感音神经性耳聋患者外周血miR-34c、miR-29b的表达及意义

目的探讨感音神经性耳聋(SNHL)患者外周血miR-34c、miR-29b的表达情况及临床意义。方法筛选2020年6月至2023年6月我院收治的神经性耳聋患者140例为观察组,同期选取体检健康者40例为对照组。根据听力损伤情况将SNHL患者分为轻度耳聋组63例,中度耳聋组42例,重度耳聋组35例。采用qRT-PCR检测miR-34c、miR-29b的表达,并检测VEGF、氧化应激水平(TAC、SOD、MDA)、NO和Cx26;采用Pearson检验进行相关性分析,采用logistic回归分析SNHL病情严重程度的独立危险因素,采用ROC曲线评估miR-34c、miR-29b对SNHL患者病情严重程度的预测价值。结果4组NO、TAC、SOD、Cx26水平比较,重度耳聋组<中度耳聋组<轻度耳聋组<对照组(P<0.05);VEGF和MDA水平比较,重度耳聋组>中度耳聋组>轻度耳聋组>对照组(P<0.05)。4组miR-34c mRNA和miR-29b mRNA表达水平比较,重度耳聋组>中度耳聋组>轻度耳聋组>对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,SNHL患者外周血miR-34c、miR-29b与VEGF、MDA呈正相关,与NO、TAC、SOD、Cx26呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,VEGF、MDA、NO、Cx26、TAC、SOD、miR-34c、miR-29b是影响SNHL病情严重程度的独立因素。结论miR-34c、miR-29b在SNHL患者中过表达,可作为预测评估SNHL患者病情严重程度的血清标志物。

基于miR-29b/TGF-β/Smad信号通路探讨复方血栓通对糖尿病视网膜病变大鼠作用的机制 分析

目的基于miR-29b/转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路探讨复方血栓通对糖尿病视网病变(DR)大鼠的的作用机制。方法100只雄性SD大鼠,其中80只建立糖尿病模型,20只作为正常组。通过腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)成功建立糖尿病DR大鼠模型72只,按照随机数字表法将其分为模型组、二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组,每组各18只。二甲双胍组通过灌胃二甲双胍184 mg/kg,复方血栓通1组通过灌胃复方血栓通片100 mg/kg,复方血栓通2组通过灌胃复方血栓通片200 mg/kg,给药10周。正常组大鼠随意给予正常饮食和饮用水,而模型组、二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠喂以高脂肪饮食,直至第16周末。测定并比较各组大鼠血清胰岛素与血糖水平,比较各组大鼠血清细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6]、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛水平。实时荧光定量PCR与蛋白印迹法分别检测各组大鼠视网膜组织中miR-29b表达与TGF-β/Smad信号通路蛋白表达。结果与正常组相比,模型组大鼠血清胰岛素及30、60、90 min内血糖均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清胰岛素及30、60、90 min内血糖水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,模型组血清中的血清SOD活性显著降低,丙二醛含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠血清SOD活性显著增加,丙二醛含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常组大鼠眼球视网膜视盘结构清晰,各层细胞排列整齐;模型组大鼠部分视网膜细胞水肿,层次模糊,排列稀疏紊乱,盘间隙呈空泡状,核染色质致密;二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠上述视网膜病变显著逆转。与正常组相比,模型组大鼠视网膜组织中miR-29b、TGF-β、p-Smad-3蛋白水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组大鼠视网膜组织中miR-29b、TGF-β、p-Smad-3蛋白水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍组、复方血栓通1组、复方血栓通2组组间大鼠以上各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论复方血栓通可显著改善大鼠视网膜病变通过抑制机体氧化应激与炎症因子水平,其机制可能与抑制miR-29b/TGF-β/Smad信号通路相关。

胞磷胆碱钠联合尤瑞克林对缺血性脑卒中患者miR-17-5p、miR-29b表达的影响

目的探讨胞磷胆碱钠、尤瑞克林对缺血性脑卒中患者miR-17-5p、miR-29b表达的影响。方法以在医院进行治疗的100例缺血性脑卒中患者为观察对象,并利用随机表法分为对照组、联合组,时间为2023年2月至2024年2月,分别给予尤瑞克林单一治疗及胞磷胆碱钠、尤瑞克林联合治疗。检测两组脑血流灌注指标、炎症因子、氧化应激、miR-17-5p、miR-29b水平和临床疗效,统计并记录患者不良反应。结果两组治疗前CBF、CBV、hs-CRP、miR-29b、IL-6、TNF-α、miR-17-5p比较,差异无统计学意义(P>0.05);患者在经过治疗后,CBF、CBV、miR-29b、SOD、GSH-Px水平升高,hs-CRP、IL-6、TNF-α、miR-17-5p、MDA水平降低,且联合组CBF、CBV、miR-29b、SOD、GSH-Px水平高于对照组,hs-CRP、TNF-α、IL-6、miR-17-5p、MDA水平与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。联合组不良反应发生率、治疗总有效率高于对照组(P<0.05),不良反应轻微,均可耐受。结论胞磷胆碱钠、尤瑞克林联合能够改善患者临床疗效,提高患者预后。

miR-29b通过KLF4调控血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达

目的探讨微小RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)通过靶向作用于Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4,KLF4)信号通路对血管平滑肌细胞增殖及表型蛋白表达的影响。方法将血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)分为4组:无义序列对照组(control+NC)、miR-29b过表达对照组(control+miR-29b)、无义序列模型组(ox-LDL+NC)、miR-29b过表达模型组(ox-LDL+miR-29b)。对照组细胞正常培养;模型组细胞采用80 mg/L氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导24 h建立模型。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测VSMCs的增殖情况;实时荧光定量PCR检测miR-29b、单核细胞化学趋化因子1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、MCP-3、α平滑肌肌动蛋白(smooth muscleα-actin,SMα-actin)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle myosin heavy chain,SM MHC)及KLF4的mRNA表达水平;酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测培养上清中MCP-1、MCP-3水平;Western blot检测蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-29b对KLF4的靶向作用。结果ox-LDL刺激VSMCs后,细胞中miR-29b表达量显著下降。与ox-LDL+NC组相比,ox-LDL+miR-29b组细胞增殖减少,炎症因子MCP-1和MCP-3的表达降低,收缩表型蛋白SMα-actin、SM MHC的表达显著升高,KLF4表达下降。双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-29b能与KLF4 mRNA的3′端非翻译区(3′UTR)结合。过表达KLF4可抑制miR-29b的作用。结论miR-29b可靶向作用于KLF4,调控ox-LDL诱导的VSMCs增殖、炎症因子的表达及表型蛋白表达的变化。

miR-29b、ESM1联合血栓弹力图检测诊断早发型PE价值

目的:探究miR-29b、内皮细胞特异性分子-1(ESM1)及血栓弹力图联合检测对早发型子痫前期(PE)的诊断价值。方法:回顾性收集2022年1月-2023年12月在本院接受治疗的93例早发型PE患者为病例组,产前检查正常妊娠且分娩的孕妇93例为对照组。分析两组血清miR-29b、ESM1水平,检测血栓弹力图情况,探究各指标对患者早发型PE及其病情严重程度的诊断效能。结果:病例组血清miR-29b(1.45±0.54)、ESM1(326.15±41.12 mmol/L)水平均高于对照组(1.23±0.45、196.23±32.15 mmol/L),反应时间、凝血时间、综合凝血指数均低于对照组,最大振幅高于对照组(均P<0.05),两组水平夹角比较无差异(P>0.05);miR-29b、ESM1、反应时间、凝血时间、最大振幅、综合凝血指数诊断早发型PE的曲线下面积(AUC)分别为0.900、0.921、0.888、0.821、0.788、0.899,而各指标联合诊断的AUC值为0.977。病例组中,PE轻度组和重度组水平夹角无差异(P>0.05),重度组血清miR-29b、ESM1、最大振幅高于轻度组,反应时间、凝血时间、综合凝血指数均低于轻度组(均P<0.05),miR-29b、ESM1、反应时间、凝血时间、最大振幅、综合凝血指数诊断重度早发型子痫前期的AUC值分别为0.856、0.884、0.940、0.667、0.754、0.831,上述指标联合诊断的AUC值为0.892。结论:血清miR-29b、ESM1联合血栓弹力图联合检测诊断早发型PE价值较高,且对早发型PE病情严重程度也有较高的诊断效能。

miR-29b-2-5p通过ABCC1抑制结直肠癌恶性生物学行为的作用机制

目的:探讨miR-29b-2-5p在调节结直肠癌(CRC)恶性生物学行为过程中的分子机制。方法:通过qRT-PCR技术分析CRC组织和细胞系(HCT-116、HT-29、Caco2、SW480和NCM460)中miR-29b-2-5p和ABCC1的转录组表达水平。分别使用细胞计数和Transwell进行评估HT-29细胞的增殖和侵袭能力。使用双荧光素报告系统验证miR-29b-2-5p与ABCC1之间的靶向作用。结果:CRC组织和细胞系中miR-29b-2-5p的表达水平显著低于正常组织(P<0.001),尤其在HT-29细胞系中miR-29b-2-5p的表达水平最为显著降低。过表达miR-29b-2-5p或沉默ABCC1均显著抑制HT-29细胞增殖(P<0.05)与侵袭(P<0.01)。生物信息学预测结果显示,ABCC1的3’UTR区域含有miR-29b-2-5p结合位点。进一步实验表明,miR-29b-2-5p过表达导致ABCC1转录表达水平显著下调(P<0.001)。双荧光素酶报告系统检测结合TCGA公共数据库结果显示,miR-29b-2-5p直接靶向ABCC1 3’UTR区域(P<0.001),并且二者表达水平呈显著负相关(P<0.001)。结论:miR-29b-2-5p通过靶向ABCC1的方式参与调控HT-29细胞的增殖和侵袭,参与CRC的发生发展。

结直肠癌患者血清、粪便和癌组织中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1的检测及其临床意义

目的:探讨结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)患者血清、粪便和癌组织中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1的表达水平及其临床意义。方法:收集2016年7月至2017年5月在海南省中医院就诊的63例CRC患者,根据CRC有无远处转移将患者分为无转移组(n=35)和转移组(n=28);另选取同期体检的30例健康志愿者纳入对照组。采集所有受试者的血清、粪便及CRC组织,用RT-PCR检测标本中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1的表达水平,并进行比较分析。结果:CRC患者血清中miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1表达水平显著高于对照组(均P<0.05),以转移组中表达水平最高(P<0.05)。CRC患者粪便中miR-21、miR-217和miR-92a-1表达水平显著高于对照组(均P<0.05),无转移组miR-217表达水平显著低于转移组(P<0.05),而miR-21、miR-29b和miR-92a-1在无转移组和转移组的差异无统计学意义(P>0.05)。无转移组CRC组织中miR-21、miR-29b和miR-92a-1均明显低于转移组(均P<0.05),而miR-217表达水平显著高于转移组(P<0.05)。结论:miR-21、miR-217、miR-29b和miR-92a-1在CRC患者的血清、粪便和癌组织中异常表达,多种miRNAs的联合检测有利于对CRC的发生、诊治和预后的评估。

miR-29b通过靶向PI3K/Akt信号通路降低胃癌细胞对顺铂的耐受性

目的探讨miR-29b与胃癌细胞顺铂耐受性之间的关系及其可能的调控机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测顺铂浓度梯度处理后胃癌细胞系中miR-29b及其靶基因的表达;CCK8法检测miR-29b敲低状态和过表达状态下胃癌细胞受顺铂处理后的增殖情况,评估miR-29b对胃癌细胞顺铂耐受性的影响。结果顺铂处理后miR-29b表达量显著上调,其靶基因AKT2表达下调。过表达miR-29b后胃癌细胞对顺铂抗性下降,干扰miR-29b表达后对顺铂的耐受性增强。Rescue实验结果显示,miR-29b通过AKT2促使胃癌细胞发挥对顺铂抗性的拮抗作用。miR-29家族另外两个成员miR-29a/c受顺铂诱导上调表达,但二者对胃癌细胞顺铂抗性的产生无显著作用。结论 miR-29b能够通过靶向抑制PI3K/Akt信号通路降低胃癌细胞对顺铂的耐受性。

小檗碱对压力超负荷肥厚心肌组织miR-29b表达的影响及其干预心肌纤维化的作用与机制

目的探讨小檗碱对压力超负荷肥厚心肌组织miR-29b表达的影响及其干预心肌纤维化的作用与机制。方法将SD大鼠随机分为模型组、小檗碱组及假手术组,模型组、小檗碱组大鼠采用腹主动脉缩窄法制备压力负荷性心肌肥厚模型。术后1周小檗碱组给予100 mg·kg^-1·d^-1盐酸小檗碱灌胃给药,假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃;术后8周取心脏组织,检测心脏肥大指数,采用Masson染色检测心肌组织纤维化[胶原蛋白体积分数(CVF)]情况,RT-PCR法检测心肌组织miR-29b及其靶基因col1a1和col3a1 mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组、小檗碱组心脏肥大指数、CVF值、miR-29b靶基因col1a1和col3a1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),miR-29b表达水平显著下降(P<0.05)。与模型组比较,小檗碱组心脏肥大指数、CVF值、miR-29b靶基因col1a1和col3a1 mRNA表达水平显著下降(P<0.05),miR-29b表达水平显著升高(P<0.05)。结论小檗碱通过上调miR-29b水平及下调其靶基因表达,抑制压力负荷性心肌肥厚模型心肌肥厚和心肌纤维化。

西妥昔单抗联合SOX方案治疗大肠癌患者的效果及对血清miR-29b和miR-92a-1水平的影响

目的探讨西妥昔单抗联合SOX方案治疗大肠癌的效果及其对血清miR-29b与miR-92a-1水平的影响。方法选择大连大学附属新华医院肛肠科2016年3月至2018年3月收治的84例大肠癌患者,随机分为SOX组和联合组,每组42例。SOX组采取SOX方案化疗,21 d为1个周期,共8个周期。联合组在SOX方案基础上联合西妥昔单抗,每2周1次。比较两组有效率、疾病控制率、化疗前后的血清miR-29b与miR-92a-1表达水平、不良反应、无进展生存期与总生存期。结果两组有效率接近,差异无统计学意义(P>0.05),联合组疾病控制率为85.71%,高于SOX组的66.67%(P<0.05)。化疗后,两组血清miR-29b和miR-92a-1表达水平均较化疗前降低(P<0.05)。联合组化疗后的血清miR-29b和miR-92a-1表达水平均低于SOX组(P<0.05)。两组不良反应发生率的差异无统计学意义(P>0.05)。截至2019年4月,两组随访时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组无进展生存期与总生存期长于SOX组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论西妥昔单抗联合SOX方案治疗大肠癌可提高疾病控制率,延长生存时间,并下调患者血清miR-29b和miR-92a-1表达,且不会增加不良反应,患者耐受性较好。

肺癌转移相关microRNA miR-29b的生物信息学分析

目的:应用生物信息学分析A549细胞中在CD133阳性低表达的miR-29b的靶基因及其功能,为以miR-29b为靶点的肿瘤研究提供线索。方法:利用miRNA PCR芯片筛选A549细胞中CD133阳性和CD133阴性差异表达的miRNA,选用miRecords预测miR-29b的靶基因,合并已证实的靶基因,利用GOEAST和DAVID数据库对所得靶基因进行功能富集分析和信号转导通路富集分析。结果:A549细胞中与CD133阴性比较,miR-29b在CD133阳性中表达下调。miR-29b靶基因有106个,其靶基因功能富集于结合和细胞外基质形成等作用(P<0.01);信号转导通路显著富集于JAK-STAT和TGF-β等信号转导通路(P<0.05)。结论:miR-29b可能与肺癌转移相关,miR-29b的靶基因显著富集在与肿瘤相关的信号通路中。

糖尿病足创面内miR-29b表达水平与氧化应激介质、炎症细胞因子的相关性研究

目的:研究糖尿病足(DF)创面内miR-29b表达水平与氧化应激介质、炎症细胞因子的相关性。方法:选择我院收治的DF患者作为DF组并收集创面组织,另取同期因外伤收治的非糖尿病患者作为对照组并收集正常皮肤组织。测定组织中miR-29b的表达水平及氧化应激介质、炎症细胞因子的含量。结果:DF组创面内miR-29b的表达量以及丙二醛(MDA)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的含量明显高于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的含量明显低于对照组;miR-29b的表达量与MDA、IL-1β、IL-18、TNF-α、VCAM-1的含量呈正相关,与GPX、SOD的含量呈负相关。结论:糖尿病足创面内miR-29b的高表达与氧化应激反应、炎症反应的过度激活有关。

多西他赛通过上调miR-29b抑制胃癌细胞的侵袭迁移

目的:研究miR-29b在多西他赛抑制胃癌抑制侵袭迁移中的作用。方法:Transwell及Wound Healing Assay检测多西他赛对胃癌细胞系SGC7901侵袭迁移能力的影响。多西他赛处理SGC7901细胞后,qRT-PCR检测miR-29b变化及Western blot检测已知miR-29b下游蛋白的变化。Transwell及Wound Healing Assay检测miR-29b对SGC7901细胞侵袭迁移能力的影响。anti-miR-29b预处理SGC7901细胞后,Transwell及Wound Healing Assay检测多西他赛对SGC7901细胞侵袭迁移能力的影响。结果:多西他赛可以有效的抑制胃癌细胞的侵袭迁移;多西他赛促进胃癌细胞中miR-29b的表达;miR-29b可以抑制胃癌细胞的侵袭迁移;在miR-29b被阻遏的情况下,多西他赛不能有效的抑制胃癌细胞的侵袭迁移。结论:多西他赛通过上调miR-29b的表达抑制胃癌细胞的侵袭迁移。

miR-29b-3p靶向PTEN在先天性心脏病中的作用及其机制

目的探究miR-29b-3p在先天性心脏病(congenital heart disease, CHD)中的作用及其机制。方法 RT-qPCR检测CHD患者和健康志愿者外周血及细胞中miR-29b-3p表达水平;二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)诱导P19细胞分化为心肌样细胞,Western blotting检测分化相关基因及磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)表达;CCK-8和Transwell实验检测转染后各组P19细胞增殖和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验验证miR-29b-3p和PTEN之间的靶向关系。结果 miR-29b-3p在CHD患者外周血中表达显著低于健康志愿者;miR-29b-3p在分化晚期表达高于早期,敲降miR-29b-3p抑制P19细胞心肌样分化;敲降miR-29b-3p显著抑制心肌样细胞增殖和迁移;PTEN为miR-29b-3p靶基因;敲降miR-29b-3p可通过靶向上调PTEN抑制P19细胞分化及心肌样细胞增殖和迁移。结论 miR-29b-3p通过靶向调控PTEN影响P19细胞心肌样分化及心肌样细胞的增殖和迁移。

lncRNA H19靶向miR-29b-3p对卵巢癌细胞运动和模型裸鼠生存能力的影响

目的探索长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) H19对卵巢癌细胞运动及模型小鼠生存能力的影响。方法 RT-PCR检测H19和miR-29b-3p mRNA在不同癌组织、癌旁组织、正常卵巢上皮细胞及多种卵巢癌细胞中的表达差异。生物学信息预测两者的靶向关系并验证。检测体外培养细胞增殖、迁移、侵袭能力,移植瘤体内生长、裸鼠存活情况,及细胞凋亡和增殖相关蛋白表达。结果 H19和miR-29b-3p mRNA在不同癌组织、癌旁组织、正常卵巢上皮细胞及多种卵巢癌细胞中均存在差异表达。si-H19能显著逆转miR-29b-3p inhibitor对细胞增殖、Ki-67表达、划痕闭合率、侵袭细胞数及VEGF、MMP-2、MMP-9表达的影响。体内实验发现,si-H19能显著逆转miR-29b-3p inhibitor对移植瘤生长、荷瘤裸鼠存活率、细胞凋亡率、Ki-67和VEGF表达的影响。结论 H19通过靶向miR-29b-3p提高卵巢癌细胞运动能力,降低荷瘤裸鼠的生存能力。

miR-29b-3p靶向调控STAT3对AML细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨miR-29b-3p通过靶向调控信号转导和转录激活因子3(STAT3)对急性髓系白血病(AML)细胞增殖及凋亡的影响。方法:TargetScan及miRanda在线数据库预测miR-29b-3p与STAT33'UTR区的结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验检测二者的靶向关系。qPCR及Western blot检测慢病毒过表达miR-29b-3p后AML细胞miR-29b-3p与STAT3 mRNA及蛋白表达变化,采用MTS检测各组AML细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:STAT3的3'UTR区存在与miR-29b-3p的结合位点,双荧光素酶报告基因实验证实STAT3是miR-29b-3p的靶基因。慢病毒过表达miR-29b-3p后,STAT3 mRNA及蛋白表达降低,过表达组AML细胞增殖减缓且凋亡增加(P<0.05)。结论:miR-29b-3p可靶向下调STAT3从而抑制AML细胞增殖,诱导细胞凋亡。

miR-29b-3p靶向IGF1调控非酒精性脂肪肝脂质代谢及肝纤维化

目的探讨miR-29b-3p在非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)模型中的表达情况,并确定miR-29b-3p在脂质沉积和肝细胞纤维化中的潜在功能。方法使用棕榈酸(PA)构建L02细胞NAFLD模型。通过RT-qPCR或Western blot测定细胞中miR-29b-3p和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的表达水平。将miR-29b-3p模拟物/抑制剂或IGF-1 siRNA转染到NAFLD细胞模型中,通过油红O染色,甘油三酯和总胆固醇测定法测定脂质积累。使用双重荧光素酶实验确定miR-29b-3p和IGF-1之间的靶向关系。结果 miR-29b-3p在NAFLD体外细胞模型中上调,而IGF-1则在下降;miR-29b-3p显著抑制了L02细胞模型中的脂质蓄积和纤维化程度;沉默IGF-1增强了miR-29b-3p过表达并对L02细胞模型的脂质积累和纤维化产生影响。结论 miR-29b-3p通过靶向IGF-1对肝细胞L02细胞模型中脂质蓄积和纤维化产生负调控作用,表明miR-29b-3p可能是NAFLD的治疗靶标。

miR-29b通过PI3K/AKT信号通路抑制白血病细胞的增殖

目的探讨miR-29b对K562白血病细胞增殖与凋亡的影响及相关机制。方法利用Lipofectamine^(TM)2000脂质体将miR-29b mimics,miR-29b NC转入白血病细胞K562中,实时荧光定量PCR法检测miR-29b表达,MTT法检测细胞活力,EdU染色法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,Western印迹检测细胞中B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax),髓样细胞白血病(MCL)-1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4,CDK6蛋白表达及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)激活情况。结果与miR-29b NC组比较,miR-29b mimics组miR-29b表达上调(P<0.01),细胞活力及细胞增殖率降低(P<0.01),细胞周期阻滞在G1期(P<0.01),Bcl-2,MCL-1,CDK4,CDK6,PI3K及p-AKT表达量均明显下调(P<0.01),Bax表达量明显上调(P<0.01)。结论 miR-29b mimics能显著抑制白血病细胞K562增殖、诱导细胞凋亡,可能与阻断PI3K/AKT信号通路有关。

结肠癌组织中miR-29b、Tiam1的表达及临床意义

目的探究结肠癌组织中microRNA-29b(miR-29b)、T淋巴瘤侵袭转移诱导基因1(Tiam1)表达及临床意义。方法选取2016年5月~2018年5月于四川省宜宾市第二人民医院治疗的81例结肠癌患者癌组织、癌旁组织,利用实时荧光定量PCR检测miR-29b、Tiaml在结肠癌组织中的表达情况,分析miR-29b、Tiaml表达的相关性及其与患者临床病理特征的关系。结果miR-29b在结肠癌组织中的表达量显著低于癌旁组织(P<0.05),Tiam1在结肠癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05);miR-29b、Tiam1表达与细胞分化程度、肿瘤TNM分期、淋巴结转移情况相关(P<0.05);癌组织中miR-29b与Tiam1表达呈负相关(r=-0.381,P<0.05)。结论miR-29b在结肠癌组织中低表达,而Tiam1呈现高表达,miR-29b和Tiam1表达与患者肿瘤TNM分期、细胞分化程度以及淋巴结转移密切相关,两者相互作用共同参与结肠的发生发展及转移。

H19/miR-29b/LOX影响胶质瘤细胞侵袭能力的体外研究

目的研究H19/miR-29b/LOX在胶质瘤细胞中的作用机制。方法通过qRT-PCR、克隆形成实验、Transwell实验检测H19、LOX在胶质瘤细胞中的表达及增殖转移能力。通过荧光素酶实验和生物信息学方法探讨H19/miR-29b/LOX之间的相关性。结果 H19、LOX在胶质瘤中随着转移程度异常表达量越高,正向调控细胞的转移增殖能力。H19能够结合miR-29b,而且miR-29b能够潜在靶向LOX基因,同时H19可以负向调控miR-29b。结论 H19/miR-29b/LOX在胶质瘤细胞中相互作用,影响细胞增殖及迁移。