线粒体细胞色素氧化酶3基因mRNA表达与支气管哮喘母系遗传的关系

目的探讨线粒体细胞色素氧化酶基因亚基Ⅲ（COX3）mRNA表达水平与支气管哮喘母系遗传的关系。方法入选2009年1至12月于昆明医学院第一附属医院重症呼吸科及儿科住院的220例支气管哮喘患者作为哮喘组；其近亲家属（其父母或子女）162名作为近亲组，同期行健康体检的健康人群260名为对照组。测定所有入选者肺功能及血清IgE水平，通过实时荧光定量-PCR技术，检测外周血线粒体COX3mRNA表达水平并进行对比分析。结果哮喘组、近亲组、对照组年龄、性别差异均无统计学意义（均P〉0．05）；3组第1秒用力呼气量（FEV，）／用力肺活量（FVC）分别为90．6±6．2、92．3±2．3、102．3±2．3，FEV，占预计值的百分比分别为（82．9±10．8）％、（94．8±5．4）％、（98．3±8．6）％，组间差异均无统计学意义（均P〉0．05）；3组血液中线粒体COX3mRNA的表达水平分别为0．357±0．217、0．637±0．473和0．975±0．260，组间差异均有统计学意义（F=21．45，P=0．012）；哮喘组、近亲组IgE水平均显著高于对照组[（283．6±62．4）、（116．4±57．5）比（52．3±13．7）μg/L，均P〈0．05]；3组血液中COX3mRNA表达与IgE水平均呈负相关（r=-0．73、-0．56、-0．61，P=0．013、0．035、0．028）。结论哮喘患者线粒体COX3基因mRNA表达下调，可能通过影响机体IgE水平，参与了哮喘过敏性炎症反应，与哮喘母系遗传有关。

小分子干扰RNA抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞中的硫氧还蛋白-2对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1、细胞色素C氧化酶I表达的影响

目的探讨小分子干扰RNA（small interference RNA，siRNA）抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞中硫氧还蛋白-2（thioredoxin-2，Trx-2）对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NADH）脱氢酶亚单位1（NADHdehydrogenase subunit1，NDl）及细胞色素c氧化酶I（eytochrome C oxidase I，COXI）表达的影响。方法体外传代培养A549细胞系，将Trx-2序列特异性的SiRNA转染A549细胞，随机分为无干扰空气组、无干扰高氧组、干扰后空气组与干扰后高氧组。分别于高氧或空气暴露12、24、48h提取A549细胞总RNA和蛋白。采用逆转录一聚合酶链反应技术测定Trx-2、ND1和COX I mRNA水平的表达，Western印迹技术检测Trx-2蛋白的表达。结果（1）序列特异性SiRNA可显著抑制Trx-2表达。（2）无干扰高氧组24hTrx-2mRNA水平为0．7799±0．1249，显著高于无干扰空气组（0．4424±0．1140）（P〈0．05）。干扰后高氧组24hTrx-2mRNA水平为0．2774±0．0174、48h为0．2587±0．0069，均显著低于干扰后空气组和无干扰高氧组（P〈0．05）。（3）无干扰高氧组24hND1 mRNA水平为0．6609±0．0368，显著低于无干扰空气组（0．8898±0．1049）（P〈0．05）。干扰后高氧组12hND1 mRNA水平为0．8848±0．0135，显著高于干扰后空气组（P〈0．05）。干扰后高氧组48hND1 mRNA水平为0．3808土0．0937，均显著低于干扰后空气组和无干扰高氧组（P〈0．05）。（4）无干扰高氧组12hCox 1 mRNA水平为1．7313±0．4331、24h为2．1929±0．6722、48h为2．0754±0．2584，均显著高于无干扰空气组（P〈0．05）。结论ND1、COXI参与高氧肺损伤发生发展过程，Trx-2对高氧肺损伤线粒体起重要的保护作用。