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补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠线粒体氧化损伤和PKCε-Nampt通路的影响
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作者 尹美娟 刘真一 +4 位作者 靳晓飞 周晓红 高钰 赵月眸 高维娟 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期79-86,共8页
目的探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注(I/R)大鼠线粒体氧化损伤及PKCε-Nampt通路的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组(14.3 g/kg)和依达拉奉组(3 mg/kg),除假手术组外均采用MCAO法建立脑I/R损伤模型,术后24 h各组给... 目的探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注(I/R)大鼠线粒体氧化损伤及PKCε-Nampt通路的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组(14.3 g/kg)和依达拉奉组(3 mg/kg),除假手术组外均采用MCAO法建立脑I/R损伤模型,术后24 h各组给予相应剂量药物,给药7 d后通过神经功能评分评估神经功能缺损情况,免疫荧光检测神经元标志物MAP-2表达,观察神经元损伤情况,检测ROS、MDA水平和SOD活性评价氧化损伤情况,荧光探针JC-1检测线粒体膜电位变化,修饰酶循环法检测NAD^(+)/NADH比值,Western blot法检测PKCε、p-PKCε、Nampt蛋白表达,免疫组化法检测p-PKCε、Nampt蛋白阳性表达。结果与模型组比较,补阳还五汤组脑梗死体积、神经功能评分降低(P<0.05),脑组织MAP-2荧光强度增强(P<0.05),神经元损伤减轻,脑组织ROS、MDA水平降低(P<0.05),SOD活性、线粒体膜电位、NAD^(+)/NADH比值升高(P<0.05),p-PKCε、Nampt蛋白表达升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可通过激活PKCε-Nampt信号通路、提高线粒体功能来减轻大鼠脑I/R损伤。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑缺血再灌注损伤 线粒体 pkcΕ NAMPT
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基于PKCβ/Erk1/2/NF-κB信号通路探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎小鼠的影响
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作者 罗玥 刘子玉 +3 位作者 王智民 赵卓 王梦真 杨潇 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第11期123-128,共6页
目的观察补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠PKCβ/Erk1/2/NF-κB信号通路的影响,探讨其治疗AIT的作用机制。方法80只8周龄NOD.H-2^(h4)小鼠随机分为对照组、模型组、中药组和硒酵母片组,每组20只。对照组饮用蒸馏水,其余各组予0.... 目的观察补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠PKCβ/Erk1/2/NF-κB信号通路的影响,探讨其治疗AIT的作用机制。方法80只8周龄NOD.H-2^(h4)小鼠随机分为对照组、模型组、中药组和硒酵母片组,每组20只。对照组饮用蒸馏水,其余各组予0.05%碘化钠溶液自由饮用8周建立AIT小鼠模型。各给药组灌胃给予相应药物给药8周。HE染色观察甲状腺组织形态,ELISA测定血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)含量,RT-qPCR检测甲状腺组织蛋白激酶Cβ(PKCβ)、细胞外信号调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)、核因子(NF)-κBp65、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)和白细胞介素(IL)-17 mRNA表达,Western blot检测甲状腺组织PKCβ、Erk1/2、NF-κBp65、RORγt、IL-17蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠甲状腺组织出现大量淋巴细胞浸润,血清TGAb、TPOAb含量明显升高(P<0.001),甲状腺组织PKCβ、Erk1/2、NF-κBp65、RORγt、IL-17 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.001);与模型组比较,中药组和硒酵母片组小鼠甲状腺组织淋巴细胞浸润减轻,血清TGAb、TPOAb含量明显降低(P<0.001),甲状腺组织PKCβ、Erk1/2、NF-κBp65、RORγt、IL-17 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.001),中药组与硒酵母片组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论补中益气汤可能通过调控PKCβ/Erk1/2/NF-κB信号通路减轻AIT小鼠炎症反应,改善甲状腺组织淋巴细胞浸润状态。 展开更多
关键词 补中益气汤 自身免疫性甲状腺炎 pkcβ/Erk1/2/NF-κB信号通路 免疫 小鼠
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2-APB通过PKCα/HIF-1α信号通路抑制H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞凋亡
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作者 欧阳紫微 董雷 +5 位作者 王琰 程远志 朱仁弟 周仁鹏 赵英杰 胡伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第7期1150-1156,共7页
目的探讨2-氨基乙氧基苯硼酸(2-APB)对H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞凋亡的作用及其机制。方法实验分为Control组、H_(2)O_(2)组、2-APB组和H_(2)O_(2)+2-APB组。CCK-8法检测各组细胞活力;显微镜下观察2-APB对H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞形态... 目的探讨2-氨基乙氧基苯硼酸(2-APB)对H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞凋亡的作用及其机制。方法实验分为Control组、H_(2)O_(2)组、2-APB组和H_(2)O_(2)+2-APB组。CCK-8法检测各组细胞活力;显微镜下观察2-APB对H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞形态变化的影响;TUNEL法和流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况;流式细胞术检测脂质活性氧(ROS)水平;Western blot法检测2-APB对H_(2)O_(2)诱导的各组细胞中Cleaved-PARP、p-PKCα和HIF-1α蛋白的表达情况;免疫荧光法检测PKCα抑制剂BIM-Ⅰ对H_(2)O_(2)诱导的各组细胞中HIF-1α的荧光表达情况。结果2-APB对H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞凋亡具有抑制作用,且当2-APB浓度为100μmol/L时抑制效果最为显著(F=235.80,P<0.01);2-APB能够抑制H_(2)O_(2)所致软骨细胞凋亡阳性率(F=114.80,P<0.01)以及ROS的水平(F=52.99,P<0.01),并且抑制Cleaved-PARP(F=10.10,P<0.05)、p-PKCα(F=24.56,P<0.05)和HIF-1α(F=6.85,P<0.05)蛋白的表达;PKCα抑制剂BIM-Ⅰ能够抑制H_(2)O_(2)所致HIF-1α荧光强度的增加。结论2-APB可以通过抑制PKCα/HIF-1α通路减少H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞凋亡,进而保护软骨细胞。 展开更多
关键词 2-氨基乙氧基苯硼酸 软骨细胞 细胞凋亡 H_(2)O_(2) pkcα/HIF-1α通路
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PKC/TRPV1通路在大鼠三叉神经痛中的病理作用
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作者 吴贝贝 沈莲 +1 位作者 王元银 王烈成 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第5期846-851,共6页
目的探究蛋白激酶C(PKC)/瞬时感受器电位香草酸亚型1(TRPV1)通路在大鼠三叉神经疼痛(TN)中的病理作用。方法采用眶下神经慢性收缩术(ION-CCI)来创建大鼠TN的模型。将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CCI组、CCI+DMSO组、CCI+GF109203X(... 目的探究蛋白激酶C(PKC)/瞬时感受器电位香草酸亚型1(TRPV1)通路在大鼠三叉神经疼痛(TN)中的病理作用。方法采用眶下神经慢性收缩术(ION-CCI)来创建大鼠TN的模型。将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CCI组、CCI+DMSO组、CCI+GF109203X(双吲哚马来酰亚胺,一种PKC抑制剂)组。使用Von Frey毛刷检测大鼠的机械痛阈。采用qRT-PCR及Western blot分别检测三叉神经节(TG)内PKC和TRPV1表达量的变化。HE染色观察TG的病理变化。结果CCI组大鼠机械痛阈降低(P<0.05),大鼠TG内的磷酸化的PKC(p-PKC)和TRPV1表达显著增加(P<0.05)。组织病理学结果显示,与Sham组相比,CCI组观察到TG出现明显的炎性细胞浸润增多、神经细胞肿胀等变化。注射GF109203X后降低了大鼠TG内PKC的磷酸化和TRPV1的表达,大鼠机械痛阈升高(P<0.05),光学显微镜下可见TG内细胞肿胀和炎症细胞有所减少。结论PKC/TRPV1通路可能参与了大鼠的三叉神经痛。 展开更多
关键词 pkc TRPV1 TG 三叉神经痛 机械痛阈
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武汉大学何德彪教授课题组科研成果被PKC2024录用
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《信息网络安全》 CSCD 北大核心 2024年第3期397-397,共1页
近日,武汉大学国家网络安全学院彭聪副研究员的研究成果《Parameter-Hiding Order-Revealing Encryption without Pairings》被公钥密码学领域国际会议PKC2024录用。这是武汉大学师生首次以第一作者身份在PKC(International Conference ... 近日,武汉大学国家网络安全学院彭聪副研究员的研究成果《Parameter-Hiding Order-Revealing Encryption without Pairings》被公钥密码学领域国际会议PKC2024录用。这是武汉大学师生首次以第一作者身份在PKC(International Conference on Practice and Theory of Public Key Cryptography)上发表学术论文,实现了国际密码学会(the International Association for Cryptologic Research, IACR)五大专业领域旗舰会议成果发表的重要突破。 展开更多
关键词 科研成果 公钥密码学 作者身份 武汉大学 学术论文 国家网络安全 pkc
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PKC-mTOR通路对糖尿病大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制
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作者 范秀娟 蔡英兰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1797-1805,共9页
目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路在糖尿病(diabetes)大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:将72只雌雄不分的SPF级4周龄SD大鼠随机分为正常对照(control)组、糖尿病组、diabetes+0.1μmol/L佛波酯(PMA... 目的:探讨蛋白激酶C(PKC)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路在糖尿病(diabetes)大鼠胃平滑肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法:将72只雌雄不分的SPF级4周龄SD大鼠随机分为正常对照(control)组、糖尿病组、diabetes+0.1μmol/L佛波酯(PMA)组、diabetes+0.2μmol/L PMA组、diabetes+0.5μmol/L PMA组、diabetes+2μmol/L双吲哚马来酰亚胺I(GF109203X)组、diabetes+5μmol/LGF109203X组和diabetes+10μmol/L GF109203X组,每组各9只。体外高糖环境下培养大鼠原代胃平滑肌细胞分为对照(CK)组、0.1μmol/L PMA处理组、0.2μmol/L PMA处理组、0.5μmol/L PMA处理组、2μmol/L GF109203X处理组、5μmol/L GF109203X处理组和10μmol/L GF109203X处理组。采用离体肌条实验技术检测胃窦平滑肌的自发性收缩,HE染色和流式细胞术检测大鼠胃平滑肌的病理变化及细胞凋亡,Western blot检测SCF、c-Kit、mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4E-BP1、p-4E-BP1、caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达变化。结果:(1)与control组相比,diabetes组胃窦平滑肌收缩性下降(P<0.05),胃平滑肌萎缩,细胞凋亡率增加(P<0.01),SCF、c-Kit和p-mTOR表达均下降(P<0.05或P<0.01)。(2)与diabetes组相比,diabetes+0.1μmol/L PMA组胃窦平滑肌自发性收缩无显著差异,diabetes+0.2μmol/L PMA组(P<0.05)和diabetes+0.5μmol/L PMA组(P<0.01)胃窦平滑肌自发性收缩显著增强,diabetes+0.2μmol/L PMA组和diabetes+0.5μmol/L PMA组mTOR、p70S6K(T421/S424)和p70S6K(T389)的磷酸化水平升高(P<0.05),diabetes+0.5μmol/L PMA组4E-BP1的磷酸化水平升高(P<0.05)。(3)与diabetes组相比,diabetes+2μmol/L GF109203X组胃窦平滑肌自发性收缩无显著差异,diabetes+5μmol/L GF109203X组(P<0.05)和diabetes+10μmol/L GF109203X组(P<0.01)胃窦平滑肌自发性收缩显著减弱,diabetes+5μmol/L GF109203X组和diabetes+10μmol/L GF109203X组mTOR、p70S6K(T389)的磷酸化水平下降(P<0.05),diabetes+10μmol/L GF109203X组p70S6K(T421/S424)的磷酸化水平下降(P<0.05),diabetes+GF109203X(2、5和10μmol/L)组4E-BP1的磷酸化水平均下降(P<0.05)。(4)与CK组相比,GF109203X(2、5和10μmol/L)处理组大鼠胃平滑肌细胞凋亡率增加(P<0.01),PMA(0.1、0.2和0.5μmol/L)处理组Bax和caspase-3表达均下降(P<0.05),Bcl-2的表达增加(P<0.05)。结论:在糖尿病大鼠胃平滑肌PKCmTOR信号通路的下调通过调节Bax/Bcl-2和caspase-3导致胃平滑肌细胞凋亡,并下调SCF和c-Kit,这可能会在糖尿病胃动力障碍中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 胃平滑肌 糖尿病胃动力障碍 pkc-mTOR信号通路 干细胞因子 细胞凋亡
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肝豆灵片通过调控PKCβⅡ/ACSL4/ALOX5信号通路改善肝豆状核变性铁死亡的机制
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作者 吴博进 董婷 +2 位作者 闻雨雅 田丽伟 赵晨玲 《山东科学》 CAS 2024年第4期34-44,共11页
基于PKCβⅡ/ACSL4/ALOX5信号通路,探讨肝豆灵片对TX小鼠肝豆状核变性铁死亡的影响以及对CuCl 2诱导的HT22细胞铁死亡的作用机制。将TX小鼠分为对照组、模型组、肝豆灵片组、Fer-1组、谷胱甘肽组,HT22细胞分为对照组、模型组、肝豆灵片... 基于PKCβⅡ/ACSL4/ALOX5信号通路,探讨肝豆灵片对TX小鼠肝豆状核变性铁死亡的影响以及对CuCl 2诱导的HT22细胞铁死亡的作用机制。将TX小鼠分为对照组、模型组、肝豆灵片组、Fer-1组、谷胱甘肽组,HT22细胞分为对照组、模型组、肝豆灵片组、Fer-1组、肝豆灵片+Fer-1组,采用HE染色检测各组小鼠海马组织病理学改变,蛋白质免疫印迹检测各组小鼠海马组织与HT22细胞中PKCβⅡ、ACSL4、ALOX5蛋白的表达,以及HT22细胞中SLC7A11、GPX4蛋白的表达,微量法检测各组TX小鼠海马组织中Fe 2+的浓度,微板法检测各组HT22细胞中SOD(超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)、GSH-Px水平,实时荧光定量聚合链式反应检测各组HT22细胞中PKCβⅡ、ACSL4、ALOX5 mRNA的表达。结果表明:与对照组相比,模型组海马组织出现明显损伤,PKCβⅡ、ACSL4、ALOX5蛋白表达均明显增高,SLC7A11、GPX4蛋白表达明显下降,Fe 2+的浓度明显升高(P<0.05);与模型组相比,肝豆灵片组、Fer-1组和谷胱甘肽组海马组织的病理损伤均得到改善,且肝豆灵片组效果明显;肝豆灵片组和Fer-1组能抑制HT22细胞铁死亡,PKCβⅡ、ACSL4、ALOX5蛋白与mRNA表达较模型组均明显减少,MDA的浓度明显降低(P<0.05),SOD活力及GSH-Px浓度明显增加(P<0.05)。肝豆灵片能减轻TX小鼠海马组织铁死亡,抑制CuCl 2诱导的HT22细胞铁死亡,其机制可能与下调PKCβⅡ/ACSL4/ALOX5信号通路,减轻细胞内脂质过氧化有关。 展开更多
关键词 肝豆灵片 肝豆状核变性 pkcβⅡ/ACSL4/ALOX5信号通路 铁死亡 机制
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腹部推拿调控Tryptase-PAR2-PKCε通路防治IBS-D内脏痛的机制研究 被引量:1
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作者 李华南 王毓岩 +4 位作者 张小凡 张玮 马菲 董桦 王金贵 《天津中医药》 CAS 2023年第1期75-81,共7页
[目的]验证腹部推拿防治腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠内脏高敏感的效果,阐明其作用途径与机制。[方法]40只SD雄性大鼠,随机分为空白组、模型组、腹部推拿组、西药组,每组10只。采用母婴分离结合慢性应激法制备IBS-D大鼠模型。应... [目的]验证腹部推拿防治腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠内脏高敏感的效果,阐明其作用途径与机制。[方法]40只SD雄性大鼠,随机分为空白组、模型组、腹部推拿组、西药组,每组10只。采用母婴分离结合慢性应激法制备IBS-D大鼠模型。应用腹壁撤退评分评价干预效果。采用甲苯胺蓝染色观察结肠组织肥大细胞(MC)聚集数量及状态。利用免疫组化及蛋白质印迹法(Western blot)法分别检测胰蛋白酶(Tryptase)颗粒分布、结肠组织中蛋白酶激活受体2(PAR2)和蛋白激酶Cε(PKCε)蛋白表达。[结果]与模型组比较,腹部推拿组和西药组腹壁撤退反射评分(AWR)明显降低(P<0.05)。镜下显示,模型组MC形态不规则,计数及密度显著高于空白组;腹部推拿组、西药组与模型组相比,MC计数降低、密度减少(P<0.01)。免疫组化检测发现与模型组相比,腹部推拿组、西药组MC Tryptase颗粒分布明显降低(P<0.01);Western blot检测发现与模型组相比,腹部推拿组和西药组的PAR2、PKCε表达量均显著降低(P<0.01)。[结论]腹部推拿作用于腹部,可能通过活化肠道MC,调控其脱颗粒,降低Tryptase释放,并借助Tryptase-PAR2-PKCε通路,进而改善IBS-D模型大鼠肠道高敏感性作用机制。 展开更多
关键词 腹部推拿 腹泻型肠易激综合征 内脏高敏感 TRYPTASE PAR2 pkcΕ
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PKCα、β_1、ε、ζ表达在缺氧预适应中的变化 被引量:2
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作者 刘宏雁 谢湘林 +1 位作者 吕国蔚 王维忠 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期213-214,共2页
目的 测定在缺氧预适应中脑组织 PKCα、β1 、ε、ζ表达的变化 ,探讨缺氧预适应形成机制。方法 采用流式细胞仪多克隆抗体间接免疫荧光技术测定。结果 随着缺氧次数的增加 ,PKCα、β1 、ε、ζ表达各亚型程度不同地持续增强 ,但 ... 目的 测定在缺氧预适应中脑组织 PKCα、β1 、ε、ζ表达的变化 ,探讨缺氧预适应形成机制。方法 采用流式细胞仪多克隆抗体间接免疫荧光技术测定。结果 随着缺氧次数的增加 ,PKCα、β1 、ε、ζ表达各亚型程度不同地持续增强 ,但 4次缺氧组有所回降。结论  PKC可能通过减弱其所引发的一系列病理变化 。 展开更多
关键词 缺氧预适应 小鼠 pkcΑ FCM pkcβ1 pkcΕ pkcζ
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补肾温阳化瘀方对子宫内膜异位症大鼠PKC信号通路的影响 被引量:1
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作者 张英美 罗琳 +4 位作者 牛若冰 胡书婵 朱晗 孙莹 贺明 《河北中医药学报》 2023年第6期7-10,15,共5页
目的:研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法:将50只SPF级8~10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体... 目的:研究补肾温阳化瘀方治疗子宫内膜异位症(EMs)的作用,探讨其调控蛋白激酶C(PKC)信号通路的机制。方法:将50只SPF级8~10周龄雌性SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和西药组,每组10只。采用自体移植法复制EMs大鼠模型,造模成功后分别给予补肾温阳化瘀方低、高剂量及孕三烯酮灌胃,假手术和模型组灌胃蒸馏水,连续21 d。HE染色观察在位内膜及异位灶的病理形态改变;Western blot测定在位内膜及异位灶磷酸化蛋白激酶C的α亚型(p-PKCα)、蛋白激酶C的α亚型(PKCα)蛋白的表达水平。结果:模型组在位内膜和异位灶p-PKCα蛋白水平升高;给予补肾温阳化瘀方治疗后,p-PKCα的蛋白表达水平降低(P<0.05),PKCα的蛋白表达水平无明显变化。结论:补肾温阳化瘀方通过抑制PKC信号通路来治疗EMs。 展开更多
关键词 补肾温阳化瘀方 子宫内膜异位症 痛经 癥瘕 不孕 p-pkcα pkcΑ 信号通路
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盐酸小檗碱通过抑制PKCα磷酸化抑制机械牵张力诱导的血管平滑肌细胞增殖和凋亡 被引量:3
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作者 蔡晓东 刘树迎 +2 位作者 林宁 杨浩澜 李朝红 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2023年第6期466-472,共7页
[目的]观察机械牵张力(SS)是否通过激活PKCα诱导小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡,并探讨盐酸小檗碱(BBR)对它的作用及机制。[方法]实验共分6组:正常对照组、BBR组、PKCα抑制剂(Go6976)组、SS组、SS+BBR组、SS+Go6976组。静息培养... [目的]观察机械牵张力(SS)是否通过激活PKCα诱导小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡,并探讨盐酸小檗碱(BBR)对它的作用及机制。[方法]实验共分6组:正常对照组、BBR组、PKCα抑制剂(Go6976)组、SS组、SS+BBR组、SS+Go6976组。静息培养的细胞给予BBR或Go6976预处理1 h,继而予10%强度的SS刺激15 min后收集细胞,Western blot检测PKCα和MAPK(ERK、JNK、p38)磷酸化水平。BBR或Go6976预处理1 h,牵拉时间为1 h,继续培养23 h,免疫荧光法检测细胞增殖(Ki67)和凋亡(TUNEL)。[结果]Western blot与免疫荧光结果显示,与正常对照组相比较,SS可升高PKCα和MAPK(ERK、JNK和p38)磷酸化水平(P<0.05),并增加VSMC的增殖和凋亡水平(P<0.05)。BBR可抑制PKCα和ERK、JNK、p38磷酸化水平(P<0.05),同时抑制VSMC增殖和凋亡(P<0.05);Go6976可抑制PKCα和ERK、JNK磷酸化水平(P<0.05),但对p38磷酸化的增加没有影响,同时抑制VSMC增殖和凋亡(P<0.05)。[结论]BBR通过抑制SS诱导的VSMC的PKCα和MAPK磷酸化,抑制VSMC增殖和凋亡。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 盐酸小檗碱 机械牵张力 pkcΑ 细胞增殖 细胞凋亡
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PKCα-NLRP3信号通路在小鼠急性肺损伤过度炎症反应中的作用机制 被引量:2
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作者 陈杨 施强强 +3 位作者 金光勇 陈蕾妃 李玉苹 顾南媛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期996-1004,共9页
目的:研究细胞焦亡在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)过度炎症反应中的作用,并探讨蛋白激酶Cα(PKCα)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路在细胞焦亡发生发展中的调节机制。方法:(1)雄性C57BL/6J小鼠经腹腔注射0.... 目的:研究细胞焦亡在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)过度炎症反应中的作用,并探讨蛋白激酶Cα(PKCα)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路在细胞焦亡发生发展中的调节机制。方法:(1)雄性C57BL/6J小鼠经腹腔注射0.15 mg/kg钙磷蛋白C(calphostin C)干预PKCα表达,经气道内滴注LPS(10 mg/kg)构建ALI模型,设置对照组、calphostin C组、LPS组和LPS+calphostin C组,每组12只。检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子分泌和氧化应激活性,以及肺内细胞焦亡水平。(2)RAW264.7细胞分别用calphostin C(100 nmol/L)及活性氧(ROS)清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC;2.5 mmol/L)干预,再经1 mg/L LPS刺激建立细胞模型,设置对照组、LPS组、LPS+calphostin C组和LPS+NAC组。高内涵成像分析系统检测各组细胞内ROS水平,免疫荧光检测细胞硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)表达量,Western blot检测PKCα-NLRP3信号通路相关蛋白的表达。结果:(1)气道内滴入LPS诱导小鼠BALF中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌水平显著升高,丙二醛(MDA)含量显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性显著降低(P<0.01),肺组织中NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与LPS组相比,LPS+calphostin C组小鼠BALF中炎症因子水平显著降低(P<0.05),MDA含量显著减少,SOD和GSH活性显著增强(P<0.01),肺组织中NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。(2)细胞模型中,与对照组相比,LPS组巨噬细胞ROS生成显著增加(P<0.01)。与LPS组相比,LPS+calphostin C组和LPS+NAC组巨噬细胞ROS水平显著降低(P<0.01),TXNIP表达下调(P<0.01),NLRP3、cleaved caspase-1和含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)蛋白水平降低,IL-1β和IL-18分泌减少(P<0.01)。结论:PKCα通过介导TXNIP-NLRP3信号通路而调控细胞焦亡过程,从而参与小鼠ALI中的过度炎症反应。 展开更多
关键词 pkcα-NLRP3信号通路 肺损伤 炎症
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宫颈癌组织中PKCα、PKCε、PKCδ表达及与化疗药物敏感性的机制研究 被引量:2
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作者 郭庆枝 李丽 +3 位作者 薄其美 陈莉 孙莉 石洪堂 《海南医学院学报》 CAS 2019年第2期120-124,共5页
目的:探讨宫颈癌组织中PKCα、PKCε、PKCδ表达及其与化疗药物敏感性的关系。方法:选择本院收治的确诊宫颈癌患者38例,三维彩色多普勒超声检测血管形成指数(VI)、血流指数(FI)、血管血流指数(VFI),取化疗前后病灶组织各100mg左右,采用R... 目的:探讨宫颈癌组织中PKCα、PKCε、PKCδ表达及其与化疗药物敏感性的关系。方法:选择本院收治的确诊宫颈癌患者38例,三维彩色多普勒超声检测血管形成指数(VI)、血流指数(FI)、血管血流指数(VFI),取化疗前后病灶组织各100mg左右,采用RT-PCR检测组织中PKCα、PKCε、PKCδmRNA表达水平,Western blot检测组织中PKCα、PKCε、PKCδ蛋白的表达,Spearman相关分析PKCα、PKCε、PKCδmRNA表达水平与化药敏感性的关系,Logisitic回归分析影响化疗敏感性的相关因素。结果:化疗后PKCα、PKCεmRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),PKCδmRNA和蛋白的表达均显著升高(P<0.05);化疗后有效组PKCα、PKCεmRNA和蛋白表达水平较化疗前均显著降低(P<0.05),PKCδmRNA和蛋白的表达较化疗前均显著升高(P<0.05);Spearman分析化疗前宫颈癌组织中PKCα与PKCε的mRNA表达水平与VI、FI和化疗后残余肿瘤体积百分比呈显著正相关,PKCδ与VI、FI和化疗后残余肿瘤体积百分比呈显著负相关,而与VFI和化疗前肿瘤的体积大小无明显相关性;Logisitic回归分析显示PKCα、PKCε、PKCδmRNA、VI、FI为化疗敏感性的独立危险因素,淋巴结转移、肿瘤体积与化疗敏感性无关。结论:PKCα、PKCε在宫颈癌组织中高表达,PKCδ在宫颈癌组织中低表达,三者均与化疗敏感性具有密切关系。 展开更多
关键词 宫颈癌 pkcΑ pkcΕ pkcΔ 化疗敏感性
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急性力竭运动对大鼠心肌PKCα、δ和ε表达的影响 被引量:4
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作者 马治云 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期333-335,共3页
目的:检测分析急性力竭运动对大鼠心肌蛋白激酶C(PKC)α、δ和ε亚型总蛋白及其磷酸化蛋白表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠50只,随机分为对照组(C组)和急性力竭运动组(AEE组)(n=25),采用一次力竭跑台运动建立急性力竭运动模型,Western ... 目的:检测分析急性力竭运动对大鼠心肌蛋白激酶C(PKC)α、δ和ε亚型总蛋白及其磷酸化蛋白表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠50只,随机分为对照组(C组)和急性力竭运动组(AEE组)(n=25),采用一次力竭跑台运动建立急性力竭运动模型,Western blot法检测PKCα、δ和ε总蛋白及其磷酸化蛋白的表达水平。结果:与C组比较,AEE组大鼠心肌PKCα、p-PKCα^(Ser-657)、PKCδ、P-pKCδ^(Thr-507)及PKCε水平均显著升高(P<0.0S)。结论:急性力竭运动导致PKCα、PKCδ、PKCε表达水平和PKCα、PKCδ活化水平上调,可能是急性力竭运动导致大鼠心肌损伤的重要因素,三亚型之间的交互作用可能是更重要的因素。 展开更多
关键词 急性力竭运动 心肌 pkcΑ pkcΔ pkcΕ 大鼠
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PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在甲状腺病变中的表达 被引量:1
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作者 王翠 唐建武 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第6期665-666,共2页
目的:对PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤及乳头状甲状腺癌中的表达进行研究,以了解它们在甲状腺病变发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学检测方法分别检测PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在30例结节性甲状腺肿、20例甲... 目的:对PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤及乳头状甲状腺癌中的表达进行研究,以了解它们在甲状腺病变发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学检测方法分别检测PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在30例结节性甲状腺肿、20例甲状腺腺瘤、31例乳头状甲状腺癌的表达情况,并进行对比分析。结果:PKCα,PKCβⅡ,PKCδ的表达在结节性甲状腺肿组与甲状腺腺瘤组无差异(P>0.05);在乳头状甲状腺癌组明显高于结节性甲状腺肿组及甲状腺腺瘤组,即在良性病变组与恶性病变组存在显著性差异(P<0.05)。结论:PKCα、PKCβⅡ、PKCδ在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、乳头状甲状腺癌中均有表达;在甲状腺乳头状癌中有过度表达。 展开更多
关键词 pkcΑ pkcβⅡ pkcΔ 甲状腺病变 免疫组化
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PAR2-PKC信号通路在胃食管反流病黏膜损伤中的作用 被引量:1
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作者 姚晓茹 年媛媛 曹佳馨 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2023年第3期247-251,共5页
目的 研究PAR2-PKC信号通路在胃食管反流病黏膜损伤中的作用。方法 据GerdQ评分>8分、内镜下食管黏膜情况确定RE组、RE炎旁对照组、NERD组患者;无GERD典型临床症状、内镜下食管黏膜正常确定正常对照组;内镜下取RE组食管黏膜糜烂处、... 目的 研究PAR2-PKC信号通路在胃食管反流病黏膜损伤中的作用。方法 据GerdQ评分>8分、内镜下食管黏膜情况确定RE组、RE炎旁对照组、NERD组患者;无GERD典型临床症状、内镜下食管黏膜正常确定正常对照组;内镜下取RE组食管黏膜糜烂处、距糜烂外周5 cm处正常黏膜组织,以及NERD组、正常对照组食管齿状线上5 cm食管黏膜组织进行免疫组化、RT-PCR实验检测各组食管黏膜组织中PAR2、PKC的mRNA表达情况。结果 共收集84例患者(RE组25例;RE炎旁对照组19例;NERD组24例;正常对照组16例);免疫组化结果显示,PAR2、PKC蛋白在NERD组阳性表达率明显高于其他三组,但PAR2、PKC蛋白在各分组食管黏膜组织中表达差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果提示,PKC mRNA检测量在各组间存在显著差异,PAR2 mRNA在正常对照组vs RE组、RE炎旁对照组vs NERD组、NERD组vs正常对照组组间存在显著差异性;正常对照组vs RE组、正常对照组vs RE炎旁对照组、NERD组vs RE组间无差异。结论 PAR2-PKC信号通路激活可能参与GERD中RE、NERD患者食管表面黏膜炎症以及NERD患者内脏高敏感过程。 展开更多
关键词 反流性食管炎 非糜烂性胃食管反流病 PAR2 pkc
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BDNF经TrkB-PKC-Ca^(2+)信号通路调控气道ASMC炎症反应
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作者 聂颖 徐辉甫 +3 位作者 王丹 张领领 邵会 乔静(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期531-536,共6页
目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)经TrkB-PKC-Ca^(2+)信号影响气道细胞收缩及炎症反应的分子机制。方法:建立TNF-α诱导的气道平滑肌细胞(ASMC)炎症模型,采用BDNF-siRNA和BDNF重组蛋白对模型进行干预,测定各组ASMC炎症因子IL-17、Eota... 目的:探讨脑源性神经营养因子(BDNF)经TrkB-PKC-Ca^(2+)信号影响气道细胞收缩及炎症反应的分子机制。方法:建立TNF-α诱导的气道平滑肌细胞(ASMC)炎症模型,采用BDNF-siRNA和BDNF重组蛋白对模型进行干预,测定各组ASMC炎症因子IL-17、Eotaxin水平及BDNF、TrkB浓度、PKC活性变化及Ca^(2+)、三磷酸肌醇(IP3)浓度变化。结果:与正常组相比,模型组细胞异常增殖,细胞内炎症因子IL-17、Eotaxin增加,BDNF、TrkB蛋白和转录水平明显升高,同时引起其下游PKCIP3-Ca^(2+)信号上调。结论:BDNF可能通过激活下游PKC信号通路诱发气道重塑,参与气道高反应形成。 展开更多
关键词 BDNF TrkB-pkc-Ca^(2+)信号 ASMC 气道炎症反应
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健脾补肾活血化瘀法联合隔药饼灸对CRF大鼠肾间质纤维化、骨骼肌萎缩及PKC/ERK信号通路的影响 被引量:1
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作者 王世卫 马民凯 +2 位作者 韩佳 耿兴华 党伟 《中国中西医结合肾病杂志》 2023年第5期422-425,I0005,共5页
目的:探讨健脾补肾活血化瘀法联合隔药饼灸对CRF大鼠肾间质纤维化、骨骼肌萎缩及PKC/ERK信号通路的影响。方法:将大鼠分为sham组、CRF组、饼灸组、药物组及联合组,均10只,饼灸组大鼠采用隔药饼灸治疗,药物组大鼠灌胃健脾补肾活血化瘀方... 目的:探讨健脾补肾活血化瘀法联合隔药饼灸对CRF大鼠肾间质纤维化、骨骼肌萎缩及PKC/ERK信号通路的影响。方法:将大鼠分为sham组、CRF组、饼灸组、药物组及联合组,均10只,饼灸组大鼠采用隔药饼灸治疗,药物组大鼠灌胃健脾补肾活血化瘀方,联合组大鼠采用饼灸组联合药物组治疗方法,检测各组大鼠肾功能;Masson染色观察肾组织纤维化程度;HE染色观察骨骼肌组织病理及萎缩面积;免疫荧光检测肾组织Ⅰ型胶原蛋白;免疫印迹检测各组大鼠肾组织PKC-α、ERK1蛋白水平。结果:CRF组肾功能指标Cr、BUN和UP24 h升高,与Sham组存在差异(P<0.05),饼炙组Cr、BUN和UP24 h降低,与CRF组肾存在差异(P<0.05),药物组和饼炙组上述指标比较无差异(P<0.05),与饼炙组相比,联合组Cr、BUN和UP24 h降低(P>0.05);sham组、CRF组、饼炙组、药物组及联合组大鼠肌纤维横截面积分别为(952.22±50.30)mm^(2)、(486.10±20.15)mm^(2)、(566.18±25.20)mm^(2)、(559.50±30.05)mm^(2)及(641.32±41.59)mm^(2),组间比较存在差异(P<0.05);sham组、CRF组、饼炙组、药物组及联合组大鼠肾组织Ⅰ型胶原蛋白分别为0.31±0.05、0.66±0.08、0.54±0.04、0.52±0.07及0.43±0.03,组间比较存在差异(P<0.05);与sham组相比,CRF组Ⅰ型PKC-α及ERK1蛋白升高(P<0.05),与CRF组相比,饼炙组PKC-α及ERK1蛋白降低(P<0.05),饼炙组与药物组无意义(P>0.05),与药物组相比,联合组PKC-α及ERK1蛋白降低(P<0.05)。结论:慢性肾衰竭大鼠采用健脾补肾活血化瘀法联合隔药饼灸治疗可以显著提高肾脏功能、减少肾脏间质纤维化,改善骨骼肌萎缩,研究机制可能与抑制PKC-α及ERK1蛋白表达相关。 展开更多
关键词 慢性肾衰竭 健脾补肾活血化瘀 隔药饼灸 骨骼肌萎缩 pkc/ERK 肾纤维化
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斑蝥素经PI3K/Akt/PKC通路对血小板功能的调控作用
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作者 郭芳 田晓云 +5 位作者 熊秀琴 袁兆伟 张力 袁语静 刘涛 刘刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1248-1255,共8页
目的 探讨斑蝥素(Cantharidin,CTD)对血小板功能的影响和抗血小板聚集的作用机制。方法 采集健康志愿者静脉血,提取洗涤血小板,聚集仪检测CTD(2.5、5、10μmol·L^(-1))对胶原、凝血酶、ADP和佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetat... 目的 探讨斑蝥素(Cantharidin,CTD)对血小板功能的影响和抗血小板聚集的作用机制。方法 采集健康志愿者静脉血,提取洗涤血小板,聚集仪检测CTD(2.5、5、10μmol·L^(-1))对胶原、凝血酶、ADP和佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA,PKC激动剂)诱导的血小板聚集,和对ATP释放的影响。荧光显微镜拍照观察CTD对纤维蛋白原表面的血小板扩展功能和对血小板斑块回缩的影响。检测CTD联用740Y-P(PI3K特异性激动剂)对胶原诱导血小板的聚集率,Western blot检测PI3K蛋白磷酸化水平。小鼠腹腔注射CTD(0.35、0.7 mg·kg^(-1))和阿司匹林(30 mg·kg^(-1)),观察胶原诱导各组离体血小板聚集率,检测PI3K、Akt和PKC蛋白磷酸化水平,检测凝血指标凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和小鼠断尾流血时间。结果 CTD抑制胶原、凝血酶和PMA诱导的血小板聚集和抑制ATP释放,对ADP诱导的血小板聚集无影响,CTD抑制血小板扩展和斑块回缩,740Y-P处理能够减弱CTD对胶原诱导的血小板聚集的抑制作用。CTD抑制离体血小板聚集功能和PI3K、Akt和PKC磷酸化水平,延长APTT和小鼠尾巴出血时间。结论 CTD抑制血小板聚集、释放、扩展、斑块回缩和影响止血功能,其机制与调控PI3K、Akt和PKC蛋白磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 斑蝥素 血小板聚集 斑块回缩 抗血小板药 PI3K/AKT pkc通路
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Wenjing Zhitong recipe exhibits potential anti-primary dysmenorrhea properties by inhibiting COX2 and PKC signaling pathway in rats induced by estradiol benzoate and oxytocin
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作者 Jialin Li Xiaoyao Liu +7 位作者 Mei Jiang Yantong Xu Chunguo Wang Yujie Hu Song Yang Jian Gao Weiling Wang Ting Wang 《Journal of Traditional Chinese Medical Sciences》 CAS 2023年第3期296-309,共14页
Objective:To explore the effect and mechanism of action of the Wenjing Zhitong recipe(WZR)in primary dysmenorrhea(PD)treatment.Methods:Uterine contractions were induced by estradiol benzoate and oxytocin in a PD model... Objective:To explore the effect and mechanism of action of the Wenjing Zhitong recipe(WZR)in primary dysmenorrhea(PD)treatment.Methods:Uterine contractions were induced by estradiol benzoate and oxytocin in a PD model and WZR was administrated.The rate of change in uterine contractility and the writhing test were used to evaluate the effects of WZR.The serum levels of prostaglandin F_(2a)(PGF_(2a))and prostaglandin E_2(PGE_2),and the activity of cyclooxygenase-2(COX2)were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The changes in phosphor-phospholipase C(pPLC/PLC),phosphor-protein kinase C(pPKC/PKC),and connexin 43(CX43)expression were detected using immunohistochemistry and western blot.Results:WZR significantly reduced the rate of change in uterine contractility and writhing times in the PD model.WZR treatment inhibited the enzymatic activity of COX2 and reduced the levels of PGF_(2a),PGF_(2a)/PGE2and COX2 in the PD model.WZR also significantly reduced the expression of pPLC/PLC,pPKC/PKC and CX43.Targeting the inhibition of COX2 activity,caffeic acid and 1-acetyl-β-carboline were validated as the active ingredients in WZR responsible for reducing uterine contractions.Conclusion:WZR attenuated PD by inhibiting COX2 activity,downregulating PGF_(2a)/PGE_2 expression,and inhibiting the PKC signaling pathway. 展开更多
关键词 Wenjing zhitong recipe Primary dysmenorrhea Network pharmacology PGF2a pkc system
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