VEGFR1和MDR1在胃癌中的表达及意义

目的:探讨VEGFR1和MDR1在胃癌中的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法检测VEGFR1和MDR1在胃癌中的表达及与分化程度的关系;比较VEGFR1和MDR1在胃癌中的表达相关性。结果:VEGFR1在高、中、低度分化胃癌的表达率依次为15/53(28%)、19/43(44%)、37/54(68%);在低分化胃癌组织中的表达明显高于高分化和中分化胃癌组织(P<0.05)。MDR1在高、中、低度分化胃癌的表达率依次为18/53(34%)、21/43(48%)、41/54(76%);在低分化胃癌组织中的表达明显高于高分化和中分化胃癌组织(P<0.05)。结论:VEGFR1和MDR1在胃癌中的表达具有一致性,可能在胃癌的多药耐药中扮演重要角色。

VEGFR1阳性造血祖细胞在大肠癌归巢性肝转移中的作用

远处转侈尤其是肝转移是大肠癌患者死亡的最主要原因,阐明大肠癌肝转移的分子机制,早期发现和防治肝转移,是提高大肠癌长期生存率的关键。研究表明,肿瘤细胞的远处转移有明显的器官特异性,VEGFR1阳性造血祖细胞(VEGFR1^+ Hematopoietic progenitor cell,VEGFR1^+ HPC)在其中可能起决定性的调节作用。本文就VEGFR1^+HPC在大肠癌定向肝转移中的作用及可能机制作一综述。

VEGFR1基因特异性siRNA的筛选

[目的]筛选血管内皮生长因子受体(VEGRF)基因特异性小干扰RNA(Small Interference RNA,siRNA),为肿瘤等疾病的基因治疗寻找一种新途径。[方法]以高表达VEGFR1的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)为模型,采用RNA干扰技术,化学合成了3条针对血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)的特异性siRNA,用Lipofectamine2000TM转染HUVEC细胞株,通过Real time RT-PCR技术检测HUVEC细胞VEGFR1基因mRNA的表达。并对效果最好的VEGFR1 siRNA-2进行siRNA的浓度梯度效果检测。[结果]结果表明,与对照组相比,所设计的3条siRNA均能不同程度地抑制VEGFR1 mRNA的表达,其中siRNA-2号最有效,浓度为50 nmol/L时抑制率达到95%左右。在浓度梯度试验中,VEGFR1 siRNA-2转染浓度为50 pmol/L时,对VEGFR1基因的沉默效果还能达到50%左右。[结论]所设计的siRNA能有效抑制VEGFR1基因的表达,为RNAi用于靶向VEGFR1的基因治疗提供了非常有效的siRNA序列。

EGFR、VEGFR1/Flt-1在未放疗和放疗后食管鳞癌组织中的表达

目的:探讨食管鳞癌组织中内皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子受体1(VEGFR1/Flt-1)的表达与术前辅助放疗敏感性的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法(EnVision二步法)检测40例未接受放疗和40例接受放疗后手术切除的食管鳞癌组织,以及20例切除组织的上切缘正常组织中EGFR、VEGFR1/Flt-1的表达。结果:EGFR在正常组织中无表达,在未接受放疗食管鳞癌中的表达率为77.5%,在接受放疗后食管鳞癌中的表达率为70%,EGFR在放疗后食管鳞癌中的表达与未放疗食鳞癌的表达相比,经卡方检验其差异具有统计学意义(P<0.05)。VEGFR1/Flt-1在正常组织中阳性表达率为80%,在未接受放疗食管鳞癌中的表达率为62.5%,在接受放疗后食管鳞癌中的表达率为80%,VEGFR1/Flt-1在放疗后食管鳞癌中的表达与未放疗食管鳞癌的表达相比较,经卡方检验其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:检测EGFR、VEGFR1/Flt-1有助于预测食管鳞癌术前放疗的疗效。

努比亚山羊妊娠前期饲喂N-乙酰半胱氨酸对VEGFD、VEGFR1基因表达量的影响

N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)作为一种优良的饲料添加剂与抗氧化剂,在提高山羊繁殖性能中有重要的作用。为探究VEGFD与VEGFR1基因在NAC饲喂前后努比亚山羊下丘脑、垂体、子宫、输卵管、卵巢组织中的表达水平。试验以妊娠前期努比亚山羊为研究对象,将其分为NAC饲喂组和空白组。提取NAC饲喂前后努比亚山羊性腺组织的RNA,逆转录合成cDNA第一链,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测VEGFD与VEGFR1基因在2个试验组山羊性腺组织中的表达水平。结果表明,VEGFD与VEGFR1基因mRNA在NAC饲喂组和空白组山羊的性腺组织中均有不同程度的表达,其中VEGFD基因在努比亚山羊NAC饲喂组表达量的顺序依次为:垂体>下丘脑>子宫>卵巢>输卵管,在空白组中的表达量依次为:垂体>子宫>输卵管>卵巢>下丘脑;NAC饲喂组中VEGFD基因在卵巢中的表达量极显著高于空白组(P<0.01)。VEGFR1基因在NAC饲喂组中表达量由高到低依次为输卵管>子宫>下丘脑>垂体>卵巢,而在空白组中的表达量由高到低依次为:输卵管>垂体>下丘脑>子宫>卵巢。且在NAC饲喂组中,VEGFR1基因在下丘脑、子宫以及输卵管中的表达量极显著高于空白组(P<0.01)。研究显示,NAC饲喂后VEGFD与VEGFR1基因在努比亚山羊性腺组织中的表达量均有不同程度提高,初步表明NAC可促进努比亚山羊的繁殖,这为今后进一步探究NAC饲喂对山羊繁殖性能及VEGFD与VEGFR1基因功能奠定基础。

肺纤方提取物对肺间质纤维化大鼠VEGFR1介导的p38MAPK/PI3K信号通路表达的影响

目的:探讨肺纤方提取物对肺间质纤维化大鼠血管新生的影响。方法:将大鼠分为假手术组、模型组、泼尼松组、氯沙坦组、肺纤方大、中、小剂量组7组,除假手术组外,采用气管插管灌注博莱霉素3mg/kg进行大鼠肺间质纤维化造模;造模第2天予以药物灌胃干预。于14d及28d分两批进行动物处理,免疫组化SP法检测VEGFR1、p38MAPK、PI3K蛋白表达。结果:肺纤方大剂量组均减轻VEGFR1、p38MAPK、PI3K蛋白表达,较模型组差异显著(P<0.05)。结论:肺纤方通过减少肺泡炎及纤维化修复时异常血管新生介导的胶原沉积而具有抗肺间质纤维化作用。

肺纤方对肺间质纤维化大鼠VEGF及VEGFR1、VEGFR2基因表达的影响

目的探讨肺纤方提取物对肺间质纤维化大鼠血管新生的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组、泼尼松组、氯沙坦组、肺纤方大剂量组、肺纤方中剂量组、肺纤方小剂量组7组,除假手术组外,其余6组采用气管插管灌注博莱霉素3 mg/kg进行大鼠肺间质纤维化造模;造模第2天各组予以相应药物灌胃干预。于第14天及第28天分2批进行取材,HE染色观察肺泡炎程度、MASSON染色观察肺纤维化程度,RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)1、VEGFR2 mRNA表达。结果肺纤方大中剂量均能抑制肺泡炎和纤维化程度、下调VEGF及VEGFR1、VEGFR2 mRNA表达水平(P<0.05)。肺纤方中剂量作用更显著。结论肺纤方通过下调VEGF及VEGFR1、VEGFR2基因表达水平,抑制血管新生,发挥抗肺纤维化作用。

贝伐珠单抗对结直肠癌细胞VEGFR1和VEGFR2表达的影响

[目的]探讨贝伐珠单抗对结直肠癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)相关受体的影响。[方法]RT-PCR、Western blotting检测不同浓度贝伐珠单抗对结直肠癌肿瘤细胞VEGF相关受体表达水平的影响。[结果]与对照组相比,贝伐珠单抗药物组结直肠癌细胞的VEGF表达水平均明显下降(P<0.05);VEGFR1和VEGFR2表达水均明显上调(P<0.05)。[结论]贝伐珠单抗可引起了结直肠癌细胞VEGFR1和VEGFR2表达上调。

Molecular docking,synthesis and biological evaluation of Vascular Endothelial Growth Factor(VEGF)B based peptide as antiangiogenic agent targeting the second domain of the Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1(VEGFR1D2)for anticancer application

Dear Editor,Tumor angiogenesis is regulated by the binding of VEGF to receptors(VEGFRs).The major mediator of tumor angiogenesis is VEGFA,more commonly referred to as VEGF.VEGFR1 binds VEGF with higher affinity(10 times)than VEGFR2.1 However,the role of the VEGFR1 in VEGF-mediated angiogenesis remains a mystery.

PTEN抑制人脐静脉内皮细胞ECV304的增殖和VEGF的表达

目的:探讨与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin hemology deleted on chromo-some ten gene,PTEN)对人脐静脉内皮细胞ECV304细胞增殖、凋亡,及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体1(VEGF receptor 1,VEGFR1)的影响。方法:将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒Ad-PTEN-GFP及空载体腺病毒Ad-GFP感染ECV304细胞,MTT实验、Hoechst3342染色法及流式细胞术检测ECV304细胞的增殖和凋亡。实时荧光定量PCR法检测Ad-PTEN-GFP感染后ECV304细胞中PTEN、VEGF和VEG-FR1 mRNA表达水平,ELISA检测ECV304细胞培养上清中VEGF的水平。鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管生长实验检测PTEN对鸡胚血管生长的影响。结果:与Ad-GFP相比,Ad-PTEN-GFP感染能明显抑制ECV304细胞的增殖,诱导细胞凋亡,5 d时增殖抑制率可达(50.38±5.42)%、细胞凋亡率达(73.3±5.3)%。当感染复数为100时,Ad-PTEN-GFP组ECV304细胞的VEGF及VEGFR1 mRNA表达水平分别为未感染组的(13.40±1.32)%及(46.12±5.20)%。同时,Ad-PTEN-GFP感染能够明显抑制CAM体内血管生长[血管指数(57.6±3.37)%vs(92.2±4.37)%,P<0.05]。结论:PTEN能显著抑制人脐静脉内皮细胞ECV304的增殖、促进其凋亡,其机制可能与抑制VEGF和VEGFR1表达,抑制血管新生有关。

紫蛇方对子宫腺肌病细胞系增殖及血管生成相关因子作用的研究

目的观察中药紫蛇方对体外培养子宫腺肌病细胞系增殖活性及血管生成相关因子的影响。方法 1采用组织消化法培养子宫腺肌病病灶细胞,以倒置显微镜观察细胞形态并进行免疫细胞化学鉴定。2以MTT法检测细胞的增殖活力,将细胞分为米非司酮高、中、低浓度组,紫蛇方高、中、低浓度组及空白对照组,分别进行相应干预,观察不同药物浓度对细胞生长的影响。3采用免疫细胞化学法,将细胞随机分为3组,中药组、西药组及空白对照组,进行相应干预。检测细胞核增殖抗原(PCNA)、凋亡相关基因生存素(Survivin)、血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR1)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)表达的变化。结果 1与空白对照组比较,中药中、高浓度及西药各浓度组对细胞生长均产生抑制作用。2与空白对照组比较,中药组和西药组PCNA、Survivin、VEGFR2表达均受到抑制(P<0.01)。与西药组比较,中药组VEGFR2表达更低(P<0.05)。结论紫蛇方通过影响PCNA、Survivin、VEGFR2表达,抑制血管生成,可能是其治疗子宫腺肌病的作用机制之一。

血管内皮生长因子及其受体与Cyclin E-CDK2在肝癌发生发展过程中的表达变化

目的通过观察血管内皮生长因子(VEGF)及其受体和细胞周期蛋白E(Cyclin E)在肝癌模型大鼠肝脏中表达情况,探讨VEGF与细胞周期相关蛋白在肝癌发生发展过程中的作用。方法建立诱发性肝癌模型,采用酶联免疫吸附试验检测血清中VEGF量的变化,免疫组化技术检测VEGFR1、Cyclin E和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK2)的表达情况。结果血清中的VEGF含量在对照组中最低,在实验组中逐渐增多,以癌变期含量最高。VEGFR1、Cyclin E和CDK2蛋白表达的平均光密度值均随着肝癌的发生发展有增高的趋势,大鼠血清中的VEGF量与肝脏组织中VEGFR1、Cyclin E和CDK2蛋白表达的平均光密度值随着肝癌的发生发展呈正相关(r=0.834,F=42.1274,P<0.05)。结论 VEGF及其受体VEGFR1在肝癌发生发展中异常表达,促进肝癌的发生发展,可能与Cyclin E、CDK2细胞周期蛋白异常表达有关。

血清中VEGF,VEGFR_1与VEGFR_2在肺癌中的表达及其相互关系

目的本研究为探讨肺癌患者血清及组织中VEGF,VEGFR1,VEGFR2的表达在肺癌发生发展中的变化,为肺癌的诊断、发病机制提供生物学指标。方法选择山西省肿瘤医院胸外科2008年1月到2008年10月收治的初治原发性肺癌患者65例作为病例组,术后均经组织病理学证实。按照频数匹配的方法选择本院健康体检中20例正常人作为健康对照组。采集外周静脉血,用ELISA法检测病例组外周血中VEGF,VEGFR1,VEGFR2含量,并与健康对照组比较。采用SPSS12.0软件包进行统计学分析VEGF,VEGFR1和VEGFR2与患者病理类型、临床分期、性别、年龄之间的关联性及其三者之间的相关性。结果①肺癌患者血清VEGF、VEGFR2表达与健康对照组比较差异有显著性(均P<0.01);VEGFR1表达在两组之间比较差异无显著性(P>0.05);②血清VEGF、VEGFR1、VEGFR2表达在性别,年龄及临床分期之间比较差异均无显著性(均P>0.05)。结论①肺癌血清中VEGF,VEGFR2的表达在腺癌,鳞癌及小细胞癌患者中明显高于正常对照,而VEGFR1的表达与对照组比较无显著性差异;②患者肺癌血清中VEGF,VEGFR1,VEGFR2的表达在性别,年龄,临床分期中差异均无显著性。

恩度对雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其分子机制的研究

研究了重组人血管内皮抑素(恩度)对雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7细胞株生长的抑制作用与其分子机制.采用MTT法、台盼蓝染色法和中性红染色法检测不同浓度恩度对MCF-7细胞生长的抑制作用,Hoechst33258荧光染色法和TUNEL分析法观察恩度诱导MCF-7细胞凋亡的形态变化,蛋白印迹法检测恩度作用的MCF-7细胞中与生长和凋亡相关蛋白的表达.结果表明,恩度显著性地抑制MCF-7细胞的生长并诱导细胞凋亡.此外,恩度显著性地减少MCF-7细胞VEGFR1,c-Met,ERα,Akt,NF-κB,Bcl-2和CyclinD1蛋白的表达,明显地上调Bax蛋白的表达,其作用的分子机制可能是通过抑制VEGFR1/c-Met/ERα-Akt-NF-κB信号传导通路,下调Bcl-2/Bax蛋白比率、降低CyclinD1蛋白的水平.

岗梅提取物对高糖损伤血管内皮细胞VEGF及其受体表达影响的研究

目的:观察岗梅提取物对高糖损伤血管内皮细胞VEGF及其受体表达的影响。方法:将HUVECs(人脐静脉血管内皮细胞株)置于高糖HG(30 mmol/L)条件下培养,用不同浓度岗梅提取物进行干预,蛋白印迹法(Western blot)法测定高糖损伤血管内皮细胞中特异性蛋白血管内皮生长因子(VEGF)水平并运用RT-PCR技术测定高糖损伤血管内皮细胞中VEGFR1、VEGFR2mRNA表达量。结果:岗梅提取物对HUVECs VEGF及其受体表达具有促进作用,其中,50~100 mg/L浓度范围内VEGF表达与高糖组比较有显著差异(P<0.05),25.0~100 mg/L浓度范围内其受体表达与高糖组比较有显著差异(P<0.05)。结论:岗梅具有抗高糖诱导血管内皮细胞损伤作用。

链脲佐菌素诱导的小鼠糖尿病视网膜病模型及促血管新生分子的表达（英文）

目的：建立链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的小鼠增殖性糖尿病视网膜病（proliferative diabetic retinopathy,PDR）动物模型,并观察在增殖性糖尿病视网膜病发生、发展过程中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体（VEGFR1,VEGFR2）,金属基质蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）2,MMP9表达的变化。方法：C57BL/6J小鼠连续5d腹腔注射STZ（55 mg/kg）。末次注射后7d检测血糖浓度。糖尿病诱导成功的小鼠和正常小鼠继续饲养3~5mo。实验结束后进行视网膜病理组织观察,并利用CD31免疫荧光染色检测视网膜血管的分布情况。采用实时定量荧光PCR分析检测VEGF,VEGFR1,VEGFR2,MMP2,MMP9的基因表达。结果：视网膜组织病理观察和CD31免疫荧光染色实验结果均表明5月龄的糖尿病小鼠视网膜组织中血管数目明显比同月龄正常小鼠多。同时,与同月龄正常小鼠相比,5月龄糖尿病小鼠视网膜组织中VEGF,VEGFR1,VEGFR2,MMP2,MMP9的基因表达也明显增加。结论：本研究表明STZ诱导的糖尿病小鼠在5月龄时发生了增殖性糖尿病视网膜病的病变,期间视网膜组织中VEGF,VEGFR1,VEGFR2,MMP2,MMP9的基因表达都明显增加。

脑脉利颗粒对斑马鱼血管新生的促进及对血小板聚集性血栓形成的预防作用研究

目的 初步研究脑脉利颗粒对斑马鱼血管新生的促进作用与机制,及其对血小板聚集性血栓形成的预防作用,为临床用药提供更有价值的理论支持。方法 通过对斑马鱼肠下血管面积、肠下血管出芽数、总RNA浓度和纯度、心脏红细胞染色强度等指标,评价脑脉利颗粒对斑马鱼血管新生的促进作用和血小板聚集性血栓形成的预防作用。结果 脑脉利颗粒在250和500μg/ml浓度时有显著的血管新生促进作用,且在500μg/ml浓度时能明显上调VEGFR1基因表达(P<0.01),在1000μg/ml浓度时有显著的血栓形成预防作用(P<0.01)。结论 脑脉利颗粒具有显著的血管新生促进作用,机制可能与上调VEGFR1的表达有关,且对血栓形成有显著的预防作用。

大鼠视神经夹持伤后视网膜Flt-1的表达及意义

目的观察大鼠视神经夹持伤后视网膜血管内皮生长因子受体-1(Flt-1)蛋白的表达变化及分布。方法将12只成年健康SD大鼠右眼行手术视神经夹持10s,左眼行手术只暴露视神经,不夹持。伤后6h、3、7、21天各取3只行免疫组化染色观察视网膜Flt-1的表达变化及分布特征。并用图像分析仪对上述结果进行灰度量化后统计分析。结果正常大鼠视网膜Flt-1蛋白呈低度表达,在视网膜内外核层、节细胞层均有少量表达。视神经夹持伤后6h视网膜的Flt-1蛋白表达开始升高,3天达到峰值,7天后开始下降,21天后降至正常以下。伤后各时间点Flt-1蛋白表达灰度值与对侧眼比较,差异均有统计学意义。结论大鼠视神经损伤后伴随有视网膜组织Flt-1蛋白表达的异常,后者可能参与伤后的视网膜及视神经组织的修复。

大鼠鞘内微量注射VEGF对伤害性刺激反应的易化作用

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在SD慢性神经痛大鼠脊髓对伤害性刺激反应的作用。方法应用热板(52℃)和机械压力实验法,以大鼠后爪缩爪反应潜伏期(HWL)为痛阈指标,观察鞘内微量注射VEGF或SU1498后的HWLs的变化。结果鞘内注射0.2、0.4 nmoL VEGF显著降低大鼠对热板和机械压力刺激的双侧HWLs,且呈量效关系;鞘内微量注射SU1498可逆转VEGF的易化作用。结论鞘内微量注射VEGF使大鼠对热板和机械压力刺激发生痛敏,其作用可能通过VEGFR2/Flk-1受体。

分化抑制蛋白-1基因缺失对眼底新生血管生成的抑制作用

目的·研究分化抑制蛋白-1(inhibitor of differentiation 1,ID1)在眼底新生血管生成过程中的作用。方法·建立氧诱导的视网膜新生血管(OIR)、激光光凝诱导的脉络膜新生血管(CNV)以及过表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)(Rho-VEGF)转基因小鼠模型。通过免疫荧光染色和实时荧光定量PCR测定OIR小鼠模型及Rho-VEGF转基因小鼠模型视网膜内ID1的定位及mRNA含量。采用ID1基因敲除(ID1^(-/-))小鼠,按上述3种模型诱导视网膜新生血管形成,比较ID1基因缺失对视网膜、视网膜下及脉络膜新生血管生成面积、数量的影响,探究ID1在新生血管形成过程中的作用及对相关因子如低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、VEGF以及血管内皮生长因子受体1/2(vascular endothelial growth factor receptor 1/2,VEGFR1/2)表达的影响。结果·在已建立的OIR小鼠、Rho-VEGF转基因小鼠和CNV小鼠这3种眼底新生血管模型中,与正常对照组相比,ID1^(-/-)小鼠的眼底新生血管面积均显著减小(P<0.05)。在ID1^(-/-)小鼠中,HIF-1α、VEGF以及VEGFR1的表达皆受到抑制。结论·ID1在缺氧或氧化损伤期间,促进HIF-1α、VEGF和VEGFR1的表达,从而促进眼底视网膜和脉络膜新生血管的生成。