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Molecular cloning and characterization of a lipid transfer protein gene(PsLTP1) from Pinus sylvestris(L.)
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作者 Nataliya Hrunyk Valentina Kovaleva +5 位作者 Hryhoriy Krynytskyy Ivan Gout Francisco Amil-Ruiz Juan Munoz-Blanco Jose Luis Caballero Roman Gout 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期1149-1158,共10页
Plant nonspecific lipid transfer proteins (nsLTPs) are widely distributed through plant kingdom and are characterized by the presence of a central hydrophobic cavity, suitable for binding various hydrophobic molecules... Plant nonspecific lipid transfer proteins (nsLTPs) are widely distributed through plant kingdom and are characterized by the presence of a central hydrophobic cavity, suitable for binding various hydrophobic molecules. Despite extensive research on nsLTP in different plant species, mostly angiosperm, and the great diversity of physiological processes in which they seem to be involved, their exact functions still remain unclear. Also, very limited experimental data are available on nsLTP in gymnosperm. In this study, we report for the first time on the molecular cloning of nsLTP, from Pinus sylvestris L.(PsLTP1, GenBank accession JN980402.1) and the expression pattern of PsLTP1 during ontogenesis and in response to environmental stress conditions. Total RNA from roots of 7-day old pine seedlings was used to isolate the cDNA clone, corresponding to Scots pine lipid transfer protein. The open reading frame of PsLTP1 consists of 372 bp encoding a protein of 123 amino acids. Amino acid sequence alignment revealed that mature PsLTP1 shares high level of similarity with nsLTP from other conifers and with well-studied nsLTPs from angiosperms. The PsLTP1 contains a 27-amino-acid N-terminal signal sequence and presents all the features of a plant nsLTP. Amino acid comparison analysis and 3D structure prediction showed that PsLTP1 is a type 1 nsLTP. The results of the expression analysis of Scots pine PsLTP1 gene revealed that its transcripts accumulate in actively growing tissues. Furthermore, transcription of PsLTP1 was upregulated in response to cold and salt treatments, and downregulated during acidic, osmotic and water stresses. 展开更多
关键词 SCOTS PINE NONSPECIFIC lipid transfer protein (nsltp) Molecular cloning Expression ABIOTIC stresses
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Genome-wide analysis of the barley non-specific lipid transfer protein gene family 被引量:2
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作者 Mengyue Zhang Yujin Kim +5 位作者 Jie Zong Hong Lin Anne Dievart Huanjun Li Dabing Zhang Wanqi Liang 《The Crop Journal》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期65-76,共12页
Non-specific lipid transfer proteins(nsLTPs) are small, basic proteins that are characterized by an eight-cysteine motif. The biological functions of these proteins have been reported to involve plant reproduction and... Non-specific lipid transfer proteins(nsLTPs) are small, basic proteins that are characterized by an eight-cysteine motif. The biological functions of these proteins have been reported to involve plant reproduction and biotic or abiotic stress response. With the completion of the barley genome sequence, a genome-wide analysis of nsLTPs in barley(Hordeum vulgare L.)(HvLTPs) will be helpful for understanding the function of nsLTPs in plants. We performed a genome-wide analysis of the nsLTP gene family in barley and identified 70 nsLTP genes,which can be divided into five types(1, 2, C, D, and G). Each type of nsLTPs shares similar exon and intron gene structures. Expression analysis showed that barley nsLTPs have diverse expression patterns, revealing their various roles. Our results shed light on the phylogenetic relationships and potential functions of barley nsLTPs and will be useful for future studies of barley development and molecular breeding. 展开更多
关键词 lipid transfer protein BARLEY Classification SEQUENCE analysis GENE expression
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薄壳山核桃花粉LTP基因的克隆和功能分析
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作者 刘玺璠 周嘉枫 +2 位作者 金群英 朱汤军 彭华正 《经济林研究》 北大核心 2024年第3期1-9,共9页
【目的】比较薄壳山核桃Carya illinoinensis(Wangenh.)K.Koch和浙江山核桃Carya cathayensis Sarg花粉萌发前后蛋白质谱的差异,筛选出可能在山核桃属植物花粉萌发中起重要作用的显著差异蛋白,并分析其生物学特性和基因表达特点。【方... 【目的】比较薄壳山核桃Carya illinoinensis(Wangenh.)K.Koch和浙江山核桃Carya cathayensis Sarg花粉萌发前后蛋白质谱的差异,筛选出可能在山核桃属植物花粉萌发中起重要作用的显著差异蛋白,并分析其生物学特性和基因表达特点。【方法】基于iTRAQ技术比较两者花粉离体萌发前后蛋白质组变化的差异,筛选出显著差异蛋白,据此信息克隆和分析差异最为显著的基因,再利用已经建立的薄壳山核桃离体萌发体系和原核细胞融合蛋白表达系统来初步验证LTP(lipid transfer proteins)在花粉萌发中的功能。【结果】比较2种植物萌发前后的蛋白比值,发现有部分蛋白在2种植物中花粉萌发前后的变化规律是相反的,其中非特异脂蛋白(Non-specific lipid-transfer protein)比值达18.6倍。经过薄壳山核桃LTP同源基因的克隆和表达分析得出2个基因片段,将其命名为LTP1和LTP2,且LTP1的稳定性更好,将LTP1加入花粉萌发体系后发现LTP1对薄壳山核桃花粉萌发率和花粉管长度无显著影响。【结论】通过比较两者花粉萌发前后的蛋白质谱的差异,筛选出可能在山核桃属植物花粉萌发中起重要作用的非特异性脂质转移蛋白LTP,克隆了薄壳山核桃CiLTP1和CiLTP2基因,分析了其生物学特性和基因表达特点,但在花粉离体萌发体系中未发现体外表达的CiLTP1蛋白有影响花粉萌发的功能。研究可为揭示山核桃属植物花粉萌发规律提供重要参考。 展开更多
关键词 薄壳山核桃 花粉离体萌发 脂质转移蛋白 植物内生菌
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牡丹非特异性脂质转移蛋白基因PsLTP的生物信息学分析
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作者 问荣荣 苏钰 +3 位作者 高泽芳 徐梦宇 何雯雯 王步勇 《安徽农业科学》 CAS 2024年第2期87-92,共6页
[目的]了解牡丹非特异性脂质转移蛋白基因LTP的基因特征及其编码蛋白的生物学特性,探索其生物功能。[方法]运用Blast、ORF-Finder、ProtParam、SignalP 4.1、ProtScale和TMHMM 2.0 Server等生物信息学软件,分析牡丹nsLTP基因序列及其编... [目的]了解牡丹非特异性脂质转移蛋白基因LTP的基因特征及其编码蛋白的生物学特性,探索其生物功能。[方法]运用Blast、ORF-Finder、ProtParam、SignalP 4.1、ProtScale和TMHMM 2.0 Server等生物信息学软件,分析牡丹nsLTP基因序列及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽、磷酸化位点、保守结构域等,并运用DANMAN、MEGA软件进行多序列比对和系统发育树构建。[结果]牡丹nsLTP基因(NCBI登录号为:JZ840269.1)序列全长为685 bp,开放阅读框长为354 bp,编码蛋白包含117个氨基酸,理论等电点为8.93,为不稳定性蛋白。牡丹nsLTP蛋白为疏水性蛋白,含有信号肽但不含跨膜结构域,NetPho Server预测其含有8个丝氨酸和3个酪氨酸磷酸化位点及5个苏氨酸磷酸化位点。PsnsLTP蛋白具有植物LTP蛋白典型结构,即4个α-螺旋,4对二硫键,1个可结合和容纳脂质分子的疏水结构。多序列比对及系统发育树分析显示,PsLTP蛋白与绒毛烟草LTP蛋白(XP_009608993.1)的相识度62.7%,且进化树聚为同一小分支,遗传距离较近。[结论]通过对牡丹nsLTP基因特性及蛋白结构研究,系统性研究了牡丹nsLTP基因的生物信息学特性,为牡丹抗病抗逆功能基因的研究提供了依据,也为其他植物nsLTP基因研究提供了参考。 展开更多
关键词 牡丹 非特异性脂质转移蛋白基因ltp 蛋白结构 生物信息学
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薰衣草非特异性脂质转移蛋白基因nsLTP2-1和nsLTP2-2的克隆与功能分析
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作者 张夏夏 陈凌娜 +2 位作者 杨扬 赵旌汝 陈永坤 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期834-843,共10页
非特异性脂质转移蛋白(nsLTP,non-specific lipid transfer proteins)在植物脂质转运和分泌中发挥重要作用。本研究从薰衣草(Lavandula angustifolia)中克隆到2个II型nsLTP基因,命名为nsLTP2-1和nsLTP2-2,并对其进行功能分析。生信分析... 非特异性脂质转移蛋白(nsLTP,non-specific lipid transfer proteins)在植物脂质转运和分泌中发挥重要作用。本研究从薰衣草(Lavandula angustifolia)中克隆到2个II型nsLTP基因,命名为nsLTP2-1和nsLTP2-2,并对其进行功能分析。生信分析表明,nsLTP2-1和ns LTP2-2分别编码119个和117个氨基酸,具有脂转移蛋白(LTP,lipid transfer proteins)保守结构域和8个高度保守的半胱氨酸残基;系统进化分析显示它们处于两个分支,与同科的紫苏(Perilla frutescens)相似性最高。基因表达分析显示2个基因均在花蕾中高表达,在叶片、茎和花瓣中几乎不表达,在花萼中的表达存在差异,nsLTP2-1和nsLTP2-2分别在成熟花萼和幼嫩花萼中表达量更高;2个基因在花蕾和叶片中的表达均受到强光诱导,且在花蕾中的表达均受脱落酸诱导,而叶片中nsLTP2-1和nsLTP2-2的表达分别受茉莉酸甲酯和乙烯诱导。亚细胞定位显示2个nsLTPs均定位在细胞膜和细胞壁上,可能与次生代谢物的转运有关。过表达nsLTP2-1和nsLTP2-2烟草叶片经尼罗红染色后,经485~543 nm激发光激发,叶片腺毛头部的荧光显示多于野生型,说明本研究中的nsLTPs可能在脂类的合成和转运中起重要作用。这些结果为明确薰衣草脂转移蛋白在脂类及萜类转运中的功能研究提供了参考。 展开更多
关键词 薰衣草 非特异性脂质转移蛋白 激素处理 非生物胁迫 基因表达 亚细胞定位 尼罗红染色
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创伤性老年患者急性肾损伤的预测价值分析
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作者 郭献阳 王本极 +1 位作者 魏大臻 陈如杰 《浙江创伤外科》 2024年第5期803-805,共3页
目的探讨几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质转载蛋白(NGAL)及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对老年创伤患者急性肾损伤(AKI)早期诊断的预测价值。方法老年创伤患者120例,在入科时收集血、尿标本,检测血清和尿CHI3L... 目的探讨几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)、中性粒细胞明胶酶相关脂质转载蛋白(NGAL)及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)对老年创伤患者急性肾损伤(AKI)早期诊断的预测价值。方法老年创伤患者120例,在入科时收集血、尿标本,检测血清和尿CHI3L1、血清和尿NGAL、尿NAG浓度。每6 h记录尿量。入科同时检测血肌酐。采用logistic回归及ROC曲线分析CHI3L1、NGAL、NAG对老年AKI的预测作用。结果多因素logistic回归分析显示血清CHI3L1(SCHI3L1)与血清NGAL(SNGAL)是AKI发生的高危因素。ROC曲线显示预测老年创伤患者AKI的发生,SNGAL的AUC为0.819,SCHI3L1的AUC为0.729,SNGAL联合SCHI3L1的AUC为0.834。结论SCHI3L1与SNGAL是老年创伤患者AKI发生的高危因素,两者均可以预测其AKI的发生,以SNGAL的预测作用更明显,联合指标能提高预测准确率。 展开更多
关键词 几丁质酶3样蛋白1 中性粒细胞明胶酶相关脂质转载蛋白 N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 老年 创伤 急性肾损伤
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植物非特异性脂质转运蛋白(nsLTPs)功能
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作者 杨鑫 何秀娟 +6 位作者 仝铸 肖翠 王泽琼 肖玉雄 袁龙义 孙中海 邱文明 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2024年第5期1471-1479,共9页
植物非特异性脂质转运蛋白(plant non-specific lipid transfer proteins,nsLTPs)是一类小分子可溶性碱性蛋白,包含1个由4个二硫键链接的8个半胱氨酸残基保守基序、1个内部疏水空腔和1个脂质结合位点。这种结构使得ns TLPs稳定性高,结... 植物非特异性脂质转运蛋白(plant non-specific lipid transfer proteins,nsLTPs)是一类小分子可溶性碱性蛋白,包含1个由4个二硫键链接的8个半胱氨酸残基保守基序、1个内部疏水空腔和1个脂质结合位点。这种结构使得ns TLPs稳定性高,结合或转运疏水分子的能力增强,因此能够在膜间转移脂质。植物ns LTPs广泛存在于高等植物中,主要有5种类型,包括LTP1、LTP2、LTPc、LTPd和LTPg,其中LTP1和LTP2最常见,研究数量相对较多。植物nsLTPs的生物学功能丰富,除了参与植物生长和发育(角质层蜡质合成,胚胎发育,种子发育和萌发)外,在非生物胁迫以及病原菌防御中也起重要作用。本研究主要讲述了近几年植物nsLTPs功能研究进展,分析了该研究存在的不足之处,并展望了未来研究方向,旨在为深入了解植物nsLTPs的功能提供参考。 展开更多
关键词 非特异性脂质转运蛋白 生物学功能 亚细胞定位 非生物胁迫
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马铃薯非特异性脂质转移蛋白基因StLTPa1的克隆和表达 被引量:12
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作者 郜刚 任彩虹 +2 位作者 金黎平 谢开云 屈冬玉 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1510-1517,共8页
非特异性脂质转移蛋白(nsLTP)是植物中大量存在的小分子脂类结合蛋白,具有多种生物学功能,如抗菌防御、信号传导、胞壁松弛、蛋白酶抑制等。通过接种青枯菌(Ralstonia solanacearum),从马铃薯栽培品种中薯3号中获得一个新的非特异性脂... 非特异性脂质转移蛋白(nsLTP)是植物中大量存在的小分子脂类结合蛋白,具有多种生物学功能,如抗菌防御、信号传导、胞壁松弛、蛋白酶抑制等。通过接种青枯菌(Ralstonia solanacearum),从马铃薯栽培品种中薯3号中获得一个新的非特异性脂质转移蛋白cDNA克隆StLTPa1,序列分析表明该基因含636bp核苷酸,编码91个氨基酸,属于I类非特异性脂质转移蛋白。基于氨基酸序列构建的系统发生树揭示,该基因与其他茄科nsLTP具有高度保守的序列相似性,核酸和氨基酸水平分别具75%~85%和60%~92%的同源性。对该基因在互作早期基因表达时空性分析表明,StLTPa1基因不仅受病菌的诱导,在不同抗、感病的马铃薯基因型中差异表达,而且受一定浓度外源非生物激发子如水杨酸、茉莉酸和脱落酸的诱导并产生一定时间的持续效应,其诱导表达模式也表现出一定的差异。原位杂交结果显示StLTPa1主要在马铃薯茎、叶维管束系统的韧皮部细胞中表达。这些结果说明StLTPa1基因受病菌和非生物激发子诱导,在植物防御反应中发挥作用。 展开更多
关键词 马铃薯 非特异性脂质转移蛋白 Stltpa1 克隆 表达
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2个蜡梅nsLTP基因启动子的克隆及其在烟草中的瞬时表达分析 被引量:7
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作者 马婧 刘群 +2 位作者 王晓斌 眭顺照 李名扬 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期601-608,共8页
利用hiTAIL-PCR法得到了2个蜡梅(Chimonanthus praecox)非特异性脂转移蛋白(non-specific lipid transfer protein)基因家族成员CpLTP3和CpLTP4翻译起始位点上游启动子序列,长度分别为1298bp和838bp。生物信息学分析表明2个序列均存在... 利用hiTAIL-PCR法得到了2个蜡梅(Chimonanthus praecox)非特异性脂转移蛋白(non-specific lipid transfer protein)基因家族成员CpLTP3和CpLTP4翻译起始位点上游启动子序列,长度分别为1298bp和838bp。生物信息学分析表明2个序列均存在启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box及多个与植物非生物胁迫相关的响应元件。在烟草叶片中的瞬时表达结果表明这两个启动子序列均具备驱动报告基因GUS表达的功能。 展开更多
关键词 蜡梅 非特异性脂转移蛋白 启动子 hiTAIL-PCR 胁迫
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植物防卫基因PvPGIP2和TaLTP4的克隆及其对小麦的转化 被引量:3
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作者 李钊 王金凤 +4 位作者 庄洪涛 蒋雯 叶兴国 李斯深 张增艳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期871-878,共8页
多聚半乳糖酸醛酶抑制蛋白和脂质转移酶蛋白是植物产生的防卫蛋白,对植物病原真菌具有防御作用。本研究利用同源基因克隆策略和RT-PCR技术,成功克隆了1个菜豆的多聚半乳糖酸醛酶抑制蛋白(PvPGIP2)编码基因和1个小麦的脂质转移蛋白(TaLT... 多聚半乳糖酸醛酶抑制蛋白和脂质转移酶蛋白是植物产生的防卫蛋白,对植物病原真菌具有防御作用。本研究利用同源基因克隆策略和RT-PCR技术,成功克隆了1个菜豆的多聚半乳糖酸醛酶抑制蛋白(PvPGIP2)编码基因和1个小麦的脂质转移蛋白(TaLTP4)编码基因;由于它们在功能上具有协同作用,我们以pAHC25为骨架构建了PvPGIP2和TaLTP4基因双价表达载体,对该双价表达载体进行菌落PCR筛选、限制酶消化鉴定和测序分析,结果表明构建的PvPGIP2和TaLTP4双价基因表达载体是成功的,该载体包含PvPGIP2表达盒和TaLTP4表达盒,分别受玉米泛素基因(Ubiqiutin)启动子的驱动,选用来源于Ti质粒中胭脂碱合成酶基因的终止序列作为终止子(Tnos)。采用基因枪法轰击小麦品种扬麦18成熟胚愈伤组织2000枚,经过2次Bialaphos筛选,最终获得扬麦18再生植株112株,利用表达载体基因的特异引物对上述成活的转化植株进行PCR检测,获得PvPGIP2和TaLTP4均为阳性的植株12株,转化率为0.6%。 展开更多
关键词 小麦 菜豆 多聚半乳糖酸醛抑制蛋白 脂质转移酶蛋白 基因克隆 转化
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西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白基因PsnsLTP的功能分析 被引量:2
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作者 李蔚 曲春浦 +2 位作者 许志茹 刘春 刘关君 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期547-553,共7页
通过在农杆菌介导下,利用西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白基因(植物表达载体:pROKII-PsnsLTP)对烟草进行遗传转化,经卡那霉素抗性分化筛选及PCR鉴定,获得6个转基因烟草株系。接种烟草炭疽病病菌和猝倒病病菌后观察转基因植株和野生型的... 通过在农杆菌介导下,利用西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白基因(植物表达载体:pROKII-PsnsLTP)对烟草进行遗传转化,经卡那霉素抗性分化筛选及PCR鉴定,获得6个转基因烟草株系。接种烟草炭疽病病菌和猝倒病病菌后观察转基因植株和野生型的表型差异,在Na Cl、Cd Cl2、7.5%PEG6000的胁迫下进行表型观察和生理指标的测定。结果显示:与野生型烟草相比,T1代转基因植株已具有较强的耐烟草炭疽病和猝倒病的能力;其超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性显著增强,丙二醛(MAD)含量显著降低,且幼苗具有较好的生长性状。由此证明,西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白PsnsLTP增加了转基因烟草抵御生物胁迫和非生物胁迫的能力,这些工作为深入研究PsnsLTP基因的抗逆机制提供了参考。 展开更多
关键词 西伯利亚蓼 非特异性脂质转移蛋白 转基因烟草 生物胁迫 非生物胁迫
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LTP4基因超表达载体的构建及其遗传转化 被引量:2
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作者 徐刚标 申响保 +1 位作者 鲍时来 张照亮 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期21-25,共5页
将脂质转移蛋白(LTP4)基因插入植物表达载体pBI121—35S,构建超表达载体pBI121—35S∶∶LTP4,通过农杆菌介导法将其转入拟南芥Arabidopsis thalianaColumbia生态型品种中,获得了卡那霉素筛选的抗性植株。PCR扩增验证及RT—PCR分析表明,... 将脂质转移蛋白(LTP4)基因插入植物表达载体pBI121—35S,构建超表达载体pBI121—35S∶∶LTP4,通过农杆菌介导法将其转入拟南芥Arabidopsis thalianaColumbia生态型品种中,获得了卡那霉素筛选的抗性植株。PCR扩增验证及RT—PCR分析表明,该基因获得超表达。 展开更多
关键词 脂质转移蛋白(ltp4) 超表达载体 拟南芥 遗传转化
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大豆脂质转运蛋白基因GmLTP3的特征分析 被引量:1
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作者 李彩云 余永亮 +3 位作者 杨红旗 董薇 田保明 梁慧珍 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期8-11,共4页
将芝麻的SiLTP3序列与大豆的核苷酸序列进行blast比对,发现大豆含有与芝麻该基因同源性高达94%的序列,克隆该基因并命名为GmLTP3。通过GmLTP3的核苷酸序列推测出其氨基酸序列,利用软件进行多重序列比对和系统发育树构建,发现该氨基酸序... 将芝麻的SiLTP3序列与大豆的核苷酸序列进行blast比对,发现大豆含有与芝麻该基因同源性高达94%的序列,克隆该基因并命名为GmLTP3。通过GmLTP3的核苷酸序列推测出其氨基酸序列,利用软件进行多重序列比对和系统发育树构建,发现该氨基酸序列与已确定功能的大豆脂质转运蛋白同源性高达99%,与蒺藜苜蓿和巴旦杏的进化距离最近。采用实时荧光定量PCR法对GmLTP3基因进行定量检测,组织表达分析表明,GmLTP3属于组成性表达基因,在大豆的根、茎、叶、花、萌发的种子中均有表达,并且在花蕾、茎和萌发的种子中表达量较高,在根、叶中表达量较低。非生物胁迫诱导表达分析表明,GmLTP3基因能够对IAA、ABA、PEG、NaCl和冷害作出应答。胁迫处理2 h后,GmLTP3表达量均有下调趋势;胁迫处理12 h后,IAA、ABA、PEG、NaCl诱导GmLTP3的表达量均有不同程度的上调,冷害处理则继续下调表达量。 展开更多
关键词 大豆 脂质转运蛋白 非生物胁迫 表达分析
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新疆陆地棉组成型表达海岛棉脂质转移酶基因GbLTP1和GbLTP3特性研究 被引量:1
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作者 沈海涛 王爱英 +1 位作者 李予霞 祝建波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期87-93,共7页
根据LTPs基因保守序列从海岛棉品种新海21中克隆两个脂质转移酶基因GbLTP1和GbLTP3。构建组成型表达载体pCAMBIA2301-GbLTP1和pCAMBIA2301-GbLTP3两个植物表达载体转化陆地棉。通过卡那霉素筛选、PCR和RT-PCR检测,获得转GbLTP1基因棉花... 根据LTPs基因保守序列从海岛棉品种新海21中克隆两个脂质转移酶基因GbLTP1和GbLTP3。构建组成型表达载体pCAMBIA2301-GbLTP1和pCAMBIA2301-GbLTP3两个植物表达载体转化陆地棉。通过卡那霉素筛选、PCR和RT-PCR检测,获得转GbLTP1基因棉花和转GbLTP3基因棉花各两个株系。利用SPSS18.0分析转基因后代抗病性、农艺性状和经济性状影响。结果显示,通过将GbLTP3与GbLTP1基因导入新疆陆地棉,棉花抗黄、枯萎病抗性和纤维品质相对于受体显著提高,特别是纤维长度和整齐度达到极显著水平(P<0.05)。外源基因GbLTP3与GbLTP1基因导入不会影响棉花农艺性状、产量性状。 展开更多
关键词 脂质转移酶 转基因棉花 棉花枯萎病和黄萎病 农艺性状 纤维品质
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甘蓝脂质转运蛋白基因BoLTP的克隆与表达分析 被引量:1
15
作者 田爱梅 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期173-177,共5页
【目的】克隆甘蓝脂质转运蛋白基因(BoLTP)的cDNA及DNA片段,为进一步研究其生物学功能奠定基础。【方法】根据NCBI数据库中脂质转运蛋白基因的信息,克隆甘蓝不同组织BoLTP基因,对其核酸序列及预测蛋白进行生物信息学分析;检测甘蓝多种... 【目的】克隆甘蓝脂质转运蛋白基因(BoLTP)的cDNA及DNA片段,为进一步研究其生物学功能奠定基础。【方法】根据NCBI数据库中脂质转运蛋白基因的信息,克隆甘蓝不同组织BoLTP基因,对其核酸序列及预测蛋白进行生物信息学分析;检测甘蓝多种组织中BoLTP的表达情况。【结果】克隆获得甘蓝BoLTP的cDNA序列为720 bp,无内含子,编码102个氨基酸。生物信息学分析发现,甘蓝BoLTP具有脂质转运蛋白家族共有特征,具有显著的疏水区,并存在信号肽结构域、AAI结构域。RT-PCR检测结果表明,BoLTP主要在甘蓝雄蕊中表达,在雌蕊、萼片、花瓣、花茎及叶片中均无表达。【结论】甘蓝BoLTP基因可能与甘蓝雄蕊中花粉的发育相关。 展开更多
关键词 甘蓝 脂质转运蛋白 基因 克隆 表达
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辣椒非特异性脂质转移蛋白基因CaLTP1的克隆及表达分析
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作者 冯冬林 赖燕 何水林 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第10期1784-1788,共5页
非特异性脂质转移蛋白(nsLTPs)是植物中大量存在的小分子脂类结合蛋白,具有多种生物学功能。从辣椒cDNA文库中筛选得到1个nsLTPs基因,命名为CaLTP1;序列分析结果表明:该基因全长cDNA序列为1 211 bp,推测编码1个包含129个氨基酸残基的前... 非特异性脂质转移蛋白(nsLTPs)是植物中大量存在的小分子脂类结合蛋白,具有多种生物学功能。从辣椒cDNA文库中筛选得到1个nsLTPs基因,命名为CaLTP1;序列分析结果表明:该基因全长cDNA序列为1 211 bp,推测编码1个包含129个氨基酸残基的前体蛋白。CaLTP1蛋白含有典型的脂质转移蛋白N-端信号肽,保守的AAI结构域和半胱氨酸位点。预测CaLTP1蛋白含有多种功能位点,包括3个CK2磷酸化位点,3个N-豆蔻酰化位点和1个PKC磷酸化位点。实时荧光定量分析组织特异性表达模式表明,CaLTP1在辣椒茎、叶、花中表达量升高。 展开更多
关键词 辣椒 脂质转移蛋白(nsltps) 表达
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油菜抗菌肽基因BnLTP1的克隆表达及活性 被引量:2
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作者 曹慧慧 董彩华 +4 位作者 于景印 柯涛 童超波 黄军艳 刘胜毅 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-6,共6页
为研究转脂蛋白(lipid transfer protein,LTP)作为抗菌肽在油菜防御反应中的作用,利用生物信息学的方法,从油菜中筛选获得了一个转脂蛋白类抗菌肽基因,命名为Bn LTP1。Bn LTP1基因长度为93bp,编码31个氨基酸残基。抗菌肽Bn LTP1分子量约... 为研究转脂蛋白(lipid transfer protein,LTP)作为抗菌肽在油菜防御反应中的作用,利用生物信息学的方法,从油菜中筛选获得了一个转脂蛋白类抗菌肽基因,命名为Bn LTP1。Bn LTP1基因长度为93bp,编码31个氨基酸残基。抗菌肽Bn LTP1分子量约为3.4k Da,其序列中的4个半胱氨酸形成两个分子内二硫键,对于稳定抗菌肽的结构起到至关重要的作用。通过overlap PCR的方法对该基因进行体外人工合成,并克隆到p ET30a/His-EDDIEGFP表达载体上进行体外原核表达。抑菌活性实验检测发现,Bn LTP1对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和酵母菌都有较强的抑菌活性;对植物病原真菌(核盘菌、灰霉菌和稻瘟病菌)等也具有抑菌活性。 展开更多
关键词 油菜 抗菌肽 转脂蛋白 融合表达 活性检测
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陆地棉LTP家族基因的克隆与表达分析 被引量:1
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作者 韩慧超 黄逸群 +1 位作者 王劲 左开井 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期84-90,共7页
长链脂肪酸能够通过调节胚珠内源乙烯信号变化来促进棉花的起始和伸长发育,为深入了解棉花脂肪酸的转运过程及参与基因,对棉花全基因组进行了分析,克隆了11个脂质转运蛋白。实时荧光定量PCR证实:LTP6,LTP7,LTP9,LTP11 4个基因在纤维起... 长链脂肪酸能够通过调节胚珠内源乙烯信号变化来促进棉花的起始和伸长发育,为深入了解棉花脂肪酸的转运过程及参与基因,对棉花全基因组进行了分析,克隆了11个脂质转运蛋白。实时荧光定量PCR证实:LTP6,LTP7,LTP9,LTP11 4个基因在纤维起始时期(野生型与突变体之间)的表达存在差异,这4个基因可能与纤维起始发育有关。通过基因组步移技术克隆了Gh-LTP6基因的启动子,并对其结构进行分析,发现其具有多个MYB结合位点。这些结果为深入研究LTP基因在纤维起始过程中的角色奠定了基础。 展开更多
关键词 陆地棉 ltp家族 基因克隆 棉纤维发育 脂质转运蛋白 启动子
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谷子脂质转移蛋白基因SiLTP1的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 孟凡花 李臻 +1 位作者 王庆国 刘炜 《山东农业科学》 北大核心 2021年第10期1-7,共7页
植物脂质转移蛋白(LTP)是一类含量丰富并且由多基因家族编码的小分子碱性蛋白。本研究利用PCR技术从谷子中克隆得到一个LTP基因,命名为SiLTP1。该基因的开放阅读框全长为354 bp,编码117个氨基酸。对其核苷酸及蛋白序列进行生物信息学分... 植物脂质转移蛋白(LTP)是一类含量丰富并且由多基因家族编码的小分子碱性蛋白。本研究利用PCR技术从谷子中克隆得到一个LTP基因,命名为SiLTP1。该基因的开放阅读框全长为354 bp,编码117个氨基酸。对其核苷酸及蛋白序列进行生物信息学分析,并通过qRT-PCR方法分析了SiLTP1在各胁迫下的表达模式。结果表明,SiLTP1具有脂质转移蛋白家族共有特性,即N端的信号肽结构、跨膜螺旋区、8个高度保守的半胱氨酸基序;三级结构预测表明,该蛋白主要是由4个α-螺旋和无规则卷曲组成;qRT-PCR结果显示,盐、干旱、ABA及MeJA均可诱导SiLTP1表达,其中盐胁迫诱导最为明显,显示SiLTP1可能参与谷子逆境胁迫响应过程,尤其在耐盐品质形成中发挥作用。本研究为深入解析谷子中SiLTP1的生物学功能及作用机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 谷子 脂质转移蛋白 基因克隆 胁迫响应 表达模式分析
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Plasma phospholipid transfer protein (PLTP) modulates adaptive immune functions through alternation of T helper cell polarization 被引量:3
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作者 Catherine Desrumau Stephanie Lemaire-Ewing +9 位作者 Nicolas Ogier Akadiri Yessoufou Arlette Hammann Anabelle Sequeira-Le Grand Valerie Deckert Jean-Paul Pais de Barros Naig Le Guern Julien Guy Naim A Khan Laurent Lagrost 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期795-804,共10页
Objective: Plasma phospholipid transfer protein (PLTP) is a key determinant of lipoprotein metabolism, and both animal and human studies converge to indicate that PLTP promotes atherogenesis and its thromboembolic ... Objective: Plasma phospholipid transfer protein (PLTP) is a key determinant of lipoprotein metabolism, and both animal and human studies converge to indicate that PLTP promotes atherogenesis and its thromboembolic complications. Moreover, it has recently been reported that PLTP modulates inflammation and immune responses. Although earlier studies from our group demonstrated that PLTP can modify macrophage activation, the implication of PLTP in the modulation of T-cell-mediated immune responses has never been investigated and was therefore addressed in the present study. Approach and results: In the present study, we demonstrated that PLTP deficiency in mice has a profound effect on CD4+ ThO cell polarization, with a shift towards the anti-inflammatory Th2 phenotype under both normal and pathological conditions. In a model of contact hypersensitivity, a significantly impaired response to skin sensitization with the hapten-2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB) was observed in PLTP-deficient mice compared to wild-type (WT) mice. Interestingly, PLTP deficiency in mice exerted no effect on the counts of total white blood cells, lymphocytes, granulocytes, or monocytes in the peripheral blood. Moreover, PLTP deficiency did not modify the amounts of CD4+ and CD8+ T lymphocyte subsets. However, PLTP-deficiency, associated with upregulation of the Th2 phenotype, was accompanied by a significant decrease in the production of the pro-Thl cytokine interleukin 18 by accessory cells. Conclusions: For the first time, this work reports a physiological role for PLTP in the polarization of CD4+ T cells toward the pro-inflammatory Th I phenotype. 展开更多
关键词 lipid transfer protein LYMPHOCYTE POLARIZATION T cell
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