α-甲酰基辅酶A消旋酶在原发性乳房外Paget病中的表达

α-甲酰基辅酶A消旋酶（alpha-methylacyl-CoA racemase,AMACR）是新近发现的诊断前列腺癌较为特异的免疫组化标记物,近来发现其在膀胱癌、结肠癌等肿瘤中也有表达.Mayes等研究发现21例乳房外Paget病（EMPD）中AMACR的表达率高达71%,EMPD分为原发性和继发性两大类,为进一步明确AMACR在EMPD中较高的表达率是否是因为继发前列腺癌、膀胱癌和结肠癌等肿瘤,AMACR是否有望成为新的用于鉴别原发性和继发性EMPD的免疫组化标记物,我们观察30例原发性EMPD中AMACR的表达情况,并分析其意义.

前列腺活检组织α-甲酰基辅酶A消旋酶检测的临床意义

目的探讨超声引导下经会阴前列腺细针密集穿刺组织中α-甲酰基辅酶A消旋酶（P5045）检测的应用价值。方法对170例超声引导下经会阴前列腺穿刺组织进行相关病理检测，诊断为前列腺癌65例（38．2％）、良性前列腺增生（BPH）97例（57．1％）、前列腺上皮内瘤（PIN）5例（2．9％）、不典型小腺体增生（ASAP）3例（1．8％）。传统6针穿刺法获得的40例前列腺组织中8例（20．0％）病理诊断为前列腺癌。免疫组织化学法检测其P504S表达情况。结果超声引导下经会阴穿刺组65例前列腺癌组织P504S阳性表达率为100．0％，其中弥漫阳性（≥＋＋＋）表达者64例（98．5％）；97例BPH组织中P504S表达（＋）者16例（16．5％），（＋＋）者1例（1．0％），阴性者80例（82．5％）；5例PIN和3例ASAP组织中P504S均为阴性表达。经直肠6针穿刺的8例前列腺癌组织标本P504S染色均呈弥漫阳性。超声引导下经会阴穿刺组和传统6针穿刺组中前列腺癌检出率差异有统计学意义（P〈0．05），但2组前列腺癌组织中P504S阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论P504S可作为前列腺癌的肿瘤标记物，在前列腺穿刺活检组织病理诊断中有一定辅助诊断价值。

血清前列腺特异性抗原和α-甲酰辅酶A消旋酶水平对前列腺癌根治术后患者预后的预测价值

目的探讨血清前列腺特异性抗原(PSA)、α-甲酰辅酶A消旋酶(AMACR)水平在前列腺癌根治术前后的变化及其对预后的预测价值。方法选择2017年1月至2020年1月驻马店市中心医院收治的128例前列腺癌患者为研究对象。患者均行前列腺癌根治术治疗,根据其预后情况分为预后良好组(n=97)和预后不良组(n=31)。收集患者的年龄、体质量指数(BMI)、肿瘤最大径、前列腺体积、病理类型、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、Gleason评分、切缘等基本资料。分别于术前及术后7 d,抽取患者空腹静脉血5 mL,1500 r·min^(-1)离心10 min,留取血清,采用酶联免疫吸附法测定血清PSA、AMACR水平。比较患者手术前后的血清PSA、AMACR水平,采用单因素分析影响前列腺癌根治术后患者预后的相关因素,logistic回归分析影响前列腺癌根治术后患者预后的危险因素,受试者操作特征(ROC)曲线分析血清PSA、AMACR水平对前列腺癌根治术后患者预后不良的预测价值。结果前列腺癌患者根治术后的血清PSA、AMACR水平显著低于术前(P<0.05)。预后不良组与预后良好组患者的年龄、BMI、肿瘤最大径、前列腺体积、病理类型比较差异无统计学意义(P>0.05);预后不良组患者TNM分期Ⅲ~Ⅳ期占比、淋巴结转移占比、低分化占比、Gleason评分≥7分占比、切缘阳性占比及术前血清PSA、AMACR水平显著高于预后良好组(P<0.05);logistic分析结果显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、低分化程度、高Gleason评分、切缘阳性及高血清PSA、AMACR水平是影响前列腺癌根治术后患者预后不良的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清PSA、AMACR水平预测前列腺癌根治术后患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.796、0.824,二者联合预测前列腺癌根治术后患者预后不良的AUC为0.916;血清PSA与AMACR水平联合预测前列腺癌根治术后患者预后不良的AUC显著大于血清PSA和AMACR水平单独预测(P<0.05)。结论血清PSA、AMACR水平异常升高是前列腺癌根治术后患者预后不良的危险因素,二者联合检测对前列腺癌根治术后患者预后不良有较高的预测价值。

α-甲酰基辅酶A消旋酶诊断前列腺癌的敏感性和特异性研究

随着α-甲酰基辅酶A消旋酶（AMACR，P504S）在前列腺癌鉴别诊断中的广泛应用，其问题也逐渐显现。我们采用AMACR／34βE12／p63双重免疫组织化学染色技术对AMACR的非特异性表达以及治疗后和各种特殊类型前列腺癌的表达作了较系统的研究。

肿瘤标志物α-甲基酰基辅酶A消旋酶在前列腺疾病诊断中的价值

目的观察α-甲基酰基辅酶A消旋酶(P504S)在前列腺病变组织中的表达,以评价其在前列腺疾病中的鉴别诊断价值。方法200例前列腺疾病组织及部分相关转移灶标本,其中前列腺癌(PCa)组织标本77例,前列腺小细胞癌(SCCP)1例,不典型小腺体增生(ASAP)2例,良性前列腺增生(BPH)118例,前列腺上皮内瘤变(HGPIN)2例。应用免疫组织化学EnVision二步法检测P504S在各类病变组织中的表达,此外部分标本还同时检测细胞角蛋白(CK)34βE12及前列腺基底细胞核染色的标记物p63的水平。分析Gleason评分与P504S表达水平的关系、手术方式对P504S表达水平的影响。结果PCa组织标本的P504S阳性率为91.2%(73/80),BPH组织标本的阳性率为0,2例HGPIN组织标本均示P504S+。不同Gleason评分PCa组织标本的P504S阳性率的差异有统计学意义(x^2=35.052,P<0.01),不同手术方式获取的PCa组织标本中P504S阳性率的差异也有统计学意义(x^2=18.882,P<0.05)。BPH组织标本中,绝大多数腺体均具有完整的基底层,34βE12的阳性率达98.3%;PCa组织标本中,70例典型缺乏基底层,10例可见不完整基底层。2例HGPIN组织标本的腺体基底细胞34βE12也呈阳性表达,但相对BPH组织标本强度有所减弱。本研究中仅83例组织标本进行p63标记,所有BPH组织标本(39例)都呈阳性表达;而44例PCa组织标本中,39例呈阴性表达,5例呈阳性表达。结论检测P504S蛋白表达有助于辅助PCa的病理诊断,特别适用于体积较小的前列腺穿刺标本的良、恶性鉴别。P504S与34βE12、p63联合应用则更有帮助,为临床早期发现、早期治疗PCa提供了有力的理论依据。

α-甲酰-CoA消旋酶在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨α-甲酰-CoA消旋酶(AMACR/p504S)在乳腺癌中的表达状况及其临床病理意义。方法:选取73例乳腺癌及36例乳腺良性增生性病变,用免疫组化技术(S-P法)标记AMACR和ER、PR、c-erbB-2,光镜观察其表达情况并进行统计学处理。结果:AMACR在乳腺癌中表达的阳性率为86.3%,良性病变中为55.6%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。AMACR在乳腺癌中的表达与组织学类型、分级以及ER、PR、c-erbB-2免疫表型等均无明显关系(P>0.05)。结论:AMACR不仅是前列腺癌的生物学标记,亦可作为乳腺癌病理诊断的参考。

4-氨基-1-羟基-2-氧-1,8-萘啶-3-甲酰胺类化合物抑制HIV整合酶链转移活性的主要微观结构因素探究

以25个4-氨基-1-羟基-2-氧-1,8-萘啶-3-甲酰胺类化合物为研究对象,利用遗传函数逼近法(GFA)构建了10个二维定量构效关系(2D-QSAR)模型,从中选取最优模型并检验其预测可靠性,并分析4-氨基-1-羟基-2-氧-1,8-萘啶-3-甲酰胺类化合物抑制HIV整合酶链转移活性的主要微观结构因素。结果表明,最优2D-QSAR模型的R^(2)=0.7776、Q^(2)=0.6421、r^(2)=0.87、(r^(2)-r′02)/r^(2)=0.01、k′=0.97、r^(2)_(m)=0.58,具有较高的稳定性和外部预测能力;热力学描述符AlogP、电拓扑状态描述符ES_Sum_sssN、ES_Sum_ssCH 2和空间描述符Shadow_nu是影响4-氨基-1-羟基-2-氧-1,8-萘啶-3-甲酰胺类化合物抑制HIV整合酶链转移活性的主要微观结构因素,其中Shadow_nu是最重要的微观结构因素。

α-甲酰辅酶A消旋酶与胸腺素β_(15)对前列腺癌早期诊断的临床价值

目的检测前列腺癌和非前列腺癌患者前列腺液中α-甲酰辅酶A消旋酶(α-MACR)、胸腺素β15的浓度,比较各指标对前列腺癌早期诊断的临床价值。方法用前列腺按摩的方法获取64例前列腺癌患者(试验组)和24例非前列腺癌患者(对照组)的前列腺液。采用双抗体夹心酶联免疫反应(ELISA)检测标本α-MACR、胸腺素β15的浓度。结果α-MACR在对照组中的浓度为(3.98±0.56)μg/L,灵敏度为4.9%,在试验组患者中浓度为(84.35±0.46)μg/L,灵敏度为96.9%,试验组浓度是对照组患者的近20倍,两者比较差异有统计学意义(t=4.583,P<0.01)。胸腺素β15在对照组的浓度为(8.07±0.36)μg/L,灵敏度为17.5%,试验组患者中的浓度为(40.65±0.34)μg/L,灵敏度为87.5%,试验组浓度是对照组的近5倍,两者比较差异具有统计学意义(t=3.732,P<0.05)。结论α-MACR和胸腺素β15与前列腺癌的发生、发展密切相关,对前列腺癌的诊断具有一定的临床价值,且α-MACR对前列腺癌的早期诊断具有更高的敏感性。

α-甲酰辅酶A消旋酶和高分子量细胞角蛋白在前列腺中的表达及其意义

【目的】通过对可能的前列腺癌的诊断指标进行全面的回顾性分析,以明确对前列腺癌的诊断和鉴别诊断有临床意义的指标。【方法】自2002年1月-2005年12月,收集病理标本的各类前列腺手术病例358例,包括前列腺癌60例,前列腺上皮内瘤(PIN)38例,良性前列腺增生(BPH)260例,所有病例均经术后病理确诊。对分析资料中前列腺癌的临床分期、前列腺癌的病理分级、PIN的病理分级以及相关病理免疫组化指标等因素,使用SAS统计软件进行统计学处理。用Cochran-Mantel-Haenszel检验对免疫组化指标与前列腺癌的诊断之间的关系进行统计分析。同时对免疫组化指标AMACR、HCK对前列腺癌诊断的敏感度、特异度及Kappa系数等进行统计分析。【结果】AMACR在前列腺癌、PIN和BPH中表达的阳性率分别为90.2%、39.47%和0,差异具有统计学意义。HCK在前列腺癌、PIN和BPH中表达的阳性率分别为18.97%、86.84%和90%,差异具有统计学意义。AMACR诊断前列腺癌的敏感度为90.20%,特异度为94.97%,Kappa系数为0.7876。HCK作为阴性指标诊断前列腺癌的敏感度为81.03%,特异度为89.60%,Kappa系数为0.2795。【结论】AMACR、HCK均是较好的前列腺癌的诊断指标;两者联合诊断具有良好的应用前景。

α-甲基酰基辅酶A消旋酶在喉癌中的表达

目的研究α-甲基酰基辅酶A消旋酶(AMACR)在喉癌中的表达,初步探讨AMACR在喉鳞癌生物学行为中的意义。方法用免疫组织化学EliVisionTMplus二步法(福州迈新)检测40例原发喉鳞癌、20例声带息肉及10例癌旁组织中AMACR的表达情况。结果40例喉癌中13例(32.5%)存在不同程度的AMACR表达,在20例声带息肉和10例正常喉组织中无AMACR表达,差异有统计学意义(P<0.01)。AMACR在高分化鳞癌和中、低分化鳞癌中表达的阳性率分别为50%、15%,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期喉癌AMACR阳性率无统计学意义,AMACR表达与性别、肿瘤部位、颈淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。结论AMACR在喉鳞癌中有阳性表达,其表达可能与分化有关,与性别、部位、临床分期、颈淋巴结转移无明显相关性。

前列腺特异性膜抗原、α-甲基酰基辅酶A消旋酶在前列腺癌中的表达及其临床意义

目的检测前列腺特异性膜抗原、α-甲基酰基辅酶A消旋酶在前列腺癌的表达情况,探讨其在前列腺癌中的意义.方法采用免疫组化En Vision法观察前列腺特异性膜抗原、α-甲基酰基辅酶A消旋酶的表达特点.结果 (1)前列腺特异性膜抗原在前列腺癌中的表达分别强于良性前列腺增生(P=0.000)和高级别前列腺上皮内瘤变中的表达(P=0.005),前列腺特异性膜抗原的表达与Gleason评分及预后(P>0.05)均不相关.(2)α-甲基酰基辅酶A消旋酶在良性前列腺增生中的表达明显低于高级别前列腺上皮内瘤变(P=0.000)和前列腺癌(P=0.000)中的表达,且与Gleason评分呈负相关(P=0.005,rs=-0.430);与预后不相关(P>0.05).结论前列腺特异性膜抗原、α-甲基酰基辅酶A消旋酶在前列腺癌的发生发展中起一定作用,但不能作为预测预后的指标.

5-取代海因的消旋过程对化学酶法制备D-氨基酸的影响

海因酶是化学酶法制备光学活性氨基酸的关键酶,今研究通过采用不同旋光性的底物进行了海因酶底物光学特异性的研究。结果表明,本体系采用的海因酶是D-海因酶,具有严格的光学选择性;提出了L-海因消旋是以混旋海因制备D-氨基酸的重要限速步骤;以L-5-甲基海因为对象,研究了L-海因的消旋过程,对其动力学过程进行了分析。研究表明,L-海因消旋符合一级反应动力学过程;并结合实验提出增高温度和pH值均有助于提高转化效率。

PPAR-γ对单核/巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达效应的研究

目的 研究配体罗格列酮活化的过氧化体增殖物激活型受体 γ(PPAR γ)对单核 /巨噬细胞转分化过程中酰基辅酶A :胆固醇酰基转移酶 1 (Acyl CoA :cholesterolacyltransferases,ACAT 1 )表达效应的影响。 方法 在RPMI1 640培养基中培养人单核细胞 (THP 1 ) ,加入佛波酯(PMA)培养 48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。运用免疫细胞化学、逆转录聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹等方法 ,观察单核巨噬细胞转分化前后PPAR γ对ACAT 1mRNA和蛋白表达水平的影响。结果 单核巨噬细胞转分化前后ACAT 1表达增加 ,罗格列酮活化的PPAR γ可明显抑制A CAT 1的表达。结论 动脉粥样硬化事件的发生可能与ACAT 1表达增强有关。罗格列酮活化的PPAR γ可能通过抑制ACAT 1表达 ,巨噬细胞摄取脂质降低 ,从而减少泡沫细胞的形成 。

渥曼青霉素阻断罗格列酮对人巨噬细胞酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶-1表达的影响

目的:研究过氧化体增殖物激活型受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)配体罗格列酮对巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响及可能机制。方法:在RPMI 1640培养基中培养人单核细胞株(THP-1),加入佛波酯培养48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。将细胞分为空白对照组、不同浓度罗格列酮组和罗格列酮+渥曼青霉素(wortmannin)组,运用实时定量PCR和Western blot,观察巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:罗格列酮可明显抑制ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性;加入磷酯酰肌醇三磷酸激酶(phosphate dylinositol 3-kinase,PI3K)信号途径抑制剂渥曼青霉素后ACAT-1表达较罗格列酮组高,较空白对照组低。结论:PPAR-γ配体罗格列酮通过PI3K途径抑制ACAT-1表达发挥其抗动脉粥样硬化的作用。

酵母脂肪酶催化拆分外消旋2-甲基-1-丁醇

Catalyzed Resolutionb racemic 2-methyl-1-butanol was achieved,with max.95%optical purity of chiral alcohol,by candida cycindrace lipase in non-aqueous organic media.Effect of some factors on the resolution was investgated.The factors included temperature,pH,organic solvents,the amount of added water and the reaction time.

糖基化终产物对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响

目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响。方法将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine serum albumin,AGE-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h的THP-1巨噬细胞共同孵育,运用RT-PCR和Western blot分别检测巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果PMA诱导72h后,THP-1细胞停止增殖,由单核细胞分化成为巨噬细胞。用50、100、200和400mg/L AGE-BSA处理巨噬细胞后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐增加;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐增加,二者较对照牛血清白蛋白组明显增加(P<0.05)。用200mg/LAGE-BSA作用巨噬细胞0、12、24、36h和48h后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐升高;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐升高,较0h明显增加(P<0.05)。结论AGEs可上调THP-1巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性,这可能与糖尿病动脉粥样硬化有关。

呋虫胺对映体对普洱茶中黑曲霉关键酶活性的影响

新烟碱型农药呋虫胺广泛用于茶叶的病虫害防治,以增加茶叶产量,但长期大量使用化学农药会造成环境污染,危害人和动物的健康。本文以普洱茶中优势菌种黑曲霉为研究对象,研究手性农药呋虫胺不同对映体对其关键酶类酶活性的影响。结果表明,S-(+)-呋虫胺、R-(-)-呋虫胺和Rac-(±)-呋虫胺对同种酶活性表现出了不同的影响,可为后续普洱茶安全评价和手性农药残留降解提供理论依据。

酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1与动脉粥样硬化

酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶目前认为是细胞内唯一合成胆固醇酯的酶,维持着细胞以及生物体胆固醇代谢的平衡,而酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1在动脉粥样硬化的发生、发展过程中发挥着至关重要的作用。自从酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶的cDNA在1993年首次被克隆之后,许多学者对酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1进行了大量的研究,现就近年来酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1与动脉粥样硬化关系的研究予以综述。

去乙酰酶抑制剂N-(2-氨苯基)-4-[N-(吡啶-3-甲氧羰基)氨甲基]苯甲酰胺的合成

以3 羟甲基吡啶为起始原料,采用碳酰二咪唑(CDI)法在0～10℃下搅拌反应,合成中间体4 [N (吡啶 3 甲氧羰基)氨甲基]苯甲酸(Ⅰ),收率为83 9%;然后与氯甲酸乙酯及三乙胺在0～10℃下搅拌反应,制得酸酐活性中间体(Ⅱ);它不经分离直接与邻苯二胺在室温条件下反应10h即得目标产物:N (2 氨苯基) 4 [N (吡啶 3 甲氧羰基)氨甲基]苯甲酰胺,经硅胶柱层析提纯后,收率为45 0%,总收率为37 8%,合成具有一定绿色化学特性;经质谱、核磁和红外等谱学方法鉴定了目标分子结构。

3-羟酰基辅酶A脱氢酶在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

目的:克隆并在大肠杆菌中表达3-羟酰基辅酶A脱氢酶(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase,HCDH)并制备其抗血清。方法:通过PCR方法扩增HCDH基因片段,经DNA测序证实后克隆到原核表达载体pMAL-P2X,重组质粒转化大肠杆菌DE3,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达结果,经麦芽糖树脂亲和纯化的蛋白皮下注射免疫獭兔,琼扩和ELISA检测抗血清的效价,Western blot检测其特异性。结果:PCR扩增得到786bp的目的片段,序列测定证实与GeneBank上登录的序列一致;成功构建了HCDH基因片段的原核表达载体;在详细探索表达条件的基础上,成功诱导HCDH的表达,并制备了相应的抗血清。结论:检测HCDH蛋白在表达水平上的变化及为HCDH基因表达调控的进一步研究奠定了基础。