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Predictive Value of Serum Bone Sialoprotein and Prostate-specific Antigen Doubling Time in Patients with Bone Metastasis of Prostate Cancer 被引量:3
1
作者 王焱 张晓飞 +3 位作者 戴吉 郑咏池 张明根 何建军 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2013年第4期559-562,共4页
Summary: This study aimed to evaluate the diagnostic and prognostic significance of serum bone sialoprotein (BSP) and prostate-specific antigen doubling time (PSADT) in patients with bone metastasis (BM) from p... Summary: This study aimed to evaluate the diagnostic and prognostic significance of serum bone sialoprotein (BSP) and prostate-specific antigen doubling time (PSADT) in patients with bone metastasis (BM) from prostate cancer (PC). A total of 116 patients with PC, 120 patients with benign prostatic hyperplasia (BPH) and 120 healthy controls were enrolled in this study. PC patients were divided into bone metastasis (BM) group (n=56) and non-bone metastasis (NBM) group (n=60). Serum BSP was detected by Sandwich ELISA. Severity of bone pain was evaluated using visual analogue score (VAS). Serum f-PSA and t-PSA levels were measured by using electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA). PSADT was calculated according to the formula: PSADT=lg(2)/[log(PSA2)--log(PSA1)]. The mean serum BSP level in PC patients with BM was significantly higher than in PC patients without BM, BPH patients and controls (P〈0.001 for all). Pearson's analysis showed that serum BSP level was posi- tively correlated with VAS in PC patients with BM (P〈0.05). Receiver operating characteristics (ROC) analysis demonstrated that BSP discriminated patients with BM from those without BM at the cutoff value of 33.26 ng/mL. The sensitivity and specificity were 78.21% and 79.28%, respectively. The opti- mal cutoff value of PSADT was 131 days, with sensitivity of 85.69% and specificity of 85.36%. Kap- lan-Meier analysis revealed that subjects with higher BSP levels/shorter PSADT had a shorter BM-free period than those with lower BSP levels/longer PSADT. Serum BSP and PSADT are useful biomarkers for the diagnosis of BM from PC, and can be regarded as independent factors for predicting the progno- sis of BM from PC. Combined determination of BSP and PSADT can improve accuracy and positive rate of BM from PC significantly. 展开更多
关键词 bone sialoprotein prostate cancer bone metastasis PROGNOSIS
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Research progress of bone sialoprotein in osteoclast differentiation and bone resorption
2
作者 ZENG Jun-ming HE Xiao-ning 《Journal of Hainan Medical University》 CAS 2023年第18期65-69,共5页
Bone sialoprotein(BSP)is an important non-collagen extracellular matrix protein(EMC)that promotes bone formation and induces bone resorption.BSP is secreted by odontoblasts,it plays an important role in cementum,alveo... Bone sialoprotein(BSP)is an important non-collagen extracellular matrix protein(EMC)that promotes bone formation and induces bone resorption.BSP is secreted by odontoblasts,it plays an important role in cementum,alveolar bone formation and mineralization,and periodontal function.Bone resorption is controlled by a complex molecular network,and BSP can promote osteoclast differentiation and bone resorption.It is also associated with the metastasis of a range of malignancies.Osteoclasts(OC)are thought to be the only cells involved in bone resorption and play an important role in bone formation and late developmental remodeling.Osteoporosis and periodontal disease are caused by excessive bone resorption.This article will summarize the osteoclasts differentiation,the biological function of bone resorption,and explore the progress of the prevention and treatment of the related bone resorption diseases such as osteoporosis and periodontal disease through the regulation of osteoclasts. 展开更多
关键词 bone sialoprotein bone resorption OSTEOCLASTS OSTEOPOROSIS PERIODONTITIS
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Design of nano-piezoelectric immunosensor array to detect bone sialoprotein
3
作者 陈钰 《外科研究与新技术》 2011年第2期125-125,共1页
Objective With the unique properties of Au nano-particles,a nano-piezoelectric immunosensor microarray was designed using AT-cut 10 Hz quartz crystal to detect blood sialoprotein (BSP) expression from clinical serum.M... Objective With the unique properties of Au nano-particles,a nano-piezoelectric immunosensor microarray was designed using AT-cut 10 Hz quartz crystal to detect blood sialoprotein (BSP) expression from clinical serum.Methods 展开更多
关键词 Design of nano-piezoelectric immunosensor array to detect bone sialoprotein
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miR-192-5p靶向CKIP-1促进骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量:1
4
作者 鄂正康 辛红伟 +1 位作者 于清波 张允帅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第13期2641-2647,共7页
背景:酪蛋白激酶2结合蛋白1(casein kinase 2-interaction protein-1,CKIP-1)是一种重要的骨形成负调控基因,其敲除鼠骨质显著增强、骨形成和骨密度也显著提高。而miRNA作为较早发现的小分子调控物,对大多数编码基因具有调控作用,在成... 背景:酪蛋白激酶2结合蛋白1(casein kinase 2-interaction protein-1,CKIP-1)是一种重要的骨形成负调控基因,其敲除鼠骨质显著增强、骨形成和骨密度也显著提高。而miRNA作为较早发现的小分子调控物,对大多数编码基因具有调控作用,在成骨分化中发挥重要作用。目的:探讨miRNA/CKIP-1对骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及其分子机制。方法:采用miRNA-Seq技术检测2022年3-6月在开封市中心医院骨外科就诊32例骨质疏松患者及同期体检中心健康人群骨髓间充质干细胞中miRNA的变化情况;利用Targetscan网站预测靶向调控CKIP-1的miRNA,利用荧光素酶报告基因实验检测miRNA与CKIP-1启动子区DNA的结合;在骨髓间充质干细胞中转染miR-192-5p类似物(miR-192-5p mimics)/阴性对照(NC mimics)或miR-192-5p抑制剂(miR-192-5p inhibitor)/阴性对照(NC inhibitor),成骨诱导后第7,14天,通过实时荧光定量PCR技术及茜素红染色检测成骨标志基因Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素、抗骨桥蛋白、骨唾液蛋白及CKIP-1的表达水平和骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的情况;采用蛋白质免疫印迹实验及茜素红染色检测miR-192-5p/CKIP-1/轴对细胞成骨分化的的调控作用。结果与结论:与健康组相比,骨质疏松组有16个miRNA表达明显升高,53个miRNA表达明显降低(P<0.05);利用Targetscan网站预测,并通过荧光素酶报告基因实验验证,发现miR-192-5p与CKIP-1有互补的核苷酸序列(P<0.05);过表达miR-192-5p,Runx2、骨钙素、骨桥素和骨唾液蛋白的表达水平显著升高(P<0.05),抑制miR-192-5p,Runx2、骨钙素、骨桥素和骨唾液蛋白的表达水平显著降低(P<0.05),而沉默CKIP-1的表达后,Runx2、骨钙素及骨桥素的蛋白水平增加(P<0.05),逆转了敲低miR-192-5p对细胞成骨分化的抑制作用。上述结果证实,miR-192-5p在骨质疏松症中表达降低;miR-192-5p通过靶向抑制CKIP-1的表达,促进骨髓间充质干细胞成骨分化。 展开更多
关键词 骨质疏松 微小RNA miR-192-5p 酪蛋白激酶2结合蛋白1 骨髓间充质干细胞 成骨分化 Runt相关转录因子2 骨唾液蛋白
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Siblings蛋白家族在多种心脏疾病中的作用
5
作者 陈锦杰 李庚 姜烨凡 《中国组织工程研究》 北大核心 2025年第24期5171-5178,共8页
背景:Siblings家族蛋白为一种外分泌蛋白家族,可由多种细胞分泌至细胞外基质,使其黏附于细胞外基质胶原,反过来作用于细胞,产生相应的生理、病理作用。目的:归纳现阶段关于Siblings家族蛋白在心血管疾病方面的研究。方法:通过计算机对Pu... 背景:Siblings家族蛋白为一种外分泌蛋白家族,可由多种细胞分泌至细胞外基质,使其黏附于细胞外基质胶原,反过来作用于细胞,产生相应的生理、病理作用。目的:归纳现阶段关于Siblings家族蛋白在心血管疾病方面的研究。方法:通过计算机对PubMed、Web of Science、Engineering Village及中国知网数据库相关文献进行检索,检索时限为2008年1月至2024年3月,英文检索词为“Current research status,Siblings,Siblings protein family,Cardiovascular,Cardiovascular diseases”;中文检索词为“研究进展、Siblings家族蛋白、心血管、心血管疾病”,依据入选标准对检索结果进行筛选排除,最终纳入76篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)Siblings家族蛋白在心血管多种疾病中起了很大的作用,尤其是在瓣膜钙化、血管硬化的疾病中有十分大的研究潜力。(2)部分Siblings家族蛋白可以沉积钙盐形成羟基磷灰石核心,开始形成微钙化结节,并通过RGD肽段与细胞表面的整合素受体结合促进细胞成骨样分化的正反馈机制,增加自身的表达量。(3)整合素受体可成为治疗心血管钙化性疾病的潜在靶点,临床可通过阻断整合素受体达到延缓钙化进程的目的。 展开更多
关键词 Siblings Siblings家族蛋白 骨桥蛋白 骨涎蛋白 牙本质基质蛋白 牙本质涎磷蛋白 基质细胞外磷酸糖蛋白 心血管 心血管疾病
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联合检测血清NTx和BSP对乳腺癌和肺癌骨转移的意义 被引量:21
6
作者 王薇 王雅杰 傅强 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期478-483,共6页
目的:探讨骨代谢生化指标血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(N-telopeptide of typeⅠcollagen,NTx)和骨涎酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)的检测对肺癌和乳腺癌骨转移的临床意义。方法:选择2006年1月至2006年7月长海医院肿瘤科经病理确诊的肺... 目的:探讨骨代谢生化指标血清Ⅰ型胶原交联氨基末端肽(N-telopeptide of typeⅠcollagen,NTx)和骨涎酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)的检测对肺癌和乳腺癌骨转移的临床意义。方法:选择2006年1月至2006年7月长海医院肿瘤科经病理确诊的肺癌或乳腺癌患者105例,分为两组,其中骨转移组50例,无骨转移组55例。应用ELISA法检测患者血清NTx和BSP浓度。结果:骨转移组患者血清NTx和BSP水平均明显高于无骨转移组(P<0.01)。NTx诊断骨转移的灵敏度和特异度分别为90.0%和67.3%,BSP诊断骨转移的灵敏度和特异度分别为84.0%和70.9%。临床发生骨相关事件(skeletal related event,SRE)的骨转移患者,血清NTx水平明显高于未发生SRE的骨转移患者(P<0.05)。在6~13个月随访期内,21例患者确诊了新发骨转移;采用Cox比例风险回归模型分析,血清NTx浓度升高提示骨转移发生的相对危险度为1.127;乳腺癌患者血清BSP增高是唯一预测骨转移的危险因素(P<0.05),其相对危险度为1.058。随访期共有33例患者死亡;无论肺癌还是乳腺癌,血清BSP增高患者的累积生存率均明显低于血清BSP正常组(P<0.05)。结论:血清NTx和BSP是诊断肺癌和乳腺癌骨转移的重要参考指标,其水平的增高是预测骨转移发生的高危因素;BSP可能是肺癌和乳腺癌患者独立预后指标。 展开更多
关键词 Ⅰ型胶原交联氨基末端肽 骨涎酸蛋白 肺癌 乳腺癌 骨转移 诊断 预后
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BSP基因RNA干扰对乳腺癌MDA-MB-231BO细胞生物学特性的影响 被引量:8
7
作者 燕慧 王捷 +4 位作者 杨自飞 张宏斌 夏冰 冼江 王江涛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期142-145,共4页
旨在研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因表达后对人乳腺癌细胞MDA-MB-231BO生物学特性的影响。应用pSilencer5.1-U6Retro构建针对BSP基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒,将重组质粒转染29... 旨在研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因表达后对人乳腺癌细胞MDA-MB-231BO生物学特性的影响。应用pSilencer5.1-U6Retro构建针对BSP基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒,将重组质粒转染293细胞制备病毒悬液感染MDA-MB-231BO细胞,利用嘌呤霉素筛选抑制BSP表达的乳腺癌细胞。Western blotting检测细胞内BSP蛋白表达,采用MTT法和集落形成试验检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果显示,成功构建BSP基因RNAi稳定转染的231BO-BSP27细胞。231BO-BSP27细胞内BSP蛋白表达抑制率为69.3%,与对照组细胞相比,231BO-BSP27细胞的生长速率和克隆形成率明显降低;S期细胞数量明显减少,G0/G1期细胞增多。由此证实,逆转录病毒介导的RNAi能实现BSP基因稳定沉默,从而抑制MDA-MB-231BO细胞的生长和增殖。 展开更多
关键词 骨唾液酸蛋白 RNA干扰 增殖 细胞周期
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抗重组人骨唾液酸蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:6
8
作者 王捷 刘增田 +3 位作者 杨太成 杨静 冼江 刘大志 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2006年第6期323-325,共3页
目的研制重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法以纯化的rhBSP免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗rhBSP mAb;用亚型鉴定试剂条鉴定IgG亚类;ELISA鉴定mAb的特异性和效价。结果获得2株能稳定分泌特异性mAb的抗rh... 目的研制重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法以纯化的rhBSP免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗rhBSP mAb;用亚型鉴定试剂条鉴定IgG亚类;ELISA鉴定mAb的特异性和效价。结果获得2株能稳定分泌特异性mAb的抗rhBSP的杂交瘤细胞系AHB1和AHB5,Ig亚类分别为IgG2a和IgG1,轻链均为κ型,其效价分别为1×10-3和1×10-7。腹水mAb经Protein A亲和色谱柱纯化后,纯度达92%以上。结论获得抗rhBSP的mAb,为进一步研究BSP的生物学功能和用于临床诊断实验研究创造了条件。 展开更多
关键词 人骨唾液酸蛋白 单克隆抗体 重组 制备 特性鉴定
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釉基质蛋白对人牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白的影响 被引量:8
9
作者 杜岩 吴织芬 +3 位作者 万玲 董广英 张贤华 袁乃梅 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2004年第3期126-129,共4页
目的 :观察釉基质蛋白对体外培养的人牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白能力的影响。方法 :乙酸法提取猪釉基质蛋白 ,改良组织块法原代培养人牙周膜细胞 ,免疫细胞化学方法和图像分析方法观察细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白的能力。结果 :... 目的 :观察釉基质蛋白对体外培养的人牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白能力的影响。方法 :乙酸法提取猪釉基质蛋白 ,改良组织块法原代培养人牙周膜细胞 ,免疫细胞化学方法和图像分析方法观察细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白的能力。结果 :人牙周膜细胞胞浆骨桥蛋白、骨涎蛋白染色阳性 ,2 0 0、10 0、5 0mg/L釉基质蛋白作用下可以使细胞胞浆骨桥蛋白、骨涎蛋白染色不同程度地加深。人牙周膜细胞在釉基质蛋白作用下 ,最早从第 3d开始骨桥蛋白表达增加、从第 7d开始骨涎蛋白表达增加。结论 :一定浓度的釉基质蛋白在特定的时间可以促进牙周膜细胞合成骨桥蛋白、骨涎蛋白。 展开更多
关键词 牙周膜细胞 釉基质蛋白 骨桥蛋白 骨涎蛋白
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羟基磷灰石陶瓷诱导成骨细胞的研究 被引量:8
10
作者 王朝元 段友容 +3 位作者 Boban Markovic C. Hala Zreiqat Rolfe Howlett 张兴栋 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期1110-1113,共4页
通过定量检测在羟基磷灰石(HA)表面生长的成骨细胞骨涎蛋白和骨钙蛋白的表达,研究了羟基磷灰石陶瓷对成骨细胞的影响.研究结果表明,随着成骨细胞培养时间的延长,在羟基磷灰石表面生长的成骨细胞骨钙蛋白和骨涎蛋白的表达量相对于对照组... 通过定量检测在羟基磷灰石(HA)表面生长的成骨细胞骨涎蛋白和骨钙蛋白的表达,研究了羟基磷灰石陶瓷对成骨细胞的影响.研究结果表明,随着成骨细胞培养时间的延长,在羟基磷灰石表面生长的成骨细胞骨钙蛋白和骨涎蛋白的表达量相对于对照组有显著增加.由于骨钙蛋白和骨涎蛋白是成骨细胞分化晚期高度表达的两种标志性蛋白质,因此其表达量的显著提高意味着羟基磷灰石陶瓷可以诱导成骨细胞的成熟.这一结果可进一步为理解HA陶瓷的生物相容性和生物活性提供分子生物学依据. 展开更多
关键词 羟基磷灰石陶瓷 成骨细胞成熟 骨钙蛋白 骨涎蛋白
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间充质干细胞的成骨细胞分化和免疫组织化学鉴定 被引量:4
11
作者 蔡敏 林建立 +2 位作者 侯建明 江亚涛 晋龙 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期628-632,共5页
目的探讨脐带的间充质干细胞分化为成骨细胞的影响因素和免疫组织化学鉴定。方法收集306例冻存的健康胎儿脐带,采用华尔通胶组织块贴壁法从脐带组织中分离间充质干细胞,利用荧光显微镜观察原代细胞的细胞形态。脐带间充质干细胞的免疫... 目的探讨脐带的间充质干细胞分化为成骨细胞的影响因素和免疫组织化学鉴定。方法收集306例冻存的健康胎儿脐带,采用华尔通胶组织块贴壁法从脐带组织中分离间充质干细胞,利用荧光显微镜观察原代细胞的细胞形态。脐带间充质干细胞的免疫表型和细胞周期采用免疫组织化学检测。复苏冻存的脐带间充质干细胞,并传代培养至10代。对第10代的脐带间充质干细胞进行成骨诱导,其成骨能力分别通过钙结节和骨涎蛋白的免疫荧光检测以及茜素红染色检测来确定。结果免疫组织化学结果显示,培养的细胞高表达间充质干细胞的表面标志物CD73、CD90和CD105,但是不表达造血细胞的表面标志物CD34和CD45。复苏后细胞的存活率是90%。细胞周期显示,第10代的细胞有80%处于G0/G1期,20%处于S+G2/M期。成骨细胞刺激因子诱导干细胞的骨涎蛋白染色呈阳性,并形成矿化的钙结节。结论冻存的脐带间充质干细胞在成骨细胞刺激因子下能被诱导分化为成骨细胞,具有高度自我增殖和多向分化能力。 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨细胞 骨涎蛋白 细胞三维培养 免疫组织化学
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骨唾液蛋白非融合荧光蛋白载体的构建及其在特异性骨转移乳腺癌细胞中的稳定表达 被引量:3
12
作者 杜红延 王捷 +3 位作者 郭勇 郑霖 杨静 刘大志 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期410-412,共3页
目的构建骨唾液蛋白(BSP)非融合荧光表达载体,建立稳定高效表达BSP和荧光蛋白的乳腺癌细胞系,为进一步研究BSP在乳腺癌细胞骨转移中的作用奠定基础。方法从构建好的pB hBSP载体中用PCR方法扩增hBSP基因,通过BglⅡ和PstⅠ两个限制性酶切... 目的构建骨唾液蛋白(BSP)非融合荧光表达载体,建立稳定高效表达BSP和荧光蛋白的乳腺癌细胞系,为进一步研究BSP在乳腺癌细胞骨转移中的作用奠定基础。方法从构建好的pB hBSP载体中用PCR方法扩增hBSP基因,通过BglⅡ和PstⅠ两个限制性酶切位点定向克隆至真核表达载体pIRES2EGFP,构建重组载体pIRES2hBSP EGFP。利用脂质体转染的方法将构建好的重组质粒转入特异性骨转移的乳腺癌细胞株MDA MB231BO中,并利用G418和流式细胞仪筛选阳性克隆。结果成功构建hB SP和EGFP非融合表达的真核表达载体pIRES2hBSP EGFP,并成功转染特异骨转移的乳腺癌细胞株,获得hBSP的稳定转染细胞株,荧光显微镜下可观察到荧光蛋白标记。结论真核表达载体pIRES2hBSP EGFP的构建及hBSP稳定转染细胞株的获得为研究BSP在乳腺癌骨转移中的作用奠定了的基础。 展开更多
关键词 骨唾液蛋白 荧光蛋白 乳腺癌细胞 基因转染 稳定表达 非融合荧光蛋白载体 特异性骨转移
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骨唾液酸蛋白(BSP)的结构与功能 被引量:5
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作者 董燕 杨连生 王捷 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2002年第3期50-53,共4页
骨唾液酸蛋白 (Bonesialoprotein ,简称BSP)是细胞外基质中的一种糖蛋白 ,主要分布在矿化组织中 ,参与骨代谢 ,但近年研究发现BSP在癌细胞的骨转移中发挥作用并对血管生成有促进作用。本文对BSP的结构与功能及研究状况作一介绍。
关键词 骨唾液酸蛋白 BSP 结构 功能 肿瘤 骨转移
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人骨唾液酸蛋白酵母工程细胞的构建与表达 被引量:4
14
作者 董燕 王捷 +2 位作者 张宏斌 武捷 郑文岭 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2003年第3期109-112,共4页
目的构建表达重组人骨唾液酸蛋白 (rhBSP)的巴斯德毕赤酵母工程细胞 ,实现rhBSP的酵母胞外分泌性高表达。方法通过PCR扩增获得人BSP基因后 ,构建重组表达载体pPICZaA hbsp ,经电转化导入到毕赤酵母GS115菌中 ,获得GS115 pPICZaA hbsp... 目的构建表达重组人骨唾液酸蛋白 (rhBSP)的巴斯德毕赤酵母工程细胞 ,实现rhBSP的酵母胞外分泌性高表达。方法通过PCR扩增获得人BSP基因后 ,构建重组表达载体pPICZaA hbsp ,经电转化导入到毕赤酵母GS115菌中 ,获得GS115 pPICZaA hbsp工程菌 ,通过Zeocin高抗性筛选和摇瓶发酵筛选出高表达rhBSP的菌株 ,并进行高密度发酵提高表达量。结果rhBSP分子量接近 6 6 0 0 0 ,产物可达上清液总蛋白的 80 % ,浓度约 0 .2 4 8g L。结论基因工程菌GS115 pPICZaA 展开更多
关键词 人骨唾液酸蛋白 毕赤酵母 基因表达 发酵
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牙本质基质蛋白1、骨桥蛋白及骨涎蛋白在小鼠牙骨质形成中的组织学定位 被引量:3
15
作者 李纾 潘克清 +3 位作者 葛少华 谢瑞阅 段学静 杨丕山 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2005年第1期28-32,共5页
目的:研究牙本质基质蛋白1(dentinmatrixprotein1,DMP1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成中的时空分布特点。方法:取出生后第5、10、15、25天的BALB/c小鼠36只,引颈处死... 目的:研究牙本质基质蛋白1(dentinmatrixprotein1,DMP1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成中的时空分布特点。方法:取出生后第5、10、15、25天的BALB/c小鼠36只,引颈处死,解剖分离含下颌第一磨牙区的下颌骨,新鲜配制4%多聚甲醛固定过夜,甲酸-甲酸钠复合脱钙液脱钙1~3周,常规石蜡包埋,近远中向5μm连续切片,免疫组化PV二步法检测DMP1、OPN及BSP的表达。采用CMIAS2000多功能真彩色病理图像分析系统,高倍镜下每张切片阳性部位沿牙骨质表面随机选取不相重叠的10个视野,计算机测量其积分光密度值,取其均值,计为该指标的1个标本的积分光密度值。相同指标重复3次,均值作为该指标在该标本中的表达强度,各指标在不同发育期的积分光密度值采用重复测量数据方差分析,分别进行统计学处理。结果:DMP1、OPN及BSP在小鼠成牙骨质细胞分化及牙骨质形成过程中呈先后不同的时相表达。DMP1表达最早,出生后第5天在牙囊细胞中表达阳性,一旦牙囊开始分化为牙周膜细胞、成牙骨质细胞和成骨细胞,其表达开始转为阴性;而OPN至出生后第10天出现表达,第15天达到高峰,此后持续表达至牙发育完成的第25天;BSP直到第15天开始表达,持续到第20天后开始减弱,至牙根发育第25天近阴性表达。对3种调节因子的染色积分光密度值的方差分析结果显示:除OPN在第15~25天之间无显著性差异外,其他各因子两两比较差异均具有显著性。结论:牙骨质是由不同序贯发生的多种调节信号顺序启动牙囊细胞分化成牙骨质细胞而形成,DMP1、OPN及BSP在这一过程中先后起着重要的调节作用。 展开更多
关键词 牙本质基质蛋白1 骨桥蛋白 骨涎蛋白 免疫组织化学
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牙周韧带细胞体外矿化的研究——骨唾蛋白与骨桥素在矿化过程中的表达 被引量:11
16
作者 王燕 汪说之 +1 位作者 樊明文 李纾 《口腔医学纵横》 CSCD 2002年第1期11-13,I002,共4页
目的 :研究骨唾蛋白与骨桥素在体外培养的人牙周韧带细胞矿化过程中的表达。方法 :体外培养的人牙周韧带细胞 ,经地塞米松矿化液诱导 ,分别于不同的时间在相差显微镜下观察其矿化结节的形成 ,采用免疫细胞化学的方法观察骨唾蛋白与骨桥... 目的 :研究骨唾蛋白与骨桥素在体外培养的人牙周韧带细胞矿化过程中的表达。方法 :体外培养的人牙周韧带细胞 ,经地塞米松矿化液诱导 ,分别于不同的时间在相差显微镜下观察其矿化结节的形成 ,采用免疫细胞化学的方法观察骨唾蛋白与骨桥素的表达情况。结果 :矿化培养 1周细胞呈复层生长 ,骨桥素呈阳性染色 ;两周细胞密集呈结节状 ,骨唾蛋白与骨桥素均为阳性 ,胞浆染成黄褐色 ;3周出现矿化结节 ,矿化以后骨唾蛋白与骨桥素保持稳定表达。结论 :牙周韧带细胞在适当的条件下可以向成骨细胞表型分化 ,表达矿化相关蛋白 ,形成矿化结节。 展开更多
关键词 牙周韧带细胞 矿化 骨唾蛋白 骨桥素 牙周病
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人骨唾液酸蛋白在巴斯德毕赤酵母中的高效分泌表达 被引量:2
17
作者 董燕 王捷 +2 位作者 杨连生 张宏斌 郑文岭 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期26-29,共4页
以PCR方法扩增人bsp基因 ,与分泌型表达载体 pPICZαA重组 ,重组质粒经电击转化毕赤酵母GS115菌株 ,获得的GS115 /pPICZαA_hbsp表达菌株能高效分泌表达rhBSP .SDS_PAGE和Westernblot分析结果表明 ,产物的分子质量接近 6 6ku ,能发生特... 以PCR方法扩增人bsp基因 ,与分泌型表达载体 pPICZαA重组 ,重组质粒经电击转化毕赤酵母GS115菌株 ,获得的GS115 /pPICZαA_hbsp表达菌株能高效分泌表达rhBSP .SDS_PAGE和Westernblot分析结果表明 ,产物的分子质量接近 6 6ku ,能发生特异性抗原 展开更多
关键词 人骨唾液酸蛋白 巴斯德毕赤酵母 基因表达 分泌型表达载体 PCR方法 抗原-抗体反应
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重组人骨唾液酸蛋白的纯化及生物学活性研究 被引量:3
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作者 董燕 王捷 +2 位作者 谭刘欣 张宏斌 武婕 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2006年第2期71-74,78,共5页
目的对毕赤酵母表达的重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)进行纯化和活性研究,为进一步研究BSP功能活性,揭示相关病理机制奠定基础。方法毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115/pPICZαA-hbsp工程菌能高效分泌表达rhB-SP,采用Ni-NTA介质以亲和色谱法纯... 目的对毕赤酵母表达的重组人骨唾液酸蛋白(rhBSP)进行纯化和活性研究,为进一步研究BSP功能活性,揭示相关病理机制奠定基础。方法毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115/pPICZαA-hbsp工程菌能高效分泌表达rhB-SP,采用Ni-NTA介质以亲和色谱法纯化rhBSP。通过羟基磷灰石(HA)晶体生长抑制实验、细胞黏附实验和鸡胚尿囊绒膜实验分析rhBSP的生物学活性。结果纯化的rhBSP达到电泳纯,并能抑制HA晶体生长,可介导乳腺癌细胞黏附和促进血管生成。结论纯化的rhBSP具有良好的生物学活性,可用于进一步研究BSP相关的病理、生理机制。 展开更多
关键词 人骨唾液酸蛋白 毕赤酵母 表达 纯化 活性
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鼠矿化组织中非胶原蛋白的提取和层析分离 被引量:4
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作者 聂敏 边专 +3 位作者 樊明文 王茜 Marie-Louise Olesson Mikael Wendel 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2003年第3期170-172,共3页
目的 :提取小鼠矿化组织中的基质蛋白 ,用离子交换层析法分离非胶原蛋白 ,并进行初步分析。方法 :取新生小鼠的颅盖骨和成年鼠的股骨 ,用盐酸胍和EDTA提取基质蛋白 ,采用MonoQHR离子交换柱层析 ,4% - 16%SDS -PAGE梯度胶电泳 ,Stains-Al... 目的 :提取小鼠矿化组织中的基质蛋白 ,用离子交换层析法分离非胶原蛋白 ,并进行初步分析。方法 :取新生小鼠的颅盖骨和成年鼠的股骨 ,用盐酸胍和EDTA提取基质蛋白 ,采用MonoQHR离子交换柱层析 ,4% - 16%SDS -PAGE梯度胶电泳 ,Stains-All染色结合银染鉴定蛋白质 ,抗骨唾蛋白 (bonesialoprotein ,BSP)抗体 ,抗骨桥素(osteopontin ,OPN)抗体进行免疫印迹。结果 :用MonoQHR离子交换柱能够有效地分离出矿化组织的非胶原蛋白 ,Stains-All硝酸银染色和免疫印迹显示出不同组份的蛋白质提取分析情况。结论 :对矿化组织中的非胶原蛋白的初步提取、分离可以采用MonoQHR离子交换柱层析 ,采用银染结合Stains -All染色。 展开更多
关键词 矿化组织 非胶原蛋白 离子交换层析法 免疫印迹法
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骨涎蛋白单克隆抗体对亲骨转移乳腺癌细胞与骨基质黏附的抑制 被引量:3
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作者 龚应静 王捷 +1 位作者 宋惠雪 夏冰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第6期536-539,共4页
目的:探讨骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)单克隆抗体对亲骨转移乳腺癌细胞(MDA-MB-231-BO)与骨基质黏附的抑制作用。方法:免疫组化方法检测MDA-MB-231-BO、肺癌细胞SPC-1、大肠癌细胞LOVO、乳腺癌细胞BSP的表达;体外骨基质黏附实验检... 目的:探讨骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)单克隆抗体对亲骨转移乳腺癌细胞(MDA-MB-231-BO)与骨基质黏附的抑制作用。方法:免疫组化方法检测MDA-MB-231-BO、肺癌细胞SPC-1、大肠癌细胞LOVO、乳腺癌细胞BSP的表达;体外骨基质黏附实验检测肿瘤细胞与骨基质的黏附,以及BSP单克隆抗体对MDA-MB-231-BO细胞与骨基质黏附的抑制;以ELISA法检测肿瘤细胞中生长因子TGF-β1分泌的变化。结果:免疫组化结果表明,MDA-MB-231-F10细胞表达BSP,SPCA-1和LOVO细胞不表达BSP;MDA-MB-231-BO细胞黏附骨基质数明显大于SPCA-1细胞和LOVO细胞(P<0.01);BSP抗体对MDA-MB-231-BO细胞和骨基质黏附具有特异抑制作用,随着抗体质量浓度升高(25、50、100、200μg/ml),其抑制率分别为22.1%、35.0%、39.2%、41.9%,抑制率与抗体浓度呈正相关;同时BSP抗体能特异性抑制MDA-MB-231-BO细胞与骨基质黏附所介导TGF-β1的释放。结论:BSP单克隆抗体对MDA-MB-231-BO细胞和骨基质黏附具有特异抑制作用,提示BSP抗体可抑制乳腺癌特异性骨转移。 展开更多
关键词 骨涎蛋白 单克隆抗体 乳腺癌 骨转移 TGF-Β1
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