秦皮甲素和秦皮乙素的药理研究进展

秦皮为一种传统中药,其毒性低、临床应用范围广,常被运用于治疗目赤肿痛、湿热泻痢、赤白带下、血崩不止等病症。药理研究发现香豆素类化合物是秦皮的主要活性成分,其中秦皮甲素和秦皮乙素最具代表性。众多的研究显示,秦皮甲素和秦皮乙素在抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗氧化等方面展现出丰富的药理学活性,其潜在的开发利用价值日益受到关注。该文通过查阅国内外相关文献,对秦皮甲素和秦皮乙素的主要药理作用研究进行归纳,以期为秦皮的研发及临床运用提供参考依据。

五味痛风丸提取及制备工艺研究

目的:将五味痛风汤开发为五味痛风丸。方法:以加水倍数、煎煮时间、煎煮次数为考察因素,以秦皮乙素转移率和干浸膏率为评价指标,采用正交设计优化五味痛风丸的提取工艺,并进行丸剂成型工艺研究。结果:最佳提取工艺为加12倍水、煎煮1.5小时、煎煮3次;最佳成型工艺为提取液减压浓缩至相对密度为1.30~1.40,吴茱萸和红曲粉碎过100目筛,混匀后制丸,70℃干燥24小时。结论:该提取、制备工艺稳定可行。

秦皮乙素对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响

目的探讨秦皮乙素(AES)对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响及相关机制。方法采用MTT法检测细胞增殖活性;采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;葡萄糖摄取量测定和乳酸含量测定实验检测细胞糖酵解情况;Western blot法检测迁移、侵袭及糖酵解相关蛋白的表达水平。结果AES能够抑制SGC-7901细胞的增殖活力,且这种抑制效果与AES的剂量成正相关。随着AES剂量的梯度增加,SGC-7901细胞的迁移、侵袭及糖酵解能力逐渐降低(P<0.05)。AES可以下调SGC-7901细胞HIF-1α、MMP-2、MMP-9、GLUT1、LDHA蛋白的表达水平(P<0.05)。结论AES对人胃癌SGC-7901细胞增殖活性及迁移、侵袭能力有抑制作用,通过抑制人胃癌SGC-7901细胞的葡萄糖摄取及乳酸生成降低糖酵解水平。AES可能通过影响缺氧诱导因子HIF-1α抑制SGC-7901细胞迁移、侵袭及有氧糖酵解过程。

基于HPLC指纹图谱和一测多评法的复方南板蓝根颗粒质量评价

采用高效液相色谱法(HPLC)对复方南板蓝根颗粒进行指纹图谱研究和相似度评价,并结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)进行统计学研究。在此基础上,以秦皮乙素为内参物,计算单咖啡酰酒石酸和菊苣酸的相对校正因子,并利用外标法(ESM)验证一测多评法(QAMS)的可靠性。10批复方南板蓝根颗粒的指纹图谱中共确定13个共有峰,相似度为0.942~0.996。PCA、OPLS-DA模式识别结果均表明,不同厂家样品间的成分存在一定差异。QAMS与ESM检测数据表明,两种算法的差异不大。所建立的指纹图谱结合统计学分析和一测多评法评价模式经济可靠、准确可行,可用于完善复方南板蓝根颗粒的质量标准监控。

秦皮乙素/蛇床子素的晶体结构研究

报道了香豆素类药物秦皮乙素的两种同质异晶和蛇床子素的晶体结构,这三种晶体结构(同质异晶1-2和蛇床子素3)同属单斜晶系,其中,同质异晶1和蛇床子素3属C2/c空间群,而同质异晶2则属P21/c空间群.同质异晶1-2中的秦皮乙素分子分别以不同类型的传统O—H…O强氢键构建出沿不同方向延伸的一维链状结构,而蛇床子素3则主要靠C—H…O弱氢键与范德华力结合形成稳定的晶体结构.

高效液相色谱紫外等吸收波长法快速测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素

研究建立了一种快速、环保和节约对照品的秦皮化学成分含量测定方法。秦皮样品采用25%(v/v)乙醇水溶液超声提取5 min。样品提取溶液采用Poroshell 120 EC-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm, 2.7μm)进行分析,0.1%甲酸水溶液-乙腈(94∶6, v/v)等度洗脱,流速1.5 mL/min。采用紫外分光光度仪对等浓度的秦皮甲素和秦皮乙素进行紫外光谱扫描,初步筛选得到2个对照品的等吸收波长,并用高效液相色谱仪对筛选得到的等吸收波长进行确证,从而获得2个对照品的等吸收检测波长341 nm。新建立的高效液相色谱紫外等吸收波长法的方法验证结果显示,秦皮甲素和秦皮乙素在各自的浓度范围内具有良好的线性关系(r=1.000 0),检出限和定量限分别为1.5μmol/L和3.0μmol/L,平均加标回收率分别为99.0%(RSD=1.4%)和97.5%(RSD=0.9%)。通过比较高效液相色谱紫外等吸收波长法和传统高效液相色谱外标法对10批秦皮样品中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定结果,显示两种方法测定结果一致。此外还采用t检验对该方法与《中国药典》2020版方法的含量测定结果进行比较,对比结果表明两种测定方法无显著性差异(P>0.05)。该方法耗时10 min,有害溶剂消耗0.5 mL,只使用1个对照品,具有快速、简便、环保和对照品消耗少的特点,适用于秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量测定,为秦皮质量评价的技术提升提供了依据。

高效液相色谱法同时测定复方南板蓝根片中秦皮乙素和菊苣酸

建立高效液相色谱同时测定复方南板蓝根片中秦皮乙素和菊苣酸含量的方法。采用XBridge C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液,梯度洗脱,流量为1 mL/min,检测波长为330 nm,柱温为40℃,进样体积为10μL,以色谱峰面积外标法定量。秦皮乙素和菊苣酸的质量浓度分别在18.40~184.02、4.96~49.61 g/mL范围内与色谱峰面积的线性关系良好,相关系数均为0.9999。秦皮乙素、菊苣酸测定结果的相对标准偏差分别为0.72%、0.54%(n=6),平均回收率分别为97.40%、98.45%。该方法操作简单,重复性好,准确度高。

三种微波萃取秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的方法

以秦皮甲素和秦皮乙素的含量为指标,研究了3种微波萃取秦皮的方法.3种方法分别为家用微波炉连续引入溶剂萃取法、微波谐振腔连续引入溶剂萃取法和实验室专用微波炉萃取法.结果表明,溶剂浓度、辐射时间、微波功率、样品粒度等均对萃取有影响.3种微波萃取法与索氏萃取法相比,提取效率高且可省时节能.

HPLC测定菊苣药材中的有效成分

目的测定菊苣药材中有效成分的含量。方法采用HPLC法。结果秦皮甲素、秦皮乙素、山莴苣苦素、羽扇豆醇的回收率分别为102.01%、102.99%、102.86%、101.06%,RSD分别为2.84%、2.60%、1.12%、2.47%,其回归方程的相关系数分别为0.9995、0.9998、0.9996、0.9992。结论所用方法准确、快速、简便、重复性好,可用于菊苣有效成分的含量测定。

虚拟组分-人工神经网络用于中药紫外光度法中多组分的同时测定

采用虚拟组分自修正、自拟合的方法消除了干扰组分的影响,实现了人工神经网络(ANN)-紫外分光光度法不经分离的中药多组分浓度的同时测定。建立了包含训练网络和拟合网络的双网络ANN算法,提高了ANN算法的自学习、自判别能力,使复杂中草药体系多组分浓度预报的准确度大大提高。对21种不同来源的秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量进行了预测,预测结果与HPLC法相比较,以相对误差小于10%计,预测准确率大于90%。该法对秦皮甲素和秦皮乙素的测定精密度分别为0.37%,1.5%。

藏药八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素和麝香酮的定量测定

目的建立八味秦皮丸(秦皮、针铁矿、草莓、多刺绿绒蒿、寒水石、美丽风毛菊、朱砂、麝香)质量标准中的定量测定项。方法采用高效液相色谱法测定秦皮甲素和秦皮乙素,色谱柱为依利特C18柱(4.6mm×250mm);流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(27∶73);体积流量为1.0 mL/min;柱温为室温;检测波长为344.4 nm。采用气象色谱法测定麝香酮,色谱柱为HP-5毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25μm);载气为氮气(99.99%);检测器温度为250℃;分流比为40∶1;程序升温150℃开始以10℃/min速度升温至170℃保持4 min,然后以15℃/min速度升温至230℃保持5 min。结果秦皮甲素、秦皮乙素进样量分别在0.200～2.502μg、0.120～1.503μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率分别为100.71%、100.38%,RSD分别为0.65%、0.87%(n=6);麝香酮进样量在15.20～152.0μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.27%,RSD为0.74%(n=6)。结论该方法灵敏、准确、专属性强,可用于八味秦皮丸中秦皮甲素、秦皮乙素、麝香酮的定量测定。

不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素、秦皮乙素的含量测定

目的 :测定不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素和秦皮乙素的含量。方法 :采用HPLC法 ,以乙腈 水 (15∶85 )为流动相 ,使用NovapakC18柱 ,检测波长 348nm ,外标法。结果 :进样量与峰面积线性关系良好 ,秦皮甲素与秦皮乙素的r值分别为 0 .9992 ,0 .9994 ,平均回收率分别为 98.2 % ,99.2 % ,RSD分别为 2 .2 4 % ,2 .15 %。因地理种源不同而造成的秦皮质量差异明显存在 ,陕西产秦皮质量上乘。结论 :本法操作快速、简便、易行 ,精密度、重复性、稳定性好 ,适用于秦皮含量的分析测定。

秦皮甲素、秦皮乙素与血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法研究了中药有效成分秦皮甲素、秦皮乙素与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明:秦皮甲素、秦皮乙素对血清白蛋白的荧光有较强的猝灭作用,其荧光猝灭为单一的静态猝灭过程,其作用机制属能量转移机制。求得不同温度下反应的结合常数K。由反应焓变、熵变确定它们间的结合主要是静电引力。依据非辐射能量转移机理,求出了其结合位置和能量转移效率。

HPLC法同时测定五味消毒饮中4种成分

目的建立HPLC法同时测定五味消毒饮中绿原酸、咖啡酸、蒙花苷和秦皮乙素4种活性成分。方法五味消毒饮水提液分析采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0μm）,以0.05%三氟乙酸溶液（V/V）-乙腈为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,检测波长为320 nm和344 nm,柱温30℃。结果绿原酸、咖啡酸、蒙花苷和秦皮乙素的线性范围分别为4.96-49.6μg/m L,0.255-2.55μg/m L,2.51-25.1μg/m L和2.47-24.7μg/m L（r≥0.999 8）。平均回收率在95%-105%范围内。结论该方法简便、灵敏、准确,可作为五味消毒饮的质量控制方法。

HPLC法测定秦皮4种有效成分的含量

目的采用高效液相色谱法建立秦皮药材中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的含量测定方法,为建立秦皮饮片质量评价体系提供含量测定方法学依据。方法制备秦皮供试品溶液,采用Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%甲酸水为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱。检测波长:254 nm测定秦皮甲素、秦皮苷和秦皮乙素,340 nm测定秦皮素。进样量:10μL,柱温:30℃,流速:0.8 mL·min^-1,依次进样分析。结果秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素质量浓度分别在78.60~1572、23.90~487.0、6.900~138.5、1.240~24.80 mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9996、0.9996、0.9995、0.9996;秦皮供试品中,四者的平均回收率分别为98.1%、98.9%、98.1%和98.5%;RSD分别为1.5%、1.6%、1.2%和0.90%(n=6)。结论建立的方法适用于研究秦皮药材中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素的含量测定。

三维荧光光谱法结合交替三线性分解算法同时分辨及定量测定秦皮中的秦皮甲素和秦皮乙素成分

用三维荧光分析结合交替三线性分解算法对秦皮中药成分进行定性定量分析,为直接测定秦皮甲素和秦皮乙素提供了一种快速简洁的方法。相关系数r分别为1.000和0.998。多次测定结果的相对误差分别为2.01%和2.21%。

RP-HPLC法测定细叶杜香叶中4种活性成分的质量分数

为了建立测定细叶杜香叶中秦皮乙素、秦皮素、金丝桃苷和槲皮素质量分数的方法,采用反相高效液相色谱法(色谱条件:色谱柱为Inertsil ODS-SP(5μm4,.6mm×250mm,柱号:9KI92609)、流动相为V(甲醇)∶V(0.2%醋酸)=43∶57、流速1.0 mL.min-1、检测波长350 nm),测得秦皮乙素、秦皮素、金丝桃苷和槲皮素4种成分的平均加样回收率分别为99.71%9、8.62%1、00.13%9、8.33%,其相对标准偏差RSD分别为1.45%1、.53%、1.04%1、.69%。结果表明:反相高效液相色谱法操作简便、准确,具有良好的重复性,可用于细叶杜香中此4种成分的质量分数的测定。

秦皮乙素诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的机制研究

目的探讨秦皮乙素诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的分子机制。方法不同浓度秦皮乙素(1.12、2.24、4.48 mmol/L)处理人肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞仪检测线粒体膜电位,分光光度法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性,蛋白印迹法和免疫荧光法检测Bax、Bcl-2、Caspase-9蛋白的表达。结果秦皮乙素显著降低SMMC-7721细胞线粒体膜电位,提高Caspase-3、Caspase-9的活性,而对Caspase-8的活性无显著影响;升高Bax/Bcl-2比例,进而活化Caspase-9,并呈良好的剂量依赖关系。结论秦皮乙素可通过线粒体途径,启动下游的效应Caspase,诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡。

退黄丸的质量标准研究

目的建立退黄丸(绵茵陈、栀子、葛根、大黄、赤芍、秦皮等)的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)鉴别成方制剂中大黄、葛根、赤芍、秦皮,以高效液相色谱法同时测定制剂中绿原酸和栀子苷,分别测定葛根素、芍药苷、大黄酸、秦皮甲素和秦皮乙素,流动相分别为甲醇和0.05%磷酸水、甲醇和水、甲醇和0.05mol/L磷酸二氢钾水溶液、甲醇和0.1%磷酸水、乙腈和0.1%磷酸水;检测波长分别为245 nm、250nm、230nm、254nm、334nm;所用色谱柱均为C18。结果 TLC可明显鉴别大黄、葛根、赤芍、秦皮。绿原酸、栀子苷、葛根素、芍药苷、大黄酸、秦皮甲素和秦皮乙素线性范围分别为0.0252～0.126 mg/mL、0.02632～0.1316 mg/mL、0.010 00～0.05000 mg/mL、0.010 68～0.05340mg/mL、0.00344～0.017 20mg/mL、0.00248～0.024 8 mg/mL、0.004 2～0.042 0 mg/mL;r值分别为0.99995、0.999 95、1.000 0、0.9997、1.000 0、1.0000、0.9997,平均回收率分别为98.80%、99.38%、99.12%、98.70%、98.72%、100.71%、98.85%;RSD分别为1.18%、0.95%、1.56%、2.11%、1.65%、0.65%、2.01%(n=6)。结论本试验定量方法操作简便,准确,重复性良好,可用于控制退黄丸的质量。

HPLC测定息痛宁胶囊中秦皮甲素和秦皮乙素的含量

目的 :测定中药复方制剂息痛宁胶囊中有效成份秦皮甲素和秦皮乙素的含量。方法 :采用HPLC ,ODS柱 ,流动相为甲醇 水 ( 2 4∶76 ) ,检测波长 336nm。结果 :秦皮甲素进样量在 0 0 0 5～ 1 5 μg范围内 ,峰面积与进样量有良好的线性关系 ,回收率 99 9% ;秦皮乙素进样量在 0 0 0 2 5～ 0 75 μg范围内 ,峰面积与进样量有良好的线性关系 ,回收率 10 2 7%。结论 :该方法准确性高 ,操作简单 。