Effect of Liposome-Encapsulated Total Alkaloid of Harmaline on Rabbit Lens Epithelial Cells:Experimental Study on the Prevention of Posterior Capsule Opacification

Purpose: To investigate whether liposome encapsulated total alkaloid of Harmaline (TAH) as a therapeutic agent is beneficial to prevention of posterior capsular opacifi-cation (PCO).Methods: Liposome-encapsulated TAH was prepared by modified freeze-thawing method. 0. 1ml of liposome-encapsulated TAH (0. 2mg/ml) was injected into the capsular bag during extracapsular lens extraction (ECLE) of each eye in total 10 rabbit eyes. Blank liposome or balance salt solution (BSS) was used as control. Slit-lamp examination and histopathological examination was used to evaluated capsule opacifica-tion. Intraocular pressure (IOP) , density and morphology of corneal endothelia cells, the amplitude and latency of b wave of ERG were measured.Results: The inflammatory response was mild both in TAH treated and the control group. PCO formation occurred in the control group 2 weeks postoperatively, but the posterior capsule was clear in TAH treated eyes. 4 weeks and 8 weeks after operation, PCO occurred both in TAH

去氢骆驼蓬碱在小鼠的抗炎镇痛及止痒作用

目的:观察去氢骆驼蓬碱的抗炎、镇痛及止痒作用。方法:以二甲苯鼠耳致炎及角叉菜胶致小鼠足跖肿胀观察抗炎作用;以小鼠扭体反应及热板法观察镇痛作用;以右旋糖酐-40致小鼠全身瘙痒模型观察药物止痒作用。结果:去氢骆驼蓬碱以剂量依赖的方式显著抑制鼠耳肿胀,在25mg/kg显著抑制足跖肿胀;剂量依赖地减少发生扭体反应的鼠数,提高小鼠的痛阈;明显抑制小鼠全身瘙痒的发作次数及发作持续时间。结论:去氢骆驼蓬碱具有抗炎、镇痛及止痒作用。

骆驼蓬总碱药理作用的研究

从骆驼蓬（ＰｅｇａｎｕｍｈａｒｍａｌａＬ．）种子中提取骆驼蓬总碱（ｔｏｔａｌａｌｋａｌｏｉｄｏｆｈａｒｍａｌａ，ＴＡＨ）。实验证明ＴＡＨ对６种体外培养人癌细胞有强力细胞毒作用，对３种杂种鼠移植性肿瘤和３种人癌裸鼠移植物有明显抑瘤作用，与顺铂或阿霉素有协同作用。用电子显微镜观察ＴＡＨ对肿瘤细胞超微结构影响；用显微荧光光度法分析对细胞周期的影响；用同位素掺入法测定对肿瘤细胞大分子合成的影响：用自建高效液相法进行骆驼蓬碱代谢动力学研究；毒性研究表明长期大剂量ＴＡＨ可引起可逆性肾毒性。

骆驼蓬种子提取物及其β咔保啉生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱及哈尔满碱(止咳药用植物)对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用。方法从体外培养的Q3肝癌细胞中,提取分离DNA拓扑异构酶Ⅱ;以阿霉素为阳性对照,用琼脂糖凝胶电泳法检测药物对DNA拓扑异构酶Ⅱ的作用。结果骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔满碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性均有一定的抑制作用。结论对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用是骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱等生物碱抗癌作用和细胞毒作用的机制之一。

骆驼蓬属植物种子中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的HPLC-荧光检测法测定

建立了HPLC-荧光检测法测定不同产地骆驼蓬、骆驼蒿、多裂骆驼蓬种子(共15个样品)中去氢骆驼蓬碱(1)和骆驼蓬碱(2)的含量。采用C18色谱柱,以乙腈-醋酸铵缓冲液(19∶81)为流动相,激发波长为250nm、发射波长为460nm。结果显示,骆驼蓬中1的含量(3.6%～5.0%)高于2(2.8%～3.5%);多裂骆驼蓬则相反,1、2的含量分别为1.6%～2.0%和2.3%～3.1%;骆驼蒿中2的含量较高(4.4%),但1含量低于检测限。

骆驼蓬总生物碱提取物的质量标准研究

以骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱为指标,采用薄层色谱和高效液相色谱等方法对骆驼蓬总生物碱提取物进行定性和定量质量控制。薄层色谱中供试品在与对照品相同位置上显相同颜色斑点,其它各项检测结果(如水分、灰分、浸出物、重金属检查)均符合中国药典要求。骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱分别在2～200和0.8～320μg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率为99.7%(RSD=1.89%)和100.7%(RSD=1.78%),日内及日间RSD小于2%。

骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱的质谱裂解途径研究

目的:研究去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的质谱裂解机制。方法:两者用HPLC进行分离后,在正离子模式下,得到去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的质谱图。结果:解析了去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱多级质谱碎片,主要发生RDA裂解、-CH3和-OH等自由基丢失,吲哚环稳定。结论:本研究丰富了去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的质谱裂解机制,为β-咔啉类生物碱的成分研究提供依据。

骆驼蓬炮制前后骆驼蓬碱含量变化研究

目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定炮制前后骆驼蓬中骆驼蓬碱的含量变化。方法色谱柱为Agilent SB柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.02 mol/L硫酸铵(32∶68,V/V),流速为1.0 m L/min,柱温为25℃,检测波长为375 nm。结果炮制前后骆驼蓬中骆驼蓬碱的平均含量分别为2.72,1.90 mg/g,炮制后的骆驼蓬碱含量较炮制前下降了30.15%。结论骆驼蓬经红酒煮制后,骆驼蓬碱含量可显著降低。

骆驼蓬总碱及其脂质体对兔晶状体上皮细胞的抑制作用

目的探讨骆驼蓬总碱（ＴＡＨ）及其脂质体（ＬＴＡＨ）对兔后囊混浊（ＰＣＯ）形成的影响。方法用改良冻融法制备ＬＴＡＨ。１０只健康纯种新西兰白兔分别每眼行晶状体囊外摘出术并分别注入０１ｍｌ浓度为０２ｍｇ／ｍｌＴＡＨ及ＬＴＡＨ。观察术后后囊、手术前后眼压、角膜内皮细胞、视网膜电图及组织病理学变化。结果注药术后４周实验眼与对照眼角膜内皮细胞密度及形态、视网膜电图的ｂ波振幅及潜时无明显差别。组织病理学检查显示对照组眼明显残留晶状体上皮细胞（ＬＥＣ）增生并有Ｓｏｅｍｍｅｒｉｎｇ环形成，而用药眼无明显的残留ＬＥＣ增殖且细胞空泡变性。结论ＴＡＨ及ＬＴＡＨ能抑制兔眼残留ＬＥＣ增殖，有可能成为一种预防后发性白内障的药物。

复方骆驼蓬子水凝胶贴剂透皮吸收促进剂的筛选

目的:筛选复方骆驼蓬子水凝胶贴剂中透皮吸收促进剂的种类。方法:以小鼠离体皮肤为渗透屏障,采用Franz扩散池装置进行体外透皮实验,运用HPLC法测定接受池中药物累积透过量,考察不同透皮促进剂对水凝胶贴剂中有效成分骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱体外透皮吸收的影响。结果:不同透皮吸收促进剂对骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱均有促渗作用,其中二元相透皮吸收促进剂的促渗作用比单一促进剂强。结论:丙二醇和氮酮可作为复方骆驼蓬子水凝胶贴剂的透皮吸收促进剂。

高效液相色谱法和薄层层析法鉴别骆驼蓬与骆驼蒿

目的:建立骆驼蓬与骆驼蒿的鉴别方法。 方法 :采用高效液相色谱法 (HPL C)和薄层层析法 (TL C)鉴别骆驼蓬和骆驼蒿。 结果 :HPL C法和 TL C法实验结果均说明骆驼蓬的根中不含骆驼蓬碱 (HAL ) ,而骆驼蒿的根中含有较多的 HAL ;骆驼蓬种子中的去氢骆驼蓬碱 (HAR)含量高于 HAL的含量 ,而骆驼蒿种子中的 HAL含量高于 HAR的含量。 结论 :HPL C法和 TL

骆驼蓬总碱的毒性

目的：研究骆驼蓬总碱的毒性。方法：用骆驼蓬总硷对小鼠进行急性毒性，大鼠进行亚急性毒性实验。结果：小鼠急性毒性实验测出骆驼蓬总硷，于腹腔、静脉注射及灌胃３种给药途径１次给药的ＬＤ５０，以及可信限分别为：１４４ｍｇ／ｋｇ（１３１．７～１５７．９ｍｇ／ｋｇ）、５６ｍｇ／ｋｇ（４８．３～６４．９ｍｇ／ｋｇ）、２８９ｍｇ／ｋｇ（２１８．５～３８２．３ｍｇ／ｋｇ）。在大鼠亚急性毒性实验可见３００ｍｇ／ｋｇ骆驼蓬总碱引起肾病变和尿素氮升高，停药后肾毒性程度可降低。结论：骆驼蓬总碱毒性的靶器官是肾脏，在停药之后肾脏病变在一定程度上是可逆的。

骆驼蓬灵单独和与洗必泰联合对抗金黄色葡萄球菌悬浮菌和生物膜的抗菌活性研究

采用微量稀释法测骆驼蓬灵和洗必泰(CHG)单独抗金黄色葡萄球菌悬浮菌和生物膜的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);棋盘稀释法测定两种药物联合时的协同效果;以及激光共聚焦采集图片检测部分联合的效果。结果表明,骆驼蓬灵和CHG联合具有协同抗菌效果。在悬浮菌试验中,9株显示抗浮游菌协同活性,在生物膜试验中,11株显示协同抗生物膜活性。其余菌株显示相加活性,本试验中无颉颃作用。初步探索了体外试验协同作用的原因,为克服金黄色葡萄球菌耐药提供了一个可供选择的方法。

反相高效液相色谱法测定骆驼蓬总碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量

目的 :建立RP HPLC法测定骆驼蓬总生物碱片中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱含量的方法。方法 :以甲醇 0 .0 1mol·L-1硫酸铵溶液 二乙铵 (6 0∶40∶0 .4,用磷酸调 pH至 (3.8± 0 .1)为流动相 ,进样量 2 0 μl,分别在 32 0 ,372nm处用RP HPLC法测定去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的含量。结果 :去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱分别在浓度为 2～ 2 5 μg·ml-1的范围内与峰面积成良好的线性关系。方法的回收率分别为 (10 1.8± 1.8) %和 (10 1.3± 1.4) %。结论 :该法简便 ,准确 。

复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子质量控制方法研究

目的 研究复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的质量控制方法。方法 分别以骆驼蓬碱（HAL）和去氢骆驼蓬碱（HAR）为对照,建立复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的薄层色谱鉴别及HPLC含量测定方法。薄层色谱：以硅胶HSGF254为薄层板,乙酸乙酯-甲醇-氨水（10∶1.5∶0.5）为展开剂;HPLC条件：采用反相HPLC色谱柱,以乙腈-醋酸铵缓冲盐（22∶78）为流动相,流速1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为330 nm。结果 复方木尼孜其颗粒的薄层色谱中HAL、HAR分离度良好,可以用于鉴别复方木尼孜其颗粒中的骆驼蓬子。含量测定方法学研究结果表明,HAL和HAR分别在0.33~104.10 mg/L和0.13~40.91 mg/L范围内呈良好的线性关系,方法平均回收率分别为97.04%和101.83%,RSD分别为2.02%和2.32%,方法的日内和日间精密度RSD均小于3%。15批复方木尼孜其颗粒样品的测定结果表明,HAL含量范围为1.62~5.04 mg/袋,平均为（2.87±0.95）mg/袋;HAR含量范围为0.87~2.22 mg/袋,平均为（1.51±0.41）mg/袋;总碱（HAL＋HAR）含量范围为（2.49~7.14）mg/袋,平均为（4.38±1.33）mg/袋。结论 建立的复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子质量控制方法灵敏、准确、重现性好、精密度高、专属性强,适用于复方木尼孜其颗粒中骆驼蓬子的质量控制。

骆驼蓬总碱对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响

目的:观察骆驼蓬总碱(total alkaloid of Harmaline,TAH)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆的影响及作用机制。方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎复制大鼠VD模型,在造模后第30天将大鼠随机分为假手术组、模型组、尼麦角林片(7 mg/kg)组及骆驼蓬总碱25、12.5、6.25 mg/kg组,灌胃给药30 d。Morris水迷宫检测学习记忆能力,HE染色观察海马CA1区组织病理学改变,免疫组织化学法检测海马CA1区BAX及BCL-2蛋白表达。结果:与模型组比较,骆驼蓬总碱25 mg/kg组第3、4天逃避潜伏期显著缩短,12.5 mg/kg组第4天逃避潜伏期显著缩短。骆驼蓬总碱25、12.5 mg/kg组穿台次数显著增加。骆驼蓬总碱能改善大鼠海马CA1区神经元组织病理学改变,骆驼蓬总碱25、12.5 mg/kg能下调促凋亡蛋白BAX的表达,上调抑凋亡蛋白BCL-2的表达。结论:骆驼蓬总碱能改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马神经细胞凋亡有关。

HPLC法同时测定复方骆驼蓬子凝胶剂中6种成分的含量

目的建立HPLC法同时检测复方骆驼蓬子凝胶剂和软膏剂中6种主要成分(鸭嘴花碱、氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、秋水仙碱)的含量测定方法。方法采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相0.1%乙酸铵缓冲溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长250nm及264nm,流速1.0mL/min,柱温27℃,进样量10μL。结果鸭嘴花碱在0.94~229.00μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均加样回收率为90.63%(RSD=1.7%);氢溴酸东莨菪碱在1.87~457.00μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 1),平均加样回收率为93.90%(RSD=1.3%);硫酸阿托品在1.39~340.00μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 2),平均加样回收率为97.05%(RSD=2.6%);骆驼蓬碱在1.84~450.00μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均加样回收率为104.13%(RSD=1.6%);去氢骆驼蓬碱在1.05~256.00μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 4),平均加样回收率为101.70%(RSD=1.9%);秋水仙碱在0.19~46.00μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为101.26%(RSD=7.1%)。凝胶样品中鸭嘴花碱的平均含量为0.28mg/g,氢溴酸东莨菪碱的平均含量为0.94mg/g,硫酸阿托品的平均含量为0.99mg/g,骆驼蓬碱的平均含量为1.14mg/g,去氢骆驼蓬碱的平均含量为1.48mg/g,秋水仙碱的平均含量为0.01mg/g。软膏样品中鸭嘴花碱的平均含量为0.51mg/g,氢溴酸东莨菪碱的含量为0.86mg/g,硫酸阿托品的含量为0.54mg/g,骆驼蓬碱的含量为2.34mg/g,去氢骆驼蓬碱的含量为1.60mg/g,秋水仙碱的含量为0.28mg/g。结论本法可同时测定复方骆驼蓬子水凝胶贴剂中鸭嘴花碱、氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、秋水仙碱的含量,且同时适用于复方骆驼蓬子软膏剂的含量测定,方法准确、结果稳定,可为复方骆驼蓬子凝胶剂及软膏剂的质量评价提供科学依据。

UPLC-MS/MS法测定复方骆驼蓬子水凝胶贴剂经皮给药后大鼠血浆中的6种生物碱

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定复方骆驼蓬子水凝胶贴剂经皮给药后大鼠血浆中6种主要成分(鸭嘴花碱、氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和秋水仙碱),并进行血浆样品前处理方法的筛选。方法采用色谱柱ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相:0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1;进样量:1μL;柱温:40℃;质谱条件:电离方式为电喷雾电离源(ESI+);多反应监测MRM。结果鸭嘴花碱、氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和秋水仙碱分别在0.096～28.500 ng·m L-1(r=0.9998)、0.050～1.500ng·m L-1(r=0.9991)、0.021～6.175 ng·m L-1(r=0.9998)、0.203～60.000 ng·m L-1(r=0.9999)、0.203～60.000 ng·m L-1(r=0.9997)、0.020～3.000 ng·m L-1(r=0.9998)与峰面积呈良好的线性关系;6种待测化合物的回收率、精密度均符合生物样品分析方法的要求。结论本法可同时测定复方骆驼蓬子水凝胶贴剂经皮给药后大鼠血浆中鸭嘴花碱、氢溴酸东莨菪碱、硫酸阿托品、骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱和秋水仙碱的含量,该方法准确、结果稳定,可为复方骆驼蓬子水凝胶贴剂的药动学研究提实验依据。

北京及新疆产骆驼蓬中两种生物碱的含量比较

目的:比较北京和新疆两产地骆驼蓬中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱含量,为评价该药材质量和栽培的可能性提供依据。方法:采用HPLC测定两产地骆驼蓬样品中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱含量。结果:两地产骆驼蓬全草的指纹图谱在化学成分种类方面没有显示出大的差异,但新疆产骆驼蓬中骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱含量分别是北京产骆驼蓬中二者含量的16.0、6.9倍,但北京栽培骆驼蓬有一种未知成分含量明显高于新疆产骆驼蓬。结论:两地出产的骆驼蓬均含骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱,但新疆样品明显高于北京样品中两者的含量,研究为新疆道地药材的道地性和异地栽培提供参考。

中药骆驼蓬生物碱提取及抗包虫化学成份研究

骆驼蓬具有镇咳，抗风湿等作用，近年报道又有抗肿瘤、治疗包虫病的作用，为进一步阐明药物作用机理。提高药物的疗效，降低毒副作用，我们对该植物的种子用化学方法进行了生物碱提取、分离、并经ＭＰ测定、薄层层析、ＵＶ、ＩＲ、ＭＳ、ＮＭＲ光谱分析、分离、鉴别出了其中含量较高的两个单体：分别确定为骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱，并据测得的一些化学和光谱数据，初步推测出了此类抗包虫有效成份的化学结构。此为首次从该植物中分离、鉴别获得。此外，本文还附了我们用骆驼蓬治疗９例肝泡球蚴病（ＡｉｖｅｏｌａｒＥｃｈｉｎｏｃｏｃｃｏｓｉｓＡＥ）临床患者的随访结果。