BCA法在反胶束萃取大豆蛋白中的应用

本文建立了用一种新的方法测定反胶束(如AOT)体系中所萃取大豆蛋白质的方法,即BCA(二辛可宁酸)法,经过对照实验,证明该方法的测定结果可靠,与半微量凯式定氮法相比无显著差异,该方法操作简便,结果准确可靠,可替代半微量凯式定氮法。

二喹啉甲酸法(BCA)分析蛋白多肽的原理、影响因素和优点

蛋白多肽的定量分析方法很多,二喹啉甲酸法(BCA)是常用的方法之一。食品组成成分复杂,有很多影响BCA反应的干扰物。文中对BCA法的反应原理、测定方法、影响因素和消除方法,以及BCA法的优点进行系统的论述。

BCA法测定新的植物毒素——蒜头果蛋白质量浓度

蒜头果蛋白(malanin)是从蒜头果种仁中分离、纯化出的一种新的植物毒蛋白.采用BCA法用酶标仪测定蒜头果蛋白的质量浓度,结果得到标准牛血清白蛋白回归方程.根据malanin的光吸收值,得出理论质量浓度为1 mg/mL的malanin的实测质量浓度为472.793μg/mL,说明malanin干粉的水溶性较好.

BCA法优化补骨脂蛋白质的提取工艺

采用碱提酸沉法提取补骨脂蛋白质,以二喹啉甲酸(BCA)法测定的蛋白质溶出率为指标,通过单因素实验和正交实验优化补骨脂蛋白质的碱提工艺条件,考察浸提p H、料液比、温度、时间等因素对补骨脂蛋白质提取的影响.结果表明,四种提取因素的影响从大到小的顺序为:浸提p H>料液比>温度>时间.最佳工艺条件为浸提p H 10.0、料液比(g/m L)1∶20、温度45℃、浸提时间150 min,此条件下补骨脂蛋白质溶出率为23.69%.以BCA法测定酸沉蛋白质浓度,确定补骨脂蛋白质的最大沉淀量p H为4.5,蛋白质的最大沉淀率为55.16%.对比发现理论提取率与实际提取率基本相同,证明BCA法测定补骨脂蛋白质的方法准确、可靠,为补骨质蛋白质的进一步研究利用奠定了基础.

BCA法测定食品中的微量铜

研究BCA(2,2'-联喹啉-4,4'-二甲酸二钠盐)与铜的显色反应,建立测量食品微量铜的光度分析方法。在盐酸羟胺存在条件下,pH11.0缓冲介质中,BCA试剂与铜在物质的量的比为2:1的条件下反应生成的紫色络合物,λmax=562nm,ε562nm=7.72×103L/(mol.cm),铜含量在0～4.8μg/mL内符合比尔定律;经测定茶叶和海带中的铜含量,结果与原子吸收法的测定结果相符。结果表明:该方法稳定准确,可用于食品中微量铜的测定。

基于Bootstrap法的BCa区间二阶矫正性质研究

首先,证明了基于Bootstrap法的BCa区间二阶矫正性质的相关抽象结论;其次,讨论了BCa区间的算法实现,并进行了实证分析。结果表明,在分布左尾较长的情形下,分位数法将正态区间的端点向左调整,BCa法又将分位数区间端点进一步向左调整,区间对称性也从正态区间的1,调整至分位数区间的0.58和BCa区间的0.38。这些调整均说明BCa区间是最为符合分布特性的估计区间,印证了BCa区间的优良二阶性质。

BCA法测定猪肺表面活性物质及其冻干粉中的表面活性蛋白质

目的：建立肺表面活性物质及其冻干粉中表面活性蛋白质的含量测定方法。方法：采用BCA试剂盒测定。结果：蛋白质在10～80μg范围内，线形关系良好，r=0．9998；在猪肺表面活性物质及其制剂中回收率分别为98.19％及98.41％；精密度（RSD）为0．61％；磷脂及辅料对测定无干扰。结论：本方法可简单快速地测定猪肺表面活性物质及其冻干粉中表面活性蛋白质的含量，专属性强、准确度高。

某些模型的MLE和BCa区间估计

BCa区间估计是Efron B近年提出的具有最高精度的,分布参数的区间估计方法,它适合于广泛的分布类型。对异方差线性模型及AR模型的有关MLE及BCa区间作了必要的理论推演及具体的模拟计算,并对Var β^((L))的MLE及加权刀切估计作出模拟的比较。

重解中国经济波动——概念、特征与内涵

本文对中国经济波动研究中的重要概念进行了重新阐述与区分:冲击是经济波动的来源,而对经济均衡造成扭曲的“楔子”则是冲击传播的机制,二者并不等同,更不能割裂。在厘清相关概念基础上,从产出、劳动、投资和消费四个角度对中国经济波动的特征和影响因素进行核算,结果表明:效率楔子及经由其传播的冲击是理解中国经济波动的首要因素;劳动楔子对解释中国劳动力市场波动和疫情以来的经济运行特征有重要价值;投资的下滑并非是投资楔子恶化带来的,而是与经济基本面高度相关,但投资楔子对理解中国“低消费”特征有重要意义;不同楔子对经济波动的贡献是动态变化的。本研究利用相应市场楔子对现实中摩擦进行概括测算的思想,对指导在结构模型中如何引入摩擦有重要价值,相关结论对宏观政策取向有一定启发。

威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定方法研究

目的 建立威廉环毛蚓提取物蛋白质含量测定的最佳方法。方法 以氨基酸分析仪测定的威廉环毛蚓提取物中的氨基酸含量为指标,对蛋白质含量检测方法 Lowry法2、改良Lowry法、BCA法、Bradford法进行对比评价。结果 Lowry法2、改良Lowry法、BCA法、Bradford法测定威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(上清液)结果分别为27.03%、45.85%、31.58%、11.11%,威廉环毛蚓提取物蛋白质含量(混悬液)的结果分别为38.44%、52.39%、44.06%、11.56%。采用氨基酸分析仪法测定得到威廉环毛蚓提取物中游离氨基酸含量为4.18%,将威廉环毛蚓提取物蛋白质酸水解之后测定总氨基酸含量为48.53%。结论 在威廉环毛蚓提取物样品溶液的处理方式上,与样品上清液相比,样品混悬液的测定结果更接近样品中蛋白质的真实含量。以牛血清白蛋白(BSA)为对照品,相较于Lowry法2、改良Lowry法和Bradford法,BCA法更适宜用于威廉环毛蚓提取物中的蛋白质含量测定。

蛋白提取工艺过程评价方法的研究

目的:建立一种快速、便捷、低成本的生物酶制剂生产工艺过程评价方法。方法:联用凝胶电泳法和BCA蛋白定量法进行计算,得到较为准确的目标蛋白定量数量数据。结果:以胰蛋白酶生产工艺为例,对不同工段样品进行SDS-PAGE和BCA测试,并计算得到对应的蛋白定量数据,其中组内样品数据RSD≤5%,说明了该方法的可重复性。结论:该方法可准确分析不同工段的蛋白浓度变化,并进行快速、灵敏地定量;同时发现原胰蛋白酶生产工艺中存在蛋白泄漏的缺陷,可为后续工艺改进提供理论依据。

二喹啉甲酸法在牛奶蛋白质定量中的应用

目的:建立二喹啉甲酸(BCA)测定牛奶中蛋白含量的方法。方法:用BCA法和凯氏定氮法分别测定食用牛奶蛋白含量;同时,添加尿素作为含氮干扰因素,测定其对BCA蛋白定量方法的影响。结果:BCA法蛋白定量精密度实验显示,平均吸光度为0.2798,标准偏差为0.004,加标回收实验的回收率为98.00%～103.00%。分别测定50倍、100倍牛奶稀释样品,结果50倍稀释样品组BCA法和凯氏定氮法测得蛋白质量浓度的平均值分别为791.2μg/mL和803.4μg/mL,100倍稀释样品组分别为370.2μg/mL和384.0μg/mL。添加尿素干扰实验显示,BCA法实验结果相对标准偏差在5%以下,而凯氏定氮法大于5%。结论:BCA法测定牛奶中蛋白含量结果可靠、稳定,与凯氏定氮法相比无显著差异;BCA法能排除含氮物质的干扰,该方法操作简便、结果准确可靠,可替代微量凯氏定氮法。

不同品种姬松茸菌丝体蛋白质和水溶性多糖含量的研究

研究目的在于筛选出性质优良的姬松茸品种。首先对本实验室保藏的姬松茸4个品种进行了菌丝发酵,并通过二奎林甲酸(BCA)检测法和苯酚-硫酸法测定了菌丝体的蛋白质和水溶性多糖含量。结果表明:姬松茸7号的蛋白质含量占菌丝体鲜重的5·41%,其水溶性多糖含量占菌丝体干重的1·499%,是4个品种中蛋白和多糖含量相对较高的品种,值得对其进行深度开发。

双辛可宁酸法测定胎盘多肽注射液中低浓度多肽的含量

目的建立双辛可宁酸(BCA)法测定胎盘多肽注射液低浓度多肽含量的方法。方法研究BCA法对胎盘多肽注射液低浓度多肽含量测定的可行性,并将其与Folin-酚法、双缩脲法、定氮法进行比较。结果 BCA法对牛血清白蛋白在19.2～115.2μg/mL的浓度范围内有良好的线性关系(r≥0.999 0),平均加样回收率为102.2%,RSD为3.8%。结论此法简便、快速、准确,适用于胎盘多肽注射液低浓度多肽的含量测定。

二喹啉甲酸检测法测定Sprague-Dawley大鼠肝微粒体蛋白浓度

目的建立酶标仪检测大鼠肝微粒体蛋白浓度的方法。方法大鼠尾静脉连续3 d注射0.9%氯化钠注射液2 ml,第4 d解剖大鼠,取肝脏,应用差速离心法提取大鼠肝微粒体,用二喹啉甲酸检测（BCA）法测定肝微粒体蛋白浓度。结果蛋白标准曲线范围在0~0.5mg/ml,回归方程为Y=0.091 9＋0.868X,（R=0.998）。低、中、高浓度回收率分别为101.33%,110.67%,101.17%,日内和日间精密度分别为6.52%,0.53%,1.95%和3.01%,7.23%,0.74%。结论本实验建立的BCA蛋白测定法准确可靠,重复性和稳定性均良好,相比较传统的蛋白测定方法,更为迅速,具有较强的抗干扰的能力,为研究用药后肝微粒体酶活性的改变提供可靠的检测手段。

凝胶层析法测定蛋白含量的方法

利用蛋白纯化仪建立一种凝胶层析测定蛋白含量的方法,采用HiTrapTMDesalting 5×5 mL色谱柱,流动相为超纯水,以蛋白浓度为横坐标,以蛋白出峰面积为纵坐标,建立标准曲线。与BCA试剂盒法比较,BCA试剂盒法相对误差范围为9.13%～144.00%,此法的相对误差范围为0.78%～44.72%,可见凝胶层析法测定结果准确性高,操作简单,快速,是一种可行的测蛋白含量的方法。

二十个平菇品种菌丝体蛋白质和多糖含量的研究

对北京农林科学院植保环保研究所实验室保藏的20个平菇菌株进行深层发酵,采用二奎林甲酸(BCA)检测法和苯酚-硫酸法测定了菌丝体中蛋白质和水溶性多糖的含量,比较20个品种的营养含量,为后期平菇功能性深加工研究奠定数据基础。结果表明:20个品种中蛋白质含量较高的品种为平侧5号、黑丰268和平菇4号,分别占菌丝体鲜重的14.225%、11.966%和11.533%;水溶性多糖含量较高的品种为平侧5号、平菇4号和平82号,分别占菌丝体干重的1.664%、1.596%和1.381%。通过该研究发现平侧5号和平菇4号是20个品种中蛋白和多糖含量相对较高的品种,可以根据需要对其进行深加工研究。

比估计的Bootstrap置信区间

先用常见Bootstrap-t方法、BCa方法,然后用自己提出的函数无偏Bootstrap研究了比估计的置信区间,并以比估计的Fieller区间作为标准比较上述三种方法,指出了函数无偏Bootstrap的适用性。

毛木耳菌丝体营养优势菌株的筛选研究

研究目的在于从保藏的9种毛木耳品种中筛选出高蛋白、高多糖含量的优势菌株,为毛木耳功能研发发掘出优势材料。通过菌丝发酵的方法获得9种毛木耳的菌丝体,经过组织处理,利用二奎林甲酸(BCA)检测法和苯酚-硫酸法进行蛋白质和多糖的筛选工作。研究结果表明,9个品种中蛋白质含量较高的品种为毛木耳福建农,其蛋白质含量占菌丝体鲜重的8.99%;水溶性多糖含量较高的为毛木耳紫木耳品种,分别占菌丝体干重的2.625%。通过研究发现9个品种中蛋白质含量和多糖含量存在较大差异,可根据对功能成分开发需要,选择优势菌株并对其进行高产发酵方面研究。

提取石油烃降解菌T1蛋白的有效方法研究

该实验采用玻璃珠震荡、热裂解、反复冻融和超声波4种方法对细菌蛋白的提取、提取介质的裂解液。通过观察细菌裂解,蛋白浓度和蛋白SDS-PAGE电泳条带,得到了有效且稳定的石油烃降解菌蛋白质的提取方法。结果超声波效果最佳,热裂解和玻璃珠震荡效果一般,反复冻融和超声波提取蛋白的SDS-PAGE条带分布基本相同,其超声波获取蛋白丰度最高。蛋白质质量浓度测定显示,超声法提取蛋白质质量浓度最高。结果表明:超声法可高效提取石油烃降解细菌蛋白质,4种提取方法的稳定性和重复性均较好。