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Cloning and Expression Analysis of PtFATB Gene Encoding the Acyl-acyl Carrier Protein Thioesterase in Populus tomentosa Carr 被引量:1
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作者 周洲 张德强 卢孟柱 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第3期267-274,共8页
Acyl-ACP thioesterases (FATs) terminates the fatty acid synthesis and allow the transport of fatty acids out of the plastids, which are the important determinants of cellular metabolism. FATB is a member of FAT enzy... Acyl-ACP thioesterases (FATs) terminates the fatty acid synthesis and allow the transport of fatty acids out of the plastids, which are the important determinants of cellular metabolism. FATB is a member of FAT enzymes that has been described previously in most of the plants. In silico cloning is a new method that utilizes the bioinformatics on the complete genome and available EST database. In this study, a full-length cDNA clone of PtFATB gene was isolated from Populus tomentosa using this approach. It is 1,450 bp in length and the open reading frame encodes a peptide of 421 amino acids. The predicted amino acid sequence shows significant homology with those from other plant species, which contain typical domains owned by FATB proteins. The transcripts of PtFATB were abundant in leaves, and less in roots detected by using semiquantitative RT-PCR. When the shoots were subjected to the stress treatments (cold, dry, NaC1) and ABA (Abscisic acid), the expression of PtFATB was only slightly reduced under the treatment of low temperature. This suggests that the expression of PtFATB is in a constitutive fashion. This study provides the basis not only for the identification and characterization of this gene but also for the improvement of cold tolerance by controlling the expression of the PtFATB gene in trees in near future. 展开更多
关键词 Populus tomentosa Carr. Acyl-acyl carrier protein thioesterase (PtFATB) in silico and molecular cloning RT-PCR expression analysis
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Gene cloning,expression analysis of JcACP (Acyl Carrier Protein) in Jatropha curcas L. and its prokaryotical expression
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作者 JIANG Lu-ding1,2,LI Xiao-hui1(1.Institute of Materia Medica,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China 2.School of Life Sciences,Sichuan University,Chengdu 610064,China) 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期128-129,共2页
Objective To clone the ACP(acyl carrier protein)gene in Jatropha curcas L.,a potential anti-tumour and anti-fungal plant.And to determinate the expression of ACP in Jatropha curcas L.Methods A cDNA clone encoding ACP(... Objective To clone the ACP(acyl carrier protein)gene in Jatropha curcas L.,a potential anti-tumour and anti-fungal plant.And to determinate the expression of ACP in Jatropha curcas L.Methods A cDNA clone encoding ACP(acyl carrier protein)was isolated from Jatropha curcas L.endosperm cDNA library by random sequencing.The expression of ACP gene was investigated by semi-quantitative RT-PCR in leaves,stems and seeds of J.curca.The expression of ACP was also investigated in germinating seeds.The fragment encoding ACP protein in J.curca.was inserted into a prokaryotic expression vector pET28a(+).The gene was overexpressed in E.coli BL21 to produce abundant protein.Immunohistochemical analysis was used to detect the expression of ACP in different tissues of J.curca.Results The cDNA sequence was 806 bp in length and the ORF was 393 bp.The predicted molecular weight of the putative protein was 14.4 kD,pI=5.2.It contained a 4'-phosphopantetheine-binding motif.This prosthetic group can be combined with Serine of ACP protein.Semi-quantitative RT-PCR analysis showed that ACP gene was expressed in leaves,stems and seeds of J.curcas.The expression level of ACP was the highest in seeds and it was not detected in roots.After seeds germinated,the expression level of ACP in seeds increased progressively and reached a peak at 96 h.After induced by IPTG,SDS-PAGE analysis showed that the ACP protein of 20 kD was expressed.Immunohistochemical analysis showed that ACP specifical expressed abundantly in embyo of the seeds,and it was not detected in roots and the emdosperm while expressed in leaves and stems.Conclusions A cDNA clone encoding ACP which had all the typical characteristics of ACPs was isolated.It was expressed successfully in E.coli.The results of semi-quantitative RT-PCR analysis and immunohistochemical analysis were very similar,which showed that the expression of ACP in J.curcas.was abundant in seeds.The results indicated the expression related to the high metabolism. 展开更多
关键词 JATROPHA curcas L. ACYL carrier protein(ACP) Clone EXPRESSION ananlysis Prokaryotical EXPRESSION IMMUNOHISTOCHEMICAL
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Cloning and Enzymatic Activity Analysis of the Malonyl-CoA:acyl Carrier Protein Transacylase in <i>Brassica napus</i>Cultivars with Different Oil Content
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作者 Chenning Qu Huanhuan Jiang Lei Zhang 《American Journal of Plant Sciences》 2014年第18期2599-2610,共12页
The full-length genomic DNA of MCAT (Malonyl-CoA:acyl carrier protein transacylase) in Brassica napus was cloned. BnMCAT shares very high identity with AtMCAT in gene sequence and gene structure. A multiple alignment ... The full-length genomic DNA of MCAT (Malonyl-CoA:acyl carrier protein transacylase) in Brassica napus was cloned. BnMCAT shares very high identity with AtMCAT in gene sequence and gene structure. A multiple alignment of the protein sequence showed that BnMCAT shares high identity with other MCATs from E. coli and plants. BnMCAT was expressed in all tissues, such as roots, stems, leaves, flowers, and seeds, and no significant differences in the expression level were found in different embryo stages after pollination. According to an in vitro relative activity analysis, purified recombinant BnMCAT expressed in E. coli had transacylase activity. Although the relative activities of BnMCAT in crude extracts isolated from different staged embryos were similar and showed little variation, a higher relative activity was found in a crude extract isolated from embryos in comparison to leaves. Different relative activities of BnMCAT in crude extracts isolated from cultivars with different oil content were also found, suggesting that the activity of BnMCAT might be a decisive factor for a high oil content. Together, these results showed that BnMCAT is an important enzyme in the FAS system and indicate that BnMCAT might be a new target enzyme for future crop improvement through genetic engineering. 展开更多
关键词 Malonyl-CoA:acyl carrier protein TRANSACYLASE (MCAT) Brassica NAPUS Oil Content Relative Activities
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Protein-protein interface analysis of the non-ribosomal peptide synthetase peptidyl carrier protein and enzymatic domains 被引量:2
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作者 Joshua C.Corpuz Javier O.Sanlley Michael D.Burkart 《Synthetic and Systems Biotechnology》 SCIE 2022年第2期671-682,共12页
Non-ribosomal peptide synthetases(NRPSs)are attractive targets for biosynthetic pathway engineering due to their modular architecture and the therapeutic relevance of their products.With catalysis mediated by specific... Non-ribosomal peptide synthetases(NRPSs)are attractive targets for biosynthetic pathway engineering due to their modular architecture and the therapeutic relevance of their products.With catalysis mediated by specific protein-protein interactions formed between the peptidyl carrier protein(PCP)and its partner enzymes,NRPS enzymology and control remains fertile ground for discovery.This review focuses on the recent efforts within structural biology by compiling high-resolution structural data that shed light into the various protein-protein interfaces formed between the PCP and its partner enzymes,including the phosphopantetheinyl transferase(PPTase),adenylation(A)domain,condensation(C)domain,thioesterase(TE)domain and other tailoring enzymes within the synthetase.Integrating our understanding of how the PCP recognizes partner proteins with the potential to use directed evolution and combinatorial biosynthetic methods will enhance future efforts in discovery and production of new bioactive compounds. 展开更多
关键词 Natural products protein-protein interactions Non-ribosomal peptide synthetase Peptidyl carrier protein Combinatorial biosynthesis Synthetic biology
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Cloning of Soybean 24 kDa Oleosin Gene and Its Transient Expression as a Carrier for Foreign Protein 被引量:9
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作者 XUMiao-yun LIUDe-hu LIGang-qiang 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2004年第5期321-329,共9页
The genomic DNA sequence encoding soybean 24 kDa oleosin and its promoter were cloned andanalyzed for investigation of the potentials of the oleosin acted as a carrier forproduction of recombinant proteins in plant. T... The genomic DNA sequence encoding soybean 24 kDa oleosin and its promoter were cloned andanalyzed for investigation of the potentials of the oleosin acted as a carrier forproduction of recombinant proteins in plant. The -300 box, GA-rich, G-box, SEF-3, SEF-4, RY box, ABA box, CAn and TATA box were found in the upstream region of the soybeanoleosin gene, which shows the functional oleosin promoter available. Homology comparisonreveals that the soybean 24 kDa oleosin shares the highest identity with the soybeanoleosin isoform A (U09118, GenBank), reaching to 98.4% in nucleotide. A soybean oleosin-hirudin fusion gene driven by the oleosin promoter was constructed and inserted intoplant binary expression vector. The intact tobacco plantlets were transformed by meansof vacuum infiltration approach, with the Agrobacterium tumefaciens harboring the abovevector. The transient correct expression of oleosin-hirudin fusion gene was identifiedby SDS/PAGE, western blotting and enterokinase treatment. 展开更多
关键词 OLEOSIN carrier for foreign protein Transient expression PROMOTER
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Comparative experiment of four different materials as carriers of Bone morphogenetic protein to repair long bone defect
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《Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition)》 2001年第3期120-121,共2页
关键词 BONE Comparative experiment of four different materials as carriers of Bone morphogenetic protein to repair long bone defect
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SCAMP2和SCAMP3在膀胱癌中的表达及意义
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作者 曲婷婷 赵树超 +2 位作者 闫伟华 张翔雁 贾长新 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第2期222-226,共5页
目的探讨分泌载体相关膜蛋白2和3(SCAMP2和SCAMP3)在膀胱癌(BC)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测181例BC及相应癌旁组织中SCAMP2和SCAMP3的表达水平。结果与相应癌旁组织相比较,SCAMP2和SCAMP3在BC组织中的表达水平显著升... 目的探讨分泌载体相关膜蛋白2和3(SCAMP2和SCAMP3)在膀胱癌(BC)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法检测181例BC及相应癌旁组织中SCAMP2和SCAMP3的表达水平。结果与相应癌旁组织相比较,SCAMP2和SCAMP3在BC组织中的表达水平显著升高(χ^(2)=41.242、110.576,P<0.001)。SCAMP2高表达与饮酒史和癌症家族史有关(χ^(2)=4.784、3.904,P<0.05)。SCAMP3高表达与浸润性BC和癌症家族史有关(χ^(2)=6.893、7.411,P<0.05)。预后分析显示,SCAMP2和SCAMP3表达与BC病人预后没有相关性。结论SCAMP2和SCAMP3在BC组织中的高表达可能与BC的发生和进展密切相关,可能可以作为BC治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 载体蛋白质类 膜蛋白质类 疾病特征 预后 免疫组织化学
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向日葵HaFATA基因的生物信息学和表达分析
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作者 周菲 《安徽农业科学》 CAS 2024年第7期96-98,共3页
FATA编码脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A,将质体中以脂酰-ACP形式存在的脂肪酸水解成游离的脂酰-CoA和酰基载体蛋白。为了解向日葵HaFATA基因编码蛋白的结构、功能及基因表达特性,对HaFATA编码蛋白进行生物信息学和基因表达分析。预测HaFATA... FATA编码脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A,将质体中以脂酰-ACP形式存在的脂肪酸水解成游离的脂酰-CoA和酰基载体蛋白。为了解向日葵HaFATA基因编码蛋白的结构、功能及基因表达特性,对HaFATA编码蛋白进行生物信息学和基因表达分析。预测HaFATA为碱性且为亲水性蛋白,二级结构主要是无规则卷曲,预测亚细胞定位于叶绿体。系统进化分析表明,HaFATA与同属菊科的莴苣(Lactuca sativa L.)和水飞蓟(Silybum marianum L.)FATA进化关系近,序列相似性分别为90%、87%。HaFATA表达分析结果显示,HaFATA在向日葵种子中表达最高,其次为在管状花和叶中,在茎、舌状花和根中不表达,在发育的种子中,HaFATA除在开花后12 d表达相对较低,在其他6个发育时期表达均较高,表明其对于种子发育和油脂积累可能具有重要作用。 展开更多
关键词 向日葵 脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶 脂肪酸 生物信息学 表达分析
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呼吸窘迫综合征早产儿血清NGAL的动态变化及其对支气管肺发育不良的早期预测价值
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作者 张彦洁 《河南医学研究》 CAS 2024年第16期3007-3011,共5页
目的探讨呼吸窘迫综合征早产儿血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的动态变化情况,并分析其对患儿发生支气管肺发育不良(BPD)的早期预测价值。方法前瞻性选取平顶山市第一人民医院儿科2019年8月至2023年1月收治的81例呼吸窘迫... 目的探讨呼吸窘迫综合征早产儿血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的动态变化情况,并分析其对患儿发生支气管肺发育不良(BPD)的早期预测价值。方法前瞻性选取平顶山市第一人民医院儿科2019年8月至2023年1月收治的81例呼吸窘迫综合征早产儿作为研究对象。分别检测出生24 h内及出生后3、7、14 d的血清NGAL水平,并收集基线资料。根据患儿出生后28 d是否发生BPD分为发生组与未发生组,比较两组患儿不同时点的血清NGAL水平及基线资料,使用点二列相关性检验血清NGAL动态变化与呼吸窘迫综合征患儿发生BPD之间的关系,再绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清NGAL动态变化对呼吸窘迫综合征早产儿发生BPD的早期预测价值。结果共纳入81例呼吸窘迫综合征早产儿,因出现不良结局脱落1例,因家长申请退出研究脱落1例,最终79例患儿完成研究。其中有30例患儿出现BPD,发生率为37.97%(30/79)。发生组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血浆Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)高于未发生组(P<0.05)。出生24 h内两组血清NGAL差异无统计学意义(P>0.05);出生后3、7、14 d发生组血清NGAL水平高于未发生组(P<0.05)。点二列相关性检验显示,出生3、7、14 d的血清NGAL水平、TNF-α、血浆KL-6与呼吸窘迫综合征患儿出现BPD呈正相关关系(r>0,P<0.05)。ROC曲线显示出生后3 d血清NGAL对呼吸窘迫综合征患儿出现BPD的预测价值较低,曲线下面积(AUC)为0.643,而出生后7 d血清NGAL对患儿出现BPD具有中等预测价值,AUC为0.866;出生后14 d的血清NGAL对患儿出现BPD具有较高预测价值,AUC为0.935。结论血清NGAL动态变化对呼吸窘迫综合征患儿出现BPD具有一定的预测价值,且出生后14 d预测价值最高。 展开更多
关键词 呼吸窘迫综合征 早产儿 血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 支气管肺发育不良 预测
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GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1在非小细胞肺癌中的表达及其与放疗疗效的关系
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作者 王龙 陈玉 赵珂 《医学临床研究》 CAS 2024年第7期1020-1023,共4页
【目的】探讨GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1(G3BP1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织中的表达及其与放疗疗效的关系。【方法】检测133例NSCLC患者组织中G3BP1蛋白表达水平,并分析其与NSCLC临床病理参数及放疗疗效的关系。【结果】NSCL... 【目的】探讨GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白1(G3BP1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织中的表达及其与放疗疗效的关系。【方法】检测133例NSCLC患者组织中G3BP1蛋白表达水平,并分析其与NSCLC临床病理参数及放疗疗效的关系。【结果】NSCLC患者组织中G3BP1蛋白水平在不同肿瘤直径、TNM分期及淋巴结转移患者中比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。有效组NSCLC组织中G3BP1蛋白水平低于无效组,差异有统计学意义(P<0.05)。G3BP1评价疗效的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)、最佳截断值、敏感度和特异度分别为0.802、2.33、86.54%和61.73%。Logistic多因素回归分析结果显示:肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移、急性放射性肺炎及G3BP1水平是影响NSCLC放疗疗效的独立危险因素(P<0.05)。【结论】G3BP1与NSCLC肿瘤直径、TNM分期及淋巴结转移有关,其水平可为评价患者的放疗疗效提供参考。 展开更多
关键词 非小细胞肺 GTP酶激活蛋白质类 载体蛋白质类
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SLC3A2在慢性阻塞性肺病中的表达及其与炎症的关系
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作者 武小杰 李伟 +1 位作者 毛莉娜 杨硕 《内科急危重症杂志》 2024年第5期401-403,共3页
目的:探讨溶质转运载体家族3成员2(SLC3A2)在慢性阻塞性肺病(COPD)发生机制中的作用。方法:收集72例COPD稳定期患者纳入COPD组,另选取67例同期健康体检者为对照组。采集2组外周静脉血,通过密度梯度离心和红细胞裂解的方法分离出中性粒细... 目的:探讨溶质转运载体家族3成员2(SLC3A2)在慢性阻塞性肺病(COPD)发生机制中的作用。方法:收集72例COPD稳定期患者纳入COPD组,另选取67例同期健康体检者为对照组。采集2组外周静脉血,通过密度梯度离心和红细胞裂解的方法分离出中性粒细胞,采用蛋白免疫印迹法检测外周血中性粒细胞SLC3A2水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆中白介素(IL)-8水平,同时收集2组的肺功能指标,包括第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)。分析SLC3A2与IL-8、FEV_(1)/FVC、FEV_(1)%预计值的相关性。结果:COPD组外周血中性粒细胞的SLC3A2及IL-8水平高于对照组(P均<0.01),SLC3A2与IL-8呈正相关(r=0.45,P<0.01),与FEV_(1)/FVC、FEV_(1)%预计值呈负相关(r=-0.42,-0.45,P均<0.01)。结论:SLC3A2可能通过炎症反应参与COPD的发生,SLC3A2有可能成为COPD临床的炎症标志物和治疗的靶点。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺病 溶质转运载体家族3成员2 氨基酸代谢 炎症机制
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妊娠期糖尿病患者血清分泌性卷曲相关蛋白-5、热休克蛋白60、溶质载体家族16成员11的表达及其与胰岛素抵抗的关系
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作者 魏曼 苑文贺 +3 位作者 刘红云 马迪蒙 闫康禄 韩宁 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第20期60-65,共6页
目的探讨分泌性卷曲相关蛋白-5(sFRP5)、热休克蛋白60(HSP60)、溶质载体家族16成员11(SLC16A11)在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达及其与胰岛素抵抗的关系。方法选取2022年1月—2023年12月在本院就诊的120例GDM患者为研究组,另选取同... 目的探讨分泌性卷曲相关蛋白-5(sFRP5)、热休克蛋白60(HSP60)、溶质载体家族16成员11(SLC16A11)在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达及其与胰岛素抵抗的关系。方法选取2022年1月—2023年12月在本院就诊的120例GDM患者为研究组,另选取同期120例健康孕妇为对照组。检测血清sFRP5、HSP60、SLC16A11表达水平;检测并计算胰岛素抵抗相关指标[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]的水平;采用Pearson法分析血清sFRP5、HSP60、SLC16A11与胰岛素抵抗的相关性;采用Logistic回归分析法与受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sFRP5、HSP60、SLC16A11与GDM的相关性。结果研究组血清sFRP5表达低于对照组,血清HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清sFRP5与HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR呈负相关(P<0.05);血清HSP60与SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05);血清SLC16A11与FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR是妊娠期患者发生GDM的影响因素,sFRP5是保护因素(P<0.05)。血清sFRP5、HSP60、SLC16A11联合诊断妊娠期患者发生GDM的曲线下面积(AUC)为0.924,3项指标联合诊断价值优于各指标单独诊断(P均<0.05)。结论GDM患者血清sFRP5水平降低,HSP60、SLC16A11水平升高;3项指标均为妊娠期患者发生GDM的影响因素,且与胰岛素抵抗相关;3项指标联合对GDM具有较高的诊断效能。 展开更多
关键词 分泌性卷曲相关蛋白-5 热休克蛋白60 溶质载体家族16成员11 妊娠期糖尿病 胰岛素抵抗
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Expression of lipopolysaccharide binding protein and its receptor CD14 in experimental alcoholic liver disease 被引量:14
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作者 Guo-Qing Zuo~1 Jian-Ping Gong~2 Chang-An Liu~2 Shen-Wei Li~2 Xin-Chuan Wu~2 Kang Yang~2 Yue Li~2 1 Department of Digestive Disease2 Department of General Surgery,Second College of Clinical Medicine &the Second Affiliated Hospital,Chongqing University of Medical Sciences,Chongqing 400010,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第6期836-840,共5页
AIM: To evaluate the relationship between the expression of lipopolysaccharides (LPS) binding protein (LBP) and CD14 mRNA and the severity of liver injury in alcohol-fed rats. METHODS: Twenty Wistar rats were divided ... AIM: To evaluate the relationship between the expression of lipopolysaccharides (LPS) binding protein (LBP) and CD14 mRNA and the severity of liver injury in alcohol-fed rats. METHODS: Twenty Wistar rats were divided into two groups:ethanol-fed group (group E) and control group (group C). Group E was fed with ethanol(5-12 g x kg(-1) x d(-1)) and group C received dextrose instead of ethanol. Rats of the two groups were sacrificed at 4 weeks and 8 weeks. Levels of endotoxin and alanine transaminase (ALT) in blood were measured, and liver pathology was observed under light and electronic microscopy. Expressions of LBP and CD14 mRNA in liver tissues were determined by RT-PCR analysis. RESULTS: Plasma endotoxin levels were increased more significantly in group E(129+/-21) ng x L(-1) and (187+/-35) ng x L(-1) at 4 and 8 wk than in control rats(48+/-9) ng x L(-1) and (53+/-11) ng x L(-1), respectively (P【0.05). Mean values of plasma ALT levels were (1867+/-250) nkat x L(-1) and (2450+/-367) nkat x L(-1) in Group E. The values were increased more dramatically in ethanol-fed rats than in Group C after 4 and 8 weeks. In liver section from ethanol-fed rats, there were marked pathological changes (steatosis, cell infiltration and necrosis). In ethanol-fed rats, ethanol administration led to a significant increase in LBP and CD14 mRNA levels compared with the control group (P【0.05). CONCLUSION: Ethanol administration led to a significant increase in endotoxin levels in serum and LBP and CD14 mRNA expressions in liver tissues. The increase of LBP and CD14 mRNA expression might wake the liver more sensitive to endotoxin and liver injury. 展开更多
关键词 Acute-Phase proteins Gene Expression Membrane Glycoproteins Animals Antigens CD14 carrier proteins Female Liver Liver Diseases Alcoholic RNA Messenger RATS Rats Wistar Research Support Non-U.S. Gov't Severity of Illness Index
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伪蛋白生物材料的分类、合成及其应用
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作者 薛云娇 张璇 +3 位作者 刘洋 陈玉焕 房静 杨芳 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期2001-2016,共16页
伪蛋白是一种新型合成生物可降解材料,以氨基酸为基本结构单元,它与蛋白质不同的是除了含有肽键外,还含有其他连接基团,这种结构使其既具有蛋白质的优良特性,又具有良好的力学性能、热性能、可调节的物理化学性能以及优异的细胞相容性... 伪蛋白是一种新型合成生物可降解材料,以氨基酸为基本结构单元,它与蛋白质不同的是除了含有肽键外,还含有其他连接基团,这种结构使其既具有蛋白质的优良特性,又具有良好的力学性能、热性能、可调节的物理化学性能以及优异的细胞相容性和3D微孔结构等性质,因此伪蛋白能够有效应用于载体、伤口愈合、组织工程等生物医药领域。本文首先综述了目前所研究的伪蛋白的类型,包括非功能性和功能性伪蛋白两类;之后详细阐述了缩聚合成伪蛋白的方法,包括溶液缩聚、界面聚合、熔融缩聚、开环聚合四种方法;接着归纳了伪蛋白生物材料在药物载体、基因载体、组织工程、创面敷料等方面的应用;最后,对伪蛋白生物材料在合成路线及应用方面未来的发展进行了探讨和展望。 展开更多
关键词 伪蛋白 合成 聚合物 载体 组织工程
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BVDV非结构蛋白NS4B的结构分析及其蛋白表达与鉴定
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作者 柳凯月 董亚尊 +6 位作者 吴双双 马一瑄 刘鸿雁 王北艳 于立权 宋佰芬 马金柱 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第1期69-76,共8页
NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基... NS4B是牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的非结构蛋白,为研究BVDV在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,对ns4b进行了结构分析、表达载体构建及蛋白表达。采用Prot-Param、TExpasy和SignalP-4.1等软件分析NS4B蛋白的氨基酸组成、疏水性和空间结构。根据Genebank上公布的BVDVns4b基因序列设计引物,利用PCR方法获得ns4b基因片段,连接到p3×Flag-CMV10表达载体上,构建重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,经双酶切与测序鉴定正确后,将p3×FlagCMV10-ns4b转染到HEK-293T细胞中,利用Western blot检测NS4B蛋白的表达。结果表明BVDV NS4B蛋白分子量为38.4 kDa,不存在信号肽,有49个磷酸化位点和6个糖基化位点,是一种主要由α-螺旋和无规则卷曲结构组成的疏水性稳定蛋白。成功构建了重组质粒p3×Flag-CMV10-ns4b,并且p3×Flag-CMV10-ns4b在HEK-293T细胞中成功表达,为今后研究NS4B蛋白在BVDV感染宿主细胞及其免疫逃逸机制奠定了基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 ns4b基因 载体构建 蛋白表达
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Hepatocellular transport proteins and their role in liver disease 被引量:2
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作者 Carmen Stanca Diana Jung +1 位作者 Peter J.Meier Gerd A.Kullak-Ublick 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第2期157-169,共13页
MOLECULAR PHYSIOLLGY OF HEPATOCELLULAR TRANSPORT PROTEINS Basolaferal transport systems Na+-dependent bile salt uptake Uptake of bile salts into the liver was first isolated perfused rat liver[1],isolated hepatocyte... MOLECULAR PHYSIOLLGY OF HEPATOCELLULAR TRANSPORT PROTEINS Basolaferal transport systems Na+-dependent bile salt uptake Uptake of bile salts into the liver was first isolated perfused rat liver[1],isolated hepatocyte cultures and basolateral plasma membrane vesicles [2,4]. 展开更多
关键词 ATP-Binding Cassette Transporters ANIMALS carrier proteins HEPATOCYTES Humans LIVER Liver Diseases Organic Anion Transporters Organic Cation Transport proteins Research Support Non-U.S. Gov't
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涮辣和昆明皱皮椒Kas生物信息学及表达分析
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作者 周慧丹 李孟娟 +4 位作者 吴睿 李平平 张芮豪 吕俊恒 邓明华 《安徽农业科学》 CAS 2024年第1期90-97,114,共9页
[目的]探究涮辣与昆明皱皮椒3-氧酰基[酰基载体蛋白]还原酶(3-oxoacyl-[acyl-carrier-protein]synthase,Kas)的差异。[方法]特异性扩增了Kas,并进行了生物信息学分析。利用荧光定量PCR及酶活性测定方法测定了不同发育时期、不同环境及6... [目的]探究涮辣与昆明皱皮椒3-氧酰基[酰基载体蛋白]还原酶(3-oxoacyl-[acyl-carrier-protein]synthase,Kas)的差异。[方法]特异性扩增了Kas,并进行了生物信息学分析。利用荧光定量PCR及酶活性测定方法测定了不同发育时期、不同环境及6种外源因子处理下Kas表达量及酶活性。[结果]扩增得到的涮辣和昆明皱皮椒Kas基因均为1467 bp,编码488个氨基酸。Kas为脂溶性、亲水性的稳定蛋白,无信号肽与跨膜结构,主要定位于质膜。在不同发育阶段,2种辣椒Kas表达水平与酶活性的趋势均为先升高后急剧降低,且在大部分发育阶段均表现为露地栽培高于大棚栽培;同一环境条件下,涮辣Kas表达与酶活性整体高于昆明皱皮椒;且不同外源物质在一定时间内可影响涮辣Kas的表达,其中MeJA和SA处理对Kas表达量影响较大。[结论]涮辣与昆明皱皮椒Kas基因和蛋白特性相似,但存在差异,在辣椒生长发育、环境和外源物质响应方面有重要功能。 展开更多
关键词 涮辣 昆明皱皮椒 3-氧酰基[酰基载体蛋白]还原酶(Kas) 生物信息学
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血浆NGAL、尿NAG及尿RBP在诊断早期糖尿病肾脏疾病中的价值 被引量:1
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作者 赵晓静 韩书光 +3 位作者 李贝贝 陈聚盛 邓晨霞 刘倩倩 《检验医学与临床》 CAS 2024年第1期57-60,64,共5页
目的探讨血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和尿视黄醇结合蛋白(RBP)在诊断早期糖尿病肾脏疾病(DKD)中的价值。方法选取2021年5月至2023年3月在上海市浦东新区公利医院内分泌科确诊的2型... 目的探讨血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和尿视黄醇结合蛋白(RBP)在诊断早期糖尿病肾脏疾病(DKD)中的价值。方法选取2021年5月至2023年3月在上海市浦东新区公利医院内分泌科确诊的2型糖尿病(T2DM)患者227例作为研究对象,根据尿微量清蛋白/肌酐比值(UACR)进一步分为正常蛋白尿(NA)组、微量蛋白尿(MA)组、大量蛋白尿(HA)组,选取88例体检健康者作为对照组。检测各组UACR、NGAL、NAG、RBP、血糖、肾功能水平。分析NGAL、NAG、RBP水平与DKD的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各项指标诊断早期DKD的价值。结果根据UACR水平分组,NA组97例,MA组73例,HA组57例。NA组、MA组和HA组的NGAL、NAG、RBP水平高于对照组,并且HA组>MA组>NA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析发现,NGAL、NAG、RBP水平与UACR、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、光抑素C(CysC)均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,NGAL、NAG、RBP及三者联合检测诊断DKD的曲线下面积(AUC)依次为0.854、0.788、0.830、0.929;单项检测时NGAL的灵敏度(82.3%)较高,NGAL、NAG和RBP联合检测时诊断效能最大(AUC=0.929)。结论血浆NGAL、尿NAG、尿RBP水平与DKD患者肾脏损伤程度密切相关。三者联合检测可发挥其最大诊断效能,为早期DKD的诊断提供新的方法。 展开更多
关键词 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 视黄醇结合蛋白 糖尿病肾脏疾病 尿微量清蛋白/肌酐比值
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MCC950调控线粒体丙酮酸载体对阿尔茨海默病模型Tau蛋白影响
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作者 齐越 安阳 +5 位作者 董笑博 夏春鹏 王籍贤 范广坤 李纪彤 李昭 《中西医结合慢性病杂志》 2024年第1期6-12,共7页
目的探讨MCC950通过抑制线粒体丙酮酸载体降低阿尔茨海默病模型Tau蛋白的作用机制。方法采用冈田酸(20 nmol/L)诱导SH-SY5Y细胞,添加UK5099(1μmol/L),CCK8法检测细胞生存率;免疫荧光法测定AT-8表达;荧光探针法测定活性氧;Rho 123测定... 目的探讨MCC950通过抑制线粒体丙酮酸载体降低阿尔茨海默病模型Tau蛋白的作用机制。方法采用冈田酸(20 nmol/L)诱导SH-SY5Y细胞,添加UK5099(1μmol/L),CCK8法检测细胞生存率;免疫荧光法测定AT-8表达;荧光探针法测定活性氧;Rho 123测定线粒体膜电位;Western blot测定丙酮酸载体及Tau-5表达水平;ELISA法测定NOD样受体蛋白3、白细胞介素-1β、白细胞介素-18含量。结果MCC950在10μmol/L浓度下对SH-SY5Y细胞具有保护作用(P<0.01);可增加线粒体膜电位,减少活性氧的产生,抑制AT-8、Tau-5、白细胞介素-1β、白细胞介素-18及丙酮酸酶载体的表达(P<0.05或P<0.01),但对NOD样受体蛋白3无明显抑制作用。结论MCC950对冈田酸诱导的SH-SY5Y细胞具有减少炎症因子、抑制Tau蛋白过度磷酸化的作用,其作用机制与抑制丙酮酸载体、改善线粒体功能有关。 展开更多
关键词 MCC950 阿尔茨海默病 丙酮酸载体 TAU蛋白 线粒体膜电位 活性氧
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黄酮类化合物抑制β-酮酰基-ACP还原酶的构效关系研究
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作者 袁海华 荀航 +4 位作者 曹先爽 杨渊 姚曦 王进 汤锋 《林产化学与工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期18-28,共11页
研究黄酮类化合物对β-酮酰基-ACP还原酶(FabG)的抑制能力和分子结构之间的关系,并探讨其抑制作用机制。通过体外酶活测定,系统评价了33种黄酮类化合物对FabG的抑制活性,分析了构效关系;采用分子对接的方法研究了黄酮类化合物对FabG的... 研究黄酮类化合物对β-酮酰基-ACP还原酶(FabG)的抑制能力和分子结构之间的关系,并探讨其抑制作用机制。通过体外酶活测定,系统评价了33种黄酮类化合物对FabG的抑制活性,分析了构效关系;采用分子对接的方法研究了黄酮类化合物对FabG的抑制作用模式,研究了木犀草素对FabG的抑制动力学特征。研究结果表明:在质量浓度为25 mg/L时,异银杏双黄酮、奥洛波尔和木犀草素对FabG的抑制率达50%以上,另有15种黄酮类化合物对FabG的抑制率大于20%。具有FabG抑制活性的黄酮类化合物基本结构特征是A环上C-5、C-7以及B环C-4'位同时存在羟基,C环具有C-4位羰基和C-2、C-3位碳碳双键。B环增加邻位羟基取代会提升其FabG抑制活性,C环C-3位羟基化会减弱抑制活性。分子对接结果表明:黄酮类化合物能通过氢键、π相互作用等结合力与FabG-NADP+复合物的酪氨酸-151(Tyr-151)、丝氨酸-138(Ser-138)等关键活性氨基酸残基产生结合作用。抑制动力学测定结果显示:木犀草素抑制FabG时与底物(EAA)是竞争性关系,与辅酶(NADPH)是反竞争性关系。黄酮类化合物通过与FabG-NADP+复合物结合,与底物竞争活性位点,从而对FabG产生抑制作用。黄酮类化合物的抑制FabG活性与其分子结构密切相关,主要活性基团为A环和B环上的羟基取代基。 展开更多
关键词 β-酮酰基-ACP还原酶(FabG) 黄酮类化合物 抑制活性 分子对接
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