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ELISA法研究新型重组人肿瘤坏死因子在小鼠体内的药代动力学 被引量:6
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作者 鞠洋 路莉 +3 位作者 吴勇杰 高明堂 李文广 闵光宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期847-851,共5页
目的研究新型重组人肿瘤坏死因子(nrhTNFα)在小鼠体内的药代动力学。方法给小鼠分别im和ivnrhTNFα后,按不同时间点采血,分离血清,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中nrhTNFα的浓度,用DAS药动学软件进行曲线拟合并计算参数。结果nrhTNF... 目的研究新型重组人肿瘤坏死因子(nrhTNFα)在小鼠体内的药代动力学。方法给小鼠分别im和ivnrhTNFα后,按不同时间点采血,分离血清,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中nrhTNFα的浓度,用DAS药动学软件进行曲线拟合并计算参数。结果nrhTNFα5.51μg·kg-1、24.60μg·kg-1小鼠im后药动学特征符合一室开放模型,呈一级动力学消除。nrhTNFαim给药能迅速吸收入血,Tmax分别为0.17h和0.33h。T1/2分别为1.25h和0.73h,AUC随剂量增加而成比例增加。nrhTNFα5.51μg·kg-1小鼠iv后符合二室开放模型,呈一级动力学消除,T1/2β为0.37h,AUC为771.24ng·L-1·h-1。结论nrhTNFαim和iv的药动学行为在小鼠体内分别符合一室和二室开放模型,均呈一级动力学消除。im给药的生物利用度为48.84%,可考虑作为替代iv的一种安全给药途径。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-Α 药代动力学 elisa 小鼠
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ELISA检测小鼠肉汁中旋毛虫抗体实验条件的研究 被引量:10
2
作者 来利红 崔晶 王中全 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2006年第6期288-291,共4页
目的建立检测小鼠肉汁中旋毛虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法应用棋盘滴定方法,选择适宜的旋毛虫肌幼虫排泄-分泌(ES)抗原的包被浓度、酶结合物的种类及肉汁稀释液的种类。结果旋毛虫肌幼虫ES抗原的包被浓度为5.0μg/ml。辣... 目的建立检测小鼠肉汁中旋毛虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法应用棋盘滴定方法,选择适宜的旋毛虫肌幼虫排泄-分泌(ES)抗原的包被浓度、酶结合物的种类及肉汁稀释液的种类。结果旋毛虫肌幼虫ES抗原的包被浓度为5.0μg/ml。辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗小鼠IgG对感染旋毛虫小鼠血清及肉汁的抗体检出率均为100%(10/10),HRP标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)的检出率均为0(0/10),两者相比其差异有显著性(P<0.05)。对感染旋毛虫的小鼠肉汁分别用磷酸盐缓冲液(PBS)、磷酸盐缓冲液-Tween20(PBS-T)、生理盐水及含3%脱脂奶粉的PBS-T稀释后进行检测,发现含3%脱脂奶粉的PBS-T在各稀释度的P/N值均明显高于其他3种稀释液(P<0.05)。结论建立了检测小鼠肉汁中旋毛虫抗体的ELISA方法,合适的酶结合物为HRP标记的羊抗小鼠IgG,肉样的最佳稀释液为含3%脱脂奶粉的PBS-T,而HRP-SPA不适合于ELISA检测小鼠抗体IgG。 展开更多
关键词 旋毛虫 elisa 肉汁 酶结合物 小鼠
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ELISA法检测白喉抗体的研究和初步应用 被引量:3
3
作者 周志军 高菲 +1 位作者 刘亚莉 王平 《微生物学免疫学进展》 2008年第2期9-12,共4页
以白喉类毒素为包被抗原,经方阵滴定确定其包被浓度。通过对百白破三联疫苗免疫的小鼠血清中自喉抗体的小鼠-Vero细胞法效价与按几何平均滴度计算的ELISA效价进行比较,验证ELISA法检测白喉抗体的可行性。该试剂用人免疫球蛋白白喉抗... 以白喉类毒素为包被抗原,经方阵滴定确定其包被浓度。通过对百白破三联疫苗免疫的小鼠血清中自喉抗体的小鼠-Vero细胞法效价与按几何平均滴度计算的ELISA效价进行比较,验证ELISA法检测白喉抗体的可行性。该试剂用人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品检测的敏感度为0.05EU/ml,检测864份健康人血清,阳性率为50%,检测89份2~14岁儿童血清,阳性率为91%,与免疫规划的实际情况相符,可用于疫苗免疫效果的观察。 展开更多
关键词 白喉类毒素 小鼠-Vero细胞法 抗体几何平均滴度 elisa
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鼠IgG定量ELISA实验参比品的制备及其应用
4
作者 黄永国 张春燕 +3 位作者 龚劲松 陈妍 张波 李方和 《华中医学杂志》 CAS 2007年第1期4-6,共3页
目的 制备一组用于小鼠IgG定量ELISA检测的实验参比品。方法 将三株杂交瘤细胞制备的小鼠腹水等体积混合,以葡萄球菌A蛋白(SPA)亲和层析纯化IgG,凯氏定氮法测定IgG含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳作纯度鉴定并据此校正其... 目的 制备一组用于小鼠IgG定量ELISA检测的实验参比品。方法 将三株杂交瘤细胞制备的小鼠腹水等体积混合,以葡萄球菌A蛋白(SPA)亲和层析纯化IgG,凯氏定氮法测定IgG含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳作纯度鉴定并据此校正其IgG浓度,以特定保存液将其稀释成既定浓度系列,根据其在ELISA中的反应特征,制备浓度(自然对数)-A450值标准曲线,并将其用于对一组杂交瘤细胞培养上清中鼠单克隆抗体的IgG定量测定。结果提纯的鼠IgG经鉴定纯度达97.1%,且反应特性良好,其IgG含量与ELISA检测信号间有高度的相关性(r=0.990)。不同浓度的稀释系列经8次反复冻融,检测信号无显著变化,变异系数(CV)为1.87%~6.47%。将标准曲线计算所得浓度对设定浓度做回收实验分析,回收率89.1%~108.3%。并用其测得一组杂交瘤细胞培养上清的鼠IgG含量为8.0~51.5mg/L。结论 鉴定结果显示制备物定量准确,浓度范围适中,稳定性好,对于早期杂交瘤细胞分泌能力以及抗体稳定性的评价、单抗制剂的鉴定具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附试验 单克隆抗体 定量参照物 小鼠
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土大黄提取物对银屑病小鼠P物质及其神经肽受体-1表达的影响
5
作者 热比姑丽·伊斯拉木 优力都孜·买买提 +2 位作者 玉素甫江·艾力 开丽比努尔·阿布来提 巴合沙拉·马乃甫 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第15期2271-2278,共8页
目的:经土大黄干预,探讨P物质(SP)及其神经激肽-1受体(NK-1R)在银屑病皮肤组织中的表达及意义。方法:收集对照组,银屑病模型组,甲氨蝶呤片组(1.3 mg/kg),阿瑞匹坦胶囊组(5 mg/kg),土大黄组(1、2、4 g/kg)小鼠皮肤、血液标本,经苏木精-伊... 目的:经土大黄干预,探讨P物质(SP)及其神经激肽-1受体(NK-1R)在银屑病皮肤组织中的表达及意义。方法:收集对照组,银屑病模型组,甲氨蝶呤片组(1.3 mg/kg),阿瑞匹坦胶囊组(5 mg/kg),土大黄组(1、2、4 g/kg)小鼠皮肤、血液标本,经苏木精-伊红(HE)染色,观察银屑病小鼠皮肤组织病理学变化;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术,检测银屑病小鼠皮肤SP、NK-1R mRNA表达;采用酶联免疫吸附测定、蛋白免疫印迹技术,检测银屑病小鼠血液SP、皮肤、NK-1R蛋白表达;随后分析SP、NK-1R表达水平与银屑病的关系。结果:与银屑病模型组比较,所有药物干预组均能改善银屑病小鼠皮肤组织病理学变化;同时,小鼠皮肤SP、NK-1RmRNA表达,血清SP、皮肤NK-1R蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。与阳性对照药甲氨蝶呤片组、阿瑞匹坦胶囊组比较,1 g/kg大黄组小鼠皮肤组织NK-1R蛋白表达升高(P<0.05)。与土大黄组(1 g/kg)比较,土大黄组(2、4 g/kg)小鼠皮肤组织NK-1R蛋白表达均降低,其中土大黄组(2 g/kg)(P>0.05)、土大黄组(4 g/kg)(P<0.05)。结论:土大黄可能通过降低焦虑相关神经递质SP及其NK-1R受体基因、蛋白表达,从而改善小鼠银屑病样皮损,其作用不亚于阳性对照药甲氨蝶呤片、阿瑞匹坦胶囊。 展开更多
关键词 土大黄 银屑病 小鼠 苏木精-伊红染色 实时荧光定量聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 蛋白免疫印迹 P物质 神经肽-1受体
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富马酸二甲酯对肠道辐射损伤防护作用及机制研究
6
作者 张亮亮 胡昌坤 +3 位作者 吴泽坤 周维 廖泽彬 高月 《中国药物警戒》 2024年第1期83-88,共6页
目的研究富马酸二甲酯(dimethyl fumarate,DMF)对全身辐照小鼠小肠辐射损伤的防护作用及机制。方法利用^(60)Coγ射线诱导小鼠辐射损伤,取照射后小鼠小肠组织切片行H&E、TUNEL染色,观察小肠组织病理学改变及细胞凋亡。通过酶联免疫... 目的研究富马酸二甲酯(dimethyl fumarate,DMF)对全身辐照小鼠小肠辐射损伤的防护作用及机制。方法利用^(60)Coγ射线诱导小鼠辐射损伤,取照射后小鼠小肠组织切片行H&E、TUNEL染色,观察小肠组织病理学改变及细胞凋亡。通过酶联免疫吸附(ELISA)法测定辐照后小鼠小肠炎症因子白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及炎症小体小鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)、小鼠黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)含量变化。采用Western blot法、免疫荧光染色检测小肠中炎性小体NLRP3、AIM2的表达。使用激动剂验证DMF对小肠的辐射防护作用。结果在γ射线诱导的小鼠全身辐照损伤模型中,DMF(15 mg·kg-1)明显改善小肠组织病理状况,降低了辐照后肠道细胞的凋亡。DMF能够显著调节辐照后炎症因子及炎症小体的表达。Western blot结果和组织免疫荧光染色表明,DMF能够显著降低NLRP3、AIM2表达。DMF与NLRP3、AIM2激动剂联合使用后组织TUNEL染色结果表明,DMF不能减轻小肠组织的细胞凋亡。结论DMF对γ射线诱导的小鼠全身辐射损伤具有保护作用,其作用与抑制NLRP3/AIM2炎性小体有关,可作为潜在辐射损伤防护药物。 展开更多
关键词 富马酸二甲酯 辐射损伤 炎性小体 肠道损伤 酶联免疫吸附 白介素-1Β 白介素-6 白介素-18 肿瘤坏死因子-α 小鼠
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Synergetic effect of Egyptian propolis in immunization of BALB/c mice against bovine cysticercosis
7
作者 Omnia Mohamed Kandil Somia Ayesh Nassar +3 位作者 Soad Mohamed Nasr Hatem Abdel Mawgoud Shalaby Seham Hendawy Faragalla Mohamed El Moghazy 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2015年第4期324-330,共7页
Objective: To evaluate the synergetic effect of an ethanolic extract of Egyptian propolis in immunization of BALB/c mice with Taenia saginata(T. saginata) crude antigen against bovine cysticercosis, with reference to ... Objective: To evaluate the synergetic effect of an ethanolic extract of Egyptian propolis in immunization of BALB/c mice with Taenia saginata(T. saginata) crude antigen against bovine cysticercosis, with reference to its effects on liver and kidney functions.Methods: Sixty female mice BALB/c strain weighing 20 to 25 g and 6-8 weeks old were randomly allocated into six groups of ten mice each. Mice in groups 1 and 2(G1 and G2) were immunized intraperitoneally with 100 μg of T. saginata crude antigen in 100 μL phosphate buffer saline emulsified in Freund's adjuvant. Besides, the mice in G2 were administered with propolis extract simultaneously with immunization. Control mice were either administered with propolis extract(G3) or injected with the same volume of phosphate buffer saline emulsified in Freund's adjuvant(G4). The mice in G5 were non-immunized infected control while, those in G6 were non-immunized non-infected control. Two weeks after the last immunization, each mouse was challenged intraperitoneally with 5 000 oncospheres except those of G6. Ethanolic extract of propolis was prepared at a dose 50 mg/kg body weight.Results: After 24 weeks of challenge, the mice in G2 showed the highest level of protection(100%), with no cyst being detected rather than mice in G1(33.3% protection). Additionally,the ELISA results, in this study, showed higher antibody titer in G2 with reduction the alteration in liver and kidney functions compared to G1.Conclusions: Egyptian propolis could increase the level of protection against experimental challenge infection with T. saginata eggs when administered simultaneously with immunization. Furthermore, it could enhance the production of antibodies to immunized antigen and decrease the alteration in liver and kidney functions. 展开更多
关键词 TAENIA saginata Vaccine BALB/c mice elisa Serum BIOCHEMISTRY
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The Dynamic Study of Specific Antibodies in Sera of Jirds and Mice Experimentally Infected with Brugia malayi
8
作者 王宝成 瞿逢伊 李裕棠 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1990年第2期157-160,共4页
This paper deals with the studies on the changes of serum specific IgM andIgG,and relationship between the antibody level and infected worm stage of Brugiamalayi.The jirds (Meriones unguiculatus)and BALB/cCR mice were... This paper deals with the studies on the changes of serum specific IgM andIgG,and relationship between the antibody level and infected worm stage of Brugiamalayi.The jirds (Meriones unguiculatus)and BALB/cCR mice were infected with threedifferent stages of Brugia malayi by different routes and serum specific IgM and IgGwere detected by ELISA mcthod.The IgM of infected jirds and mice occurred earlierthan IgG,reached peak at 4~8th weeks,and maintained at a certain level during 30weeks.The responses and toles of IgM and IgG might probably be considered as animmunological characferistic of parasitic helminthic infection.The antibody levels inBALB/cCR mice after infection were higher than those in jirds. 展开更多
关键词 jird BALB/cCR mice BRUGIA malayi elisa IgM IgG
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日本血吸虫单克隆anti-anti-id的建株及初步鉴定 被引量:4
9
作者 王祝鸣 冯振卿 +2 位作者 仇镇宁 李芸茜 管晓虹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第4期204-205,256,共3页
目的 制备日本血吸虫抗独特型抗体 (anti- id,Ab2 ) NP30的单克隆抗独特型抗体 (anti-anti- id,Ab3)。方法 应用辣根过氧化物酶标记的 NP30 (HRP- NP30 )免疫 BAL B/ c小鼠的脾细胞与SP2 / 0融合 ,制备单克隆 anti- anti- id。结果 ... 目的 制备日本血吸虫抗独特型抗体 (anti- id,Ab2 ) NP30的单克隆抗独特型抗体 (anti-anti- id,Ab3)。方法 应用辣根过氧化物酶标记的 NP30 (HRP- NP30 )免疫 BAL B/ c小鼠的脾细胞与SP2 / 0融合 ,制备单克隆 anti- anti- id。结果 获得 1株稳定分泌抗 NP30的单克隆抗体的细胞株 ,定名为 NP48。NP48的 Ig同型为 Ig G2 b。NP48与 SWAP和 SEA EL ISA反应均阳性。免疫组织化学显示 NP48可定位于虫卵内毛蚴头腺及毛蚴膜。结论  NP48是 NP30的特异性 anti- anti- id,可用于 展开更多
关键词 日本血吸虫 单克隆抗体 模拟抗原 酶联免疫吸附试验 小鼠 anti-anti-id
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实验感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体水平的研究 被引量:6
10
作者 王中全 来利红 崔晶 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期171-174,179,共5页
目的观察小鼠感染旋毛虫后不同时间肉汁中抗体水平的变化及其与血清抗体水平的相关性。方法将288只昆明小鼠随机分成3组(每组96只):轻度(A组)、中度(B组)及重度(C组)感染组,每鼠分别经口感染100、300、500条旋毛虫幼虫,感染后各组每周... 目的观察小鼠感染旋毛虫后不同时间肉汁中抗体水平的变化及其与血清抗体水平的相关性。方法将288只昆明小鼠随机分成3组(每组96只):轻度(A组)、中度(B组)及重度(C组)感染组,每鼠分别经口感染100、300、500条旋毛虫幼虫,感染后各组每周或隔周随机剖杀8只小鼠,收集血清和肉汁,用旋毛虫肌幼虫排泄物分泌抗原(ES抗原)ELISA检测血清及肉汁中抗体水平;另取30只小鼠,每鼠感染500条旋毛虫幼虫,感染后6周剖杀,制备肉样,用ELISA检测4℃及-20℃保存不同时间后的肉汁中抗体动态水平。结果轻度、中度和重度感染组小鼠分别在感染后4、3和3周开始从肉汁中检出抗体,抗体阳性率分别为87.5%、50%和87.5%;3组小鼠的肉汁抗体阳性率均随感染后时间的延长而逐渐升高,分别在感染后6、4和4周达100%,抗体水平均在感染后8周达高峰,吸光度(A490值)分别为0.43、0.49及0.52,之后肉汁中抗体水平稍有下降,但感染后第18周抗体阳性率仍均为100%,A490值分别为0.35、0.41及0.46。3组小鼠感染后不同时间肉汁与血清抗体水平均具有相关性(r100=0.940,r300=0.970,r500=0.983,P<0.05)。感染旋毛虫小鼠肉样在4℃保存7d和1d的抗体水平A490值均为0.53(F=0.250,P>0.05)。在-20℃保存8周和1周的肉汁抗体水平A490值分别是0.46和0.50,保存8周的肉汁抗体水平与1周的相比无明显下降(F=2.273,P>0.05);虽然保存10周的肉汁A490值已降至0.43,与保存1周的相比差异有统计学意义(F=15.675,P<0.05),但抗体阳性率仍为100%并持续至实验结束时(保存20周)。结论动物死亡或屠宰后不能采集血清时,可从新鲜、冷藏及冷冻胴体采集肉汁代替血清进行抗旋毛虫抗体的检测。 展开更多
关键词 旋毛虫 肉汁 血清 elisa 小鼠
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阻断交感神经对小鼠胚胎植入和子宫局部免疫的影响 被引量:4
11
作者 董玉兰 陈耀星 +1 位作者 王子旭 荆海霞 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期705-709,共5页
目的探究交感神经对小鼠妊娠早期胚胎发育作用的机制。方法利用组织学、免疫组织化学和酶联免疫吸附(ELISA)方法观察化学阻断剂6_羟多巴胺(6_OHDA)损毁交感神经对小鼠妊娠早期子宫局部免疫水平和早期胚胎发育的影响。结果化学损毁交感... 目的探究交感神经对小鼠妊娠早期胚胎发育作用的机制。方法利用组织学、免疫组织化学和酶联免疫吸附(ELISA)方法观察化学阻断剂6_羟多巴胺(6_OHDA)损毁交感神经对小鼠妊娠早期子宫局部免疫水平和早期胚胎发育的影响。结果化学损毁交感神经后,小鼠受孕率下降,胚胎植入数减少约64.4%;妊娠鼠子宫内膜固有层不发达,微血管分布少;子宫CD4+T细胞略有增多,而CD8+T细胞明显增加,特别在E3和E5,与对照组比较差异极显著(P<0.01);细胞因子IL_2含量升高,尤其E5升高最明显,达3.6倍,而IL_4含量仅在E5有明显升高,IL_2/IL_4比值显著升高。结论交感神经对孕小鼠子宫内膜组织学结构和子宫CD4+/CD8+T细胞与Th1/Th2细胞比值的影响可能是调控胚胎植入和早期发育的机制之一。 展开更多
关键词 交感神经 妊娠 子宫 淋巴细胞 早期胚胎发育 免疫组织化学 酶联免疫吸附 小鼠
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小鼠注射新型重组人肿瘤坏死因子的药代动力学 被引量:4
12
作者 刘昌孝 陈拯民 +7 位作者 顾以保 蔡永明 高连用 曾勇 李全胜 张英起 赵宁 王增禄 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第3期216-219,共4页
目的 研究新型重组人肿瘤坏死因子 (nrh TNFα)在小鼠体内的药代动力学 .方法 给小鼠按 10 ,2 0和 40μg·kg- 1 剂量 im nrh TNFα后 ,不同时间点采血 ,分离血清 ,采用高效液相色谱法 (HPL C)分离结合同位素法和酶联免疫法(EL I... 目的 研究新型重组人肿瘤坏死因子 (nrh TNFα)在小鼠体内的药代动力学 .方法 给小鼠按 10 ,2 0和 40μg·kg- 1 剂量 im nrh TNFα后 ,不同时间点采血 ,分离血清 ,采用高效液相色谱法 (HPL C)分离结合同位素法和酶联免疫法(EL ISA)测定血清中 nrh TNFα的浓度 .结果 小鼠 im后 ,nrh TNFα能迅速进入血液循环 ,约在 0 .5 h内达到最大血浓度 ,未降解的 nrh TNFα在体内的分布以肾脏最高 ,血液次之 ,其后为肺、肝 ,脑浓度最低 .消除半衰期 (T1 /2 )在 0 .6~ 1h.两种方法所得 Cmax和 AUC与剂量呈显著相关 .与 iv比较 ,im给药 nrh TNFα的绝对生物利用度仅为 0 .16 6 ,表明nrh TNFα在体内易代谢消除 .结论 阐明了 nrh 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α 药代动力学 高效液相色谱法 酶联免疫法 小鼠
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三种酶联免疫吸附法筛选“渗漏”型SCID小鼠的比较 被引量:7
13
作者 李艺 崔恒 +1 位作者 叶雪 姚煜 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期111-112,共2页
目的 选择简单的方法筛选“渗漏”型SCID小鼠。 方法 采用 3种酶联免疫吸附法 (双抗夹心ELISA、双抗夹心间接ELISA及生物素 亲和素夹心ELISA)测定SCID小鼠血清中IgG含量。 结果 生物素 亲和素夹心ELISA法灵敏度最高 ,用此法共检测... 目的 选择简单的方法筛选“渗漏”型SCID小鼠。 方法 采用 3种酶联免疫吸附法 (双抗夹心ELISA、双抗夹心间接ELISA及生物素 亲和素夹心ELISA)测定SCID小鼠血清中IgG含量。 结果 生物素 亲和素夹心ELISA法灵敏度最高 ,用此法共检测了 4 1只 6~ 8周龄小鼠 ,其中 4 0只的IgG含量为 0 2 4± 0 16mg L ;只有 1只小鼠IgG含量为 2 3mg L ,渗漏比例为 2 4 %。 结论 用生物素 亲和素夹心ELISA法对SCID小鼠“渗漏”进行初筛 ,是简便、敏感。 展开更多
关键词 渗漏 酶联免疫吸附法 SCID小鼠
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旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平的研究 被引量:2
14
作者 崔晶 来利红 王中全 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期495-498,共4页
目的观察旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷(larvae per gram diaphragm,lpgd)与血清及肉汁抗体水平的关系。方法将32只雄性昆明小鼠随机分成4组(每组8只),每只分别感染50(A组)、100(B组)、300(C组)、500条(D组)旋毛虫幼虫,感染后42d剖杀,收集血... 目的观察旋毛虫感染小鼠膈肌虫荷(larvae per gram diaphragm,lpgd)与血清及肉汁抗体水平的关系。方法将32只雄性昆明小鼠随机分成4组(每组8只),每只分别感染50(A组)、100(B组)、300(C组)、500条(D组)旋毛虫幼虫,感染后42d剖杀,收集血清及肉汁,观察膈肌虫荷并用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清及肉汁抗体。另将50只小鼠随机分成5组(每组10只),每组分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染500条幼虫,感染后42d剖杀,观察感染不同种旋毛虫小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平。结果感染旋毛虫的A、B、C、D4组小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平均无相关性(P>0.05),但与感染剂量呈正相关(P<0.05),每组小鼠的血清与肉汁抗体水平也均具有相关性(P<0.05)。5种旋毛虫感染小鼠的膈肌虫荷与血清及肉汁抗体水平相比均无相关性(P>0.05),但血清与肉汁抗体水平相比均具有相关性(P<0.05)。旋毛虫感染小鼠的血清及肉汁抗体水平明显高于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫)感染小鼠的血清和肉汁抗体水平(P<0.05)。结论旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)感染小鼠血清及肉汁中抗旋毛虫抗体的检测。 展开更多
关键词 旋毛虫 感染剂量 肉汁 血清 elisa 小鼠
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细菌脂多糖单克隆抗体Clone 20的多反应性及其抗独特型抗体的制备与特性 被引量:2
15
作者 苏东辉 许伟群 +3 位作者 刘梁英 朱苹 王依星 郑秀芬 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第6期36-42,共7页
Clone20系由S.minnesotaR595死菌免疫Balb/c小鼠制备的IgM类单克隆抗体,曾报告它对脂多糖(LPS)中的末端αKDO(2-酮基-3-脱氧辛酸)特异。本文报告采用ELISA显示,Clone20尚能和LPS的毒性成分类脂A结合。用Clone20免疫的小鼠淋巴... Clone20系由S.minnesotaR595死菌免疫Balb/c小鼠制备的IgM类单克隆抗体,曾报告它对脂多糖(LPS)中的末端αKDO(2-酮基-3-脱氧辛酸)特异。本文报告采用ELISA显示,Clone20尚能和LPS的毒性成分类脂A结合。用Clone20免疫的小鼠淋巴细胞制备杂交瘤并筛选出4个分泌抗独特型抗体的细胞株.编码为Clone47-50。ELISA抑制试验显示,单克隆抗体Clone49和Clone50与固相Clone20的结合能为E.coliJ5(Re-型)LPS、S.minnesotaR595(Re-型)LPS、类脂A及αKDO所抑制;Clone47和Clone48则否。另一方面,4个克隆均能抑制Clone20结合到团相Re-LPS及类脂A。在被动溶血试验中,Clone20与固相Re-LPS的结合,也为4个克隆所抑制。对于Clone20与αKDO的结合,仅Clone49与50显示抑制作用。这些结果提示,Clone20分子上与Clones47-50的结合部位均不同程度地接近乃至分享其与类脂A结合的独特型决定簇,Clones49与50则尚可结合Clone20上和。KDO结合的独特型决定簇或其邻近结构。此外,在Clone50的腹水中检出高滴度的抗Re-LPS和抗类脂A抗体。综合以上关于Clone50的免疫学特性,推断它至少是部分模拟了LPS的抗原结构。初步的动物实验显示,提前3hr给小鼠注射Clone50,对随后的致死性内毒素休克有明显对抗作用。 展开更多
关键词 内毒素 抗独特型抗体 KDO elisa 脂多糖
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防己水煎液及其不同拆分部位对脂多糖诱导下RAW264.7细胞炎症因子的影响 被引量:9
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作者 郭辰 王蒙 +4 位作者 李静 魏晴 王秋红 杨炳友 匡海学 《中医药学报》 CAS 2015年第4期33-36,共4页
目的:观察防己水煎液及其不同拆分部位对脂多糖(LPS)诱导下RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法:采用噻唑蓝比色法(MTT法)测定防己水煎液及其不同拆分部位对RAW264.7细胞的毒性作用,格里斯氏试剂(Griess法)测定细胞炎症反应产生的NO含量,... 目的:观察防己水煎液及其不同拆分部位对脂多糖(LPS)诱导下RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法:采用噻唑蓝比色法(MTT法)测定防己水煎液及其不同拆分部位对RAW264.7细胞的毒性作用,格里斯氏试剂(Griess法)测定细胞炎症反应产生的NO含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)的含量。结果:防己水煎液及其生物碱拆分组分可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞释放细胞炎症因子NO(P<0.01),TNF-α(P<0.01),IL-6(P<0.01),其他组分无明显效果。结论:防己水煎液及其不同拆分部位在浓度小于312.50mg/L的范围内对RAW264.7细胞无显著毒性。防己水煎液及其生物碱拆分组分可能通过抑制细胞因子NO,TNF-α,IL-6的释放发挥其抗炎作用。 展开更多
关键词 防己 炎症 小鼠巨噬细胞 酶联免疫吸附试验 细胞因子
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人工合成胸腺素α1静脉注射后在小鼠和大鼠体内的分布与代谢 被引量:1
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作者 马建秀 李秀娟 +3 位作者 臧凯宏 吴勇杰 高明堂 李文广 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期1843-1846,共4页
目的研究人工合成胸腺素α1(synthetic thymosin alpha 1,sTα1)在小鼠和大鼠体内静脉注射的分布和排泄特点。方法用竞争ELISA法测定sTα1在小鼠体内静脉注射后不同时间点组织中的药物浓度和不同时间段内尿液药物累计量;同法检测sTα1... 目的研究人工合成胸腺素α1(synthetic thymosin alpha 1,sTα1)在小鼠和大鼠体内静脉注射的分布和排泄特点。方法用竞争ELISA法测定sTα1在小鼠体内静脉注射后不同时间点组织中的药物浓度和不同时间段内尿液药物累计量;同法检测sTα1在大鼠体内静脉注射后不同时间段内胆汁药物累计量。结果分布特点:小鼠sTα1静脉注射后15 min时胸腺中药物分布最高,浓度为(1 533.4±712.4)ng/g,肝、脾、胸腺次之,在脑中含量较低;静脉注射后30 min时胸腺组织中药物分布依然最高,浓度为(25 583.4±6 244.7)ng/g,脾、肾、肝中次之。sTα1静脉注射后1 h时肾脏中药物分布最高,浓度为(6 164.1±4 821.8)ng/g,胸腺浓度为(5 665.8±3 881.9)ng/g。静脉注射后2 h时肾脏分布最高,浓度为(1 408.0±1 252.7)ng/g,而胸腺中浓度仅为(306.4±268.6)ng/g,其他组织中有少量分布,脑组织中的药物浓度接近血浆药物浓度,说明sTα1可通过血脑屏障。排泄特点:小鼠静脉注射sTα1 1 mg/kg后,12 h尿累计排泄量为给药量的26.35%,大鼠静脉注射0.5 mg/kg sTα1后,胆汁中未见有药物排出。结论小鼠静脉注射sTα1后可以浓集于免疫器官胸腺和脾脏内,且可进入血脑屏障,以原型经肾排泄为主要排泄途径。 展开更多
关键词 人工合成胸腺素 分布 排泄 elisa 小鼠 大鼠
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小鼠脾内免疫法制备重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体 被引量:1
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作者 武楠 周丹秋 +2 位作者 阮卫 吴丽桂 张慧涨 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期184-188,共5页
目的制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,用于早期弓形虫感染的抗原检测。方法用弓形虫RH株重组抗原SAG1进行常规免疫结合小鼠脾内免疫,杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA法筛选阳性克隆,经亚克隆建株。诱生腹水法制备抗体,protein-... 目的制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,用于早期弓形虫感染的抗原检测。方法用弓形虫RH株重组抗原SAG1进行常规免疫结合小鼠脾内免疫,杂交瘤技术制备单克隆抗体。ELISA法筛选阳性克隆,经亚克隆建株。诱生腹水法制备抗体,protein-G亲合层析法进行纯化,测定其亚类、效价;Westernblot法分析其特异性;夹心-ELISA法检测抗体的敏感性及特异性;检测弓形虫感染小鼠血液循环抗原,同时用PCR法检测弓形虫B1基因并比较结果。结果获得2株抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体3B6、10C4,抗体均为IgG1,轻链均为κ链,Western blot显示2株单抗均能识别弓形虫天然的和重组的SAG1抗原。3B6、10C4敏感度分别为31.3ng和62.5ng,与血吸虫病、钩虫病及疟疾患者血清均无交叉反应。弓形虫早期感染检测PCR及ELISA法阳性检出率分别为63.2%、47.4%。结论成功制备小鼠抗重组弓形虫SAG1抗原单克隆抗体,初步用于早期弓形虫感染诊断。 展开更多
关键词 重组SAG1抗原 脾内免疫 单克隆抗体 夹心-elisa 小鼠
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皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长及细胞因子的影响 被引量:9
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作者 刘明华 黄兴武 +3 位作者 肖顺汉 钟琳 任美萍 田吉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期365-367,共3页
目的探讨皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长及细胞因子水平的影响。方法建立小鼠肉瘤S180及小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型,观察皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;采用ELISA法测定白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-12(IL-12)... 目的探讨皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长及细胞因子水平的影响。方法建立小鼠肉瘤S180及小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型,观察皂角刺提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用;采用ELISA法测定白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,探讨皂角刺提取物对荷瘤小鼠细胞因子的影响。结果皂角刺提取物在50、100mg/kg时对S180的生长抑制率分别为44.59%、53.38%,对H22生长抑制率分别为39.88%、46.63%,且能提高荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数;皂角刺提取物能提高荷瘤小鼠细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α的表达水平。结论皂角刺提取物有较强的体内抗肿瘤活性,且能促进细胞因子的表达,增强机体免疫功能。 展开更多
关键词 皂角刺提取物 荷瘤小鼠 细胞因子 elisa
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小鼠脑脊髓炎病毒自然感染调查以及人工感染小鼠试验 被引量:1
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作者 袁文 张钰 +6 位作者 黄碧洪 罗银珠 王静 潘金春 吴瑞可 郭鹏举 黄韧 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期75-81,共7页
目的了解小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)自然感染情况,探究人工感染TMEV小鼠体内各脏器组织中病毒分布及血清抗体变化。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法对2010年~2015年广东地区采集的SPF级小鼠、开放环境... 目的了解小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)自然感染情况,探究人工感染TMEV小鼠体内各脏器组织中病毒分布及血清抗体变化。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法对2010年~2015年广东地区采集的SPF级小鼠、开放环境饲养的小鼠以及野生褐家鼠临床样本进行TMEV检测。36只ICR小鼠经脑内接种TMEV BeAn病毒,每天观察动物的临床症状,在接种第0、3、7、10、17、21、31、39、46天每个时间点分别对3只动物安乐死,剖检并取血清和组织脏器样本进行TMEV检测。结果 SPF级小鼠TMEV抗体阳性率为5.29%(n=2834),核酸阳性率为27.27%(n=457);开放环境饲养的小鼠的抗体和核酸阳性率分别为71.95%(n=82)和53.66%(n=82);野生褐家鼠中核酸阳性率为25.93%(n=27)。TMEV阳性小鼠中仅有两只小鼠表现有明显的临床症状。盲肠内容物、粪便和脑是qRT-PCR检测的最佳选择样本。ICR小鼠脑内接种TMEV BeAn病毒后第3 d可在脑、心脏、肝脏、肺脏和胃中检测到病毒核酸,脾脏、肾脏和盲肠中未检测到病毒核酸。肝脏、心脏、肺脏和胃中的病毒在接种后第10天已完全清除,脑中的病毒一直持续存在到第46天试验结束。小鼠感染后第7天可以检测到抗体,随后抗体水平逐渐升高,接种后17 d抗体阳性率达100%,并一直到46 d都可以维持较高的抗体水平。人工感染小鼠呈隐性感染,临床上并未表现明显症状和眼观病理变化。结论广东地区实验小鼠和野生褐家鼠均存在TMEV感染,且感染率较高。小鼠接种TMEV BeAn毒株后呈隐性感染,感染小鼠第7天可以产生抗体且持续存在。病毒在感染小鼠肝脏、心脏、肺脏和胃中短时间存在,而在脑中长期存在。qRT-PCR与ELISA两种检测方法具有较好的一致性,qRT-PCR检测方法可作为实验动物国家标准的有力补充。 展开更多
关键词 小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV) 感染 检测
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