地黄水提液对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗及resistin基因mRNA和蛋白表达的影响

目的:探讨中药地黄水提液对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和resistin基因表达的影响。方法:Wistar大鼠喂以高热量饲料加链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组、2型糖尿病模型组、地黄高、中、低剂量治疗组。8周后,以RT-PCR法检测大网膜脂肪组织resistin基因mRNA的表达,以SDS-PAGE检测其蛋白的表达。同时观察空腹血糖、空腹血胰岛素、血脂的含量和胰岛素抵抗指数的变化,研究不同剂量地黄水提液对上述各指标的影响。结果:地黄治疗组大鼠较模型组大鼠resistin基因mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。各治疗组FPG,FINS,TG,LDL,CH的含量及IR显著降低(P<0.05),而HDL则显著升高(P<0.05)。结论:地黄水提液通过抑制脂肪组织抵抗素基因的表达,降低血胰岛素抵抗水平、改善脂代谢紊乱,从而降低2型糖尿病大鼠血糖。

Resistin基因在肥胖易感大鼠与肥胖抗性大鼠脂肪组织中表达差异的研究

目的探讨高脂饮食诱导下肥胖易感(Obesity鄄prone,OP)大鼠与肥胖抗性(Obesity鄄resistance,OR)大鼠白色脂肪组织中Resistin基因mRNA表达的差异。方法25只雄性SD大鼠,以高脂高能量鼠料饲养2周后,按体重增值大小分组,增重最多9只为OP组,增重最少9只为OR组,余7只为正常对照组(C组),OP、OR大鼠继续饲以高脂高能量鼠料4周,对照组改饲标准鼠料。观察各大鼠体重变化、脂肪组织湿重、血脂、血糖、血清胰岛素等,并采用NorthernBlot技术分析脂肪组织中Resistin基因的mRNA表达水平。结果①高脂高能量鼠料诱导下,OP组大鼠体重、附睾周围及腹膜后脂肪组织湿重明显高于C组,OR组则显著低于C组,但各组间血脂、血糖、血清胰岛素水平并无显著差异(P>0.05);②OP组大鼠附睾周围和腹膜后脂肪组织中ResistinmRNA表达水平均显著高于C组与OR组,OR组则低于C组,且附睾周围脂肪组织中ResistinmRNA表达水平显著高于腹膜后脂肪组织。结论OP与OR大鼠外周脂肪组织存在Resistin基因mRNA表达的差异,其差异与大鼠发生肥胖的易感程度有关。

中国汉族人群resistin基因5′调控区与2型糖尿病的关系

目的 分析resistin基因 5′调控区单核苷酸多态性 (SNPs)与 2型糖尿病的关系。方法 对 30名 2型糖尿病患者及 30名非糖尿病对照者resistin基因 5′调控区进行测序分析 (所有受试者均为中国汉族人群 )。采用 χ2 检验比较两组间SNPs的差异。结果 共检测出 4个SNPs多态位点 ,分别为g .- 6 38G >A(0 .14 17)、g.- 5 37A >C(0 .0 6 6 7)、g .- 4 2 0C >G(0 .30 83)、g . 35 8G >A(0 .14 17)。统计显示 2型糖尿病患者与对照组之间各SNPs等位基因频率无显著性差异。结论 在中国汉族人群resistin基因 5′调控区多态位点与

resistin在妊娠期糖尿病患者胎盘组织的表达及意义

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘组织抵抗素(resistin)的表达及在妊娠期糖尿病发病过程中的意义。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)检测18例妊娠期糖尿病患者(妊娠期糖尿病组)和18例正常晚期妊娠妇女(正常对照组)胎盘组织resistin mRNA和resistin蛋白的表达,同时检测体重指数(BMI)、空腹血糖水平(FPG)、空腹胰岛素水平(FINS)、血脂水平和胰岛素抵抗指数(HO- MA-IR)。结果:(1)GDM组甘油三酯(TG)、FPG、FINS及HOMA-IR的水平明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);(2)两组胎盘组织中均可检测到resistin mRNA和resistin蛋白表达。GDM组的resistin mRNA表达水平及蛋白表达水平均高于对照组(P<0.01,P<0.05);(3)GDM组HOMA-IR水平与胎盘组织resistin mRNA表达水平(r=0.621,P<0.05)、resistin蛋白表达水平(r=0.739,P<0.01)及TG(r=0.786,P<0.01)呈正相关;GDM组TG水平与胎盘组织resistin mRNA表达水平(r=0.592,P<0.05)、resistin蛋白表达水平(r=0.546,P<0.05)呈正相关。正常妊娠组则无相关性。结论:胎盘组织分泌的resistin与GDM胰岛素抵抗密切相关,胎盘resistin表达异常可能参与了GDM的发病过程。

脂源性分泌因子leptin、resistin、adiponectin、visfatin mRNA在子痫前期患者胎盘组织中表达及意义

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中脂源性分泌因子瘦素(leptin)、抵抗素(resistin)、脂联素(adiponectin)、内脂素(visfatin)mRNA表达水平及其意义。方法:采用RT-PCR方法测定36例正常足月妊娠妇女(A组)、24例轻度子痫前期患者(B组)和17例重度子痫前期患者(C组)胎盘组织中脂源性分泌因子leptin、resistin、adiponectin、visfatin mRNA表达水平。结果:①C组leptin、resistin mRNA表达水平分别为1.361±0.261、1.515±0.177,显著高于B组的0.898±0.201、1.055±0.113和A组的0.559±0.175、0.508±0.119(P<0.05);②C组adiponectin mRNA表达水平为0.222±0.115,显著低于B组的0.776±0.176和A组的1.422±0.193(P<0.05);③C组visfatin基因mRNA表达水平为0.253±0.119,显著低于B组的1.298±0.193和A组的1.308±0.208(P<0.05),B组与A组比较无显著差异(P>0.05)。结论:脂源性分泌因子leptin、resistin、adiponectin、visfatin在子痫前期的发病中有重要作用,可能参与了胰岛素抵抗的病理生理过程。

枸杞多糖对2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠resistin基因表达的影响

观察枸杞多糖(LBP)对高脂膳食加链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病(2-DM)大鼠胰岛素抵抗指数及肾周脂肪组织抵抗素(resistin)基因表达的影响。选用高脂饲料加STZ建立2-DM胰岛素抵抗大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型对照组、罗格列酮组和LBP高、中、低剂量组(80mg/kg、40mg/kg、20mg/kg),每组各10只,另选10只大鼠为正常对照组。各组灌胃8周后,空腹取材,RT-PCR法检测肾周脂肪组织resistin基因mRNA水平,放射免疫法测定空腹胰岛素并计算胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)。结果表明,与模型组比较,罗格列酮组及LBP各剂量组均能显著降低2-DM大鼠肾周脂肪组织resistin基因mRNA表达,降低IRI。说明LBP具有改善2-DM大鼠胰岛素抵抗的作用。

急性心肌梗死、不稳定性心绞痛和原发性高血压患者血浆Resistin的含量变化

目的 :Resistin是新发现的富含半胱氨酸的分泌性蛋白家族成员之一 ,且已被证实是将肥胖和 2型糖尿病联系在一起的激素。新近发现Resistin可能与肥胖的代谢性疾病及其心血管并发症有关 ,并将中心性肥胖与 2型糖尿病和 /或心血管疾病联系在一起。本实验研究Resistin与心血管疾病如心肌梗死、不稳定性心绞痛和高血压等的关系以及在这些心血管疾病中的变化。方法 :使用酶联免疫分析法检测血浆中Resistin含量 (ng/ml)。结果 :Resistin在血浆中的平均浓度为 (2 3 89± 3 31 )ng/ml,其中男性为 (2 2 5 8± 2 4 0 )ng/ml,女性为 (2 5 1 0± 3 6 5 )ng/ml。在心血管疾病如心肌梗死、不稳定性心绞痛和高血压时Resistin的含量均有显著下降 ,分别为 6 6 % (p <0 0 1 ) ,73% (p <0 0 1 )和 1 4 % (p <0 0 5 )。 结论 :Resistin与多种心血管疾病如心肌梗死、不稳定性心绞痛和高血压均有显著相关性。在这些心血管疾病中Resistin含量明显降低 。

人和小鼠resistin基因的克隆与序列测定

构建人和小鼠resistin基因cDNA克隆,并进行序列分析,为进一步进行resistin表达和生物学活性研究奠定基础。用RT-PCR方法扩增人和小鼠resistin基因cDNA,获得的片段连接至pGEM-T载体,转化大肠杆菌JM109,并经过酶切鉴定和序列测定。结果成功地构建了人和小鼠resistin基因cDNA克隆,人和小鼠resistin的氨基酸序列具有共同的结构特征CX28CX12CX8CXCX3CX10CXCXCX9CC,克隆的人resistincDNA在编码序列第133位的A被T代替,导致45位密码子编码的丝氨酸由半胱氨酸代替;小鼠resistincDNA在第16位的T被C取代,导致第6位密码子编码的苯丙氨酸改变为亮氨酸。密码子发生改变的生物学意义还有待于进一步研究。

Resistin结合多肽对胰岛β细胞株RINm5F分泌功能的影响(英文)

目的先前研究已显示resistin结合多肽(RBP)能拮抗resistin对脂肪细胞脂质代谢和内分泌功能的调节作用。本研究试图阐明RBP对胰岛β细胞株RINm5F分泌功能的影响。方法以不同水平RBP(10-10,10-11,10-12mol/L)与RINm5F共培养30min、60min、2h后取上清,ELISA法测其胰岛素,RT-PCR法检测细胞中葡萄糖转运子2(GLUT2)mRNA表达水平,Western blotting法检测细胞中GLUT2的蛋白水平,并采用FURA-3/AM钙荧光染色法检测胰岛素分泌的重要启动因素:细胞内钙水平。结果RBP在10-12mol/L时干预2h,不影响胰岛β细胞株RINm5F的细胞活性,但能显著刺激胰岛素分泌。RBP为10-12mol/L时干预2h,细胞内钙明显增多。在Resistin刺激下,GLUT2mRNA水平和蛋白水平均显著上调。结论RBP能促进RINm5F细胞株胰岛素的分泌,其可能机制是RBP上调了GLUT2的表达,进而增加了细胞内钙的水平,最终导致胰岛素分泌增加。

从ICR小鼠脂肪组织对resistin基因的扩增

目的 PCR扩增ICR小鼠脂肪组织的resistin基因,为进一步在ICR小鼠中开展resistin的相关研究提供必要的基础。方法在脂肪组织中抽提总RNA,用RT-PCR进行resistin基因的体外扩增,经电泳检测和测序后用DNAMAN软件进行碱基序列分析。结果抽提的总RNA完整性较好,RT-PCR产物电泳检测获得了363 bp的目的条带,双向测序的碱基峰值图均一,所扩增片段的序列与GenBank报道的小鼠resistin序列有93.8%的同源性,说明获得的基因片段是ICR小鼠的resistin基因。结论在体外成功扩增了ICR小鼠脂肪组织的resistin基因,可为在ICR小鼠中开展resistin基因生物功能等的研究奠定基础。

血清AAT、RANTES、Resistin水平与大动脉粥样硬化型急性缺血性卒中患者病情及预后的关系研究

目的探讨血清α-1抗胰蛋白酶(AAT)、受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、抵抗素(Resistin)水平与大动脉粥样硬化(LAA)型急性缺血性卒中(AIS)患者病情及预后的关系。方法选取2022年1月—2023年1月延安大学咸阳医院神经内科收治的LAA型AIS患者159例纳入AIS组,根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度亚组31例,中度亚组72例,重度亚组56例,另选取同期医院体检健康志愿者84例纳入健康对照组。随访90 d后,根据改良Rankin量表评分将LAA型AIS患者分为预后不良亚组61例和预后良好亚组98例。多因素Logistic回归分析LAA型AIS患者预后影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清AAT、RANTES、Resistin水平预测LAA型AIS患者预后的价值。结果与健康对照组比较,AIS组血清AAT、RANTES、Resistin水平升高(t/P=16.897/<0.001、20.334/<0.001、17.775/<0.001);血清AAT、RANTES、Resistin水平在轻度亚组、中度亚组、重度亚组中依次升高(F/P=146.195/<0.001、192.910/<0.001、194.396/<0.001)。随访90 d,LAA型AIS患者159例预后不良发生率为38.36%(61/159)。影响LAA型AIS患者预后的独立危险因素为年龄增加、合并糖尿病、入院时NIHSS评分增加、AAT升高、RANTES升高、Resistin升高[OR(95%CI)=1.078(1.019~1.141)、2.774(1.010~7.622)、1.106(1.054~1.160)、1.597(1.057~2.414)、1.136(1.059~1.219)、1.097(1.035~1.163)];血清AAT、RANTES、Resistin水平及三者联合预测LAA型AIS患者预后不良的ROC曲线下面积分别为0.769、0.771、0.766、0.897,三者联合的曲线下面积大于单独预测(Z/P=3.484/0.001、3.416/0.001、3.230/0.001)。结论LAA型AIS患者血清AAT、RANTES、Resistin水平升高与病情加重和预后不良密切相关,血清AAT、RANTES、Resistin水平联合预测LAA型AIS患者预后不良的价值较高。

西洋参活性部位对胰岛素抵抗大鼠resistin基因mRNA表达的影响

目的:观察西洋参治疗胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)大鼠活性部位对Resistin基因表达的影响。方法:通过早期药效学试验证明,西洋参根部60%洗脱部分和30%洗脱部分为有效部位。本实验采用高脂饲料喂养加链脲佐菌素法复制IR大鼠(SD)的动物模型,造模成功后,将大鼠随机分为模型组、罗格列酮组、西洋参60%洗脱组、西洋参30%洗脱组。给药4周后,以RT-PCR法检测附睾周围白色脂肪组织中Resistin-mRNA的表达。结果:与模型组比较,各给药组大鼠脂肪组织中Resistin基因mRNA的表达均降低,其中以西洋参60%洗脱组作用最强,与模型组比较有极显著差异(P<0.01),西洋参30%洗脱组和罗格列酮组与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论:西洋参可降低IR大鼠脂肪组织中Resistin基因的表达;西洋参60%洗脱部位降低Resistin基因表达的作用最明显。

Resistin基因对TNF-α诱导血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:研究抵抗素(resistin)基因对TNF-α诱导血管内皮细胞ECV304表达细胞间黏附分子1(ICAM-1)的影响。方法:应用分子生物学技术,将resistin基因克隆到载体pEGFP-C1中构建质粒pEG/Resi,脂质体转染ECV304,转染6h加入20μg/LTNF-α诱导,用RT-PCR方法分别检测转染18、30、42和54h时resistin和ICAM-1 mRNA表达;同时用免疫印迹法检测resistin蛋白的表达,并用ELISA方法检测各期ECV304上清ICAM-1蛋白表达。结果:经酶切鉴定和测序证实质粒pEG/Resi构建成功并可在ECV304中表达;相同TNF-α诱导条件下转染resistin基因组的ICAM-1表达水平始终高于未转染组,在resistin基因表达高峰(30和42h)ICAM-1 mRNA和蛋白表达量较未转染组均显著升高(P<0.05);且ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平均随resistin基因表达量的增加而升高。结论:Resistin基因能够增强TNF-α诱导ECV304细胞表达ICAM-1。

Resistin基因在3T3-L1前体脂肪细胞诱导分化过程中表达水平的变化

目的:观察Resistin基因在3T3-L1脂肪细胞诱导分化过程中不同时段表达水平的变化,探讨Resistin基因与脂肪细胞分化、脂质积聚之间的关系。方法:体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,在诱导其向成熟脂肪细胞分化的不同时段(第0￣10天),采用RT-PCR技术检测脂肪细胞中Resistin基因mRNA的表达水平。结果:①Resistin基因在3T3-L1前体脂肪细胞诱导分化初期(第0￣2天)不表达,分化第3天开始表达,分化第4￣6天Resistin基因的表达显著上调,分化第6￣10天Resistin基因的表达保持在较高水平并趋于稳定;②Resistin基因的表达水平除在诱导分化第3￣4天、第6￣10天内差异无显著性(P>0.05)外,其余各时段间表达水平差异均有显著性(P<0.01)。结论:Resistin基因可能参与了脂肪细胞分化的中晚期过程,在3T3-L1脂肪细胞分化过程中表达逐渐上调,其表达变化与脂肪细胞分化、脂质积聚过程相一致。

运动时间诱导大鼠Resistin表达差异的研究

以观察不同运动持续时间对大鼠Resistin蛋白表达的影响为主要研究目的,经2型糖尿病大鼠建模后,将62只正常及糖尿病大鼠分为6组:正常对照组,糖尿病对照组和糖尿病运动4组(20、40、60和80分钟组)。在运动组大鼠进行一次中等强度的跑台运动后,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测大鼠蛋白的表达情况。与糖尿病对照组相比表明各运动组Resistin蛋白含量显著下降(P<0.01);与20分钟和40分钟组相比,60分钟组下降的幅度具有显著性差异(P<0.01和P<0.05)。由此得出结论:持续运动达60分钟的中等强度运动对Resistin蛋白表达的影响好于其他运动时间。

肝脏Resistin与DM非酒精性脂肪肝大鼠糖脂代谢的发生机制及中药干预的作用研究

目的:探讨糖肝康对糖尿病脂肪肝模型大鼠肝组织抵抗素(Resistin)表达的影响机制。方法:采用链脲佐菌素联合高脂饮复制糖尿病脂肪肝大鼠模型,成模后随机分为模型组、护肝宁组和糖肝康小、中、大剂量组,每组10只,另取10只正常大鼠作为空白组,分别给予相应药物干预,12周后Western Blot方法检测大鼠肝组织Resistin的表达。结果:与空白组比较,模型组肝组织Resistin表达明显减少(P<0.01);与模型组比较,各给药组肝组织Resistin表达明显增加(P<0.01),糖肝康中、大剂量组优于护肝宁组(P<0.01)。结论:糖肝康可能通过增加Resistin表达水平,改善肝脏代谢进而保护肝脏。

Resistin基因3’非翻译区ATG序列多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的研究resistin基因3'-非翻译区ATG重复序列在2型糖尿病(T2DM)患者及正常血糖人群中的多态性分布,探讨此重复序列与T2DM的相关性。方法选取东北地区汉族T2DM患者243例,正常对照110例,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法初筛基因后,进行DNA直接测序。结果在353例受试者中,检测到resistin基因3’非翻译区ATG重复序列有3种基因型,表现为T2DM患者中a型ATG序列重复6次,共有220例,频率为90．5％;b型ATG序列重复8次,共有10例,频率为4．1％;c型ATG序列重复7次,共有13例,频率为5．4％。在110例正常人中均表现为重复6次的a型ATG序列,不存在b型及c型的基因型。结论Resistin基因3’非翻译区ATG序列在T2DM患者及正常人群中的多态性分布存在差异,其多态性分布与T2DM的易感性相关,可能是东北地区汉族人群发生T2DM的一个重要的相关因素。

miR-625通过负向调控Resistin的表达抑制非小细胞肺癌细胞的恶性生物学行为及其机制

目的:探究miR-625和Resistin对NSCLC细胞增殖、侵袭、迁移及裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的机制。方法:qPCR实验检测80例NSCLC及癌旁组织(标本收集自2018年3月至2019年10月于新疆维吾尔自治区人民医院手术治疗的NSCLC患者)和4种细胞系中miR-625与Resistin的表达,生物信息学预测两者的靶向关系并用双荧光素酶基因报告实验进行验证;通过脂质体转染技术在NSCLC细胞中过表达或抑制miR-625及Resistin表达,实验分为miR-625 mimic组、miR-625 inhibitor组、si-Resisitin组、miR-625 inhibitor+si-Resisitin组和NC组,利用CCK-8、Transwell及划痕实验检测miR-625与Resistin对NSCLC细胞增殖、侵袭及迁移的影响,Western blotting实验检测两者对NSCLC细胞中EMT相关的PI3K/AKT/Snail通路蛋白表达的影响,裸鼠成瘤实验观察两者对A549细胞移植瘤生长的影响。结果:miR-625在NSCLC组织和4种细胞系中呈低表达、Resistin呈高表达(均P<0.01),两者表达水平呈负相关(r=-0.7183,P<0.01),且Resistin的表达与NSCLC分化程度、临床分期及淋巴结转移相关。Resistin是miR-625的靶基因。在NSCLC细胞系A549和H226的增殖、侵袭、迁移能力及裸鼠移植瘤的生长方面,与Blank组和NC组相比,miR-625 mimic组与si-Resistin组能力均显著降低(均P<0.05),miR-625 inhibitor组显著提高(均P<0.05);miR-625 inhibitor+si-Resistin组显著低于miR-625 inhibitor组(均P<0.05);NC组与miR-625 inhibitor+si-Resistin组之间无显著差异(均P>0.05);p-AKT、p-PI3K、Snail、Twist1、Vimentin等蛋白表达变化也有相同的趋势(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达则发生相反的改变(P<0.05)。结论:miR-625在NSCLC组织和细胞中均呈低表达,其能负向调控Resistin表达从而抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移及裸鼠移植瘤生长,其机制可能与PI3K/AKT/Snail信号通路有关。