血清LHR、SAA与ACS患者颈动脉粥样斑块稳定性的相关性分析

目的探讨低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值(LHR)、血清淀粉酶样蛋白A(SAA)与急性冠脉综合症(ACS)患者颈动脉粥样斑块稳定性的相关性。方法选取2022年1月至2023年1月ACS患者147例和健康对照患者30例,根据颈动脉B超结果将ACS患者分为不稳定斑块组、稳定斑块组及无斑块组。比较ACS三个亚组一般临床资料及血清LHR、SAA水平;评估ACS患者颈动脉斑块性质与两种血清因子的相关性。结果三组患者血清SAA、LHR、IMT比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血清LHR、SAA与IMT均呈正相关。ROC曲线分析显示血清LHR、SAA对ACS患者不稳定斑块具有诊断意义(P<0.05),且2者联合诊断价值优于单项,AUC值达0.753。结论ACS患者血清SAA、LHR与颈动脉粥样硬化斑块形成及稳定性相关,可作为早期识别不稳定斑块的诊断指标。

不同BMPRIB基因型小尾寒羊同期发情处理后FSHR和LHR表达量的研究

目的根据小尾寒羊BMPRIB突变位点进行基因分型。研究发情期小尾寒羊BMPRIB基因型(BB、AB和AA)与FSHR和LHRmRNA表达量的关系。方法利用半定量PCR技术。结果在发情期BB型右侧卵巢FSHR的mRNA水平(1.14±0.11)显著高于AA(0.44±0.11)和AB(0.36±0.08)型(P<0.01),但左侧卵巢在基因型间无显著性差异;BB型右侧卵巢LHR的mRNA水平(0.42±0.02)也显著高于AA(0.23±0.02)和AB(0.25±0.04)型(P<0.01),左侧卵巢各基因型间无显著性差异。结论FSHR和LHR的mRNA的高表达量可能是引起小尾寒羊较高的产羔数的原因之一。

沂蒙黑山羊子宫中FSHR和LHR基因在发情周期内的表达规律

为了探讨低繁山羊子宫中FSHR基因和LHR基因的表达变化规律,本研究从沂蒙黑山羊子宫中提取总RNA,使用相同的RT-QPCR方法,分别对处于发情周期不同阶段沂蒙黑山羊子宫各段中FSHR基因和LHR基因在mRNA水平上进行定量分析。结果显示:FSHRmRNA和LHRmRNA在整个发情周期的子宫各段中都有表达。FSHRmRNA的整体表达量水平均高于LHRmRNA的表达量;FSHRmRNA在子宫角发情后期表达量最高,渐低至发情前期最低;子宫肉阜在间情期表达量最高,至发情前期最低,四时期之间差异不显著(P>0.05);子宫颈在发情期表达量最高,间情期表达量最低,与其它时期差异显著(P<0.05)。LHRmRNA在子宫角、子宫肉阜、子宫颈均在间情期表达量最高,且与其它三个时期差异显著(P<0.05)。两基因在子宫体的表达量较低且规律不明显。

山羊子宫中LHR基因片段的克隆及半定量RT-PCR检测方法的建立

【目的】进一步研究处于发情周期不同阶段的济宁青山羊子宫中黄体生成素受体（LHR）mRNA表达量的变化，为探讨其对山羊生殖内分泌机制的作用规律提供理论依据。【方法】以GAPDH为内参照基因，从济宁青山羊的子宫组织中提取总RNA，用RT—PCR方法扩增目的基因，进行克隆测序，并对半定量RT—PCR反应体系进行了优化。【结果】获得了济宁青山羊LHR mRNA的部分序列，长度约为286bp，与已报道的GenBank中羊的I。HRmRNA（序列号为AF379199）41～326bp序列同源性为100％。以此基因片段的阳性克隆为基础优化的半定量RT—PCR体系为：LHR基因的适宜循环数为30个，内参照GAPDH基因的循环数为26个，Mg^2＋浓度均为1．5mmol／L。【结论】克隆了山羊LHRmRNA的部分序列，并建立了优化的半定量RT—PCR体系。

LHR基因在济宁青山羊发情周期不同阶段子宫中表达差异的研究

从济宁青山羊子宫组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增黄体生成素受体(LHR)基因,获得一条286bp的片段,以pGEM-TEasy vector为载体,转染大肠杆菌E.coliDH5α,筛选阳性克隆并测序。采用优化的半定量RT-PCR技术,以山羊GAPDH为分子内参,比较研究了发情周期不同阶段的济宁青山羊子宫组织中LHR基因的表达差异。结果表明:得到的片段为山羊LHR基因的部分序列,与GenBank中登录的山羊LHR基因(AF379199)41-326 bp序列同源性高达100%。LHRmRNA在整个发情周期的子宫中都有表达。其中,发情期的表达水平最低(0.454±0.06),且与其它时期比较均差异显著(P<0.05),随之在间情期升至最高值(0.705±0.09),尔后在发情前期降至(0.553±0.07)。这一研究结果为山羊的生殖内分泌调控机制研究提供了分子水平的数据。

莱芜黑山羊卵巢FSHr、LHr的免疫组化定位研究

为从形态学角度理解内分泌调节过程,揭示促性腺激素(GTH)对雌性哺乳动物卵巢调节作用机制,对处于非繁殖季节的莱芜黑山羊卵巢中FSHr、LHr分布进行免疫组化SABC方法定位.分别选取相邻的6张连续阳性切片,光镜观察、图像分析.结果显示:FSHr、LHr阳性细胞主要分布于卵泡颗粒细胞、膜细胞、卵母细胞、血管周围间质,尤其以在卵泡颗粒细胞、膜细胞的胞质中分布最多.原始卵泡卵母细胞中便有两种受体阳性物质分布,在各级卵泡中两种受体阳性细胞数量、染色强度随卵泡发育水平呈正向增加趋势.

去卵巢大鼠肾脏组织表达FSHR和LHR

目的探讨肾脏是否具有和卵巢相似的内分泌功能和变化,有望为肾脏的生理功能增添新的内容。方法制备去卵巢动物模型,采用放免法、RT-PCR半定量法检测肾脏组织中FSH受体(FSHR)和LH受体(LHR)的表达。结果在肾脏和卵巢中,低剂量FSH和LH提高FSHR mRNA和LHR mRNA水平,而高剂量FSH和LH下调FSHRmRNA和LHR mRNA水平;高剂量的雌激素可导致FSHR mRNA水平由0.777±0.294降至0.514±0.249(P<0.05)。结论大鼠肾脏中FSHR、LHR的表达调节特性与卵巢组织一致,肾脏可能具有和卵巢组织相似的内分泌功能和变化。

GnRH和LHR基因多态性和牛精液品质性状的相关分析

本试验采用PCR-RFLP方法分析了GnRH基因外显子2和LHR基因内含子9在144头中国荷斯坦牛和79头河南地方肉牛品种中的多态性,利用最小二乘法分析多态位点不同基因型与精液品质性状的关系。研究结果表明,2～3岁荷斯坦牛的鲜精活力显著高于4岁以上的牛,而畸形率显著低于7岁以上的牛。对2～4岁荷斯坦牛不同精液品质性状的简单相关分析表明,畸形率与顶体完整率和冻精活力呈显著的负相关(相关系数r分别为-0.736和-0.500)。不同基因型与精液品质性状的关联分析结果表明,144头中国荷斯坦牛所研究位点不同基因型对精液品质性状没有显著影响。而河南地方肉牛GnRH基因外显子2的A883G位点GG基因型的精子密度显著低于AA和AG基因型,LHR基因G51656T位点的TT基因型精子密度显著高于GT基因型,未检测到GG基因型。并且发现随着年龄的增长,种公牛的精液品质逐渐变差。GnRH和LHR基因可作为影响肉牛精液品质性状的候选基因。

地萸补肾固冲方对未成年雌性大鼠卵巢组织中FSHR和LHR的影响

目的:探讨地萸补肾固冲方对未成年雌性大鼠卵巢组织中促卵泡生成素受体(FSHR)和黄体生成素受体(LHR)的影响。方法:将未成年雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组,己烯雌酚组,地萸补肾固冲方高、中、低剂量组5组,每组10只。正常对照组给予生理盐水灌胃;己烯雌酚组给予己烯雌酚混悬液0.067μg/g(按临床剂量的6.7倍)灌胃;地萸补肾固冲方高、中、低剂量组分别给地萸补肾固冲方浸膏稀释液30,15,7.5 g/kg(以生药量计)灌胃,分别相当于临床剂量的6.7,3.35,1.68倍。各组均按20μL/g给药,1 d 1次,连续给药4周。末次给药后处死大鼠,取血,取卵巢备用。采用酶联免疫吸附法检测血清促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E 2)、孕酮(P)、睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、促性腺激素释放激素(GnRH)含量;免疫组化观察卵巢卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)的表达程度。结果:与正常对照组对比,己烯雌酚组中大鼠血清的E 2、LH、FSH、P、GnRH含量有统计学意义(P<0.05);地萸补肾固冲高剂量组中血清的E 2、P、LH含量有统计学意义(P<0.05);地萸补肾固冲中、低剂量组的血清各项指标有升高的趋势,但差别无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组对比,己烯雌酚组、地萸补肾固冲高剂量组卵巢组织FSHR蛋白表达程度显著升高(P<0.05);己烯雌酚组卵巢组织LHR蛋白表达程度显著升高(P<0.05),地萸补肾固冲高、中剂量组卵巢组织LHR蛋白表达程度有升高趋势,但差别无统计学意义。结论:地萸补肾固冲方对未成年雌性幼鼠性腺轴发育有一定的促进作用,从而具有治疗青春期功血的作用。

豚鼠发情周期不同时期的子宫LHR mRNA差异表达研究

【目的】克隆豚鼠子宫黄体生成素受体(LHR)基因片段并分析其进化关系,研究豚鼠子宫LHR mRNA在发情周期不同时期的表达特性。【方法】以豚鼠子宫总RNA为模板,根据小鼠、大鼠、猪LHR保守区设计引物,RT-PCR扩增LHR基因片段。筛选阳性克隆测序,采用DNAMAN软件分析比对同源性。以β-actin为分子内参,采用优化的半定量RT-PCR技术,测定豚鼠发情周期不同时期的子宫组织LHR mRNA表达量。【结果】测序得到686 bp的剪接变异体1和缺失75 bp 4号外显子的剪接变异体2。686 bp序列与人类LHR mRNA序列同源性为83.8%,与牛、猪及绵羊LHR mRNA序列同源性分别为84.6%、84.2%及83.6%,而与大鼠和小鼠LHR mRNA序列同源性则分别高达93.7%和99.4%。LHR mRNA在豚鼠整个发情周期的子宫中都有表达,发情周期第0天的表达水平为0.635±0.0194,第4天为0.617±0.099,均显著低于第8天的表达水平(P<0.05),随之在第12天升至1.218±0.049。【结论】克隆的片段为豚鼠LHR基因的部分序列,其mRNA存在着剪接变异体。豚鼠子宫LHR mRNA在发情周期第0、4天表达水平较低,第12天升至最高,即发情周期不同时期的LHR mRNA表达呈现明显的规律性,该结果为探究哺乳动物非性腺组织中LHR的功能及生殖内分泌调控机制提供了理论依据。

LHR、Caspase-3、和Bcl-2在围着床期小鼠输卵管上皮的表达

目的探讨LHR、Caspase-3和Bcl-2在围着床期小鼠输卵管上皮中的生物学作用。方法应用免疫组化SABC法和图像分析检测LHR、Caspase-3和Bcl-2在昆明小鼠(n=28)动情期、孕1 d、孕4 d和孕6 d输卵管上皮中的分布和变化规律。结果 LHR、Caspase-3和Bcl-2存在于不同阶段的小鼠输卵管上皮细胞中。Caspase-3在动情期的水平最高,在孕早期呈现逐渐下降的趋势,孕6 d表达上调。LHR和Bcl-2具有相似的变化规律,均于孕1 d达到峰值,且在孕1 d和孕4 d的水平显著高于动情期和孕6 d组。结论 LHR、Caspase-3和Bcl-2的表达与围着床期小鼠输卵管上皮细胞的增殖、凋亡密切相关。

左归丸对早衰和初老大鼠下丘脑-垂体-卵巢FSHR、LHR和ER表达的影响

目的:探讨早衰和初老大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织FSHR、LHR和ER蛋白表达的差异以及左归丸的干预作用。方法:60只大鼠给予顺铂注射液6 mg/(kg·w),共2次,建立卵巢早衰大鼠模型。空白组给予等剂量的生理盐水腹腔注射。将造模成功的大鼠随机分为模型组、补佳乐组、左归丸(低、中、高)剂量组;另40只初老大鼠,随机分成空白组、左归丸(低、中、高)剂量组,每组10只。用免疫组化法定位和相对定量早衰和初老大鼠在下丘脑-垂体-性腺轴上的FSHR、LHR和ER的表达量差异;不同剂量左归丸干预POF(早衰和初老)大鼠,检测FSHR、LHR和ER的表达量。结果:早衰大鼠血清卵泡雌激素(FSH)水平明显增高(P<0.05),卵泡雌激素受体(FSHR)在早衰大鼠下丘脑组织和初老组大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织表达下调(P<0.05),黄体生成素受体(LHR)在早衰大鼠下丘脑、垂体组织和初老组大鼠垂体组织表达下调(P<0.05),雌激素受体(ER)在早衰大鼠下丘脑、垂体、卵巢组织和初老大鼠垂体组织表达下调(P<0.05);左归丸可以上调早衰大鼠卵巢组织,初老大鼠垂体和卵巢组织FSHR表达,早衰和初老大鼠垂体组织LHR以及早衰和初老大鼠下丘脑、垂体和卵巢组织ER表达,尤以左归丸高剂量组作用显著(P<0.05)。结论:下丘脑、垂体和卵巢组织FSHR和ER低表达是造成卵巢功能衰退的主要原因,左归丸通过促进卵巢合成分泌雌激素(E),降低血清FSH和LH水平,进而上调下丘脑、垂体和卵巢组织的FSHR和ER表达,延缓卵巢衰退。

FSHR与LHR的研究进展

本文重点论述了FSHR与LHR的结构及在卵母细胞体外成熟过程中的表达和调控,并阐述了FSHR与LHR的研究现状及存在的问题。

调经助孕胶囊对不孕大鼠卵巢FSHR、LHR的影响

目的建立SD大鼠ASR模型,探讨调经助孕胶囊对排卵障碍性不孕模型大鼠性周期、卵巢组织形态、血清Inhibin-B(抑制素B)及卵巢FSHR(卵泡刺激素受体)、LHR(黄体生成素受体)的影响。方法给幼年雌性SD大鼠注射雄激素可导致其成年后不孕,这种雄激素致不孕的大鼠不排卵。结果调经助孕组大鼠阴道上皮细胞有明显的周期性变化;调经助孕组大鼠卵巢各级卵泡总数大于模型组(P<0.05),调经助孕组大鼠卵巢病理性囊性卵泡个数小于模型组(P<0.05);调经助孕组大鼠血清抑制素B含量高于模型组(P<0.05);调经助孕组大鼠卵巢FSHR、LHR表达水平高于模型组(P<0.05)。结论调经助孕胶囊有使排卵障碍性不孕症的大鼠恢复性周期趋势的作用,增加模型大鼠血清Inhibin-B含量,提升卵巢储备功能,增强模型大鼠卵巢FSHR、LHR的表达水平,促进卵泡的发育与成熟。

大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠卵巢FSHR、LHR和active Caspase-3蛋白表达的影响

目的观察大蒜素对D-半乳糖所致的雌性衰老小鼠促卵泡素受体(FSHR)与促黄体素受体(LHR)表达水平的影响,结合凋亡相关蛋白active Caspase-3表达变化初步探讨原因。方法 SPF级雌性昆明小鼠40只,随机分为对照组、模型组、大蒜素组和维生素C组,每组10只。模型组、大蒜素组和维生素C组小鼠以100 mg/kg体重剂量皮下注射D-半乳糖生理盐水溶液,对照组小鼠注射同体积生理盐水,每日1次,同期大蒜素组以20 mg/kg剂量腹腔注射大蒜素注射液,维生素C组以50 mg/kg剂量腹腔注射维生素C,对照组及模型组腹腔注射同体积生理盐水,共持续6周。给药结束后采集标本,Western blot法检测卵巢组织FSHR与LHR表达水平,免疫荧光法观察active Caspase-3表达变化。结果与对照组相比,模型组FSHR与LHR表达水平明显升高(P<0.05),active Caspase-3表达增强,大蒜素组FSHR与LHR表达水平(与β-actin比较)分别为0.63±0.07和0.82±0.06,较模型组明显下降(P<0.05),active Caspase-3表达亦有减弱趋势。结论大蒜素能下调FSHR与LHR表达水平,提示其一定程度上延缓了D-半乳糖所致小鼠卵巢的衰老,该作用可能与其减少卵巢细胞凋亡有关。

日粮不同能量水平对绵羊卵巢LHR基因表达的影响

选择4~5月龄、体重相近的杂交母羔(陶赛特羊♂×小尾寒羊♀)36只,随机分为3组,分别饲喂不同能量水平的日粮:中能量组日粮(10.33 MJ/d)、低能量组日粮(7.21 MJ/d)和高能量组日粮(13.49MJ/d),饲养40d后,屠宰取绵羊卵巢组织样,采用半定量RT-PCR的方法,检测日粮不同能量水平对绵羊卵巢组织中LHR基因表达的影响。结果表明:日粮能量水平的不同影响绵羊卵巢组织中LHR基因的表达。高、低能量组LHR基因的表达均低于中能量组,高能量组LHR的表达量又低于低能量组,但3组之间的差异均不显著(P】0.05)。

小尾寒羊LHR基因组织表达、多态性及其与产羔性状的关联分析

为了揭示LHR基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)中的表达规律、多态性及其与产羔数的关系,深入了解其对小尾寒羊产羔性状的作用。本研究采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只)的生殖及脑组织中LHR基因的表达谱进行分析,同时采用Sequenom MassARRAY~?SNP技术对380只小尾寒羊和380只其他品种绵羊(小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、策勒黑羊、湖羊和草原型藏羊)LHR基因7个单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms, SNPs)的多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果显示,LHR基因在小尾寒羊大脑、下丘脑和卵巢中均有表达,其中在卵巢高表达。LHR基因在小尾寒羊多羔群体卵巢、大脑和下丘脑的表达均极显著高于单羔群体(P<0.01)。分型发现LHR基因中,4个SNPs位点的等位基因频率和基因型频率在多羔和单羔品种间差异均达到极显著水平(P<0.01);7个SNPs在大多数绵羊品种中均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5);卡方适合性检验表明,7个SNPs在大多数绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);关联分析表明,LHR基因有1个SNP多态性与小尾寒羊各胎产羔数显著相关(P<0.05),2个SNPs多态性与小尾寒羊各胎产羔数呈极显著相关(P<0.01)。本研究发现,LHR基因的3个SNPs位点的多态性与小尾寒羊产羔性状存在一定程度相关,暗示其可能参与小尾寒羊多羔性状调控。

黑线仓鼠LHR部分序列的克隆与分析

以大鼠、小鼠、金仓鼠(Mesocricetus auratus)的同源保守序列设计了黑线仓鼠(Cricetulus barabensis)黄体生成素受体基因(LHR)的引物,经PCR扩增得到了154 bp的目的产物,通过Blast证实该片段是黑线仓鼠的LHR序列.该段序列处于第11外显子的5’端,编码51个氨基酸,包含部分铰链区和第一个跨膜α螺旋(TM1)区.疏水性氨基酸所占比例相当高,其中缬氨酸、异亮氨酸各占9.80%,亮氨酸为19.61%,通过疏水性分析,TM1区具有典型的α螺旋特征.与大鼠、小鼠、金仓鼠等物种同源比对,核苷酸和氨基酸的同源性分别达到了83%-98%,82%-100%.α螺旋跨膜区的氨基酸同源性超过82%具有很强的保守性,但在26,41,44,48位点上仍然表现出种属之间的差异性.该研究用PCR的方法克隆出了黑线仓鼠LHR的部分序列,并对其进行了同源性分析,为今后黑线仓鼠种群繁殖机制、种群扩散模式等的研究奠定一定理论基础.

繁殖基因(ESR、LH、LHR、PRLR)编码区生物信息学分析

为了研究各物种ESR、LH、LHR、PRLR基因进化的特点,从GenBank下载了人、毛猩猩、黑猩猩、猕猴、欧洲兔、野猪、黄牛、大熊猫、小家鼠、仓鼠、褐家鼠11个物种的139条编码区序列(CDS),采用生物信息学方法对4种基因进行分析。结果表明,4种基因均存在较丰富的遗传多样性。其中ESR基因单位长度多态位点数为0.330 7,单位长度突变位点数为0.399 8,核苷酸多样性最低,同义替换率相对最高,平均遗传距离最小。LH基因单位长度多态位点数(0.484 8)与单位长度总突变位点(0.618 3)均最高,核苷酸多样性和非同义替换率相对最高。依据4种基因遗传距离构建的聚类图的拓扑结构存在差异,说明4种繁殖基因进化速率存在差异,ESR基因进化速率相对较慢,LH基因相对较快。

能量对初情期前母猪卵巢LHR和FSHR mRNA表达的影响(英文)

对9头50日龄、体质量为30 kg的初情期前杜×长×大三元杂交母猪进行长期日粮能量差异饲养试验。饲养结束后屠宰,取卵巢液氮保存。半定量RT-PCR检测每头母猪卵巢LH和FSH受体mRNA的含量。结果,高能组卵巢LH和FSH受体mRNA的含量显著高于中能组和低能组(P<0.05);而低能组显著低于中能组和高能组(P<0.05)。表明,能量水平高的日粮可以显著地促进初情期前卵巢上LH和FSH受体在mRNA水平的表达,而能量水平不足的日粮则不利于这种表达。本文首次报道了日粮能量水平对母猪卵巢LH和FSH受体mRNA表达的影响。