L-carnitine对缺氧/复氧新生大鼠心肌细胞能量生成及CPT-Ⅱ mRNA表达的影响

目的 探讨L 肉毒碱 (L carnitine ,L Car)对缺氧 复氧培养新生大鼠心肌细胞能量生成的影响及其机制。方法 以原代培养新生大鼠心肌细胞建立缺氧 复氧损伤模型 ,高效液相色谱检测单纯缺氧 复氧以及L Car预处理缺氧 复氧心肌细胞ATP、ADP、AMP生成改变 ;RT PCR方法检测心肌细胞肉毒碱脂酰基转移酶 Ⅱ (carnitinepalmitoyltransferase Ⅱ ,CPT Ⅱ )mRNA表达。结果 与正常对照组比较 ,培养心肌细胞缺氧 2 4h复氧 0、2、4、8h后 ,心肌细胞ATP、ADP均明显下降。与单纯缺氧 复氧组比较 ,L Car预处理组心肌细胞缺氧 复氧后ATP含量明显增高 ;培养心肌细胞缺氧 2 4h后 ,CPT ⅡmRNA表达除复氧 2h有所上升外 ,复氧 4、8h表达渐次降低。L Car预处理使缺氧 2 4h复氧 4h心肌细胞CPT ⅡmRNA表达呈浓度依赖性增高 ,5 0nmol L处理组CPT ⅡmRNA表达显著高于 0nmol L处理组。结论 心肌细胞缺氧 复氧过程中能量生成明显降低 ,其损伤可能与三羧酸循环中呼吸酶CPT Ⅱ表达降低有关 ;L Car对培养仔鼠心肌细胞缺氧复氧损伤具有显著保护作用 ,其机制可能是与L Car从转录调控水平改善CPT Ⅱ合成有关。

CPT Ⅱ基因F352C多态性与非酒精性脂肪性肝炎易感性的研究

目的:研究肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(Carnitine Palmitoyltransferase Ⅱ,CPT Ⅱ)基因F352C多态性与日本高知地区非酒精性脂肪性肝炎(NASH)易感性的相关性。方法:提取日本高知地区45例肝活检证实的NASH患者和148例健康志愿者的外周静脉血,应用聚合酶链式反应(PCR)进行检测分析。结果:NASH组中A等位基因的频率显著高于正常对照组(P<0.01);NASH组中A/-基因型的频率显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:CPT Ⅱ基因F352C多态性与NASH发生发展有显著相关性。

肉碱棕榈酰基转移酶Ⅱ缺陷症的生化学研究

目的:分析肉碱棕榈酰基转移酶Ⅱ(CPTⅡ)缺陷症患者细胞生化学特性,为研究CPTⅡ缺陷导致能量代谢障碍分子机制提供基本数据。方法:通过基因组序列分析,确定CPTⅡ基因突变类型;通过检测CPTⅡ残基酶活性和酶促动力学特征,分析正常和缺陷CPTⅡ残基酶两者活性与CPTⅡ基因突变类型间关系;测定两者线粒体脂肪酸β-氧化和ATP生成水平;分析两者细胞膜电位。结果:生化学特性分析结果显示CPTⅡ缺陷症患者细胞的CPTⅡ残基酶活性明显降低,且呈热不稳定性;细胞线粒体脂肪酸β-氧化和ATP生成水平显著不足;细胞膜电位显著较低。结论:CPTⅡ是一个热不稳定蛋白酶,CPTⅡ缺陷导致CPTⅡ残基酶活性明显降低,脂肪酸β-氧化和ATP生成水平显著不足。

胰岛素、胰高血糖素对体外培养犊牛肝细胞CPT-Ⅰ和CPT-ⅡmRNA表达的影响

体外原代培养犊牛肝细胞,添加不同浓度的胰岛素(insulin,INS)(0、1、10、100、1 000nmol/L)和胰高血糖素(glucagon,GLN)(0、1、10、100、1 000nmol/L),每个处理做3个重复,分别培养1h后,提取总RNA。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,检测肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅰ)和肉碱棕榈酸转移酶Ⅱ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅱ)mRNA表达的变化。结果显示,随着培养液中INS含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量逐渐降低,呈现一定的剂量依赖性。随着培养液中GLN含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量均升高,呈现一定的剂量依赖性,且当GLN的添加浓度高于100nmol/L时,CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量显著升高(P<0.01)。结果表明,INS可在一定程度上抑制脂氧化关键酶的表达,GLN可显著促进脂氧化关键酶的表达。

艾力联合5-FU/CF治疗转移性大肠癌及与FOLFOX4方案的比较研究

[目的]比较艾力联合5-FU/CF方案(A组)及FOLFOX4方案(B)组的临床疗效及毒副反应。[方法]采用临床试验,比较FOLFIRI(艾力、5-FU及CF)及FOLFOX4(奥沙利铂、5-FU及CF)方案,化疗进展期转移性结直肠癌的近期疗效及毒副反应。[结果]A组28例,CR1例,PR11例,近期客观有效率42.86%,中位疾病进展时间(TTP)为6.9月,中位生存时间(MST)为11.1月。B组28例,CR:无CR,PR10例,近期客观有效率35.71%,TTP为7.0月,MST为10.8月。不良反应A组略强于B组。[结论]对于进展期转移性结直肠癌,国产艾力构建的FOLFIRI方案近期有效率有增加趋势。对一般情况较差者,FOLFOX4更适合一些。