3页
小波软阈值去噪的关键在于阈值的选择。常用的阈值计算方法主要针对噪声信号为不相关的情况,并需要对噪声方差进行估计。对于含有未知噪声的信号,提出一种GCV准则确定阈值的小波去噪方法,并证明该方法得到的阈值是一种渐近最优解。该方... 小波软阈值去噪的关键在于阈值的选择。常用的阈值计算方法主要针对噪声信号为不相关的情况,并需要对噪声方差进行估计。对于含有未知噪声的信号,提出一种GCV准则确定阈值的小波去噪方法,并证明该方法得到的阈值是一种渐近最优解。该方法与常用的基于固定阈值和SURE阈值的去噪法进行比较,结果表明,无论是肉眼观察还是利用均方差和信噪比进行客观评价,基于GCV准则的小波去噪方法可以在噪声未知的情况下,有效的去除信号噪声,并很好的保留信号的原始特征。 展开更多
关键词 小波去噪 gcv准则 均方差 信噪比
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HSV-tk/GCV系统对ACC-M细胞作用的体外试验 被引量:7
11
作者 孙春晓 何荣根 +3 位作者 张志愿 刘兴坤 周晓健 陈诗书 《口腔颌面外科杂志》 CAS 1999年第1期26-29,共4页
目的:为研究HSV-tk/GCV系统对涎腺腺样囊性癌细胞株(ACC-M)细胞的体外杀伤作用。方法:采用MTT法和细胞计数法对GCV在不同剂量和不同作用时间时细胞的生存率进行研究。结果:HSV-tk/GCV系统能有效地... 目的:为研究HSV-tk/GCV系统对涎腺腺样囊性癌细胞株(ACC-M)细胞的体外杀伤作用。方法:采用MTT法和细胞计数法对GCV在不同剂量和不同作用时间时细胞的生存率进行研究。结果:HSV-tk/GCV系统能有效地杀伤ACC-M细胞,杀伤呈时间依赖性和剂量依赖性,这种作用有比较明显的旁杀伤效应,旁杀伤效应的强弱与细胞间的接触程度呈正比关系。结论:HSV-tk/GCV系统能有效地杀伤ACC细胞,可望用于ACC的治疗。 展开更多
关键词 腺样囊性癌细胞 HSV-TK/gcv 杀伤作用 涎腺肿瘤
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TK/GCV系统对骨肉瘤MG-63细胞杀伤的体外实验研究 被引量:3
12
作者 张桦栋 吕智 +2 位作者 冯毅 刘小丽 侯慧铭 《中国骨伤》 CAS 2014年第3期240-243,共4页
目的:探讨脂质体介导的TK/GCV系统对骨肉瘤MG-63细胞的杀伤作用以及所产生的旁观者效应。方法:脂质体介导TK基因体外转染骨肉瘤MG-63细胞,倒置荧光显微镜观察细胞转染是否成功,流式细胞仪检测转染细胞与未转染细胞的转染效率。将未转染... 目的:探讨脂质体介导的TK/GCV系统对骨肉瘤MG-63细胞的杀伤作用以及所产生的旁观者效应。方法:脂质体介导TK基因体外转染骨肉瘤MG-63细胞,倒置荧光显微镜观察细胞转染是否成功,流式细胞仪检测转染细胞与未转染细胞的转染效率。将未转染的骨肉瘤MG-63细胞分为3组,实验1组用转染TK/GCV的细胞上清液与原培养液按1/10、1/7、1/5、1/2比例混和液培养;实验2组用0.22μm滤器过滤的转染后的细胞上清液与原培养液按1/10、1/7、1/5、1/2比例混和液培养;对照组用培养液培养,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分别测定各组细胞的生长抑制率及骨肉瘤细胞对TK/GCV系统的敏感性。结果:经TK基因转染的MG-63细胞,倒置荧光显微镜下有大量绿色荧光蛋白表达,流式细胞仪检测转染TK基因的细胞转染效率可达75.5%。6 d后MTT检测结果显示实验1组中各比例浓度的混合培养液对细胞的抑制率与对照组相比有统计学意义(P<0.05);实验2组中1/10、1/7比例浓度的混合培养液对细胞的抑制率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。经TK基因转染的MG-63细胞随GCV浓度增加,细胞凋亡率增加。结论:脂质体介导的TK/GCV系统能够通过旁观者效应抑制骨肉瘤MG-63细胞的生长。 展开更多
关键词 骨肉瘤 基因治疗 胸腺嘧啶脱氧核苷激酶(TK) 丙氧鸟苷(gcv) 旁观者效应
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pLTKcSN/VPC及GCV系统的旁观者效应观察 被引量:7
13
作者 张晓鹏 胡加飞 +8 位作者 蔡如珏 王伟民 袁国梁 王驹 许秀兰 卢亦成 张光霁 朱诚 顾健人 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期325-327,共3页
目的:探讨单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶基因(TK)逆转录病毒载体生产细胞(pLTKcSN/VPC)和更昔洛韦(GCV)系统杀伤恶性胶质瘤细胞过程中的旁观者效应。方法:采用大鼠胶质瘤细胞C6、人恶性胶质瘤U87MG和它们的... 目的:探讨单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶基因(TK)逆转录病毒载体生产细胞(pLTKcSN/VPC)和更昔洛韦(GCV)系统杀伤恶性胶质瘤细胞过程中的旁观者效应。方法:采用大鼠胶质瘤细胞C6、人恶性胶质瘤U87MG和它们的转染TK阳性细胞C6TK,U87TK,将C6与C6TK,U87MG和U87TK按比例(TK阳性细胞占细胞总体的0%~100%,10%梯度)分别混合培养于96孔板中,每种混合比例设6孔。培养24h后,6孔中3孔加入浓度为0.5μg/mlGCV,另外3孔作为空白对照。继续培养72h,直接计数各孔活细胞数并以对照组计数结果为本底计算GCV对各混合比例的抑制率。结果:当TK阳性细胞占10%时,C6和U87MG组的抑制率达到或超过30%,当TK阳性细胞占总体的50%以上时,GCV对各混合比例的抑制率接近100%。结论:pLTKcSN/VPC和GCV系统杀伤恶性胶质瘤细胞过程中存在明显的旁观者效应。 展开更多
关键词 恶性 胶质瘤 基因治疗 逆转录病毒 TK gcv
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细胞缝隙连接与HSV-TK/GCV系统旁观者效应的关系 被引量:8
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作者 杨燕 陶亮 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期9-12,共4页
在用单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统治疗肿瘤的研究中,一个有趣和重要的现象就是旁观者效应(bystander effect,BE)。它在很大程度上提高了HSV-TK/GCV系统治疗肿瘤的疗效。但到目前为止,BE的确切机制尚未阐明。... 在用单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统治疗肿瘤的研究中,一个有趣和重要的现象就是旁观者效应(bystander effect,BE)。它在很大程度上提高了HSV-TK/GCV系统治疗肿瘤的疗效。但到目前为止,BE的确切机制尚未阐明。大量研究表明,靶细胞连接蛋白(connexin,Cx)的表达及其形成的细胞间缝隙连接(gapjunction,GJ)与这一现象关系密切。该文对GJ与HSV-TK/GCV系统BE的关系作一综述,并探讨了由HSV-TK/GCV系统生成可经GJ传递的"死亡信号"的性质。 展开更多
关键词 连接蛋白 缝隙连接 旁观者效应 HSV—TK/gcv系统 自杀基因疗法
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HSV-tk/GCV自杀基因系统对喉癌细胞杀伤作用的体外研究 被引量:3
15
作者 刘志 成诗银 鱼兵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期582-585,共4页
目的 研究逆转录病毒介导的HSV tk/GCV系统对人喉癌细胞的体外杀伤作用。方法 构建携带HSV tk基因的逆转录病毒载体 ,并以该重组逆转录病毒感染人喉癌细胞Hep 2。以G4 18筛选的抗性克隆 (命名为Hep 2 /tk) ,用MTT比色法观察GCV在体外... 目的 研究逆转录病毒介导的HSV tk/GCV系统对人喉癌细胞的体外杀伤作用。方法 构建携带HSV tk基因的逆转录病毒载体 ,并以该重组逆转录病毒感染人喉癌细胞Hep 2。以G4 18筛选的抗性克隆 (命名为Hep 2 /tk) ,用MTT比色法观察GCV在体外对Hep 2 /tk细胞的杀伤作用。结果 Hep 2 /tk细胞与未转染tk基因的Hep 2 /0、Hep 2细胞相比较 ,三者的生长速度无明显差别。Hep 2 /tk细胞对GCV高度敏感 ,即低浓度GCV(0~ 1mg/L)处理Hep 2 /tk细胞 7d,可将其大部分细胞杀死 ,增加GCV的浓度 (>1mg/L)不能显著增强其对Hep 2 /tk细胞的杀伤作用。 结论 人喉癌细胞Hep 2对HSV tk/GCV系统高度敏感 。 展开更多
关键词 HSV-TK/gcv自杀基因系统 喉癌 细胞杀伤作用 体外研究 基因治疗 更昔洛韦
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乳腺癌特异性多肽介导的HSV-TK/GCV系统的构建及其靶向杀伤效应 被引量:2
16
作者 耿计伟 董坚 +6 位作者 刘为青 高嫦娥 熊秋霞 缪延栋 周华华 李秋恬 李臣 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期383-388,共6页
目的:研究乳腺癌MDA-MB-231细胞特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向杀伤作用。方法:以PCR从质粒pORF-HSV-TK中扩增目的基因PI-TK,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-PI-TK载体,转... 目的:研究乳腺癌MDA-MB-231细胞特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外靶向杀伤作用。方法:以PCR从质粒pORF-HSV-TK中扩增目的基因PI-TK,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建pET-28a(+)-PI-TK载体,转化宿主菌,经IPTG诱导表达PI-TK融合蛋白,利用His-Tag对其进行纯化,SDS-PAGE和Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白。将不同质量浓度的PI-TK融合蛋白与MDA-MB-231细胞共培养,联合更昔洛韦(ganci-clovier,GCV)作用后,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,CCK-8法检测MDA-MB-231细胞的增殖。结果:成功构建了重组原核表达载体pET-28a(+)-PI-TK,获得纯化的PI-TK融合蛋白,SDS-PAGE及Western blotting鉴定PI-TK融合蛋白表达正确。单独PI-TK融合蛋白不影响MDA-MB-231细胞的形态和增殖,但PI-TK融合蛋白联合GCV能剂量依赖性靶向抑制MDA-MB-231细胞的增殖,200μg/ml PI-TK+10 mg/LGCV作用的抑制率达(68.9±7.57)%;PI-TK联合GCV抑制MDA-MB-231细胞的IC50值为152.64μg/ml。上述各作用对MDA-MB-435细胞均无影响(P<0.05)。结论:乳腺癌特异性转导多肽PI介导的HSV-TK/GCV抗瘤系统可靶向杀伤MDA-MB-231细胞。 展开更多
关键词 乳腺癌特异性多肽 PI 乳腺癌 MDA-MB-231细胞 HSV—TK/gcv抗瘤系统 靶向性
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重组IFN-α2a与HSV-tk/GCV系统协同作用增强对于卵巢癌细胞系SKOV3杀伤作用的体外研究 被引量:2
17
作者 程月鹃 潘凌亚 张毅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第1期13-16,共4页
目的 :观察应用重组IFN α2a能否增强单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因 (HSV tk) /丙氧鸟苷 (GCV)系统对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应。方法 :利用逆转录病毒载体将潮霉素磷酸转移酶和HSV tk的融合基因 (hytk)导入SKOV3细胞 ,测定GCV对... 目的 :观察应用重组IFN α2a能否增强单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因 (HSV tk) /丙氧鸟苷 (GCV)系统对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应。方法 :利用逆转录病毒载体将潮霉素磷酸转移酶和HSV tk的融合基因 (hytk)导入SKOV3细胞 ,测定GCV对SKOV3/hytk细胞的杀伤作用和旁观者效应。观察IFN α2a与HSV tk/GCV协同作用对旁观者效应的影响 ,并且在联合应用GCV和IFN α2a后 ,进行细胞周期分析。结果 :GCV对SKOV3/hytk细胞有明显的杀伤作用 ,并且可以同时杀伤周围未转基因的细胞 ,联合应用IFN α2a与HSV tk/GCV可以明显增强旁观者效应 (P <0 .0 5 ) ,使处于S期的SKOV3/hytk细胞较对照组和使用单药组明显增多 (P <0 .0 1)。结论 :IFN α2a与HSV tk/GCV联合应用可以产生协同作用 ,增强HSV tk/GCV系统在体外对卵巢癌细胞系SKOV3的杀伤效应 。 展开更多
关键词 卵巢癌 HSV-TK/gcv IFN-Α2A
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HSV-TK/GCV系统对人肺癌细胞株的杀伤效应 被引量:2
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作者 宋毅 刘兆雄 +1 位作者 黄光琦 肖林 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期165-167,共3页
目的 观察单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV -TK/GCV系统对人肺癌细胞H4 4 6的体外杀伤作用。方法 利用脂质体(lipofectin)将重组逆转录病毒载体pLXSN -TK导入包装细胞PA317,G4 18筛选至抗性克隆出现 ,收获病毒液。加入聚凝胺感染H4 4 6细... 目的 观察单纯疱疹病毒胸苷激酶基因HSV -TK/GCV系统对人肺癌细胞H4 4 6的体外杀伤作用。方法 利用脂质体(lipofectin)将重组逆转录病毒载体pLXSN -TK导入包装细胞PA317,G4 18筛选至抗性克隆出现 ,收获病毒液。加入聚凝胺感染H4 4 6细胞 ,并筛选出含TK基因的H4 4 6细胞。观察GCV对H4 4 6和不同比例混合的H4 4 6、H4 4 6 /TK的杀伤作用及旁观者效应。结果 经电镜及PCR检测证实TK基因已导入PA317、H4 4 6细胞。H4 4 6 /TK细胞对GCV的敏感性明显高于H4 4 6细胞 ;随着TK+ 细胞比例的增加 ,存活率进一步减低 ,提示GCV不仅杀死TK+ 细胞 ,也杀死混合培养的未转导TK基因的H4 4 6细胞 ,表明HSV -TK基因转导的H4 4 6细胞具有明显的旁观者效应。结论 HSV -TK/GCV系统赋予人肺癌细胞对GCV的高敏感性及旁观者效应。 展开更多
关键词 HSV-TK gcv系统 肺癌细胞 杀伤效应 丙氨基鸟苷 旁观者效应
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GCV联合干扰素治疗小儿病毒性脑炎32例疗效观察 被引量:5
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作者 谢晓丽 胡文广 +2 位作者 徐洋 张琪琛 吴惧 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第22期53-53,共1页
关键词 gcv 联合 干扰素 治疗 病毒性脑炎 疗效观察 儿童
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Psi2STK/GCV与鼠C6神经胶质瘤细胞的相互作用 被引量:1
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作者 索新 周劲松 +1 位作者 何成彦 郭永川 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期634-636,共3页
目的 :研究利用基因工程包装细胞进行基因转导与药物相结合来治疗脑胶质瘤的可行性。方法 :利用基因转导技术及分子生物学方法构建了逆转录病毒载体 STK及基因工程包装细胞psi2 STK,并利用 psi2 STK细胞和丙氧鸟苷 ( GCV)结合对胶质瘤... 目的 :研究利用基因工程包装细胞进行基因转导与药物相结合来治疗脑胶质瘤的可行性。方法 :利用基因转导技术及分子生物学方法构建了逆转录病毒载体 STK及基因工程包装细胞psi2 STK,并利用 psi2 STK细胞和丙氧鸟苷 ( GCV)结合对胶质瘤细胞进行了离体的基因治疗研究。结果 :实验组 C6Bp BAG+ psi2 STK由于有 psi2 STK细胞的存在 ,对 GCV的敏感性比对照组C6Bp BAG+ psi2 STK明显增强。结论 :通过体外实验证实了逆转录病毒转导 HSV- TK基因 ,在培养 C6胶质瘤细胞中 ,提高了其对 展开更多
关键词 神经胶质瘤 治疗 基因疗法 丙氧鸟苷 gcv 基因工程 包装细胞psi2STK
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