益母草注射液通过其生物碱成分上调Tie-2、VEGFR2和VEGF促进斑马鱼血管新生

目的:研究益母草注射液在斑马鱼血管损伤模型中的促血管生成作用,并阐明潜在的物质基础和分子机制。方法:采用HPLC-PAD和TLC技术检测益母草注射液的主要成分;利用舒尼替尼诱导转基因Tg(flk1:eGFP)斑马鱼血管损伤模型,益母草注射液干预治疗后,测量斑马鱼节间血管(ISVs)长度,QT-PCR检测血管生成相关基因的表达水平。结果:发现益母草注射液的主要成分是水苏碱、胆碱和葫芦巴碱;其中,益母草注射液、葫芦巴碱和胆碱可减轻化学诱导的斑马鱼血管损伤,其作用机制涉及益母草注射液上调Tie-2、VEGF和VEGFR2的表达,其主要成分葫芦巴碱上调Tie-2和VEGF的表达,胆碱上调VEGF和VEGFR2的表达。结论:益母草注射液及其主要生物碱成分可通过上调Tie-2、VEGFR2和VEGF来促进血管生成。

人肝癌Huh7细胞上皮间充质转化与VEGFa/VEGFR2自分泌途径的相关性及华蟾素的调控作用

目的探究华蟾素(cinobufagin,CBG)注射液对人肝癌Huh7细胞血管内皮生长因子a(vascular endothelial growth factor a,VEGFa)/血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)自分泌信号通路及上皮间充质转化进程的影响。方法通过CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验和成球实验检测人肝癌Huh7细胞增殖、迁移、侵袭和成球能力;免疫荧光双标实验对人肝癌Huh7细胞VEGFa/VEGFR2进行共定位分析,ELISA法检测人肝癌Huh7细胞上清液中VEGFa水平,Western blot法检测人肝癌Huh7细胞中VEGFa/VEGFR2通路及上皮间充质转化相关蛋白表达水平。结果CBG注射液能显著抑制人肝癌Huh7细胞的增殖、迁移、侵袭和成球能力;人肝癌Huh7细胞可能存在VEGFa/VEGFR2自分泌途径;CBG注射液能抑制VEGFa的分泌,降低下游p-VEGFR2、p-PI3K、p-AKT及间充质标志物N-Cadherin、Vimentin、Snail蛋白的表达水平,升高上皮标志物E-Cadherin蛋白的表达水平。结论CBG注射液可能通过VEGFa/VEGFR2自分泌途径调控人肝癌Huh7细胞上皮间充质转化。

基于VEGF/VEGFR2信号通路探究苗药铁筷子醇提物抗类风湿关节炎大鼠滑膜血管新生作用

目的本项目拟以“苗药铁筷子”为研究对象,研究其对胶原诱导型(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠抗炎活性及VEGF/VEGFR2/P38 MAPK通路的调控机制。方法将60只雌性Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、阳性药物组、铁筷子低、中、高剂量组,每组10只。将牛Ⅱ型胶原蛋白溶液注入大鼠尾部,复制大鼠模型,阳性药物组灌胃给予甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)2.0 mg/(kg·d),每隔1 d 1次;铁筷子低、中、高3个剂量组以铁筷子醇提取物灌胃0.25、0.5和1 g/(kg·d),每天1次;正常组、模型组均采用等量NaCl溶液灌胃;连续灌胃28 d。治疗过程中,观察各组大鼠一般状况,记录体重变化,测定大鼠足底厚度;治疗结束后取大鼠后肢,经Micro-CT检测骨质破坏程度、苏木素-伊红(HE)染色法进行关节滑膜的病理学研究,免疫组织化学染色观察滑膜新生血管数量,反转录聚合酶链反应法(qRT-PCR)在大鼠滑膜组织中检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-A、血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、肿瘤坏死因子(tumer necrosis factor,TNF)-α的mRNA水平,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测VEGF、VEGFR2、p-P38、p-AKT的表达,以探索苗药铁筷子治疗类风湿性关节炎的潜在作用机制。结果与正常组比较,模型组大鼠体重降低显著(P<0.01),足肿胀度明显增加(P<0.01),病理切片可见踝关节及后肢其他小关节滑膜组织明显增生、大量炎性细胞浸润,骨组织表面可见啃噬样病变,滑膜新生血管数量明显增多,Micro-CT显示明显骨质破坏、骨量百分比、骨小梁厚度、骨密度均显著下降,关节滑膜组织中VEGF-A、VEGFR2、TNF-αmRNA水平显著升高(P<0.01),VEGF-A、VEGFR2、p-P38、p-AKT蛋白表达量均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,铁筷子醇提物呈剂量依赖性改善上述情况,以铁筷子高剂量组效果最优,大鼠的体重显著升高(P<0.05),足肿胀度明显下降(P<0.05),滑膜组织病理学损伤及骨组织啃噬样病变情况明显好转,滑膜组织新生血管明显减少,VEGF-A、VEGFR2、TNF-αmRNA水平明显降低(P<0.01),VEGF-A、VEGFR2、p-P38、p-AKT蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论苗药铁筷子可能通过调节VEGF/VEGFR2信号通路减轻CIA大鼠关节炎性损伤,进而发挥治疗类风湿关节炎的作用。

子痫前期患者内含子多聚腺苷酸化VEGFA-VEGFR2信号通路的富集分析

目的分析与子痫前期(PE)相关的转录组内含子多聚腺苷酸化(IPA)现象。方法从GEO数据库中收集到90例PE相关样本的转录组数据。采用STAR比对到人类基因组hg38,利用IPAFinder软件分析比对文件中的IPA现象。Miranda软件进行miRNA靶基因预测。差异表达基因的评估使用edgeR与对数倍数变化>1和调整的P<0.05,通过Clusterprofiler进行功能富集分析。结果血管内皮生长因子A(VEGFA)-血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路中的基因在PE相关的IPA现象中出现富集,且VEGFA-VEGFR2通路中基因表达水平与IPA现象呈负相关。鉴定出LIN28B和AGO2是与IPA位点结合最显著的基序。分析与这些IPA现象相关的miRNA结合位点,发现miR-193b和miR-365a在IPA基因中起核心调控作用。结论VEGFA-VEGFR2信号通路可能通过IPA改变影响PE的发病,子痫前期中IPA相关miRNA和基因表达变化之间有潜在的临床相关联系。

ATG5和VEGFR2在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

肝癌组织中ATG5的表达与临床病理(TNM)分期的关系,以及二者与肝癌TNM分期的关系。方法 本研究拟选择肝癌临床标本89份,按最大直径及TNM分期分为若干亚组,检测VEGFR2、ATG5蛋白及miRNA的表达,并进行关联研究。结果 VEGFR2、ATG5基因在癌组织中的阳性表达水平明显升高,且在瘤体直径≥50mm基TNMⅡ、Ⅲ分期及以上患者中更高。VEGFR2-miRNA、ATG5-miRNA在癌组织中表达更高。VEGFR2-miRNA、ATG5-miRNA、TNM分期成正向关联,ATG5-miRNA与TNM分期也同样如此。结论 肝癌组织中VEGFR2、ATG5的高表达与肝癌的恶性度及TNM分级相关,可得,VEGFR2、ATG5高参与肝细胞癌的发生、发展。

藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖及VEGFR2表达的影响

目的:观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和血管内皮细胞受体2(VEGFR2)表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制。方法:以不同浓度的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48h后,应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析VEGFR2蛋白的变化。结果:藤黄酸对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有明显抑制作用,其效应呈浓度和时间依赖性。流式细胞仪分析显示SW480细胞呈G2/M期阻滞;SW480细胞的凋亡率随藤黄酸浓度增加逐步上升。用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24h,VEGFR2蛋白的表达随药物浓度的增加而减少(P<0.01)。结论:藤黄酸能够明显抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,诱导SW480细胞发生G2/M期阻滞,其作用机制可能与抑制VEGFR2表达有关。

有氧运动对2型糖尿病大鼠肾脏VEGF-A及VEGFR2蛋白表达的影响

目的:研究有氧运动对2型糖尿病大鼠肾脏VEGF-A、VEGFR2蛋白表达的影响,并对其可能机制进行探讨。方法:通过高糖高脂饲喂5周加低剂量腹腔注射STZ复制2型糖尿病大鼠模型,7周后成模SD大鼠被随机分为糖尿病安静组和糖尿病运动组,另设正常对照组。采用7周有氧游泳运动只对糖尿病运动组进行干预,实验末测定血糖、24 h UA、肾皮质VEGF-A及VEGFR2和p-VEGFR2蛋白的表达及光镜、电镜观察肾小球形态结构的变化。结果:光镜下糖尿病运动组大鼠肾小球增大不明显,毛细血管袢大多数开放,球囊壁渗出、粘连等现象较糖尿病安静组明显改善;基底膜无明显增厚,足突融合等现象较糖尿病安静组均有所减轻;血糖浓度和24 h UA排泄量降低显著(P<0.05或P<0.01);肾皮质VEGF-A、VEGFR2和p-VEGFR2蛋白的表达均较糖尿病安静组显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:运动对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其作用机制可能是通过其降低血糖及下调2型糖尿病状态下表达增加的VEGF-A和VEGFR2蛋白水平,而减轻大鼠肾脏损伤。

阿霉素纳米-VEGFR2单抗交联物的抗肝癌作用

目的探讨阿霉素纳米-VEGFR2单抗交联物抗肝癌作用,研究其在体内对肝癌组织生长的抑制作用及其对肝癌祼鼠生存期的影响。方法 (1)选择10只肝癌裸鼠随机分为两组,按尾静脉注射不同成分分别为交联物A组和阿霉素溶液(F-ADM)组,使用高效液相色谱法测定交联物在肝癌裸鼠体内分布;(2)选择18只肝癌裸鼠随机分为3组,按尾静脉注射不同成分分别为交联物B组、F-ADM组及生理盐水(NS)组,每组在给药当天及给药后第3、6、9、12、15、18、21天分别用游标卡尺测量肿瘤并计算体积,给药后第21天处死全部裸鼠,称肿瘤质量。(3)选择30只肝癌裸鼠随机分为3组,按尾静脉注射不同成分分别为交联物C组、F-ADM组、NS组,观察并记录各组肝癌裸鼠的生存时间。结果注射交联物A组肝癌裸鼠2 h后的肿瘤、血液、心、肝、肾中的阿霉素浓度与注射阿霉素纳米裸鼠(纳米组)差异具显著统计学意义(P<0.05);给药2 h时药物的靶向指数及选择性指数以肿瘤最高;3组肿瘤体积均随着时间的延长逐渐增大,但交联物B组增长最慢,其肿瘤体积在给药后第9、12、15、18、21天均明显小于F-ADM组,肿瘤质量在给药后第21天明显轻于F-ADM组(P<0.05);交联物C组和F-ADM组裸鼠的存活率得到改善,从6周开始交联物C组裸鼠的存活率明显高于NS组,在9、10、11、12周交联物C组裸鼠的存活率明显高于F-ADM组(P<0.05)。结论阿霉素纳米-VEGFR2单抗交联物在抗肝癌过程中实现缓慢释放和靶向性作用,增加了药物在肝及肿瘤中的分布比例,延长了药物的作用时间,有助于提高肿瘤的治疗效果。

肾衰方及其拆方对肾间质纤维化VEGF、VEGFR2、a-SMA的影响

目的探讨肾衰方及其拆方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化(RIF)及VEGF、VEGFR2、a-SMA的影响。方法采用单侧输尿管梗阻建立RIF大鼠模型。将108只无特定病原体(SPF)级健康成年SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、贝那普利组,每组18只。UUO术后1 d起连续灌胃给药3周,肾衰方组、补虚方组、祛邪方组大鼠分别按19.5、9.5、11.0 g/(kg·d)进行灌胃,贝那普利组给予1.05 mg/(kg·d),假手术组和模型组每日给予等量生理盐水灌胃。造模后各组分别在第7、14、21天各处死6只大鼠,检测其血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),同时计算左肾肾脏脏器指数;采用苏木精-伊红染色和马松染色进行肾脏组织病理检测,采用Western Blot检测VEGF、VEGFR2、a-SMA的表达,实时荧光定量RT-PCR检测VEGF、VEGFR2、a-SMAmRNA的表达。结果(1)与假手术组比较,同时期模型组、肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、贝那普利组血清BUN、Scr、左肾肾脏脏器指数均升高(P<0.05)。与模型组相比,同时期肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、贝那普利组血BUN、Scr、肾脏脏器指数均降低(P<0.05),与其他治疗组相比,肾衰方组在降低BUN、Scr、肾脏脏器指数更明显(P<0.05)。(2)肾脏病理改变:与假手术组比较,同时期模型组、肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、贝那普利组肾小管间质损伤指数和胶原阳性面积均增加(P<0.05)。与UUO模型组比较,同时期肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、贝那普利组肾小管间质损伤指数和胶原阳性面积均降低(P<0.05);与其他治疗组相比,肾衰方组在减轻肾小管间质损伤指数和胶原阳性面积更明显(P<0.05)。(3)与假手术组比较,同时期模型组、肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、贝那普利组VEGF、VEGFR2、a-SMA蛋白和VEGF、VEGFR2、a-SMAmRNA表达量均增加(P<0.05);与模型组相比,同时期肾衰方组、祛邪方组、补虚方组、贝那普利组VEGF、VEGFR2、a-SMA和VEGF、VEGFR2、a-SMAmRNA表达均有不同程度降低(P<0.05),与其他治疗组相比,肾衰方组降低VEGF、VEGFR2、a-SMA蛋白和VEGF、VEGFR2、a-SMAmRNA表达量更明显。结论肾衰方改善肾功能,减轻肾脏病理损害可能是通过抑制VEGF、VEGFR2、a-SAM蛋白和mRNA表达。

VEGFR2-V297Ⅰ位点基因多态性与贝伐珠单抗联合全脑放疗对非小细胞肺癌脑转移患者的疗效及相关性研究

目的 研究基于贝伐珠单抗联合全脑放疗的非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移患者中VEGFR2-V297I位点基因多态性对其疗效的影响及其相关性分析。方法 收集2015年6月—2017年6月汉中市中心医院接受贝伐珠单抗并联合全脑放疗的晚期NSCLC脑转移患者141例,详细记录患者的性别、年龄、病理分型、ECOG得分、EGFR突变类型及生存资料,比较不同VEGFR2-V297I基因型患者基于贝伐珠单抗联合全脑放疗后进展及生存情况。结果 141例肺癌患者中有83例(58.87%)携带有CC基因型,49例(34.75%)携带有CT基因型,9例(6.38%)携带有TT基因型;符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ^(2)=0.21,P=0.90);近期疗效评价:CC型和CT/TT型患者的客观缓解率分别为48.19%和48.28%,疾病控制率分别为89.16%和91.38%,差异均无统计学意义(P>0.05);携带有CC基因型患者的中位无进展生存期(PFS)为9.012个月(95%CI:8.260~9.764),携带有CT/TT型患者中位PFS为6.741(95%CI:5.787~7.695)个月(Log-rank=10.240,P=0.001);携有CC基因的中位总生存期(OS)为19.236(95%CI:18.176~20.295)个月,携带有CT/TT型患者中位OS为17.285(95%CI:16.175~18.395)个月(Log-rank=5.456,P=0.02);Cox比例风险回归模型显示年龄、性别、ECOG评分、VEGFR2-V297I位点均是影响患者PFS的独立危险因素。结论 VEGFR2-V297I位点基因多态性影响NSCLC脑转移患者基于贝伐珠单抗联合全脑放疗的疗效,CT/TT基因型是其进展与死亡的独立危险因素。

链霉菌I06A-02832产生的VEGFR2-CD拮抗剂发现研究

目的分离鉴定链霉菌I06A-02832发酵液中具血管内皮细胞生长因子受体-2酪氨酸激酶(VEGFR2-CD)抑制活性的次生代谢产物。方法采用大孔吸附树脂、Se phadex LH-20、HPLC等分离手段对次生代谢产物进行分离纯化;通过质谱(MS)、核磁共振波谱(NMR)对其结构进行鉴定,以ELISA法检测其次生代谢产物对VEGFR2-CD的拮抗活性。结果分离得到两个环二肽类次生代谢产物:2832B和2832C;化合物2832B的化学结构与环(脯氨酸-酪氨酸)一致,化合物2832C的化学结构与环(苯丙氨酸-甘氨酸)一致,均对VEGFR2-CD表现出一定的抑制活性。结论化合物2832B和2832C是具有VEGFR2-CD活性的环二肽类次生代谢产物,本研究首次报道它们具有VEGFR2-CD抑制活性。

LKB1、VEGFR2在非小细胞肺癌组织中表达及临床意义的研究

目的探究人Liver kinase B1(LKB1)与血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)在非小细胞肺癌组织中的表达情况,并探究其临床意义。方法采用免疫组化方法测定65例非小细胞肺癌组织及40例癌旁组织LKB1、VEGFR2表达情况。分析LKB1、VEGFR2表达情况与临床病理特征的相关性。结果肺癌组织中LKB1阳性率低于癌旁组织,VEGFR2阳性率高于癌旁组织。LKB1在腺癌中的表达阳性率高于鳞癌,VEGFR2在腺癌中的表达阳性率低于鳞癌。在具有吸烟史、淋巴转移、临床低分期以及低分化程度中LKB1阳性率更低,VEGFR2阳性率更高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论腺癌组织中LKB1表达水平高于鳞癌组织;非小细胞肺癌组织中LKB1、VEGFR2呈现相反的表达趋势。LKB1低表达与VEGFR2高表达提示肺癌患者具有吸烟史、出现淋巴转移、高临床分期以及低分化程度。

电针对促排卵大鼠子宫VEGF、VEGFR2表达的影响

目的观察电针刺激对激素促排卵大鼠子宫组织中VEGF、VEGFR2表达的影响,并探讨其作用机制。方法 10周龄SD雌性大鼠30只,随机分为对照组、模型组及治疗组,每组各10只。模型组和治疗组腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)20U,48h后注射同等剂量的人绒毛膜促性腺激素(hCG),与种鼠合笼,次晨分笼造模,治疗组在与种鼠合笼前1周连续电针治疗7d(刺激强度1mA,疏密波2/15Hz,持续刺激15min)。合笼后第3.5天处死实验动物,留取子宫组织,观察形态改变;采用免疫组化方法检测VEGF、VEGFR2蛋白的表达;采用qPCR技术测定子宫组织中VEGF、VEGFR2mRNA的表达,采用2^(-△△Ct)方法计算。结果肉眼观察对照组子宫形态规整,表面红润光滑;模型组子宫形态肿大扭曲,表面色泽暗红充血;治疗组子宫形态略微肿胀,表面红润,无充血现象。免疫组化可见VEGF、VEGFR2蛋白在3组子宫内膜上均有表达,平均光密度没有明显差异,但表达分布部位有差异。模型组相比于对照组,在基质细胞和腺体上的表达分布较为广泛。VEGFR2在子宫的肌层组织中表达有明显差异:对照组几乎没有表达,模型组表达则明显增高(P<0.05),治疗组比模型组表达有明显下降(P<0.05)。模型组子宫内膜组织VEGF mRNA的表达是对照组的0.68倍,下降趋势明显;治疗组是对照组的0.88倍,有上升趋势。模型组子宫内膜组织VEGFR2mRNA的表达是对照组的0.46倍,下降趋势明显;治疗组是对照组的0.82倍,有比较明显的上升趋势。结论电针可以调整促排卵大鼠子宫组织中VEGF及其受体的表达,从而调整激素促排卵导致的子宫内膜种植窗口期的同步性。

miR-409-3p通过抑制LHX2调控VEGF/VEGFR2信号通路促进前列腺癌细胞凋亡、抑制细胞增殖

目的:探讨微小RNA-409-3p(microRNA-409-3p,miR-409-3p)对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法:qRT-PCR与Western blot平行检测前列腺癌细胞中miR-409-3p与LIM同源框基因2(LIM-homeobox gene 2,LHX2)的表达;CCK-8实验检测miR-409-3p过表达对前列腺癌细胞增殖能力的影响,以及LHX2过表达对前列腺癌细胞增殖能力的恢复作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因检测miR-409-3p与LHX2的靶向作用关系;Western blot检测细胞中LHX2、CyclinD1、CDK4、Cleaved-caspase-3及VEGF/VEGFR2信号通路相关蛋白表达。结果:miR-409-3p在前列腺癌细胞中的表达水平显著低于正常前列腺上皮细胞(P<0.05),LHX2的表达水平高于正常前列腺上皮细胞(P<0.05);miR-409-3p过表达可显著抑制前列腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡(P<0.05),并可上调Cleaved-caspase-3的表达(P<0.05),下调CyclinD1、CDK4、VEGF、t-VEGFR2、p-VEGFR2的表达(P<0.05);双荧光素酶实验证明miR-409-3p与LHX2存在靶向关系,miR-409-3p可负性调控LHX2的表达;LHX2过表达可部分逆转miR-409-3p对前列腺癌细胞增殖、凋亡及VEGF/VEGFR2信号通路的影响。结论:miR-409-3p可通过下调LHX2的表达而促进前列腺癌细胞凋亡、抑制细胞增殖,其作用机制可能与抑制VEGF/VEGFR2信号通路激活有关。

VEGFR2和c-Cbl在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨VEGFR2和c-Cbl在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:构建胃癌组织芯片,应用免疫组化的方法,检测两种蛋白的表达情况。结果:VEGFR2和c-Cbl在胃癌组织中的阳性表达率分别为85.5%和71.0%。VEGFR2蛋白表达与浸润深度、淋巴结转移及病理分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、分化程度无关;c-Cbl蛋白表达与浸润深度及病理分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、分化程度及淋巴结转移无关。VEGFR2与c-Cbl的表达强度呈正相关。结论:VEG-FR2和c-Cbl在胃癌中高表达;VEGFR2和c-Cbl蛋白的表达强度与胃癌的浸润深度及病理分期均呈正相关;VEGFR2与淋巴结转移呈正相关;VEGFR2与c-Cbl的表达强度亦呈正相关。

基于分子对接研究吲哚咔唑类小分子对Tie-2/VEGFR2的双效抑制作用模式

运用分子对接技术研究了吲哚咔唑类小分子对人血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)和人血管生成素受体Tie-2(ANG-R-Tie-2)的双效抑制作用模式。研究结果表明,吲哚咔唑类小分子的双效抑制作用主要源于两种受体相似的活性口袋,小分子与两者的铰链区均可形成氢键,使其催化活性受到抑制,从而抑制肿瘤细胞的生长。抑制活性的差异主要源于活性口袋的细微差异所导致疏水、静电等相互作用的不同。其中,疏水作用的差异是影响配体选择性的主要原因,静电作用、氢键及空间位阻对结合稳定也有一定影响。该文的研究结果为多靶点酪氨酸激酶小分子抑制剂的设计及提高激酶抑制剂的选择性提供了重要的理论依据。

大肠腺癌中Sema4D和VEGFR2的表达及意义

目的探讨Sema4D和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)在大肠腺癌组织中的表达及其临床意义。方法运用组织芯片和免疫组化SP法检测115例大肠腺癌组织、19例大肠腺瘤组织和12例正常大肠黏膜组织中Sema4D与VEGFR2的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 Sema4D在正常大肠黏膜表达阳性率8.33%,在腺瘤和腺癌中阳性表达率为15.79%和39.13%,差异有统计学意义且与淋巴结转移、Dukes临床分期明显相关(P<0.05)。VEGFR2在正常大肠黏膜中阳性率16.67%,在腺瘤和腺癌中表达率为21.05%和51.3%,差异有统计学意义其表达与淋巴结转移、浸润程度、Dukes临床分期明显相关(P<0.05)。结论大肠腺癌中Sema4D与VEGFR2的表达可能在大肠腺癌的发生、发展中发挥重要作用。

乙醇对斑马鱼胚胎发育中VEGFR2基因表达的影响

目的观察体外乙醇对斑马鱼血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因表达的影响。方法选取绿色荧光蛋白特异性标记血管内皮细胞的转基因斑马鱼胚胎120颗,随机均分为1%乙醇处理组(A组)、1.5%乙醇处理组(B组)、1.75%乙醇处理组(C组)及对照组(D组)。于胚胎受精后4.3h～3d给予一定体积浓度比的无水乙醇处理,制备胎儿酒精综合征模型。用激光共聚焦显微镜观察其荧光表达的情况,并用反转录PCR方法观察乙醇处理后VEGFR2的表达。结果与D组比较,A、B、C组斑马鱼胚胎在受精后3d,荧光强度和VEGFR2表达随乙醇浓度增高而减弱,表达下降。结论斑马鱼胚胎受精后3d,VEGFR2基因表达随着乙醇浓度的增加而减弱。

反复自然流产小鼠蜕膜VEGF、VEGFR2的表达及中药干预研究

目的:观察反复自然流产小鼠蜕膜VEGF、VEGFR2的表达及补肾健脾中药(补肾安胎冲剂)的干预作用,探讨补肾健脾中药的保胎作用机理。方法:建立反复自然流产小鼠模型,随机分为模型组、阳性对照药组、中药组,进行不同的干预。观察各组流产率、蜕膜VEGF/VEGFR2的蛋白表达。结果:模型组的流产率高于正常妊娠组及中、西药对照组(P<0.01);与模型组比较,中药组蜕膜VEGF、VEGFR2表达升高(P<0.01),与西药组无显著性差异。结论:反复自然流产小鼠蜕膜存在VEGF、VEGFR2表达不足,补肾安胎冲剂能上调VEGF、VEGFR2的表达,进而促进血管的形成,促进胚胎发育,降低流产率。

六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22小鼠肝癌组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响

目的:观察六味地黄汤辅助环磷酰胺对荷H22肝癌小鼠肝癌组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响。方法:雄性昆明小鼠40只,随机分为模型组、化疗组、六味组、六味化疗联合组,每组10只。腋下注射H22细胞建立H22荷瘤模型,六味组造模前两周开始用药[剂量为22 g/(kg·d)],化疗组[剂量为50mg/(kg·d),隔日1次]及六味化疗组造模后用药,造模14 d后处死小鼠称重,取瘤组织称重计算抑瘤率,取脾组织称重计算脾指数,免疫组化检测VEGF与VEGFR2蛋白的表达。结果:化疗组与六味化疗联合组有良好的抑瘤作用;六味组脾指数增大,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05),六味化疗联合组VEGF蛋白表达明显减少,与化疗组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与六味组相比较,差异有统计学意义(P<0.05);六味化疗联合组VEGFR2蛋白表达减少,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与六味组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论:六味地黄汤辅助环磷酰胺可抑制荷H22肝癌小鼠组织VEGF与VEGFR2蛋白表达,减少肝癌组织血管增殖,从而发挥辅助化疗作用。