牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验的建立与应用

【目的】建立并优化布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验(Native hapten agar gel immuno-diffusion test,NH-AGID),检测临床样品。【方法】建立NH-AGID方法,评价方法特异性、敏感性及重复性;检测免疫地区2287份、非免疫地区252份牛、羊血清。【结果】建立了NH-AGID方法,检测稳定,重复性好,具有较高的特异性;对自然感染阳性动物检测敏感性低于80%,对排菌动物的检测敏感性高于90%,检出布病阳性抗体的阈值高于RBT。免疫地区血清NH抗体平均检出率17.8%,LPS抗体平均检出率52.3%;非免疫地区血清NH抗体平均检出率40.9%,LPS抗体平均检出率54.8%。【结论】应用NH-AGID方法可鉴别区分免疫地区牛、羊布病感染动物和免疫动物。检出NH抗体动物处于布鲁氏菌活动期或排菌期为布病感染动物,应及时剔除出群。

巨大芽孢杆菌对江蓠植株琼脂直接脱硫工艺的建立及优化

为建立绿色便捷的琼脂脱硫工艺,以江蓠植株作为唯一硫源培养巨大芽孢杆菌进行琼脂脱硫。以脱硫菌的生长情况为评价指标,构建巨大芽孢杆菌对江蓠植株琼脂直接脱硫工艺,并优化江蓠植株脱硫工艺的灭菌方法、江蓠添加量和培养基各组分浓度。结果表明:江蓠植株琼脂在经过优化的脱硫工艺后,琼脂脱硫率达到37.985%,琼脂的凝胶强度由低于检测限提升至(200.263±7.121)g/cm^(2),发酵后的琼脂品质有明显的提升。

琼脂凝胶中气泡含量及间距对超声波衰减特性的影响

首先,基于声学探伤技术,采用透射法就琼脂凝胶中气泡对超声波传播的影响进行了试验研究;其次,用有限元分析软件对含气泡琼脂凝胶中的超声波传播进行了声学仿真。将试验结果和仿真结果进行对比,趋势一致结果符合良好,对琼脂凝胶中气泡尺寸、数量及间距对超声波衰减的影响分别进行了分析。结果表明:当气泡含量发生变化时,对超声波衰减起主要作用的是吸收衰减;当气泡含量一定时,气泡间距的改变对超声波的传播有着显著影响,随着间距的增加,声衰减逐渐增大,且随着频率增加声衰减逐渐减小。

新疆马传染性贫血病消灭工作考核验收结果分析

【目的】为通过农业农村部对新疆马传染性贫血病消灭工作考核验收,达到消灭标准,实现新疆消灭马传染性贫血病的目标,对巴音郭楞蒙古自治州和静县和伊犁州昭苏县马属动物进行马传染性贫血病检测验证。【方法】参照行业标准《马传染性贫血病琼脂凝胶免疫扩散试验方法》(NY/T569-2002),对马属动物进行马传染性贫血抗体检测。【结果】现场随机采集和静县马血清130份、昭苏县马血清110份,经检测,马传染性贫血抗体均为阴性,表明和静县和昭苏县无患马传染性贫血病的马属动物。【结论】新疆达到马传染性贫血病消灭标准,实现了消灭马传染性贫血病的目标。

琼脂凝胶质构特性的研究

研究了琼脂溶液浓度、pH、离子强度、Na^+、K^+、六偏磷酸钠(HMP)、焦磷酸钠(SPP)、三聚磷酸钠(TPP)对琼脂凝胶质构特性的影响。结果表明:影响琼脂凝胶硬度的主次因素依次为琼脂浓度、Na^+与K^+的摩尔比、离子强度、pH;影响琼脂凝胶弹性的主因素依次为琼脂浓度、离子强度、pH、Na^+与K^+摩尔比。影响粘聚性的主次因素依次为离子强度、琼脂浓度、Na^+与K^+摩尔比、pH。磷酸盐对琼脂凝胶硬度、弹性和粘聚性的影响主次顺序均为:焦磷酸钠、三聚磷酸钠、六偏磷酸钠。

犬瘟热琼脂扩散试验方法的建立及初步应用

采用犬瘟热鸡胚成纤维细胞弱毒疫苗免疫绵羊制备琼脂扩散抗体，应用犬瘟热病貉肝脏（电镜检查“＋＋”以上）制备琼脂扩散抗原，建立了琼脂扩散试验方法，用于犬瘟热病死动物肝、脾脏器中病毒抗原成分的检出。检测送检病料１０份，与电镜检查结果比较，阳性符合率为８５．７％（６／７），阴性符合率为７５％（３／４），总体符合率为９０％（９／１０）。本方法特异、敏感，操作简便，易于推广应用。

冷碱处理条件与龙须菜琼胶强度的关系

为研究冷碱处理条件与龙须菜琼胶凝胶强度(gelstrength,GS)的关系,采用均匀设计法,研究了温度T、碱液浓度M和处理时间t三因素与龙须菜琼胶凝胶强度的定量关系。通过多元线性回归拟合出回归模型:GS=27.72×T+19.69×M+2.75×t-488.62,P<0.0001。由回归模型可知,三因素对龙须菜凝胶强度的贡献大小为:T>M>t。在三因素的水平范围内,再经验证实验表明,实验测定值与回归预测值均无显著性差异(P>0.05)。这表明,该回归模型对龙须菜凝胶强度具有较好的预测性,为龙须菜冷碱法处理的最佳工艺条件、提高龙须菜琼胶加工质量、降低生产成本提供了重要科学依据。

提取江蓠琼脂新工艺条件的研究

提取江蓠琼脂新工艺条件的研究李来好，陈培基，王道公，吴燕燕（中国水产科学研究院南海水产研究所水产加工研究室）摘要采用＂高温稀碱法＂提取江蓠琼脂，系统地研究了江蓠的碱处理、漂白和提胶的新工艺条件。其主要特点是：（１）在碱处理中，添加了蒽衍生物，使琼脂的...

以氨基酸为配体的血液灌流用内毒素吸附剂的制备及性能研究

以琼脂凝胶为载体,氨基酸为配体,合成了内毒素吸附剂,并对其吸附效果进行了比较.对吸附剂的各种性质进行了表征,选取琼脂-赖氨酸吸附剂对内毒素血症的兔子进行血液灌流,可将血浆中的内毒素降至接近正常值,最高清除率达73.6%,且吸附剂具有良好的血液相容性.

全自动电泳分析系统筛查地中海贫血的临床应用价值探讨

目的探讨全自动电泳分析系统筛查地中海贫血(简称地贫)的应用价值。方法选择2008年1～12月已被基因诊断确诊的138例地贫患者和69例非地贫患者,对其血红蛋白电泳结果进行回顾性分析。结果与基因分析法相比,全自动电泳分析系统筛查α地贫的敏感性为95.0%,特异性为91.3%,诊断准确性为93.3%,阳性预测值95.0%,阴性预测值94.0%;筛查β地贫的敏感性为98.3%,特异性为95.7%,诊断准确性为96.9%,阳性预测值95.0%,阴性预测值98.5%。结论全自动电泳分析系统具有较高的特异性和较好的敏感性,是一种筛查地贫的理想方法。

黄芪总提物对肝细胞凋亡的抑制作用

为研究黄芪总提物 (TEA)对肝细胞凋亡的保护作用及其机理 ,分别用D 氨基半乳糖 (D GalN ,70 0mg·kg- 1,ip) +脂多糖 (LPS ,1μg·kg- 1,ip)诱导小鼠在体肝细胞凋亡和H2 O2 (0 .1mmol·L- 1,1h)诱导原代培养大鼠肝细胞凋亡 ,采用形态学观察 ,DNA凝胶电泳和流式细胞术等方法检测细胞凋亡 .结果表明 :①TEA (40mg·kg- 1,ig× 2 ,5h)使D GalN +LPS升高的小鼠血中肿瘤坏死因子 (TNF)水平和肝脏丙二醛 (MDA)含量降低 ,以及使降低的肝线粒体锰 超氧化物歧化酶 (Mn SOD)活性升高 ;TEA可明显抑制D GalN +LPS引起的小鼠肝细胞皱缩变小 ,核染色质凝聚和DNA片段化 .②TEA (2 0mg·L- 1)可恢复或减轻由H2 O2 所致肝细胞增殖受抑和肝细胞MDA含量升高 ;TEA (40mg·L- 1)可使H2 O2 致DNA较强的AO荧光染色变淡 ,TEA(2 0mg·L- 1)对H2 O2 所致的DNA片段化有抑制作用 ,使H2 O2 升高的大鼠肝细胞DNA亚G1峰 (即凋亡峰 )明显降低 ,经DNA软件分析 ,TEA可使H2 O2 升高的细胞凋亡率从 6 3.7%降至 4 .2 % .提示 ,TEA对体内外肝细胞凋亡均有保护作用 。

琼脂凝胶体系中草酸钙晶体的生长研究

动态观察琼脂凝胶体系中草酸钙晶体的形成情况, 采用X射线粉末衍射 (XRD)、傅立叶变换红外光谱(FTIR)、红外差谱对晶体进行表征,使用配有数码相机的生物学显微镜拍摄晶体形貌。结果表明,在此体系中得到了不同形貌的多种晶型草酸钙晶体,其中三水草酸钙 (COT)所占比例最高,二水草酸钙(COD)最少。并对此体系中的草酸钙晶体形成机理进行了探讨。

肾脏病患者尿蛋白电泳测定及其病理活检对比分析

[目的]评价十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)技术进行非浓缩尿蛋白电泳测定的临床意义。[方法]应用SDS-AGE技术对60例肾脏病患者非浓缩尿液样本蛋白组分进行分析,并与同时作肾活检的病理结果作对比。[结果]60例肾脏病患者非浓缩尿液样本根据尿蛋白电泳图谱可以区分为正常生理性蛋白谱带、单一中分子蛋白谱带、中小分子蛋白谱带、中高分子蛋白谱带、混合型(小、中、高)分子蛋白谱带。与肾活检病理结果相符。[结论]非浓缩尿蛋白电泳法敏感性好,快捷简便,可根据尿蛋白组分的分布判断肾脏损伤的部位和程度,有重要的临床诊断意义。

琼脂和卡拉胶凝胶性能研究

利用质构仪测量琼脂和卡拉胶凝胶特性,重点研究了Mg2+、浓度和pH值对琼脂和卡拉胶凝胶强度的影响。结果表明,琼脂凝胶强度随着Mg2+浓度的增加有小趋势的增加,因此可在琼脂中添加Mg2+,而Mg2+不能使卡拉胶凝胶,浓度是影响凝胶强度的主要因素,凝胶强度随着浓度的增加而增加,随着pH先增后减。

抗Fas mAb和IFN联合诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的观察联合应用抗 Fas 单克隆抗体(mAb)和干扰素-γ(IFNγ)诱导人胃癌细胞系 SGC-7901细胞凋亡,并探讨其在胃癌治疗中的意义.方法应用细胞形态观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞光度术检测抗 Fas mAb,IFN-γ单独及联合应用诱导的人胃癌细胞系SGC-7901细胞凋亡,并应用流式细胞光度术检测 IFN-γ对人胃癌细胞系 SGC-7901细胞表达 Fas 抗原的影响.结果抗 Fas mAb 显著诱导 SGC-7901细胞凋亡(19.3%),细胞 DNA 裂解片段呈现典型的"阶梯状"排列的条带.联合应用抗 Fas mAb 和 IFN-γ处理人胃癌细胞系 SGC-7901细胞凋亡率(29.4%)显著高于对照组、IFN-γ及抗 Fas mAb 处理组(1.2%,1.9%,19.3%,t=17.345,17.276,5.425,P<0.01及P<0.05).IFN-γ处理组人胃癌细胞系 SGC-7901细胞 Fas 抗原的表达阳性细胞数(59.3%)显著高于对照组(27.1%,t=12.995,P<0.05),抗 Fas mAb 诱导 SGC-7901细胞凋亡的敏感性与 Fas 抗原的表达水平显著相关.结论抗 Fas mAb 可以诱导 SGC-7901细胞凋亡.联合应用抗Fas mAb 和 IFN-γ具有协同诱导人胃癌细胞凋亡的作用,其机制可能与干扰素-γ显著上调人胃癌细胞系 SGC-7901细胞Fas 抗原的表达水平有关.

“全胚双氟碳法”制备禽脑脊髓炎琼扩抗原的研究

用禽脑脊髓炎病毒 (AEV) Van Rockel毒株接种 6日龄 SPF鸡胚 ,感染 11d后 ,分别收集鸡胚、绒毛尿囊膜及尿囊液 ,鸡胚剔除羽毛、眼球、爪和喙后与绒毛尿囊膜一起 ,制成匀浆 ,反复冻融 3次。通过 2次氟碳 (三氯三氟乙烷 )从全胚匀浆中萃取制备 AE琼扩抗原 (AGP- Ag)。用进口标准 AE AGP试剂进行标化 ,结果发现 :制备的 AE AGP- Ag与标准阳性血清之间有清晰、致密的沉淀线 ,并与标准 AE AGP- Ag的沉淀线完全吻合 ,表明两者的沉淀反应一致 ,从而建立了 AE AGP- Ag制备新方法——“全胚双氟碳法”。其制备 AEAGP- Ag有如下特点 :1产量高 ,平均每 3个 SPF鸡胚可获得 1m L AE AGP- Ag;2特异 ,与类症阳性血清无交叉反应 ;3敏感 ,AGP试验中毋需重复加样 ,普通琼脂板即可出线 ;4稳定性好 ,保存期长 ;5与标准 AEAGP- Ag阳性检出符合率均达 10 0 %。本研究表明用“全胚双氟碳法”制备的 AEAGP- Ag达到了进口标准 AEAGP- Ag质量 ,可用于 SPF鸡 AE抗体的监测 ,且生产成本低 ,也可用于商品鸡

非甾体类抗炎药对荷瘤小鼠肝癌的促凋亡作用(英文)

目的 :探讨非甾体类抗炎药 (NSAIDs)中选择性及非选择性的环氧化酶 - 2抑制剂对小鼠移植的肝肿瘤的凋亡诱导作用和其分子机理。方法 :昆明种小鼠腋下无菌接种腹水保种的鼠肝癌H2 2细胞 ,给予布洛芬 ,吲哚美辛和尼美舒利灌胃每天 1次 ,2 1d后断颈法处死小鼠 ,应用电镜 ,DNAladder,流式细胞术及Westernblot等方法研究NSAIDs对小鼠荷瘤的作用及分子机理。结果 :3种药均能诱导Hep2 2肿瘤细胞的凋亡 ,与对照组 (3.3%± 0 .6 % )相比 ,布洛芬 ,吲哚美辛和尼美舒利的细胞凋亡率分别上升为 15 %± 1.0 % ,2 9.7%± 1.5 %和 4 6 .3%± 3.5 %。尼美舒利治疗组呈现更为明显的凋亡形态和DNA梯度 ,也明显下调bcl-xL和bcl- 2的表达 ,而吲哚美辛和布洛芬下调bcl- 2表达的同时上调bcl-xL 的表达。 3种药物都不改变c -myc的表达。结论 :NSAIDs可抑制小鼠肝肿瘤的生长 ,诱导其肿瘤细胞调亡 ,其中选择性COX - 2抑制剂尼美舒利的作用最为明显 ,并与调节bcl-xL和bcl- 2的表达有关。

以琼脂凝胶固定热聚IgG制备类风湿关节炎免疫吸附剂的研究

以环氧氯丙烷对琼脂凝胶珠进行活化反应后键联热聚ＩｇＧ，制成一种新型类风湿关节炎免疫吸附剂。确定了最佳制备条件，使凝胶上环氧基的含量达１１０μｍｏｌ／ｇ，对热聚ＩｇＧ的固定量达６ｍｇ／ｇ。在体外条件下吸附剂对三种类风湿因子ＩｇＭＲＦ，ＩｇＧＲＦ及ＩｇＡＲＦ的吸附量分别达３４００、２２５０和２４００ＩＵ／ｇ。

SDS-琼脂糖凝胶电泳分析蛋白尿来源的临床意义

目的分析尿蛋白成分来鉴别蛋白尿来源。方法应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶进行非浓缩尿蛋白电泳分析49例蛋白尿患者的尿蛋白成分。结果在肾后性蛋白尿中往往可以检测到巨球蛋白等一类大分子蛋白,而在肾性则往往缺乏。并且以巨球蛋白作为鉴别蛋白尿的标准,其敏感性和特异性均达到95.8%。结论该方法客观性强,诊断符合率高,重复性好,简便快速,值得临床应用。

人源抗菌肽LL-37衍生物GLL-37抗菌活性研究

目的:对人源抗菌肽LL-37的特定氨基酸残基进行替换,获得衍生抗菌肽GLL-37,以增强其抗蛋白酶解能力和抗菌活性。方法:肽LL-37和GLL-37均由化学合成。采用微量稀释法测定它们对6种革兰氏阴性和阳性菌的最低抑菌浓度,以及在不同NaCl浓度下,它们对大肠埃希菌ATCC 25922的最低抑菌浓度。将LL-37和GLL-37与弹性蛋白酶共孵育后,通过对共孵育产物进行蛋白聚丙烯凝胶电泳和抗菌活性测定,研究它们抗弹性蛋白酶水解的能力。结果:GLL-37较LL-37对弹性蛋白酶的水解作用更具抵抗力。在高浓度NaCl下,GLL-37也较LL-37具有更强的抗菌活性。结论:通过对LL-37氨基酸序列中特定氨基酸残基的替换,可增强其抗菌活性及抗弹性蛋白酶水解能力,获得的衍生肽GLL-37具有很高的研究开发价值。