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Combination of low-concentration of novel phytoestrogen(8,9)-furanyl-pterocarpan-3-ol from Pachyrhizus erosus attenuated tamoxifen-associated growth inhibition on breast cancer T47D cells
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作者 Arief Nurrochmad Endang Lukitaningsih +2 位作者 Ameilinda Monikawati Dita Brenna Septhea Edy Meiyanto 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2013年第11期847-852,共6页
Objective:To investigate the estrogenic effect of(8,9)-furanyl-pterocarpan-3-ol(FPC)on growth of human breast cancer T47D cells and the interactions between the FPC and tamoxifen(TAM),on the growth of estrogen recepto... Objective:To investigate the estrogenic effect of(8,9)-furanyl-pterocarpan-3-ol(FPC)on growth of human breast cancer T47D cells and the interactions between the FPC and tamoxifen(TAM),on the growth of estrogen receptor-dependent breast cancer T47D cells.Methods:The proliferation effect of FPC were conducted on T47D cells in vitro by MTT test.T47D cells were treated with FPC alone(0.01-200μmol/L)or in combination with TAM 20 nmol/L.Furthermore,the expression of ERαor c-Myc were also determined by immunohistochemistry.Results:The results indicated that administration of an anti-estrogen TAM showed growth inhibitory effect on T47D cells,wheraes co-administered with low concentration(less than 1μmol/L)of FPC attenuated to promote cell proliferation.In contrast,the combination of TAM with higher doses(more than 20μmol/L)of FPC showed growth inhibitory.This result was supported by immunocytochemistry studies that the administration of 20 nmol/L TAM down-regulated ER-αand c-Myc,but the combination of 20 nmol/L TAM and 1μmol/L FPC robustly up-regulated expression of ER-α.Thus,the reduced growth inhibition of TAM 20 nmol/L by FPC 1μmol/L on T47D cells may act via the modulation of ER-α.Conclusions:The findings indicate and suggest that FPC had estrogenic activity at low concentrations and anti-estrogenic effect that are likely to be regulated by c-Myc and estrogen receptors.We also confirm that low concentration of FPC attenuated the growth-inhibitory effects of TAM on mammary tumor prevention.Therefore,the present study suggests that caution is warranted regarding the consumption of dietary FPC by breast cancer patients while on TMA therapy. 展开更多
关键词 PHYTOESTROGEN (8 9)-furanyl-pterocarpan-3-ol Tamoxifen Estrogenic effect t47d cellS
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Cytotoxicity study of ethanol extract of the stem bark of asam kandis (Garcinia cowa Roxb.) on T47D breast cancer cell line 被引量:1
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作者 Elidahanum Husni Faras Nahari +2 位作者 Yan Wirasti Fatma Sri Wahyuni Dachriyanus 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2015年第3期249-252,共4页
Objective:To investigate the cytotoxic effect of ethanol extract of the stem bark of asam kandis[Garcinia cowa Roxb.(G.cowa)]on T47 D breast cancer cell line.Methods:The cytotoxicity of ethanol extract was carried out... Objective:To investigate the cytotoxic effect of ethanol extract of the stem bark of asam kandis[Garcinia cowa Roxb.(G.cowa)]on T47 D breast cancer cell line.Methods:The cytotoxicity of ethanol extract was carried out against human breast cancer cell line(T47D) by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide colorimetric assay.The extract was added at various concentrations(0.1.1,10 and 100 μg/mL).The level of cytotoxicity was determined by calculating the level of IC_(50),that was based on the percentage of the cell death after 24 h treatment with the extract.Cell morphological changes were observed by using inverted microscope.Results:The 3-(4.5-dimelhylthiazol-2-yl)-2.5-diphenyltelrazolium bromide assay showed that ethanol extract of G.cowa exhibited significant cytotoxic effect on T47 D with IC_(50) value of(5.10+1.68) μg/mL.Morphological alteration of the cell lines after exposure to ethanol extract of G.cowa was observed under phase contrast microscope in a dosc-dependent manner.ConclusionsThe results suggest the possible use of ethanol extract of asam kandis for preparing herbal medicine for cancer-related ailments. 展开更多
关键词 GARCINIA cowa Roxb CYTOTOXICITY t47d BREAST CANCER cell LINE
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Combinational effects of hexane insoluble fraction of Ficus septica Burm.F.and doxorubicin chemotherapy on T47D breast cancer cells
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作者 Agung Endro Nugroho Adam Hermawan +2 位作者 Dyaningtyas Dewi Pamungkas Putri Anindya Novika Edy Meiyanto 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2013年第4期297-302,共6页
Objective:To evaluate the effects of n-hexane insoluble fraction(HIF)of Ficus septica leaves in combination with doxorubicin on cytotoxicity,cell cycle and apoptosis induction of breast cancer T47D cell lines.Methods:... Objective:To evaluate the effects of n-hexane insoluble fraction(HIF)of Ficus septica leaves in combination with doxorubicin on cytotoxicity,cell cycle and apoptosis induction of breast cancer T47D cell lines.Methods:The in vitro drugs-stimulated cytotoxic effects were determined using MTT assay.Analysis of cell cycle distribution was performed using flowcytometer and the data was analyzed using ModFit LT 3.0 program.Apoptosis assay was earned out by double staining method using ethydium bromide-acridin orange.The expression of cleaved-poly(ADP-ribose)polymerase(PARP)on T47D cell lines was identified using immunocytochemistry.Results:The combination exhibited higher inhibitory effect on cell growth than the single treatment of doxorubicin in T47D cells.In addition,combination of doxorubicin and HIF increased the incidence of cells undergoing apoptosis.HIF could improve doxorubicin cytotoxic effect by changing the accumulation of cell cycle phase from G_2/M to G_1 phase.The combination also exhibited upregulation of cleaved-PARP in T47D cells.Conclusions:Based on this results,HIF is potential to be developed as co-chemotherapeutic agent for breast cancer by inducing apoptosis and cell cycle arrest.However,the molecular mechanism need to be explored further. 展开更多
关键词 FICUS septica Burm.F. Cancer t47d cells Cytotoxic
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丹参酮ⅡA抗乳腺癌T47D细胞增殖的GPER途径研究 被引量:13
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作者 赵丕文 臧金凤 +2 位作者 陶仕英 陈梦 牛建昭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1458-1462,共5页
目的利用经典雌激素受体(estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA(TanshinoneIIA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPE... 目的利用经典雌激素受体(estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA(TanshinoneIIA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPER激动剂G1和GPER拮抗剂G15为工具药干预,并应用GPERSiRNA转染构建GPER基因沉默的T47D细胞,利用MTT细胞增殖实验观察丹参酮IIA对T47D细胞增殖速率的影响及GPER的介导作用.利用Westernblot方法检测丹参酮IIA对T47D细胞GPER表达情况的影响.结果1×10^-5 mol·L^-1 ~1×10^-7 mol·L^-1丹参酮IIA能够明显抑制T47D细胞增殖,且该抑制作用可被G1拮抗,可被G15增强.丹参酮IIA作用于GPER基因沉默的T47D细胞,该细胞表现出更为明显的生长抑制效应.West-ernblot测定结果表明,1×10^-5 mol·L^-1和1×10^-6 mol·L^-1丹参酮IIA可使T47D细胞GPER蛋白表达明显降低.结论丹参酮IIA具有抑制乳腺癌T47D细胞增殖的作用,该抑制作用可经GPER途径介导;且丹参酮IIA具有对靶细胞GPER表达的调节功能. 展开更多
关键词 丹参酮IIA 乳腺癌 t47d细胞 细胞增殖 G蛋白偶联雌激素受体 雌激素受体 基因沉默
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刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响 被引量:8
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作者 司玲玲 马俊 +3 位作者 任欢欢 任博雪 李德芳 郑秋生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期260-267,共8页
目的研究刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探究刺槐素雌激素样作用的主要介导受体。方法磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期的变化,q PCR检测雌激素受体-α(ERα)、雌激素受体-β(ERβ)、细胞增殖抗原标记物(Ki67... 目的研究刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探究刺槐素雌激素样作用的主要介导受体。方法磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期的变化,q PCR检测雌激素受体-α(ERα)、雌激素受体-β(ERβ)、细胞增殖抗原标记物(Ki67)mRNA表达,Western blot法检测ERα、ERβ蛋白表达。结果刺槐素浓度为0.001~10μmol·L^(-1),能促进T47D细胞增殖,使S和G_2/M期的细胞比例明显增加,增殖指数升高,同时增加Ki67 mRNA的表达,此作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780所拮抗。刺槐素及17β-雌二醇(E2)均可上调ERα和ERβ的表达,刺槐素联合ERα受体拮抗剂(MPP)可逆转刺槐素的促增殖作用,使S和G_2/M期的细胞比例明显降低,减少Ki67mRNA的表达;但刺槐素联合ERβ受体拮抗剂(PHTPP)处理虽可抑制细胞增殖效应,使S和G_2/M期的细胞比例降低,减少Ki67 mRNA的表达,但作用不明显。结论刺槐素具有雌激素样作用,在0.001~10μmol·L^(-1)浓度范围内,可通过调节ERα受体表达来促进T47D细胞的增殖。 展开更多
关键词 刺槐素 雌激素 t47d细胞 雌激素Α受体 雌激素Β受体 雌激素样作用 细胞增殖
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线粒体融合蛋白-2基因增强人乳腺癌T47D细胞对小白菊内酯的敏感性 被引量:3
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作者 邱梅清 佟仲生 +2 位作者 贾勇圣 刘晓东 陈悦 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期37-42,共6页
目的:探讨线粒体融合蛋白-2(mitofusin-2,Mfn-2)基因表达对人乳腺癌T47D细胞对小白菊内酯敏感性的影响。方法:Real-time PCR检测不同乳腺癌细胞系(T47D、MDA-MB-231、MCF-7、MDA-MB-435及HCC38)中Mfn-2 mRNA的表达。LipofectamineTM200... 目的:探讨线粒体融合蛋白-2(mitofusin-2,Mfn-2)基因表达对人乳腺癌T47D细胞对小白菊内酯敏感性的影响。方法:Real-time PCR检测不同乳腺癌细胞系(T47D、MDA-MB-231、MCF-7、MDA-MB-435及HCC38)中Mfn-2 mRNA的表达。LipofectamineTM2000体外转染pEGFP和pEGFP-Mfn-2质粒至人乳腺癌T47D细胞,real-time PCR和Western blotting检测T47D细胞中Mfn-2 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测T47D细胞的增殖,流式细胞术检测T47D细胞凋亡率及线粒体膜电位。结果:与正常乳腺细胞相比,Mfn-2 mRNA在乳腺癌HCC38细胞系中高表达,在T47D等其他细胞系中均低表达。pEGFP-Mfn-2转染48 h后,T47D细胞中Mfn-2 mRNA和蛋白的表达均明显上调。与pEGFP转染组相比,pEGFP-Mfn-2转染组T47D细胞在小白菊内酯(0.05 mol/L)作用下的存活率明显降低[(47.93±2.21)%vs(56.93±2.05)%,P<0.05]。流式细胞术检测结果显示:50 mmol/L小白菊内酯作用下,pEGFP-Mfn-2转染组与pEGFP转染组相比,T47D细胞凋亡率升高[(71.2±2.1)%vs(38.8±2.6)%,P<0.05],而线粒体膜电位明显降低[(1.6±0.1)%vs(5.0±0.5)%,P<0.05]。结论:pEGFP-Mfn-2转染可增强T47D细胞对小白菊内酯的敏感性。 展开更多
关键词 乳腺癌 t47d细胞 线粒体融合蛋白-2 小白菊内酯 敏感性
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黄荆子乙酸乙酯提取物对人乳腺癌T47D细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响 被引量:7
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作者 陈雪莲 姜浩 +2 位作者 曹建国 尹婵 肖集文 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第3期432-435,共4页
目的:研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)对人乳腺癌(T47D)细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响。方法:体外培养T47D细胞,溴化标记尿嘧啶(BrdU)掺入法测定细胞核酸合成的抑制作用;平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖生长能力的抑制作用;人乳腺... 目的:研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)对人乳腺癌(T47D)细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响。方法:体外培养T47D细胞,溴化标记尿嘧啶(BrdU)掺入法测定细胞核酸合成的抑制作用;平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖生长能力的抑制作用;人乳腺癌T47D裸鼠移植瘤模型治疗实验,观察EVn-50在体内对T47D细胞生长抑制作用,HE染色观察乳腺癌组织和细胞形态改变。结果:EVn-50抑制体外培养T47D细胞核酸合成和生长,呈剂量依赖性;EVn-50对裸鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用,呈剂量和时间依赖性;EVn-5080mg/kg实验组对移植瘤的瘤重抑制率为51.4%(P<0.001);镜下观察EVn-5080mg/kg实验组肿瘤组织坏死组织较多,细胞异型性较少。结论:黄荆子乙酸乙酯提取物对人乳腺癌有生长抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 t47d细胞 黄荆子 移植瘤
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化疗药物对高表达SNCG的乳腺癌细胞株T47D的抑制作用的实验研究 被引量:3
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作者 何帮顺 潘玉琴 +3 位作者 瞿卫 立彦 王自正 王书奎 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期821-824,共4页
目的:探讨各种化疗药物对高表达γ突触核蛋白(SNCG)的乳腺癌T47D细胞株的抑制作用。方法:常规培养不表达及高表达SNCG的乳腺癌MCF-7及T47D细胞株,采用MTT法观察顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)、紫杉醇(TAX)... 目的:探讨各种化疗药物对高表达γ突触核蛋白(SNCG)的乳腺癌T47D细胞株的抑制作用。方法:常规培养不表达及高表达SNCG的乳腺癌MCF-7及T47D细胞株,采用MTT法观察顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)、紫杉醇(TAX)、依立替康(CPT-11)对细胞的抑制作用,并用流式细胞术分析药物作用后的细胞周期变化及细胞凋亡。结果:作用60 h后,ADM、VCR、TAX及CPT-11对T47D细胞的抑制作用显著低于MCF-7细胞(P<0.01),而DDP、5-FU对T47D细胞的抑制作用与MCF-7细胞相比差异无显著性(P>0.05),且显著高于其他4种抗肿瘤药物(P<0.01)。药物作用T47D细胞60 h后,DDP、5-FU组的细胞增殖指数(PI)及Caspase-3表达均较对照组及其他4组差异有极显著性(P<0.01)。结论:DDP及5-FU对高表达SNCG的T47D细胞的抑制作用显著高于ADM、VCR、TAX及CPT-11,此可为临床对乳腺癌患者个体化治疗方案的选择提供体外实验依据。 展开更多
关键词 γ突触核蛋白 乳腺癌 t47d细胞 个体化治疗
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β-谷甾醇对T47D细胞增殖和细胞周期的影响及作用机制探讨 被引量:16
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作者 陶仕英 牛建昭 +5 位作者 王继峰 郝庆秀 赵丕文 杨美娟 张丽娟 冒湘琳 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第2期362-366,共5页
目的:观察β-谷甾醇(BSS)对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌T47D细胞的作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察不同浓度BSS对T47D细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测其对T47D细胞... 目的:观察β-谷甾醇(BSS)对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌T47D细胞的作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察不同浓度BSS对T47D细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测其对T47D细胞周期的影响;利用Western-blot和Real-time PCR技术检测其对细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白及m RNA表达的影响。结果:高浓度BSS抑制T47D细胞增殖,使细胞分裂增殖指数降低,且ICI182 780不能完全拮抗其对T47D细胞的增殖抑制作用;低浓度BSS可促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且ICI182 780可完全拮抗其促增殖作用。Western-blot及Real-time PCR结果显示:低浓度BSS可诱导T47D细胞Cyclin D1蛋白和m RNA表达,并且ICI182 780能够抑制此诱导作用。结论:BSS通过ER介导调节Cyclin D1蛋白与m RNA水平的表达,从而影响ER阳性人乳腺癌T47D细胞增殖活性和细胞周期,发挥植物雌激素样作用。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 t47d 细胞周期蛋白D1 细胞增殖 细胞周期 植物雌激素
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miR-1207-5p通过靶向LIMD1调控乳腺癌T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量:1
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作者 杨洁泉 崔猛胜 董文文 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期567-573,共7页
目的:探讨miR-1207-5p对乳腺癌T47D干细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:以IGF-1、EGF、bFGF诱导、富集乳腺癌T47D干细胞并进行成球培养,流式细胞术分离干细胞,采用WB法检测干细胞分子标志物。采用qPCR检测干细胞中miR-12... 目的:探讨miR-1207-5p对乳腺癌T47D干细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:以IGF-1、EGF、bFGF诱导、富集乳腺癌T47D干细胞并进行成球培养,流式细胞术分离干细胞,采用WB法检测干细胞分子标志物。采用qPCR检测干细胞中miR-1207-5p的表达水平,双荧光素酶报告基因实验分析miR-1207-5p和LIMD1的靶向关系。CCK-8、Transwell和划痕实验检测T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭能力。WB法检测干细胞中LIMD1蛋白的表达水平。结果:分离的T47D干细胞能够形成细胞球,细胞球体积随培养天数的增加而增加;干细胞分子标志物ALDH1、ESA和OCT4的表达水平较亲本T47D细胞显著升高(P<0.05或P<0.01),miR-1207-5p在干细胞中高表达(P<0.01)。过表达miR-1207-5p显著促进T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭(均P<0.01),敲降miR-1207-5p显著抑制T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭(均P<0.01)。miR-1207-5p靶向下调LIMD1的表达(P<0.01),miR-1207-5p通过靶向下调LIMD1促进乳腺癌T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01)。结论:miR-1207-5p通过靶向下调LIMD1的表达来促进乳腺癌T47D干细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 乳腺癌 t47d细胞 肿瘤干细胞 miR-1207-5p LIMD1 增殖 迁移 侵袭
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乳癌T47D细胞P物质和NK-1的免疫细胞化学检测 被引量:4
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作者 王继纲 陈桦 《齐鲁医学杂志》 2009年第3期218-220,共3页
目的探讨P物质及其受体神经激肽1(NK-1)在体外培养的乳癌细胞系T47D中的表达及免疫细胞化学定位。方法用放入盖玻片的6孔板进行细胞培养,第3天将盖玻片取出进行免疫细胞化学染色。结果在T47D细胞系中P物质和NK-1呈阳性表达。P物质阳性... 目的探讨P物质及其受体神经激肽1(NK-1)在体外培养的乳癌细胞系T47D中的表达及免疫细胞化学定位。方法用放入盖玻片的6孔板进行细胞培养,第3天将盖玻片取出进行免疫细胞化学染色。结果在T47D细胞系中P物质和NK-1呈阳性表达。P物质阳性表达主要位于胞浆,而NK-1阳性表达主要位于胞膜和胞浆。结论P物质和NK-1在绝大多数T47D细胞中呈阳性表达,提示神经内分泌机制参与了乳癌的发病过程。该研究揭示了T47D细胞系的一种新特性,并为乳癌的治疗提供了新的可能靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 t47d细胞系 P物质 受体 神经激肽1 免疫组织化学
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RUNX3基因真核表达载体的构建及其在乳腺癌T47D细胞中的表达
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作者 姜影 杜金荣 +3 位作者 佟丹丹 娄阁 吴丽华 石岩 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第9期1720-1723,共4页
目的:构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-RUNX3,并在乳腺癌T47D细胞株中表达。方法:应用基因重组技术和限制性内切酶EcoRI和XhoI酶切,构建并鉴定pcDNA3.1(+)-RUNX3真核表达载体,经脂质体Lipofectamine2000介导质粒转染T47D细胞后应用逆转录-... 目的:构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-RUNX3,并在乳腺癌T47D细胞株中表达。方法:应用基因重组技术和限制性内切酶EcoRI和XhoI酶切,构建并鉴定pcDNA3.1(+)-RUNX3真核表达载体,经脂质体Lipofectamine2000介导质粒转染T47D细胞后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot实验,检测RUNX3在T47D细胞中的表达。结果:重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-RUNX3经限制性内切酶EcoRI和XhoI酶切,电泳后显示1.3kb的RUNX3目的片段和5.4kb的pcDNA3.1(+)载体片段。测序证实酶切片段与gene bank中登记的RUNX3序列相同,证实pcDNA3.1(+)-RUNX3真核表达载体构建成功。经RT-PCR和Western blot检测,表明转染pcDNA3.1(+)-RUNX3的T47D细胞RUNX3阳性表达。结论:重组真核表达载体构建正确,并建立稳定表达RUNX3的T47D细胞系,从而为后续研究提供有用的细胞研究模型。 展开更多
关键词 RUNX3基因 t47d细胞 乳腺癌
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莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制研究 被引量:4
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作者 周璐炜 王娟 陈旭 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第5期548-554,共7页
目的研究莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法采用MTT法检测不同剂量莪术醇(0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL)对T47D乳腺癌细胞增殖的抑制作用。以莪术醇(12.5、25、50、100μg/mL)干预T47D乳腺癌细胞后,采用倒置相差显微镜... 目的研究莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法采用MTT法检测不同剂量莪术醇(0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL)对T47D乳腺癌细胞增殖的抑制作用。以莪术醇(12.5、25、50、100μg/mL)干预T47D乳腺癌细胞后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态;采用流式细胞仪检测细胞周期及活性氧(ROS)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期调控因子p21和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的mRNA表达水平;采用Westernblot法检测CDK2、CDK6、细胞周期蛋白D(Cyclin D)、PCNA、核转录因子E2-相关因子(Nrf2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)的蛋白表达水平。另将细胞分为2组,其中一组加入不同剂量莪术醇,另外一组加入33μg/mL莪术醇干预6、12、24、48 h,根据以上2组结果确定最佳氧化时间和给药浓度后,另设空白对照组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(单用ROS抗氧化剂NAC)、莪术醇组(单用莪术醇)、莪术醇联合NAC组(采用ROS抗氧化剂NAC预处理,再加入莪术醇),检测细胞周期及ROS荧光强度。结果莪术醇能使T47D乳腺癌细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05或P<0.01),并呈一定的剂量和时间依赖趋势。莪术醇能将T47D乳腺癌细胞周期阻滞于G1期,并使ROS水平显著增加(P<0.05或P<0.01);ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇的上述诱导作用(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,莪术醇能下调PCNA和CDK2 mRNA的表达,并上调p21 mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。Westernblot结果显示,莪术醇能显著下调Keap1、Nrf2、CDK2、CDK6和Cyclin D的蛋白表达(P<0.05或P<0.01);ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇对上述蛋白表达的下调作用(P<0.05或P<0.01)。结论莪术醇可能通过诱导氧化应激和细胞周期阻滞,发挥抑制T47D乳腺癌细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 莪术醇 t47d乳腺癌细胞 细胞周期阻滞 细胞增殖 氧化应激 作用机制
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不同浓度黄连素对乳腺癌T47D细胞生物学特性的影响 被引量:3
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作者 刘亚江 冯金华 +2 位作者 邹琼燕 黄文超 李佳艳 《疑难病杂志》 CAS 2020年第9期945-949,共5页
目的观察不同浓度黄连素对乳腺癌T47D细胞生物学特性的影响。方法2019年2—8月在郴州市第一人民医院进行实验。在ATCC细胞库购买乳腺癌细胞株(T47D细胞),随机分为3组,乳腺癌组(BC组)T47D细胞不做其他处理,正常培养;低浓度组(LC组)将T47... 目的观察不同浓度黄连素对乳腺癌T47D细胞生物学特性的影响。方法2019年2—8月在郴州市第一人民医院进行实验。在ATCC细胞库购买乳腺癌细胞株(T47D细胞),随机分为3组,乳腺癌组(BC组)T47D细胞不做其他处理,正常培养;低浓度组(LC组)将T47D细胞与10μmol/L黄连素溶液混合培养;高浓度组(HC组)将T47D细胞与30μmol/L黄连素溶液混合培养。比较3组T47D细胞凋亡、增殖、侵袭、迁移情况,并分析不同浓度黄连素对T47D细胞生物学特性的影响。结果HC组T47D细胞凋亡数量最多,凋亡率为(61.35±6.38)%,LC组为(26.97±3.75)%,BC组为(16.57±2.53%),3组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。HC组T47D细胞增殖数量最少,LC组居中,BC组最多(P均<0.01);HC组T47D细胞迁移面积最小,无细胞区域宽度最大,LC组居中,BC组细胞迁移面积最大(P均<0.01);HC组T47D细胞侵袭能力较差,显微镜下细胞数量少,BC组显微镜下细胞数量多,侵袭能力最强,LC组居中(P均<0.01)。结论黄连素对乳腺癌T47D细胞的生长存在抑制作用,且黄连素浓度越高,抑制效果越明显。 展开更多
关键词 黄连素 乳腺癌t47d细胞 生物学特性 增殖
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补骨脂素的植物雌激素作用及其机制探讨 被引量:58
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作者 赵丕文 牛建昭 +1 位作者 王继峰 王玲巧 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期59-63,共5页
目的:利用雌激素受体(ER)α,β阳性T47D细胞和子宫内膜癌Ishikawa细胞观察补骨脂素的雌激素样作用,并探讨其可能的作用机制。方法:以1×10^-8mol.L^-1雌二醇(E2)为阳性对照药,利用MTT细胞增殖试验观察1×10^-5~1×10^... 目的:利用雌激素受体(ER)α,β阳性T47D细胞和子宫内膜癌Ishikawa细胞观察补骨脂素的雌激素样作用,并探讨其可能的作用机制。方法:以1×10^-8mol.L^-1雌二醇(E2)为阳性对照药,利用MTT细胞增殖试验观察1×10^-5~1×10^-9mol.L^-1补骨脂素对T47D增殖的影响,同时观察1×10^-6mol.L-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素对Ishikawa细胞增殖的影响;以半定量RT-PCR法检测1×10^-6mol.L-1和1×10-7mol.L-1补骨脂素对T47D细胞雌激素效应基因PR mRNA表达情况的影响;并以雌激素受体拮抗剂ICI 182,780为工具药进行干预。同时,通过流式细胞术检测1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素引起T47D细胞ER-α,ER-β含量的变化。结果:1×10^-5~1×10^-7mol.L^-1补骨脂素能够显著促进T47D细胞增殖;1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素对Ishikawa细胞增殖也有显著的促进作用;RT-PCR结果显示:1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素可使T47D细胞PR mRNA表达显著增加,表现出雌激素样作用,而且以上效应可被ICI 182,780拮抗。1×10^-6mol.L^-1和1×10^-7mol.L^-1补骨脂素还可诱导T47D细胞ER-α,ER-β表达明显增加。结论:补骨脂素具有植物雌激素作用,并且其作用是通过ER途径介导的。 展开更多
关键词 补骨脂素 植物雌激素 人乳腺癌细胞 子宫内膜癌细胞 细胞增殖 孕激素受体 雌激素受体
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淫羊藿苷衍生物的制备及其雌激素样作用研究 被引量:42
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作者 叶海涌 刘健 楼宜嘉 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第2期131-136,共6页
目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)及其衍生物淫羊藿素(icaritin,ICT)和去甲淫羊藿素(desmethyli-caritin,DICT)的雌激素样作用及其相关的构效关系。方法ICA经纤维素酶水解成ICT,进一步在BBr3和CH2Cl2的体系中反应生成DICT;用不同浓度的化... 目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)及其衍生物淫羊藿素(icaritin,ICT)和去甲淫羊藿素(desmethyli-caritin,DICT)的雌激素样作用及其相关的构效关系。方法ICA经纤维素酶水解成ICT,进一步在BBr3和CH2Cl2的体系中反应生成DICT;用不同浓度的化合物与雌激素敏感性人乳腺癌细胞株MCF-7和T47D分别共培养6d和9d,MTT法检测其对细胞的促增殖率,以此评价化合物雌激素样作用的强弱。结果ICT、DICT促细胞增殖作用显著,10-6mol/L浓度时促MCF-7细胞增殖作用分别是雌二醇(10-9mol/L)的90.0%和94.0%(P<0.01);促T47D细胞增殖作用分别是雌二醇的65.6%,50.0%(P<0.01)。ICA未呈现促MCF-7细胞和T47D细胞增殖作用。ICT、DICT的促细胞增殖作用被10-7mol/L雌激素受体完全拮抗剂ICI182、780完全抑制。结论ICT和DICT具有促MCF-7细胞和T47D细胞增殖的雌激素样作用,而ICA未体现该作用。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 淫羊藿素 去甲淫羊藿素 MCF-7细胞 t47d细胞 植物雌激素
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一些化工原料的雌激素样效应 被引量:13
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作者 余增丽 张立实 吴德生 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期10-12,共3页
采用雌激素受体阳性乳腺癌细胞株T47D在DMEM培养基 (含 1 0 %小牛血清 )中开放式单层贴壁培养的方法 ,探讨几种常见化工原料壬基酚 (NP)、双酚A(BisA)、邻苯二甲酸酯二丁酯 (DBP)的雌激素效应。于开始实验前将培养细胞用PBS洗涤后改为... 采用雌激素受体阳性乳腺癌细胞株T47D在DMEM培养基 (含 1 0 %小牛血清 )中开放式单层贴壁培养的方法 ,探讨几种常见化工原料壬基酚 (NP)、双酚A(BisA)、邻苯二甲酸酯二丁酯 (DBP)的雌激素效应。于开始实验前将培养细胞用PBS洗涤后改为在无酚红DMEM(含 5 %CDT -FBS)中培养持续 5d ,其目的是耗尽内源性雌激素 ,实验设溶剂对照、雌激素阳性对照及 3种受试物各 4个剂量组 ,采用MTT法、3 H TdR掺入法及流式细胞术对T47D细胞增殖情况进行分析。结果显示NP、BisA和DBP对T47D细胞增殖的影响同雌激素类似 ,可促进T47D细胞增殖和细胞DNA合成 ,并推进G0 G1 期细胞进入S期 ,提高细胞增殖指数 ,随着培养时间 ,延长至 96h ,0 8μmol LNP、32 μmol LBisA和 32 0 μmol LDBP均对T47D细胞有明显促进增殖效果。结果提示这几种化合物具有雌激素效应 ,且其作用效果存在时间 -效应和剂量 -效应关系。由于T47D细胞增殖为雌激素依赖性 。 展开更多
关键词 化工原料 雌激素样效应 环境雌激素 壬基酚 双酚A 邻苯二甲酸酯二丁酯 T470细胞株
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小叶莲有效成分对人乳腺癌细胞增殖、细胞周期及线粒体膜电位的影响 被引量:9
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作者 孔越 王庆辉 +3 位作者 尚明英 肖军军 孟书聪 蔡少青 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第10期1368-1371,共4页
目的:探讨小叶莲提取物、有效成分及成分组合对人乳腺癌细胞增殖的影响及机制。方法:采用酸性磷酸酶法测定小叶莲4种提取物[乙醇提取物(X_c)、乙醇提取物石油醚萃取物(X_p)、乙醇提取物乙酸乙酯萃取物(X_e)、乙醇提取物正丁醇萃取物(X_... 目的:探讨小叶莲提取物、有效成分及成分组合对人乳腺癌细胞增殖的影响及机制。方法:采用酸性磷酸酶法测定小叶莲4种提取物[乙醇提取物(X_c)、乙醇提取物石油醚萃取物(X_p)、乙醇提取物乙酸乙酯萃取物(X_e)、乙醇提取物正丁醇萃取物(X_z)]、5种有效成分[鬼臼毒素(S_1)、去氧鬼臼毒素(S_2)、4-去甲去氧鬼臼毒素(S_3)、8-异戊烯基山柰酚(S_4)、8,2′-二异戊烯基槲皮素-3-甲醚(S_5)]以及3种有效成分组合{组合1[S_1-S_2-S_3-S_4-S_5(2∶4∶1∶4∶32),Z_1]、组合2[S_2-S_4(1∶1),Z_2]、组合3[S_3-S_4(1∶4),Z_3]}对人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞增殖的影响;流式细胞仪检测上述样品对MDA-MB-231、MCF-7(或T47D)细胞周期和细胞线粒体膜电位的影响。结果:小叶莲有效成分组合Z_1对MDA-MB-231、MCF-7细胞具有显著抑制作用,其半数抑制浓度(IC_(50))分别为(0.27±0.2)、(0.11±0.1)μg/mL;提取物X_c、X_p、X_e,有效成分S_2、S_4以及成分组合Z_2、Z_3对MDA-MB-231、MCF-7(或T47D)细胞的增殖均有较强抑制作用,IC_(50)均小于15μg/mL;各提取物和有效成分均可阻滞MDA-MB-231、MCF-7细胞周期于G_2/M期;各有效成分组合均可阻滞MDA-MB-231、T47D细胞周期于G_0/G_1期,并能降低MDA-MB-231、T47D细胞线粒体膜电位。结论:小叶莲有效成分及成分组合可通过影响细胞周期和线粒体膜电位,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 小叶莲 有效成分 有效成分组合 人乳腺癌MDA-MB-231细胞 人乳腺癌MCF-7细胞 人乳腺癌t47d细胞 细胞周期 线粒体膜电位
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异补骨脂素的植物雌激素作用及其机制的探讨 被引量:26
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作者 赵丕文 牛建昭 +2 位作者 王继峰 郝庆秀 于杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1193-1197,共5页
目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB231细胞观察异补骨脂素(isopsoralen)的雌激素样作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察... 目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB231细胞观察异补骨脂素(isopsoralen)的雌激素样作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察异补骨脂素对T47D和MDA-MB231细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测细胞周期分布的变化。同时,利用实时荧光定量PCR法及流式细胞术检测异补骨脂素对T47D细胞pS2 mRNA及蛋白表达情况的影响。结果1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素能够促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且该作用可被ICI182,780所拮抗;1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素对MDA-MB231细胞增殖无影响。PCR及流式蛋白检测结果显示:1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素可使pS2 mRNA和蛋白表达增加,同时加入ICI182,780可部分拮抗异补骨脂素对pS2表达的诱导和促进作用。结论异补骨脂素具有植物雌激素作用,该效应可通过作用于靶细胞雌激素受体途径实现。 展开更多
关键词 异补骨脂素 植物雌激素 t47d MDA-MB231 细胞增殖 PS2 雌激素受体
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四物汤治疗更年期综合征的作用机制研究 被引量:17
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作者 陈悦 冯放 +3 位作者 裴育莹 俞舒丹 梁叶莺 赵丕文 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第8期799-801,804,共4页
目的观察四物汤对更年期模型SD大鼠的作用并探讨发挥作用的可能靶点和机制。方法将正常SD雌性大鼠40只按体质量均衡和随机的原则分为正常组、模型组、四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组。除正常组外,其余组均切除两侧卵... 目的观察四物汤对更年期模型SD大鼠的作用并探讨发挥作用的可能靶点和机制。方法将正常SD雌性大鼠40只按体质量均衡和随机的原则分为正常组、模型组、四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组。除正常组外,其余组均切除两侧卵巢造模。手术2周后,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组分别给予3,6,9 g/(kg·d)四物汤灌胃,均1次/d,持续6 d。第7天腹主动脉取血并分离血清,分离子宫并称质量,免疫组化法测定子宫组织雌激素受体ERα表达量;蛋白质免疫印记技术检测药物血清对T47D细胞雌激素受体ERα表达的影响。结果正常组大鼠的子宫系数与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组的子宫系数与模型组比较差异均有统计学意义,且随着四物汤方剂浓度的升高,子宫系数有增大的趋势;大鼠子宫组织ERα表达模型组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),四物汤中剂量组和高剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);四物汤低、中剂量组的含药血清能够明显提高T47D细胞ERα的表达水平(P均<0.01)。结论四物汤对更年期综合征有很好的治疗作用,并可提高靶细胞ERα的表达水平。 展开更多
关键词 四物汤 更年期综合征 子宫系数 t47d细胞 ERΑ
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