血红素加氧酶-1在胃癌顺铂化疗敏感性中的作用

目的研究血红素加氧酶-1(HO-1)及其抑制剂在胃癌顺铂(CDDP)化疗中的作用,为胃癌化疗敏感性提供潜在的增敏靶点。方法 MTT法检测锌原卟啉IX(ZnPPIX)及CDDP对胃癌细胞株SGC7901增殖能力的影响;Western blot和Real-time PCR分别检测胃癌细胞中HO-1蛋白和mRNA的表达;构建裸鼠皮下种植瘤模型并进一步观察ZnPPIX及CDDP对胃癌成瘤能力的影响。结果 CDDP联合ZnPPIX干预胃癌细胞明显抑制肿瘤细胞的增殖率(P<0.05);同时,CDDP胃癌细胞中HO-1mRNA水平和蛋白的表达增加(P<0.05)。而CDDP联合ZnPPIX干预细胞组的HO-1的表达较对照组明显降低(P<0.05)。荷瘤实验结果显示,CDDP可抑制胃癌皮下种植瘤的生长,肿瘤体积和质量明显降低。结论 HO-1抑制剂ZnPPIX可增强CDDP对胃癌的化疗敏感性,有可能成为潜在的胃癌CDDP化疗方案的增敏剂。

ZnPPⅨ对胃癌腹膜转移细胞凋亡的影响

目的研究ZnPPⅨ对人胃癌腹膜细胞GC9811-P凋亡的影响。方法采用MTT法测定GC9811-P细胞在ZnPPⅨ作用48 h后生长抑制情况;流式细胞仪观察ZnPPⅨ对GC9811-P细胞周期和细胞凋亡的影响;western blot免疫印迹法观察ZnPPⅨ对细胞系CIAPIN1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响。结果各浓度值的ZnPPⅨ均可抑制GC9811-P细胞增殖,并促进肿瘤细胞凋亡,并降低CIAPIN1和Bcl-2/Bax蛋白的表达水平。结论ZnPPⅨ可诱导GC9811-P细胞的凋亡,其作用机制可能通过调控CIAPIN1基因影响Bcl-2/Bax分子的表达。

锌原卟啉IX对胃癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:研究HO-1抑制剂锌原卟啉IX(ZnPPIX)对胃癌细胞增殖能力和侵袭能力的影响,探讨锌原卟啉对胃癌细胞生物学特性的调控作用。方法:应用胃癌细胞株SGC7901作为实验载体,不同浓度ZnPPIX干预胃癌细胞,应用MTT法检测其在不同时间段和不同浓度对胃癌细胞增殖能力的影响。应用Transwell小室检测ZnPPIX对胃癌细胞侵袭能力的影响。Western blot在蛋白水平检测胃癌细胞中侵袭相关因子的表达变化。结果:ZnPPIX可明显抑制肿瘤细胞的增殖能力且呈浓度依赖性。ZnPPIX干预胃癌细胞与Co PP组和空白对照组相比,细胞的侵袭能力明显减弱。ZnPPIX可降低胃癌细胞MMP2、MMP9、VEGF的蛋白表达量。结论:本实验初步探讨HO-1抑制剂锌原卟啉IX对胃癌细胞增殖和侵袭能力的负向调控作用,为HO-1可能成为胃癌的治疗新靶点提供理论依据及线索。

缺血后处理对大鼠缺血-再灌注肺损伤血红素加氧酶-1表达的影响

目的观察缺血后处理（IPO）对大鼠肺缺血-再灌注损伤（IRI）期间血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响，探讨其保护机制。方法48只成年SD大鼠，随机（随机数字法）分成6组（n=8）,假手术组（S组）；缺血-再灌注组（I/R组）：夹闭左肺门缺血45min,再灌注105min；缺血后处理组（IPQ组）：缺血后再灌注30s,停灌30s，反复3次，再恢复灌注102min;氯化高铁血红素（Hemin）＋缺血-再灌注组（ZnPPIX＋IPO组）：术前连续2d腹腔注射Hemin40junol/（kg·d）,余同I/R组；锌原卟啉K＋缺血后处理组（ZnPPK＋IPO组）：术前24h腹腔注射ZnPPIX20mg/（kg·d）,余同IPO组；氯化高铁血红素＋假手术组（HM＋S组）。测定各组肺组织HO-1蛋白表达水平、动脉血氧分压（Pa02）、肺组织湿/干质量比（W/D）和血清丙二醛（MDA）含量，观察肺组织病理变化。组间比较采用单因素方差分析，组内比较采用配对＊检验。结果1/R组肺组织HO-1蛋白表达（0.177±0.015）与S组和HM＋S组相比差异具有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）,但与IPO组（0.194士0.017）及HM＋I/R组（0.209±0.013）相比差异具有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）o各实验组Pa02均显著低于S组（90±11）mmHg,IPO组和HM＋I/R组PaO2与1/11组相比较，差异具有统计学意义（P〈0.01）;I/R组较S组肺组织W/D、血清MDA含量升高，肺组织病理损伤严重，而IPO组和HM＋I/R组上述改变差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论早期短时程缺血后处理能明显减轻在体大鼠肺IRI,其作用机制与其上调HO-1蛋白表达及抑制脂质过氧化的损伤作用有关。

基于脱氧核酶-等温级联放大耦合的传感体系高灵敏检测水样中铅离子

结合等温链替代扩增(ISDA)和指数扩增(EXPAR)设计一种非标记、高灵敏的Pb^(2+)荧光生物传感体系。在Pb^(2+)存在情况下,底物链被活化的GR-5 DNAzyme快速切割释放引物1。引物1与模板1杂交,并被DNA聚合酶(BSM)延伸形成带限制性内切酶(Nt.BbvCI)识别序列的双链核苷酸。BSM从Nt.BbvCI切割产生的切口再次延伸形成双链核苷酸,并释放信号G4-DNA片段。G4-DNA片段同时又可以作为模板2的引物,启动指数放大过程,从而释放更多的信号G4-DNA片段。扩增产物G4-DNA与原卟啉锌(ZnPPIX)相互结合从而产生强烈的荧光信号。详细优化了多种因素对检测体系的影响,在最优实验条件下,此方法对Pb^(2+)的线性检测范围为0.1~50.0 nmol/L,检出限为0.03 nmol/L(S/N=3),回归方程为y=288.7x+744.7(y为荧光强度,x为Pb^(2+)浓度)。干扰实验表明,该传感器对Pb^(2+)具有良好的特异性和选择性。该传感体系成功应用于环境水体中Pb^(2+)含量检测,加标回收率为94.0%~103.0%。本方法操作简单、选择性好、灵敏度高、有较强的抗干扰性能,可用于环境水样中Pb^(2+)的高灵敏检测。