端粒酶、γ-干扰素、腺苷酸脱氨酶及结核感染T细胞斑点试验在诊断结核性和恶性胸腔积液中的作用分析

目的 评价端粒酶、γ-干扰素(IFN-γ)、腺苷酸脱氨酶(ADA)及T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测在诊断结核性和恶性胸腔积液中的价值。方法 纳入40例早期结核性胸膜炎患者(结核组)和40例恶性胸腔积液患者(肿瘤组),分别在治疗前抽取患者胸腔积液及空腹血液,应用酶联免疫吸附分析法检测端粒酶的含量和IFN-γ的浓度,应用比色分析法检测ADA的活性,采用Elispot斑点计数检测T-SPOT.TB阳性率。结果 结核组和肿瘤组的端粒酶含量分别为(1.46±0.73)×10~(-3) nmol/L和(3.34±1.72)×10~(-3) nmol/L,结核组端粒酶含量低于肿瘤组(P<0.01);结核组和肿瘤组的IFN-γ含量分别为(137.44±38.93) U/L和(27.94±8.46) U/L,ADA含量分别为(68.42±9.58) U/L和(15.39±4.43) U/L,2组患者IFN-γ含量和ADA含量比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结核组IFN-γ浓度、ADA活性及T-SPOT.TB阳性率均高于肿瘤组(P<0.01)。联合应用端粒酶、IFN-γ、ADA及T-SPOT.TB 4个诊断指标的诊断试验鉴别诊断结核性和恶性胸腔积液的敏感度为0.974,特异度为0.974。结论 联合应用端粒酶、IFN-γ、ADA及T-SPOT.TB 4个诊断指标的诊断试验在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液的鉴别诊断中具有重要意义。

结核γ-干扰素释放检测、核酸扩增检测联合结核感染T细胞监测对肿瘤合并结核感染患者的指导意义

目的 探讨结核γ-干扰素释放检测(TB-IGRA)、核酸扩增检测联合结核感染T细胞监测在肿瘤合并结核感染患者检测中的应用价值,分析其诊断能力。方法 收集2023年9月至2024年6月江苏省如皋市人民医院收治的100例肿瘤患者的资料进行回顾性分析,按照是否并合并结核感染分为感染组(23例)和未感染组(77例)。分析2组患者的临床资料,比较TB-IGRA、核酸扩增检测、结核感染T细胞监测3种检测技术阳性检出率差异,比较其检出能力。结果 临床细菌学检查证实肿瘤合并结核感染23例(23%),未感染77例(77%),感染组与未感染组的性别比例、年龄分布、肿瘤分类比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。TB-IGRA检出结核菌阳性率65.22%(15/23),核酸扩增检测为47.83%(11/23),结核感染T细胞监测为55.52%(13/23)。联合应用3种检测技术时,结核菌阳性检出率为82.61%(19/23),明显高于单独检测(P <0.05)。结论 TB-IGRA检出的肿瘤合并结核感染患者的阳性率最高,3种检测技术联合应用阳性检出率明显高于单独应用,具有较好的临床应用价值。

γ-干扰素试验在结核病诊断中的临床应用价值

目的分析CLIA检测γ-干扰素试验诊断结核病的临床应用价值。方法选取2023年5月-2023年9月在本院接受检查的疑似结核病患者1616例,以临床最终诊断结果为金标准,判断全自动化学发光法检测γ-干扰素试验在结核病诊断中的诊断效能。结果临床最终诊断结果显示,阳性患者916例,阴性患者700例。γ-干扰素试验结果显示,阳性患者908例,阴性患者708例。CLIA检验γ-干扰素试验在肺外结核中的阳性检出率较高,但与临床最终诊断结果比较差异有统计学意义(P<0.05);在结核病、肺结核、呼吸道疾病、肺部炎症疾病的阳性检出率与临床最终诊断结果比较差异无统计学意义(P>0.05);在结核病中的敏感度、特异度、准确度与临床最终诊断结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结果采用CLIA检测γ-干扰素试验可对结核病进行诊断,可明确患者为结核病或非结核疾病,并且在结核病的诊断中具有较高的敏感度、特异性。

鸡γ-干扰素与补体受体2蛋白相互作用的研究

【目的】研究鸡γ-干扰素(chicken interferonγ,chIFN-γ)与鸡补体受体2(chicken complement receptor 2,chCR2)蛋白的相互作用,为研究chIFN-γ和chCR2新功能奠定基础。【方法】通过同源重组方法构建chIFN-γ相关表达质粒,利用免疫共沉淀、激光共聚焦和表面等离子共振技术鉴定chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用,并通过分子对接技术模拟chIFN-γ与chCR2蛋白的相互作用模式。【结果】成功构建了pCMV-Myc-chIFN-γ表达质粒。将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染HEK-293FT细胞,结果表明chIFN-γ蛋白可以与chCR2蛋白进行相互作用;将pCMV-Myc-chIFN-γ和pCMV-HA-chCR2-ΔTM质粒共转染DF-1细胞,结果表明chIFN-γ蛋白与chCR2蛋白可以在DF-1细胞中进行共定位。表面等离子共振试验结果显示chIFN-γ与chCR2蛋白之间的平衡解离常数(KD)值为0.362μmol/L,二者之间有较高的亲和力。分子对接试验结果显示,chIFN-γ与chCR2蛋白之间的相互作用模式为Asp23-His150间形成1组盐桥作用,Asn37-Ser143、Glu57-Gly179和Ile93-Tyr184间形成3组氢键作用。【结论】本研究结果证明了chIFN-γ与chCR2蛋白可以进行相互作用,且二者之间的作用模式为1组盐桥和3组氢键作用。

抗γ-干扰素自身抗体阳性耐多药结核病并发马尔尼菲等多重感染一例并文献复习

目的: 报告1例抗γ-干扰素自身抗体阳性导致的耐多药结核病并发马尔尼菲等多重感染患者的诊治过程,并结合文献分析该病的临床特征、实验室检查、治疗及预后。方法: 回顾性分析2023年8月2日首都医科大学附属北京胸科医院收治的1例抗γ-干扰素自身抗体阳性导致的耐多药结核病并发马尔尼菲等多重感染患者的相关临床资料。检索截止时间2024年5月31日,分别从PubMed数据库中以“Anti-interferon-γ autoantibodies、Multidrug-resistant tuberculosis”同时为检索词,从万方数据库、中国知网以“抗γ-干扰素自身抗体、耐多药结核病”同时为检索词均未检索到相关文献。而以“抗γ-干扰素自身抗体、Anti-interferon-γ autoantibodies”分别为中英文关键词在万方数据库、中国知网和PubMed数据库进行检索,共检出抗γ-干扰素自身抗体并发药物敏感结核病2篇,检出抗γ-干扰素自身抗体并发机会性感染61篇,检出抗γ-干扰素自身抗体相关治疗17篇。总结该例患者特征并进行相关文献复习。结果: 该患者经过免疫评估,发现细胞免疫异常、基因突变,因药物不良反应和患者身体一般情况较差,错过最佳治疗时机,未达到理想效果。结合文献研究,65例并发两种及以上机会性感染,50例存在皮肤损害,而抗γ-干扰素自身抗体并发耐多药结核病患者既往无相关文献报道。文献报道中抗γ-干扰素自身抗体阳性的获得性免疫缺陷综合征患者中,机会性感染病原中马尔尼菲篮状菌病71例,非结核分枝杆菌病31例,结核病2例。其中,65例患者并发两种及以上机会性感染,50例患者存在皮肤损害。结论: 抗γ-干扰素自身抗体阳性患者可能合并多重感染,治疗效果差,尽早应用新型免疫制剂联合相关病原体治疗可能获得更好的预后。

基于γ-干扰素释放试验的麻风分枝杆菌感染筛查诊断

目的:探讨γ-干扰素释放试验(IGRA)在麻风分枝杆菌感染诊断中的应用价值。方法:在麻风患者、健康人群的PBMCs中进行IGRA检测。麻风患者进一步按多菌型(MB)和少菌型(PB)展开研究,使用I-SPOT-TB试剂盒(酶联免疫斑点法)检测释放IFN-γ的效应T细胞频数。比较分析MB和PB患者IGRA检测的阳性率,结合qPCR结果对PB患者进行讨论分析。结果:以患者的病理诊断为确诊依据,纳入29例麻风患者,20名健康人群作为对照。用rESAT6-CFP10刺激后,MB和PB患者IFN-γ的激活程度和IGRA阳性率均无统计学差异。37.5%的PB患者qPCR阴性,IGRA阳性;12.5%的PB患者IGRA阴性,qPCR阳性;IGRA阳性或qPCR阳性的PB患者达75%。结论:IGRA阳性提示分枝杆菌感染的可能,IGRA联合qPCR可作为早期筛查麻风的辅助检测方法。

鸡γ-干扰素的原核表达及其单克隆抗体制备与鉴定

【目的】通过原核表达系统表达鸡γ-干扰素(chicken interferon-gamma,ChIFN-γ),并制备其单克隆抗体,为建立检测天然ChIFN-γ的免疫学方法提供试验材料。【方法】将密码子优化的ChIFN-γ基因克隆至原核表达载体pET-21a(+)中,构建重组质粒pET21a-ChIFN-γ;重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,利用IPTG诱导表达重组蛋白;用该纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫合格的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合;用建立的ELISA方法筛选分泌针对ChIFN-γ蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞,并制备腹水,Protein A/G纯化腹水获得特异性抗体;对单克隆抗体的类和亚类进行鉴定;Western blotting和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测单克隆抗体的反应性、亲和力和特异性交叉反应;用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体,用两两配对的方法进行抗体配对。【结果】成功制备可溶性重组ChIFN-γ蛋白;Western blotting结果显示,ChIFN-γ与相应抗体结合呈现特异性条带(16 ku);获得7株针对ChIFN-γ的特异性杂交瘤细胞株:3E8、5F8、2G12、5A10、3D8、3B5、3G2。Western blotting和IFA结果显示,7株单克隆抗体反应性良好,均能特异性识别真核表达的ChIFN-γ;单克隆抗体的类和亚类鉴定结果显示,3E8、5F8、3D8、3B5和2G12重链均为IgG1,5A10重链为IgG2a,3G2重链为IgM,7株单克隆抗体的轻链均为Kappa型;所获得的7株单克隆抗体解离常数(dissociation constant,Kd)在1.04~58.33 nmol/L之间,为高亲和力抗体,并获得5组配对抗体。【结论】本研究成功制备了ChIFN-γ蛋白及其单克隆抗体,为进一步开展ChIFN-γ在禽类免疫学、病毒学及疫苗效果评价等相关研究奠定基础。

外周血γ-干扰素释放试验与胸水腺苷脱氨酶检测对结核性胸膜炎的诊断价值

目的:分析外周血γ-干扰素释放试验(IGRA)与胸水腺苷脱氨酶(ADA)检测对结核性胸膜炎(PT)的诊断价值。方法:选择2021年4月—2023年5月就诊于广东省梅州市人民医院的80例疑似PT患者进行研究,按照诊断结果进行分组,其中40例PT患者纳入PT组,40例非PT患者纳入非PT组,比较两组IGRA及胸水ADA检测结果。结果:两组IGRA和胸水ADA检测结果差异有统计学意义(P<0.05)。40例PT组患者中,IGRA检测阳性35例,胸水ADA检测阳性24例,两者同时阳性21例;40例非PT组患者中,IGRA检测阳性13例,胸水ADA检测阳性2例,两者同时阳性1例。PT组IGRA及胸水ADA检测的阳性检出率均高于非PT组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IGRA与胸水ADA检测在PT的诊断中应用价值较高。

γ-干扰素诱导蛋白10鉴别结核分枝杆菌不同感染状态效能的Meta分析

目的:评价γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)鉴别结核分枝杆菌不同感染状态的诊断效能.方法:检索Cochrane Library、PubMed、Web of Science、中国知网、维普、万方等数据库,检索自建库至2023年1月的相关文献,进行数据提取和质量评价,采用RevMan 5.3和Stata 17.0软件进行统计分析.结果:共纳入75篇文献,96项研究,共11116例患者.Meta分析结果为IP-10用于鉴别结核感染和非结核感染的合并敏感度为0.82(95%CI:0.79~0.84),特异度为0.87(95%CI:0.84~0.90),阳性似然比为6.40(95%CI:5.20~8.00),阴性似然比为0.21(95%CI:0.18~0.24),诊断比数比为31(95%CI:23~420),受试者工作曲线的曲线下面积为0.91(95%CI:0.88~0.93).结论:IP-10有助于鉴别结核不同感染状态,但最终确诊需要结合病史、症状等进行综合诊断.

艾滋病合并肺结核患者结核感染γ-干扰素释放试验结果假阴性的影响因素分析

目的:分析艾滋病合并肺结核患者结核感染γ-干扰素释放试验(TB-IGRA)结果假阴性的影响因素。方法:选取2021年1月—2023年3月孝感市第一人民医院感染科收治的艾滋病合并肺结核患者76例作为研究对象,均进行TB-IGRA,根据TB-IGRA结果分为真阳性组与假阴性组,比较两组临床资料,分析TB-IGRA结果假阴性的独立影响因素。结果:76例患者TB-IGRA结果阳性54例,TB-IGRA诊断艾滋病合并肺结核的灵敏度为71.1%(54/76),假阴性率为28.9%(22/76)。人类免疫缺陷病毒(HIV)病毒载量、年龄、CD4^(+)T细胞计数均为艾滋病合并肺结核患者TB-IGRA结果假阴性的独立影响因素(P<0.05)。结论:艾滋病合并肺结核患者TB-IGRA结果假阴性的影响因素包括HIV病毒载量、年龄、CD4^(+)T细胞计数,实际诊断时,需结合临床进行综合判断。

化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验在肺结核诊断中的价值探究

目的 分析化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验在肺结核诊断中应用的价值。方法 选取2020年1月—2023年4月江苏省淮安市楚州中医院接受检查的109例疑似肺结核患者作为研究对象,全部研究对象均行结核菌素皮肤试验和化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验,将抗酸染色试验的结果为金标准,比较两种检测方式在肺结核诊断中的应用结果及诊断效能。结果 结核γ-干扰素释放试验在肺结核诊断中真阳性例数多于结核菌素皮肤试验。化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验的灵敏度(94.74%)和准确度(93.58%)高于结核菌素皮肤试验的84.21%、81.65%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.588,7.144,P均<0.05)。结论 在肺结核疾病诊断中,应用化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验具有较高价值,诊断结果与金标准较为接近,诊断效能较高。

全血γ-干扰素释放试验联合GeneXpert结核分枝杆菌/利福平检测对肺结核的诊断效能

目的分析全血γ-干扰素释放试验联合全自动医用实时聚合酶链式反应系统(GeneXpert)结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)/利福平(rifampin,RIF)检测对肺结核的诊断效能。方法非随机选取镇江市第三人民医院于2022年2月—2024年2月收治的100例疑似肺结核患者为研究对象,均采取全血γ-干扰素释放试验检测、痰GeneXpert MTB/RIF检测,以固体培养结果作为金标准,分析单一及联合检测的诊断效能。结果100例疑似肺结核患者经临床诊断确诊为肺结核35例,检出率为35.00%(35/100)。联合检测的灵敏度为97.14%(34/35),高于γ-干扰素释放试验的74.29%(26/35)和GeneXpert MTB/RIF的77.14%(27/35),差异有统计学意义(χ^(2)=7.644,P<0.05)。联合与单一检测的特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论在肺结核的临床诊断中,全血γ-干扰素释放试验检测、GeneXpert MTB/RIF检测均有着良好的应用优势,两种检测方式联合诊断能够进一步提高诊断效能。

基于荧光免疫层析法的γ-干扰素释放试验对活动性肺结核的诊断价值

目的 评价荧光免疫层析法(IGRA)的γ-干扰素释放试验对活动性肺结核的诊断价值。方法 回顾性分析2023年1~6月浙江金华广福肿瘤医院疑似或待排肺结核患者758例,均进行IGRA检测。根据最终诊断将患者分为活动性肺结核病组268例和非结核病组490例,探讨IGRA对话动性肺结核的诊断效能。结果 IGRA检测活动性肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为86.57%、83.06%、73.65%、91.87%。ROC曲线分析得出最佳诊断界值为0.353IU/mL,其检测敏感度及特异度分别为86.57%(95%CI:81.96-90.14)、82.86%(95%CI:79.27-85.94)。结论 IGRA的γ-干扰素释放试验对辅助诊断活动性肺结核具有较好的敏感度和阴性预测值,该检测产品操作简单、报告时间短,非常适用于结核感染的筛查和活动性肺结核的快速辅助诊断。

胸部DR联合γ-干扰素释放试验在大学生肺结核筛查中的应用效果

目的:分析胸部数字化X线摄影(DR)联合γ-干扰素释放试验在大学生肺结核筛查中的应用效果。方法:选取2020年9月—2023年9月在岭南师范学院门诊部进行肺结核筛查后疑似肺结核的115名大学生。分别对其实施胸部DR检查以及γ-干扰素释放试验检查,以连续三次痰抗酸杆菌检测结果为金标准,对比胸部DR检查、胸部DR联合γ-干扰素释放试验检查的诊断灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值及阴性预测值;对比非结核病组与肺结核病组IFN-γ浓度及凝血指标水平。结果:痰抗酸杆菌检测结果中,确诊为肺结核者共18例,胸部DR联合γ-干扰素释放试验诊断肺结核的灵敏度、特异度、准确率明显高于DR单项检查(P<0.05)。肺结核病组IFN-γ浓度、D-二聚体(D-D)、血小板(PLT)、纤维蛋白原(Fbg)水平高于非结核病组,凝血酶时间(TT)水平低于非结核病组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在大学生肺结核筛查中应用胸部DR与γ-干扰素释放试验联合检查可获得良好效果,相较于胸部DR单项检查,联合检查可获得更佳诊断灵敏度、准确率,能够为疾病的诊断及后续治疗方案制定提供可靠依据。

γ-干扰素释放试验在潜伏结核感染治疗效果评价中的应用价值

分析潜伏结核感染治疗效果评价中,γ-干扰素释放试验的应用价值。方法 将2020年1月-2023年12月本院50例潜伏结核感染患者(观察组)及50例肺结核患者(对照组)纳入研究,对照组规范性治疗,观察组预防性治疗,均进行γ-干扰素释放试验,全面分析应用价值。结果 观察组治疗2月后γ-干扰素释放试验值较对照组低,P<0.05。结论 γ-干扰素释放试验具有重要的应用价值,它能为结核病的防治工作提供更为科学、精确的评估方法,为个体化治疗方案的制定提供实证支持,对结核病的控制、预防工作产生积极影响。

γ-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的临床价值

探讨γ-干扰素(IFN-γ)体外释放试验(TB-IGRA)在结核病诊断中的临床价值。方 法 以2023年1月至2023年12月间在梧州市某医院进行TB-IGRA检测的150例患者(其中包括30例正常对照者)作为研究对象。查看其病例与临床资料,并与抗酸杆菌检测(液基夹层杯)、结核菌培养、结核抗体检测(TB-AB)比较其检测的灵敏度和特异性。结果 在150名被选取的患者中,已确诊为结核病的有64例(肺结核41例,肺外结核23例),其中IGRA57例为阳性,灵敏度较高,可达到89.06%。肺部感染引起的结核与肺外其他组织器官感染所引起的结核在阳性检出率上来进行比较,并没有显著性差异(P>0.05);TB-IGRA试验的阳性检出率要明显高于本次试验中的其他三种检测方式。本次试验中临床资料确诊为非结核的病例为86例(包括确诊肺部感染或其他疾病者56例和30例健康对照者),其中71例通过TB-IGRA测定的结果为阴性,特异性为82.56%。结论 γ-干扰素体外释放试验对检测各种结核病具有取材方便、检测快速、灵敏度高、特异性好等优点;临床应用价值较高,值得在临床应用和推广。

结核感染T细胞γ-干扰素释放试验及结核分枝杆菌IgG抗体检测在结核病患者诊断中的应用

分析结核感染T细胞γ干扰素释放试验(TB-IGRA)、结核杆菌IgG抗体检测对结核病诊断的意义。方法 选择我院2023年4月至2024年4月诊治结核病129例为对象,选105例体检非结核病为对照,比较检查结果。结果 结核病TB-IGRA、结核杆菌IgG抗体检测、两者联合检测阳性率高于非结核病,联合检测的准确度、敏感度、特异度高于单一检查方式。结论 结核病诊断中TB-IGRA联合结核杆菌IgG抗体检测的准确度高,具备参考价值,提供诊治依据。

人γ-干扰素研究进展

本文不仅综述了人γ-干扰素(hIFN-γ)分子结构的多态性,而且简介了表达载体的构建、表达和表达产物的纯化等技术方法,并对现存的问题和前景作了简要分析。

血清γ-干扰素诱导蛋白10在活动性肺结核患者中的诊断价值

目的探讨血清γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)在活动性肺结核患者中的诊断价值。方法选择新疆医科大学第一附属医院2017年1-12月收治的活动性肺结核病初诊患者72例(活动性肺结核组);另将本院呼吸科同期住院的肺炎、肺癌和肺气肿等其他肺部疾病患者列为非结核呼吸病组;对照组30例,来源于同期来本院的健康体检者。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测3组血清IP-10,实际操作按说明书要求进行。血清T-SPOT的检测按T-SPOT.TB试剂盒操作规范进行。结果 3组IP-10和IFN-γ水平之间差异有统计学意义(P<0.05)。活动性肺结核组IP-10以及IFN-γ经检验均明显高于非结核呼吸病组和对照组(P<0.05),但健康对照组和非结核呼吸病组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。经相关性检验,活动性肺结核组IFN-γ及IP-10水平呈正相关关系(r=0.154,P=0.004)。IFN-γ与IP-10 2个指标诊断活动性肺结核的ROC曲线下面积为0.927和0.975。IFN-γ和IP-10诊断活动性肺结核的灵敏度分别为90.5%和95.9%,特异度分别为92.3%和97.1%。以对照组和非结核呼吸病组为对照,血清IP-10检测活动性肺结核的敏感性和特异性(95.5%、97.1%)高于血清T-SPOT的敏感性和特异性(75.4%、72.6%),同时也高于IFN-γ的敏感性和特异性(90.5%,92.3%)。结论采用ELISA检测血清IP-10水平,操作方法简便,质量控制明确,敏感性和特异性均呈较高水平,今后可进一步扩大样本证实其敏感性与特异性,为活动性肺结核的快速诊断提供理论依据。