Bmi-1基因杂合子缺失对小鼠脑老化的影响

目的:Bmi-1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1)基因在干细胞增殖和分化中的作用已有大量文献报道,但其在老年小鼠脑中发挥的作用尚不清楚。本研究旨在探讨Bmi-1在脑衰老中的病理生理作用。方法:选取17月龄的Bmi-1杂合子(Bmi-1^(+/-))小鼠和野生型(wild-type,WT)小鼠,采用行为学检测、免疫组化及Masson染色等技术,比较Bmi-1^(+/-)小鼠和WT小鼠的整体健康状况及长期记忆能力;通过HE染色、电子显微镜及Western blot等方法,研究Bmi-1基因半剂量敲除对小鼠脑衰老进程的潜在影响。结果:Bmi-1^(+/-)小鼠较同窝WT小鼠出现了长期空间记忆功能的减弱(P<0.05),伴随着海马齿状回(dentate gyrus,DG)区域特异性的神经细胞发生减少(P<0.05),神经元数目降低(P<0.05)和灰质区体积缩小(P<0.05)。进一步研究发现,与WT小鼠相比,Bmi-1^(+/-)小鼠DG区神经元线粒体膨大、肿胀,线粒体嵴减少的比例增加(P<0.05),且DG区神经元细胞质中脂褐素的数量明显增加(P<0.05);此外,Bmi-1^(+/-)小鼠DG区神经元线粒体能量代谢相关蛋白泛醌氧化还原酶核心亚基V2[NADH dehydrogenase(ubiquinone)flavoprotein 2,NDUFV2]和泛醌氧化还原酶核心亚基S3[NADH dehydrogenase(ubiqui-none)ferrithionein 3,NDUFS3]的表达量均下调(P<0.05),三羧酸循环的重要催化酶二氢硫辛酰琥珀酰转移酶蛋白(dihydroli-poyl S-succinyltransferase,DLST)也显著下调(P<0.01);同时Bmi-1调控的细胞周期因子中,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27和肿瘤蛋白p53显著上调(P<0.05)。结论:Bmi-1基因的半剂量缺失抑制了老龄鼠脑内海马区新生神经元的产生,导致海马DG区体积的特异性缩小,长期记忆功能障碍,其机制可能与老化相关蛋白p27、p53表达异常和神经元线粒体变性有关。

槐耳颗粒通过抑制Bmi-1与CD133表达减少三阴性乳腺癌全身转移的研究

目的研究在不同给药方式下槐耳颗粒对三阴性乳腺癌细胞的作用效果,及槐耳颗粒是否可以影响Bmi-1进而调节肿瘤细胞CD133表达以发挥抑制肿瘤细胞转移的作用。方法选择40只3~4周龄雌性裸鼠随机分成四组,预防组、预防及治疗组、治疗组分别于建模前3周、建模前及建模后3周、建模后3周口服给予槐耳清膏溶液,对照组不给予药物治疗;建模方式采用左心室注射的方法建立三阴性乳腺癌全身转移模型,建模后六周观察期后统一处死裸鼠并取标本;通过Kaplan-Meier法分析裸鼠生存时间,免疫组化法检测裸鼠转移灶内CD133及Bmi-1的表达,组间比较采用方差分析。结果预防及治疗组裸鼠的生存时间最长(MST=42d),其次为治疗组(MST=39d),再次为预防组(MST=38 d),对照组裸鼠的生存时间最短(MST=32d);预防及治疗组的Bmi-1平均表达最低,对照组的Bmi-1平均表达最高,不同给药方式与Bmi-1的表达之间存在显著性差异(P<0.05);预防及治疗组的CD133平均表达最低,对照组的CD133平均表达最高,不同给药方式与CD133的表达之间存在显著性差异(P<0.05)。结论槐耳颗粒对三阴性乳腺癌全身转移具有预防及治疗作用;槐耳颗粒可能通过激活Bmi-1凋亡基因从而减少了三阴性乳腺癌干细胞CD133的比例,进而发挥了预防及治疗三阴性乳腺癌全身转移的作用。

血清DcR3、Bmi-1、TFF3对宫颈癌的诊断价值

目的探讨宫颈癌患者血清诱骗受体3(DcR3)、Bmi-1、三叶因子3(TFF3)表达水平及诊断价值。方法选取2019年8月至2023年8月在该院住院的98例初诊宫颈癌患者作为宫颈癌组。另选取同期于该院就诊的74例宫颈良性病变患者和62例健康体检者分别作为良性病变组和健康对照组,收集并整理所有研究对象的临床资料。采用酶联免疫吸附试验检测血清DcR3、TFF3表达水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Bmi-1表达水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清Bmi-1、DcR3、TFF3单独及三者联合检测对宫颈癌的诊断价值。结果与健康对照组比较,良性病变组、宫颈癌组血清DcR3、Bmi-1、TFF3表达水平均明显升高,且宫颈癌组血清DcR3、Bmi-1、TFF3表达水平均明显高于良性病变组,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、病理组织类型宫颈癌患者血清Bmi-1、DcR3、TFF3表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同国际妇产科联盟分期、组织分化程度、淋巴结转移宫颈癌患者血清Bmi-1、DcR3、TFF3表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清DcR3、Bmi-1、TFF3水平单独及三者联合检测诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)分别为0.829、0.851、0.841、0.918,三者联合检测优于各自单独检测的AUC(Z_(三者联合-DcR3)=2.641,P=0.008,Z_(三者联合-Bmi-1)=2.201,P=0.028,Z_(三者联合-TFF3)=2.971,P=0.003)。结论宫颈癌患者血清中DcR3、Bmi-1、TFF3水平明显升高,三者联合检测诊断宫颈癌的临床价值较高。

Bmi-1在前列腺腺泡腺癌中的表达及意义

目的探讨Bmi-1在前列腺腺泡腺癌中的表达及意义。方法使用免疫组化方法,分析Bmi-1在前列腺腺泡腺癌和良性前列腺增生症中的表达情况,比较其与临床病理指标的意义,并和雄激素受体(AR)进行相关性分析。结果Bmi-1在前列腺腺泡腺癌中的阳性率为82.8%(48/58),高于其在前列腺增生症组中的阳性率42.9%(6/14)(P=0.006)。前列腺腺泡腺癌中Bmi-1的表达与AR的表达呈正相关(r=0.331,P=0.011)。结论Bmi-1可能与前列腺腺泡腺癌的发生有关,与AR相互调节发挥作用。

pEGFP-BMI-1真核表达载体的构建、鉴定及其表达

本研究构建真核表达载体pEGFP-BMI-1并观察其在HeLa细胞中的表达。将BMI-1逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)产物克隆入pEGFP-N1,经酶切、PCR鉴定及测序分析,构建pEGFP-BMI-1真核表达载体;采用脂质体转染法,将融合基因pEGFP-BMI-1转入HeLa细胞,用荧光显微镜和Western blot检测其表达,SYBR Green I实时定量RT-PCR方法检测转染前后HeLa细胞中P16INK4a mRNA的表达变化。结果表明:重组后的pEGFP-N1质粒已成功载入BMI-1的全长编码基因,序列测定的结果与预期设计完全一致。荧光显微镜下可见在转染pEGFP-BMI-1的HeLa细胞中存在荧光分布;Western blot检测发现存在外源性融合蛋白BMI-1-EGFP的表达。在HeLa细胞中过表达BMI-1显著下调P16INK4a mRNA的表达为对照组的9.2%(P<0.01)。结论:成功构建了真核表达质粒pEGFPBMI-1,转染HeLa细胞后可表达融合蛋白BMI-1-EGFP。这为今后研究BMI-1在肿瘤发生发展中的机制奠定了基础。

Bmi-1在乳腺癌组织中的表达及意义

背景与目的:多梳基因家族的Bmi-1被认为是一种癌基因,在多种肿瘤组织中均有表达,但其与乳腺癌关系的研究国内尚无报道。本研究旨在通过检测中国人乳腺癌组织中Bmi-1的表达,探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化SP法检测58例乳腺癌组织中Bmi-1蛋白的表达情况,并结合患者的临床病理资料分析与其相关性。结果:所检测的58例乳腺癌标本中Bmi-1蛋白强阳性表达48例(82.8%)。统计分析结果发现Bmi-1的强阳性表达与乳腺癌的淋巴结转移及临床分期密切相关(P<0.05),而与肿瘤大小及ER、PR、c-erbB-2、VEGF等临床病理特征无显著性相关(P>0.05)。结论:Bmi-1蛋白在乳腺癌组织中的高表达与肿瘤进展相关,预示肿瘤具有高度转移潜能;Bmi-1可能成为预测乳腺癌高度转移的新分子标志物。

Bmi-1基因过度表达与胃癌分化、转移及预后的关系

目的探讨胃癌组织中Bmi-1基因mRNA表达与胃癌分化、转移及临床预后的关系。方法收集我院2006年5月～2006年11月共42例行胃癌手术切除标本,提取肿瘤及癌旁组织配对标本的总RNA,用RT-PCR方法测定Bmi-1基因表达,并结合临床资料,对Bmi-1基因差异表达与胃癌病人临床表现的相关性进行分析研究。结果42例配对标本分别进行Bmi-1mRNA荧光检测比较,29例标本的肿瘤组织中Bmi-1基因mRNA表达明显高于癌旁正常胃组织。Bmi-1mRNA的表达与胃癌大小、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度等无关(P>0.05)。并且Bmi-1mRNA阳性表达者生存率明显低于阴性者。结论Bmi-1基因在胃癌组织中表达状态与胃癌的生长和浸润转移关系密切,Bmi-1基因mRNA可望作为胃癌病情发展及指导临床治疗的标记物之一,Bmi-1mRNA的测定有助于判断肿瘤预后。

Bmi-1、Ki67在大肠肿瘤组织中的表达及其意义

背景与目的:多梳基因家族成员的Bmi-1基因被认为是一种癌基因,在多种肿瘤组织中均有表达,而增殖细胞核抗原Ki67是反映细胞增殖程度的重要参考指标。本研究旨在通过检测大肠肿瘤组织中Bmi-1、Ki67蛋白表达情况及意义,并探讨两者在大肠癌中的表达的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测Bmi-1、Ki67蛋白在60例大肠癌、30例大肠腺瘤及20例正常大肠粘膜组织中的表达情况及其与大肠癌临床病理特征及患者生存率的关系,并探讨大肠癌中Bmi-1蛋白表达与Ki67蛋白的相关性。结果:Bmi-1蛋白在大肠癌、大肠腺瘤及正常肠粘膜组织中高表达率分别为25.0%、6.7%、0%,而Ki67蛋白的高表达率分别为18.3%、3.3%、0%;Bmi-1、Ki67蛋白在大肠癌中表达明显高于腺瘤组及正常组(P<0.05);采用卡方检验显示,Bmi-1蛋白高表达与有无远处转移密切相关(P<0.01),而与TNM分期有关(P<0.05)。采用Logistic回归分析显示只有远处转移与Bmi-1蛋白高表达有关(P<0.01,OR>1)。卡方检验显示,Ki67蛋白高表达与患者年龄、有无远处转移及TNM分期密切相关(P<0.05),Logistic回归分析显示只有患者年龄与Ki67蛋白高表达有关(P<0.05,OR<1);Kaplan-Meier生存分析显示Bmi-1、Ki67蛋白高表达患者生存率明显低于低表达患者(P<0.05);大肠癌组织中Bmi-1蛋白表达与Ki67蛋白表达相关性无统计学意义(r=0.224,P>0.05)。结论:Bmi-1、Ki67蛋白表达与大肠癌的发生、转移及预后关系密切,可作为评估患者浸润转移及预后的参考指标;Bmi-1蛋白对Ki67蛋白表达可能有间接的调控作用。

Bmi-1在胃癌组织中的表达及相关性研究

目的:探讨Bmi-1在胃癌组织和癌旁组织中的表达及其与临床病理特征的关系,初步评价Bmi-1在胃癌发生、发展中的作用及其意义。方法:随机收集20例胃癌患者的癌组织、癌旁正常对照组织,采用RT-PCR方法检测其Bmi-1mRNA表达情况;另外收集我院2002～2004年146例有3年以上完整随访资料的胃癌术后患者,采用免疫组织化学法对手术标本石蜡切片进行染色,检测Bmi-1蛋白的表达,并分析Bmi-1与临床病理特征的相关性。结果:RT-PCR结果显示,胃癌组织中Bmi-1mRNA表达水平明显高于癌旁正常对照组织。免疫组化分析表明,Bmi-1蛋白在胃癌中阳性表达率为67.8%(99/146)。Bmi-1的表达与胃癌大小、临床分期、淋巴结转移和浸润深度密切相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤分化程度等无关(P>0.05)。结论:Bmi-1在胃癌组织表达状态与胃癌的生长和浸润转移关系密切,可以作为反映胃癌生物学行为的有效指标。

膀胱癌组织中Bmi-1蛋白的表达及其临床意义

背景与目的:目前关于膀胱癌发生、发展的机制尚不清楚,缺乏有效判断预后的标记物。本研究旨在检测人膀胱癌组织中的Bmi-1蛋白的表达情况,并探讨其与膀胱癌临床病理特征及预后的关系。方法:选择中山大学肿瘤防治中心2000年1月至2003年6月住院患者中的137例膀胱移行细胞癌标本,采用免疫组化SP法检测癌旁组织和膀胱癌组织中Bmi-1蛋白的表达水平,并结合临床资料进行统计学分析。结果:癌旁组织中Bmi-1蛋白的表达水平明显低于膀胱癌组织(16.7%vs.54.3%,P<0.05)。G1、G2、G3级膀胱癌中Bmi-1蛋白阳性率分别为20.6%、54.3%和78.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。浅表性肿瘤和浸润性肿瘤中Bmi-1蛋白阳性率分别为32.5%和81.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。Bmi-1蛋白的表达与膀胱癌的大小、分级及分期有关(P<0.05);与患者年龄、性别、肿瘤数目及复发无明显相关性(P>0.05)。本组随访44～86个月,中位随访时间66个月,浅表性膀胱癌和浸润性膀胱癌患者的五年生存率分别为89.6%和39.2%(P<0.05);Bmi-1蛋白阴性和阳性患者的五年生存率分别为78.5%和50.8%(P<0.05)。结论:Bmi-1蛋白在膀胱癌组织中的表达明显高于癌旁组织,Bmi-1蛋白的检测有助于膀胱癌的诊断及预后的评估。

Bmi-1在正常胃组织和胃癌及其癌前病变中的表达及意义

目的：检测Bmi-1在正常胃粘膜、胃癌及癌前病变中的表达，分析探讨Bmi—1与核增殖抗原ki-67和凋亡抑制基因Bcl-2之间的关系，以及Bmi-1^＋细胞与Bcl-2^＋／ki-67^-细胞分布之间的关系，探讨其与胃癌临床病理因素的关系及意义。方法：采用免疫组化Envision法检测162例胃癌及配对正常胃粘膜中Bmi-1和ki-67的表达，采用免疫组化双染法观察Bcl-2^＋／ki-67^-细胞的分布。结果：胃癌组织中Bmi-1表达（52．5％）明显高于正常胃粘膜（21．6％），P〈0．05；胃癌中Bmi-1表达与Lauren分型、Borrmann分型和胃癌临床病理分期有关（P〈0．05）。胃癌中ki-67表达与Borrmann分型有关（P〈0．05）。Bcl-2在胃癌中的表达与胃癌Lauren分型有关（P〈0．05）。在胃癌组织和肠化生粘膜中，Bmi-1与Bcl-2呈正相关（P〈0．05）。结论：胃癌及其癌前病变中Bmi-1表达可能与细胞增殖、凋亡和癌变有关。在胃癌和肠化生粘膜中Bmi-1和Bcl-2表达的相关性以及Bmi-1^＋细胞和Bcl-2^＋／ki-67^-细胞分布之间的关系提示Bmi-1与胃癌的发生密切相关。

SALL4及BMI-1在急性白血病中的表达

本研究旨在探讨SALL4及BMI-1基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义。运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测62例急性白血病患者和10例对照者(非恶性血液病患者)骨髓细胞中SALL4及BMI-1的mRNA的表达水平。结果表明:①SALL4mRNA在除M3及T-ALL外的急性白血病中均高表达,在髓系白血病中表达显著高于B淋巴细胞白血病(p=0.022,<0.05);在对照者中9例不表达,1例低表达;②SALL4mRNA在初治AL中表达较对照组明显增高,完全缓解组的表达明显下降,与初治组有显著差异(p<0.05);复发组的表达也明显增高,且略高于初治组患者(p=0.414);③BMI-1除在M3型中也高表达外与SALL4的表达规律一致,两者表达呈显著正相关(r=0.684,p<0.01)。结论:SALL4及BMI-1在急性白血病中异常高表达,影响白血病的发生和发展,它可作为急性白血病的发病、复发及预后判断的可能指标。

Bmi-1、hTERT在乳腺癌细胞中的表达及与凋亡的关系

目的研究原癌基因Bmi-1和hTERT的表达变化及其与细胞凋亡的关系,探讨它们在乳腺癌发生、发展过程中的作用。方法采用MTT法检测乳腺癌细胞的增殖抑制情况,并确定所选用的药物浓度。RT-PCR、Western Blot检测Bmi-1、hTERT的mRNA及蛋白的表达情况;TUNEL、流式细胞技术检测乳腺癌细胞的凋亡情况。结果 5-FU对乳腺癌细胞有明显抑制作用,各实验组与对照组OD值的差异有统计学意义(P<0.05)。用5-FU干预后,实验组Bmi-1和hTERT的mRNA及蛋白表达水平均降低,细胞凋亡指数增加,与对照组相比差异显著有统计学意义(P<0.05),经统计学分析两者呈正相关(P<0.05),且两者的表达与凋亡呈负相关(P<0.05)。结论 Bmi-1和hTERT的表达下调可促进乳腺癌细胞凋亡。

Bmi-1和Mel-18基因在大肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨Bmi-1和Mel-18基因在大肠癌中的表达及其临床意义.方法:收集我院68例大肠癌组织标本,68例癌旁正常组织作为对照.利用免疫组织化学的方法检测大肠癌及正常组织中的Bmi-1基因和Mel-18基因的表达,并结合临床资料,对该两种基因的表达与大肠癌患者临床表现的相关性进行分析.结果:(1)Bmi-l在大肠癌组织中的表达明显高于正常组织(73.5%vs23.5%,P<0.05),且与大肠癌的侵袭深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);(2)Mel-18基因在大肠癌组织中的表达明显低于正常组织(41.2%vs66.2%,P<0.05),且与大肠癌的淋巴结转移及临床分期呈负相关(P<0.05);(3)相关性分析发现,Bmi-1和Mel-18基因在大肠癌组织中的表达呈负相关(r=-0.545,P<0.05).结论:Bmi-1和Mel-18基因与大肠癌的发展、转移关系密切,检测Bmi-1和Mel-18对大肠癌的诊断及判断预后可能有重要意义.

Bmi-1基因过度表达与喉癌的分化、转移及预后的关系

目的探讨喉癌组织中Bmi-1基因mRNA的表达与喉癌的分化、转移及临床预后的关系。方法收集我们医院2008年5月~2008年11月共52例行喉癌手术切除的标本,提取肿瘤组织及癌旁组织配对标本的总RNA,采用RT-PCR方法测定Bmi-1基因mRNA的表达,Western blot法分析Bmi-1蛋白的表达水平,并结合临床资料对Bmi-1基因差异表达与喉癌患者的临床表现进行相关性分析。结果 52例配对标本分别进行Bmi-1mRNA荧光检测比较,39例标本的肿瘤组织中Bmi-1基因mRNA的表达明显高于癌旁正常喉组织;32例标本的肿瘤组织中Bmi-1蛋白表达明显高于癌旁正常喉组织;Bmi-1mRNA的表达与喉癌淋巴结转移和浸润深度密切相关（P〈0.05）,而与患者的性别、年龄、吸烟及肿瘤分化程度等无关（P〉0.05）。结论 Bmi-1基因在喉癌组织中的表达状态与喉癌的生长和浸润转移关系密切;Bmi-1基因mRNA可望作为喉癌病情发展及指导临床治疗的标记物之一;Bmi-1mRNA的测定有助于判断肿瘤预后。

沉默Bmi-1基因表达稳定细胞株的建立及其生物学特性的研究

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertionsite 1,Bmi-1)基因是多梳基因家族成员,参与细胞增殖调控.研究发现Bmi-1基因可能参与肿瘤的形成,可能成为肿瘤潜在的治疗靶点.用RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Bmi-1基因表达观察其对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭和转移等生物学特性的影响,以探讨Bmi-1在乳腺癌发生发展中的作用.PT67细胞包装质粒后产生的逆转录病毒感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选建立稳定细胞株,稳定抑制Bmi-1的细胞株命名为MCF-7/Bmi-1si.通过RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测Bmi-1的表达量;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell侵袭小室模型检测细胞体外侵袭和转移能力.MCF-7/Bmi-1si组与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,Bmi-1 mRNA和蛋白表达量明显减少,克隆形成数及形成率也明显减少(P<0.05).侵袭和转移实验表明:与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,MCF-7/Bmi-1si组细胞在Transwell侵袭小室中24 h穿膜细胞数明显减少(P<0.05).结果表明沉默Bmi-1基因表达稳定细胞株构建成功,Bmi-1基因表达的沉默能显著降低MCF-7细胞的体外增殖及侵袭转移能力.

Bmi-1基因对于人胚骨髓间充质干细胞增生和衰老的作用

目的探讨人类胚胎骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)中,Bmi-1(B cell specific moloney murine leukemia virus insertion site1,Bmi-1)基因是否参与了自我更新和增生的维持。方法 用human-Bmi-1干扰病毒和GFP对照病毒分别转染MSC,进行RNA干扰(RNA interference,RNAi),镜下观察转染效率。于转染后0、72、120、168h4个时间点收集细胞,用实时定量PCR(Real-time PCR)方法检测细胞中的Bmi-1干扰组与同时间点GFP对照病毒转染组相比的相对转录水平,一周后比较human-Bmi-1干扰病毒和GFP对照病毒转染后MSC细胞的增生能力和衰老状态。结果 经human-Bmi-1干扰病毒和GFP对照病毒转染后48h,显微镜下细胞都带有绿色荧光,转染效率超过90%。与转染后0h的Bmi-1基因的相对转录水平(100±21)%相比,72、120、168h的Bmi-1基因的相对转录水平下降,分别为:(28±18)%、(55±21)%和(58±22)%,差异有统计学意义。经Bmi-1干扰后,细胞的增生能力显著下降,衰老细胞数量显著增加。结论 Bmi-1基因正性调控人类胚胎骨髓来源的MSC的增生,并防止衰老,当细胞内的Bmi-1转录水平下降时,细胞增生减慢,衰老细胞也显著增加。

沉默Bmi-1表达可促进MCF-7乳腺癌细胞凋亡并抑制其侵袭

目的探讨B细胞特异的Moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)基因沉默对细胞增殖与侵袭的影响及可能的分子机制。方法收集经病理确诊的乳腺癌及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR检测Bmi-1的表达差异;采用LipofectamineRNAi MAX转染试剂将靶向Bmi-1基因的小干扰RNA(siRNA)转染MCF-7细胞,流式细胞术检测Bmi-1沉默后细胞周期和凋亡的改变,Western blot法检测凋亡相关基因P21、Bax、Bcl-2的表达变化。TranswellTM侵袭实验检测MCF-7细胞侵袭力变化,Western blot法检测上皮钙黏素(E-cadherin),神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达水平。结果乳腺癌组织Bmi-1 mRNA表达量高于癌旁组织,沉默Bmi-1基因可使MCF-7细胞周期阻滞于G1期,凋亡细胞增多;与空白对照组、阴性对照siRNA转染组相比,Bmi-1-siRNA组中P21与Bax的表达水平明显上调,Bcl-2明显下调。沉默Bmi-1基因表达可抑制MCF-7细胞的侵袭力,与对照组相比,下调Bmi-1可增强E-cadherin的表达,减少N-cadherin、vimentin的表达。结论下调Bmi-1的表达可引起MCF-7细胞G1期阻滞,促进细胞凋亡,与P21表达上调,Bax/Bcl-2比率升高有关;下调Bmi-1水平可抑制MCF-7细胞侵袭性,与抑制肿瘤细胞上皮间质转化有关。

大肠癌患者病理因素及预后与Bmi-1表达的相关性研究

目的研究大肠癌组织中Bmi-1蛋白表达情况及其与大肠癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测60例大肠癌、30例大肠腺瘤及20例正常大肠粘膜组织中Bmi-1蛋白的表达情况及其与大肠癌临床病理特征及患者生存率的关系。结果Bmi-1蛋白在大肠癌中的阳性表达率为51.7%,在大肠癌、大肠腺瘤及正常肠粘膜组织中高表达率分别为25.0%、6.67%、0%,在大肠癌中表达明显高于腺瘤组及正常组(P<0.05);卡方检验显示Bmi-1蛋白高表达与有无远处转移及TNM分期密切相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、分布部位、分化程度、组织类型及淋巴结转移等临床病理特征无关(P>0.05),进一步采用多因素Logistic回归分析显示只有远处转移与Bmi-1蛋白高表达有关(P<0.01,OR>1);Kaplan-Meier生存分析显示Bmi-1蛋白高表达患者生存率明显低于低表达患者(P<0.05)。结论Bmi-1蛋白表达与大肠癌的发生、转移及预后关系密切,可作为评估患者浸润转移及预后的参考指标。