紫草中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁提取和含量测定及其稳定性研究

目的测定不同产地的紫草中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁(以下简称阿卡宁)的含量,比较不同溶剂对紫草中阿卡宁的提取率,并对阿卡宁的乙醇溶液稳定性进行考察。方法采用高效液相色谱法测定阿卡宁的含量,色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水-甲酸(700:300:0.5)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长275nm。测定了内蒙紫草、新疆紫草和云南紫草中阿卡宁的含量,考察了75%乙醇、乙醇、石油醚和液体石蜡对紫草中阿卡宁的提取率;将阿卡宁0.1mg·mL-1乙醇溶液于冰箱4℃存放,定期进样测定,并与新配制时测定的峰面积比较。结果测定的三种紫草中,以新疆紫草含量最高;乙醇和石油醚对阿卡宁的提取率高而75%乙醇和液体石蜡的提取率低;阿卡宁的乙醇溶液随存放时间的增加而峰面积变小。结论提取溶剂对紫草中阿卡宁提取率影响较大;由于阿卡宁溶液的不稳定性,选择阿卡宁作为评价含紫草药材制剂的指标成分并不合适。

HPLC法测定紫草药材中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的不确定度分析

目的:分析HPLC法测定紫草药材中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的不确定度。方法:通过HPLC测定β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法,对流程进行分析计算,得出扩展不确定度结果:HPLC法测定黄麦合剂中淫羊藿苷含量紫草药材中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的扩展不确定度为0.134μg·ml^(-1),测定结果表示为(66.137±0.134)μg·ml^(-1),k=2。结论:该评定方法可作为HPLC法测度报告该类成分的不确定度评定的参考。

HPLC同时测定紫朱软膏中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量

目的 建立同时测定紫朱软膏中紫草的左旋紫草素和β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的高效液相色谱方法.方法 采用Welch Materials XB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,18.5 μm）,流动相乙腈-水-甲酸（75∶25∶0.05）,检测波长516 nm,柱温30 ℃,流速1.0 mL/min,进样量20 μL,对紫朱软膏中紫草的有效成分左旋紫草素和β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁进行定量测定.结果 左旋紫草素在0.025 6～0.256 μg 范围内线性关系良好（r^2=0.999 5）,平均回收率为98.12%（RSD=1.92%）;β,β＇-二甲基丙烯酰阿卡宁在0.174 4～2.616 μg范围内线性关系良好（r^2=0.999 2）,平均回收率为100.46%（RSD=1.17%）.结论 本试验建立的方法简便,测定结果准确,可用于紫朱软膏的质量控制和评价.

紫草中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定及不同来源药材质量评价的初步研究

目的:建立HPLC法测定紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量,并对药材质量进行初步评价方法:色谱柱:Cosmosil 5C_(18)-MS-II(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-甲酸(430:570:0.5);检测波长:275nm;流速:1.0 ml·min对8批紫草药材进行定量测定,并提取特征图谱信息,进行聚类分析和主成分分析。结果:各紫草样品中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量均大于3 mg·g^(-1),符合现行标准规定,但成分谱存在一定的差异。通过多变量统计分析,试验样品可分为新疆紫草、未知品种的进口紫草与滇紫草;除β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁外,其他成分对其质量评价也起着重要作用。结论:目前市售紫草药材的基原与质量均有较大差异,本方法准确、可靠,可用于其综合评价研究。

不同产地蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量测定及质量标准研究

目的建立测定蒙药蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法,并制订其质量标准。方法采用显微鉴别法,对药材样品的横切面和粉末进行鉴别;采用薄层色谱法对药材样品中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁进行定性分析;测定药材样品中水分、灰分、浸出物的含量;采用紫外分光光度法测定药材样品中左旋紫草素的含量,检测波长为516 nm;采用高效液相色谱法测定药材样品中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量,色谱柱为Thermo Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%甲酸水溶液(70∶30,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为275 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果药材样品横切面和粉末显微特征明显;薄层色谱图中可见左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的特征斑点,且斑点分离清晰。左旋紫草素质量浓度在5~50μg/m L(R^(2)=0.9999)范围内与吸光度线性关系良好,β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的质量浓度在10~200μg/m L(R^(2)=0.9996)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.00%;左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的平均加样回收率分别为101.23%和100.16%,RSD分别为2.01%和2.88%(n=9)。根据1-7号批次药材拟订蒙紫草的质量标准,羟基蒽醌总色素(以左旋紫草素计)含量不得低于1.00%,β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量不得低于0.15%;蒙紫草中水分含量不得超过12.00%,总灰分含量不得超过8.00%,酸不溶性灰分含量不得超过2.00%,水溶性浸出物含量不得低于30.00%,醇溶性浸出物含量不得低于10.00%。结论该方法操作简便,结果准确,重复性高,稳定性好,可用于蒙药蒙紫草中左旋紫草素和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定和质量控制。

波长切换-超高效液相色谱法检测女珍颗粒中特女贞苷、蟛蜞菊内酯和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的建立检测女珍颗粒中特女贞苷、蟛蜞菊内酯和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的波长切换-超高效液相色谱法(UPLC)。方法色谱柱:Agilent Eclipe SB C_(18)液相色谱柱;检测波长:225 nm(特女贞苷)、352 nm(蟛蜞菊内酯)、276 nm(β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁);柱温:30℃;流速:1.0 mL·min^(-1);进样量:10μL;流动相:5mL·L^(-1)冰醋酸溶液(A)-乙腈(B);梯度洗脱。用外标法定量检测。结果特女贞苷、蟛蜞菊内酯和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁质量浓度分别在0.475~47.5、0.0972~9.72、0.196~19.6μg·mL^(-1)范围内与其峰面积线性关系良好;加标回收率分别为98.8%、99.3%、100.4%;重复性RSD值(n=6)分别为1.2%、0.91%、1.3%。结论建立的方法具有快速、准确等特点,可用于女珍颗粒中成药的质量控制,为其测定标准的提高提供技术参考。

高效液相色谱法测定紫草油中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的：建立紫草油中β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱（HPLc）法，色谱柱为迪马C18钻石色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为乙腈．水-甲酸（75：25：0．2）；检测波长为275nm；柱温为室温。结果：在80．6～564．5ng范围内，β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁进样量和峰面积具有良好的线性关系，线性回归方程为C=1．0279×10^-6A＋2．3589×10^-2，r=0．9999。测得紫草油中β，β′-二甲基丙烯酰阿卡宁平均含量为0．8692mg/ml。结论：该方法简便可行，重现性好，可作为紫草油的质量控制方法。

SPE-HPLC法测定复方紫草油中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的:建立测定复方紫草油中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法。方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-水-甲酸(700:300:0.5),流速:1.0 ml·min^(-1),检测波长:275 nm,柱温:25℃,进样量:10μl。结果:β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁在5.2~104.0μg·ml^(-1)浓度范围内有良好的线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为100.2%,RSD为1.23%(n=6)。结论:此方法操作简便、专属性强、灵敏度高、重复性好,可用于该制剂的质量控制。

聚丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵的合成

以偶氮二异丁基脒盐酸盐(V-50)为引发剂,丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵(DMBC)为聚合单体,采用自由基水溶液聚合法,在氮气氛围中制备了阳离子型聚丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵(PDMBC)。用单因素法考察了单体质量分数、引发剂用量、反应温度以及反应体系pH对聚合物黏度和相对分子质量的影响。对反应条件进行了优化,当反应温度为42℃时,可以合成出相对分子质量100万以上的聚丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵。

丙烯酰胺/丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵共聚水分散体的制备

以丙烯酰胺(AM)、丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵(DMBC)为共聚单体,过硫酸铵为引发剂,自制聚甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(PDMC)为分散剂,在硫酸铵水溶液中采用水分散聚合法,制备了丙烯酰胺/丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵共聚水分散体。考察了反应温度、硫酸铵浓度、单体配比、链转移剂浓度、分散剂用量、引发剂用量对共聚物黏度、相对分子质量、颗粒尺寸的影响。实验发现,制备丙烯酰胺/丙烯酰氧乙基二甲基苄基氯化铵共聚水分散体较优配方为:温度65℃,硫酸铵质量分数为27.6%,AM、DMBC总单体质量分数为15%,DMBC∶AM(质量比)=(0.297~0.363)∶1,链转移剂用量为0.078 g/L,分散剂质量分数2.7%~3.6%,过硫酸铵质量分数范围为4.38×10^(-4)~5.84×10^(-4)mol/L。

HPLC测定紫草提取物中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的:建立HPLC测定紫草提取物中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量。方法:采用HPLC,Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水-甲酸(70:30:0.05),检测波长275 nm,柱温40℃,流速1 mL.min-1。结果:β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁在50～200μg具有良好的线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率103.31%,RSD 1.44%(n=5)。结论:方法准确,重复性好,可作为紫草提取物的含量控制。

HPLC法测定紫草中β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的:建立测定紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量的方法。方法:采用改进后的高效液相色谱法,以流动相制备供试品溶液。色谱柱为Kromasil100-5C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水-甲酸(700∶300∶0.5),流速为1.0mL·min-1,检测波长为275nm。结果:β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁的进样量在0.16～3.20μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999);平均回收率为99.46%,RSD=1.90%(n=6)。结论:该方法简便、易行,方法验证符合要求,可用于紫草的含量测定。

甲基丙烯酰明胶水凝胶作为细胞三维培养支架在骨组织工程中的应用

背景:骨缺损的治疗一直是临床医生亟待解决的临床难题,用甲基丙烯酰明胶进行细胞体外3D培养,可以为大面积骨缺损的治疗提供新的方向。目的:文章综述了甲基丙烯酰明胶作为3D细胞培养支架在骨组织工程中的研究进展,以期为临床骨缺损修复提供进一步的参考。方法:应用计算机检索中国知网及PubMed数据库1986年1月至2023年8月收录的文献,中英文检索词分别为“骨缺损,骨组织工程,生物支架材料,水凝胶,光交联水凝胶,甲基丙烯酰明胶,三维培养,细胞培养”和“Bone defect,Bone tissue engineering,Biomaterial scaffold,Hydrogel,Methylacrylyl photocrosslinked hydrogel,Three-dimensional culture;Cell culture”,最终纳入68篇文献进行综述分析。结果与结论:①同二维培养相比,3D培养可以在无菌条件下,构建立体三维空间,更好地模拟体内环境,为细胞提供合适的温度、酸碱度及足够的营养,使细胞能够在体外正常生长增殖并保持其正常结构与功能,具有独特优势。②在骨组织工程生物支架材料的选择中,水凝胶因其良好的生物相容性、可降解性及具有立体三维网络结构等优点,已被广泛应用于骨再生的研究。③甲基丙烯酰明胶的物理及生物性能受到浓度、光照时间及光引发剂种类以及反应体系等因素的影响,而这些性能均能对细胞的黏附、生长及增殖,甚至细胞形态及功能产生一定的影响。④甲基丙烯酰明胶因具有良好的生物相容性、物理可调节性、可注射性及光敏性能,已被广泛应用于3D细胞封装、3D生物打印及基于数字光处理的立体光刻技术等细胞3D培养体系中。⑤应用各类复合甲基丙烯酰明胶进行细胞的3D培养,可以更好地促进血管形成及骨再生,为临床骨缺损的治疗提供更多可能。⑥目前甲基丙烯酰明胶的来源、合成的方法以及安全性尚没有健全的标准,需要进一步加强研究,对甲基丙烯酰明胶在3D细胞培养领域的应用进行更深入的完善。

4,4’-二(2-羟基-4-甲基-1-偶氮苯)苯磺酰替苯胺的合成及表征

偶氮染料是目前用于纤维染色的一类重要化合物,将4,4'-二氨基苯磺酰替苯胺(DASA)制成重氮盐,然后在一定条件下与3-甲基苯酚进行偶联反应制得了一种新的化合物4,4'-二(2-羟基-4-甲基-1-偶氮苯)苯磺酰替苯胺。并通过实验条件的优化,确定了该反应的最佳实验条件为:芳香胺与亚硝酸钠的物质的量之比为1∶2.6、重氮盐与3-甲基苯酚的物质的量之比为1∶1、反应时间45 min、反应温度0~5℃、pH为9,产率为86.2%。并用HPLC-MS、1H NMR对产物结构进行了表征,结果表明目标产物4,4'-二(2-羟基-4-甲基-1-偶氮苯)苯磺酰替苯胺被成功合成。

薄层扫描法测定新疆不同产地新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的测定新疆不同产地新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量,对药材质量进行初步评价。方法样品经超声提取,点样于高效硅胶G薄层板上,以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶4∶0.5∶0.4)为展开剂上行展开,在520nm波长进行扫描检测。结果 14个产地新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量为8.215~33.65mg/g,博乐产新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量最高(33.65mg/g),塔什库尔干产新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量最低(8.215mg/g),含量均大于《中国药典》规定。结论采用薄层扫描法测定新疆紫草中β,β’-二甲基丙烯酰阿卡宁含量灵敏度高,准确性好,简便,快速。

β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的电化学行为及其测定

研究β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁(β,β-dimethyl-acry-lalkannin,简称β,β-DAL)的电化学行为并由差示脉冲伏安法测定其含量.实验表明:β,β-DAL在玻碳电极上具有明显的吸附性,其电极反应是一可逆的双电子双质子过程.在pH4.6的磷酸盐缓冲溶液中,+0.8～-0.4V电位区间内,β,β-DAL的差示脉冲还原峰电流(Ip)与其浓度(C)呈良好的线性关系,浓度范围1.3×10-7～-1.7×10-6mol/L(r=0.9996),检出限4.0×10-8mol/L.本方法灵敏度高、重现性好,用于中药紫草中β,β-DAL的含量测定,结果满意.

HPLC法测定“化腐生肤”渗滤液中β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量

目的建立用高效液相色谱法测定“化腐生肤”渗滤液中β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁的含量，为其制定质量标准提供依据。方法色谱柱为DiamonsilC18（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈一甲酸水（78：22），流速为1．0mL／min，检测波长为275nm，柱温30℃结果β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁在0．02-76～0．1935mg／mL范围内线性良好（r=0．9998），平均回收率均在95％～105％，RSD为2．223％，“化腐生肤”渗滤液中β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁含量为0．3866mg／mL。结论该方法准确，简便灵敏，可用于“化腐生肤”渗滤液的质量控制。

新型N-[cis-3-(2-氯-3,3,3-三氟丙烯基)-2,2-二甲基环丙烷基羰基]-N'-芳氧乙酰肼的合成与生物活性

为了寻找高效、低毒的农药先导化合物,利用cis-3-(2-氯-3,3,3-三氟丙烯基)-2,2-二甲基环丙烷酰氯(1)与芳氧乙酰肼的缩合反应,合成了12种未见文献报道的目标化合物,其结构经IR,1HNMR,MS和元素分析测试技术确证.初步的生物活性测定结果表明,部分目标化合物在100mg/L浓度下对双子叶植物(油菜)显示出良好的除草活性;同时,部分化合物在200mg/L浓度下对蚕豆蚜虫(Aphisfabae)显示出较好的杀虫活性。

基于新疆紫草中β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁含量变化的浓缩工艺研究

目的探索新疆紫草中以β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁为指标的制剂浓缩工艺的稳定性研究。方法采用动态平行取样,HPLC检测法,以β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁为考察指标,系统考察其热稳定性规律,用于浓缩过程中工艺参数的确定。结果当温度在60~80℃时,随加热温度升高,紫草提取液中阿卡宁的保留率降低;在固定温度下,随加热时间的延长,阿卡宁的保留率降低;当乙醇浓度为10%~80%时,在含醇量一定的条件下,随加热时间的延长,阿卡宁的保留率降低;当乙醇浓度低于30%时,阿卡宁在溶液中极不稳定。结论紫草药材提取后进行浓缩时,温度应控制在65℃以下,采用少量、短时间的方式进行浓缩。

RP-HPLC法同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β，β-二甲基丙烯酰紫草素的含量

目的:建立同时测定紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的方法。方法:采用 RP-HPLC法,Zorbax Eclipse XDB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的乙腈溶液(A)和含0.5%冰醋酸及0.3%三乙胺的水溶液(B),梯度洗脱,洗脱程序为:0 min(67%A),5 min(70%A),15 min(75%A),30 min(75%A);流速1.0 mL·min^(-1);检测波长516 nm,柱温30 ℃。结果:紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素浓度分别在1.2～12.2μg·mL^(-1)(r=0.9999)、2.5～24.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)、11.3～112.8μg·mL^(-1)(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好线性关系(n=5)。方法回收率(n=9)分别为100.3%,98.6%,98.4%。结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于紫草中紫草素、异丁酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰紫草素含量的同时测定。