基于一磷酸腺苷的RAFT接枝棉织物的结构和阻燃性能

采用可逆加成断裂链转移自由基聚合(RAFT)方法,基于纤维基二硫代酸酯类RAFT链转移剂(Cell-CTA),以偶氮二异丁腈为引发剂,以改性一磷酸腺苷(AAMP)为阻燃单体,在纯棉织物上进行RAFT接枝聚合改性,制备了接枝阻燃棉织物(Cell-g-PAAMP)。采用红外光谱、扫描电镜、拉曼光谱等方法对Cell-g-PAAMP的化学结构、表面形貌及其燃烧后残炭的形态和石墨化程度进行了表征。采用热重分析仪、数显氧指数测定仪、织物强力仪、透气性能测试仪对Cell-g-PAAMP的阻燃性能和物理机械性能进行了分析。Cell-g-PAAMP红外光谱中,1199 cm^(-1)处新出现P=O双键的伸缩振动峰,说明已成功制备Cell-g-PAAMP。扫描电镜和拉曼光谱结果表明,Cell-g-PAAMP表面粗糙,有颗粒状物质附着于表面,燃烧后残炭形态保持基本完整且结构致密,石墨化程度提高。与纯棉织物对比,Cell-g-PAAMP初始分解温度降低,热稳定性提高,极限氧指数提高,获得了良好的阻燃效果。Cell-g-PAAMP透气性和断裂强力下降,但断裂伸长率却大幅增加。

饲养方式对宰后苏尼特羊肉一磷酸腺苷激活的蛋白激酶活力及糖酵解的影响

本研究测定了放牧和圈养条件下苏尼特羊宰后羊肉一磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)活力、AMPK基因(PRKAA1、PRKAA2、PRKAG3)m RNA相对表达量和糖酵解指标,分析了AMPK活力与糖酵解指标之间的相关性,研究不同饲养方式对羊肉AMPK活力及糖酵解的影响。结果表明:放牧条件下苏尼特羊背最长肌的剪切力、亮度值以及黄度值均显著大于圈养条件(P<0.05);两种饲养方式的胴体初p H值(p H1)和静止排酸24 h后胴体最终pH值(pH24)差异不显著(P>0.05);圈养条件下苏尼特羊PRKAA1和PRKAG3基因的相对表达量显著大于放牧条件(P<0.05),PRKAA2基因相对表达量显著小于放牧条件(P<0.05);AMPK活力和己糖激酶活力均为圈养条件大于放牧条件,但差异不显著(P>0.05);圈养条件下乳酸含量显著大于放牧条件(P<0.05)。通过相关性分析可知:PRKAG3基因相对表达量与AMPK活力、己糖激酶活力以及乳酸含量均呈显著正相关(P<0.05),与剪切力呈显著负相关(P<0.05);PRKAA1基因相对表达量仅与乳酸含量呈显著正相关(P<0.05);PRKAA2基因相对表达量与AMPK活力以及糖酵解指标无显著相关性;AMPK活力和己糖激酶活力以及乳酸含量均呈显著正相关(P<0.05)。综上所述,PRKAA1和PRKAG3基因相对表达量高时,AMPK被激活,使己糖激酶活力增加,加速组织内的糖酵解,增加肌肉乳酸含量,降低p H值,进而影响肉的品质。

肉牛宰后初期一磷酸腺苷活化蛋白激酶活性在不同部位肉中的差异表达及与牛肉品质关系

文中主要探讨了一磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated proteinkinase,AMPK)在宰后早期(3、5.5、7和10 h)不同部位牛肉中的差异性表达以及对最终牛肉品质的影响。选取牛柳(psoas major,PM)与西冷(longissimus dorsi,LD)2个部位,分别测定p H值、AMPK活性、糖酵解指标和肉品质指标。研究结果表明:随着宰后时间的延长,AMPK的活性显著下降(P<0.05),而且PM中的AMPK活性显著高于LD(P<0.05);AMPK活性与p H值与肌糖原含量呈显著正相关,与乳酸含量及(AMP+IMP)/ATP[AMP:adenosine monophosphate,一磷酶腺苷;IMP:inosine monophosphate,肌苷酶;ATP:adehosine triphosphate,三磷酶腺苷)呈显著负相关关系(P<0.05),丙酮酸激酶随宰后时间先升高后降低(P<0.05),而且PM中丙酮酸激酶达到最大活性值的时间以及最大值要早于且高于LD(P<0.05);同时,PM在成熟期间表现出较高的嫩度以及较低的蒸煮损失(P<0.05)。上述结果表明,AMPK能够通过调节糖酵解进程而影响牛肉的品质。

一磷酸腺苷与肌动球蛋白相互作用的荧光光谱研究

目的：采用荧光分光光度法研究了一磷酸腺苷（adenosine 5’-monophosphate,AMP）与肌动球蛋白相互作用的情况。方法：根据分子间的相互作用力与相关热力学参数间的关系,结合AMP与肌动球蛋白相互作用的焓变和熵变,讨论AMP对肌动球蛋白荧光的猝灭机理,测定AMP与肌动球蛋白的猝灭常数、结合常数和作用力类型,考察AMP对肌动球蛋白构象的影响。结果：Western blotting证明了不同浓度AMP对肌动球蛋白解离的促进作用;AMP与肌动球蛋白结合反应中ΔG〈0,ΔH〉0,ΔS〉0,两者之间结合主要通过疏水相互作用,且AMP的存在使得肌动球蛋白的构象发生变化,疏水环境极性降低;荧光光谱分析表明AMP与肌动球蛋白的结合使肌动球蛋白内源荧光发生了有规律的猝灭,298 K和313 K温度条件下AMP与肌动球蛋白的静态猝灭常数分别为8.70×10^2、4.07×10^2 L/mol,结合常数KLB分别为9.253×10^2 L/mol和3.142×10^2 L/mol。结论：AMP通过疏水相互作用力和肌动球蛋白形成复合物,从而促进肌动球蛋白的解离。

三磷酸腺苷、二磷酸腺苷和一磷酸腺苷的毛细管电泳分析研究

研究了三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)和一磷酸腺苷(AMP)的毛细管电泳行为,考察了运行缓冲液的pH值、磷酸盐浓度、分离电压、分离温度等因素对这三种化合物的迁移时间和分离效果的影响。结果发现,这些因素对上述三种化合物的分离有显著的影响,在优化的分离条件下,三种物质在10min内可得到分离。方法的检出限为0.125mg/mL,线性范围为0.125～2.00mg/mL,相关系数为0.991～0.997。

小白蒿总黄酮对大鼠腹腔白细胞内白三烯B4、5-羟二十碳四烯酸、游离钙和环一磷酸腺苷水平的影响

本文以大鼠胸腔白细胞为材料,采用高效液相色谱法(HPLC)、放免分析法(RIA)和荧光分光光度法分别测定大鼠腹腔白细胞内白三烯B4(LTB4)、5-羟二十碳四烯酸(5-HETE)、环一磷酸腺苷(c AMP)及游离钙水平。结果表明,在2.0~10.0μg/m L浓度范围内,小白蒿总黄酮可剂量依赖性地抑制完整中性白细胞中LTB4的生物合成。另外,小白蒿总黄酮对人工三肽(f MLP)激发的白细胞内游离钙升高具有抑制作用,并促进细胞内c AMP水平提高。小白蒿总黄酮显著影响白细胞的多种功能,这可能与其抗炎作用机理有关。

一磷酸腺苷激活的蛋白激酶对动物糖脂代谢的调节作用

一磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)广泛存在于真核细胞中,AMPK的活性受一磷酸腺苷(AMP)/三磷酸腺苷(ATP)的调节,应激反应可通过ATP的产生减少或消耗使细胞内AM P/ATP增加,从而激活AMPK。激活的AMPK可通过磷酸化下游靶蛋白,改变脂类和碳水化合物代谢,使其朝着抑制ATP消耗过程、促进ATP生成反应的方向进行,即抑制脂肪酸和糖原合成,促进脂肪酸氧化分解和葡萄糖的吸收,从而迅速恢复细胞中的能量,因此AMPK被称为"细胞能量调节器",在动物适应环境的过程中发挥着重要的作用。本文在国内外已有文献报道基础上,对AMPK的结构、分布、活性调节及对糖脂代谢的调节作用进行综述。

一磷酸腺苷激发试验对支气管哮喘的诊断和鉴别诊断的意义

目的探讨一磷酸腺苷(AMP)支气管激发试验对支气管哮喘的诊断和鉴别诊断的意义。方法选取健康志愿者(正常对照组)26例,急性上呼吸道感染患者(上感组)22例、慢性阻塞性肺疾病(COPD)Ⅰ级组20例、哮喘完全控制22例、哮喘未控制组20例。均进行AMP支气管激发试验。分析各组1秒用力呼气容积(FEV1)下降20%时AMP累积剂量(PD20FEV1-AMP)、激发试验敏感度、特异度及不良反应。PD20FEV1-AMP数据以中位数(四分位数间距)[M(QR)]表示。结果对照组、上感组及COPDⅠ级组行AMP支气管激发试验结果均为阴性;完全控制组有14例阳性,8例阴性,阳性率为63.6%;部分控制组有17例阳性,3例阴性,阳性率为85.0%。对照组、上感组及COPDI级组的PD20FEV1-AMP>39.4 mg,完全控制组、部分控制组的PD20FEV1-AMP分别为9.6 mg(31.87 mg)、2.4 mg(24.58 mg)。AMP支气管激发试验的敏感度、特异度和准确度分别为73.8%、100%和90.0%。不良反应包括咳嗽(21.8%)、咳痰(12.7%)、胸闷(10.9%)、气短(10.9%)、咽部不适感(8.2%)。结论 AMP支气管激发试验能够诊断和鉴别诊断哮喘,且不良反应轻微。

微小RNA⁃199⁃3p通过一磷酸腺苷活化蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白通路抑制高糖诱导的白色脂肪细胞分化

目的探讨微小RNA(miR)-199a-3p与2型糖尿病(T2DM)病理特征关系及其对白色脂肪细胞分化和脂肪炎症调控的分子机制。方法收集2015年6月~2018年4月就诊于我院的131例T2DM患者(T2DM组)与146例健康志愿者(NC组)的临床资料。采用RT-qPCR检测外周血has-miR-199a-5p、has-miR-199a-3p、has-miR-199b-5p和has-miR-199b-3p水平;采用ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、瘦素、脂联素、内脂素、抵抗素和白细胞介素-6(IL-6)含量,并探讨其与miR-199a-3p的相关性。3T3-L1细胞经高糖、低糖和分化诱导处理后,采用RT-qPCR检测3T3-L1细胞中has-miR-199a-3p含量,ELISA检测TNF-α和IL-6含量;油红O染色观察miR-199a-3p类似物(mimics)处理高糖诱导的3T3-L1脂滴形成;Western blot检测mimics干预高糖处理3T3-L1细胞中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶P85亚基(p-P85)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3b)、葡萄糖转运体-4(GLUT-4)、磷酸化信号传导与转录激活因子-3(p-STAT3)、磷酸化一磷酸腺苷活化蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、NAD-依赖性去乙酰化酶(SIRT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)蛋白表达。采用Pearson相关分析评估各变量间的相关性。结果T2DM组患者血浆miR-199a-3p、miR-199b-5p和miR-199b-3p均明显低于NC组(P<0.05)。重度T2DM组患者miR-199a-3p含量明显低于轻、中度T2DM组(P<0.05)。T2DM组血浆miR-199a-3p含量与空腹胰岛素(FIns)、空腹血糖(FPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、TNF-α及IL-6呈负相关(P<0.05)。高糖组miR-199a-3p含量高于对照组,分化的脂肪细胞内miR-199a-3p含量明显高于3T3-L1细胞(P<0.05),mimics组油脂滴数量明显低于阴性对照组。高糖+抗miR-199a-3p组的p-AMPK、p-mTOR、SIRT-1和PPAR-γ蛋白表达均明显低于高糖组(P<0.05),两组IRS-1、p-P85、p-AKT、p-GSK3b和Glut-4蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论T2DM患者外周血中miR-199a-3p呈低表达,且与血糖、胰岛素抵抗、脂肪因子和炎症因子含量呈负相关,其可能通过调控AMPK/mTOR及PPAR-γ和SIRT-1蛋白表达,影响IL-6和TNF-α炎症因子释放参与白色脂肪细胞炎症和脂肪细胞分化再生。

巨噬细胞特异性敲除一磷酸腺苷激活依赖性蛋白激酶基因的小鼠模型构建

目的:构建巨噬细胞特异性敲除一磷酸腺苷激活依赖性蛋白激酶(AMPK)基因的小鼠模型,并观察对血压的影响。方法:利用胚胎显微注射法构建AMPKα1基因第3外显子两端携带loxP位点的小鼠模型,和集落刺激因子1受体启动子诱导表达Cre酶的小鼠模型,交配繁育出巨噬细胞特异性敲除AMPK的小鼠模型。鼠尾DNA做PCR鉴定基因型,腹腔注射他莫昔芬诱导敲除AMPK,Real-timePCR检测小鼠骨髓细胞AMPKRNA水平。检测Cre阴性小鼠注射与不注射他莫昔芬的血压差异,以及Cre阴性和阳性小鼠注射他莫昔芬5d后的血压差异。结果:鼠尾DNAPCR鉴定出AMPKα1loxP为纯合阳性、且Cre为阴性或阳性的小鼠。与Cre阴性小鼠相比,他莫昔芬显著降低了Cre阳性小鼠骨髓细胞AMPKmRNA[(0.9263±0.1293)vs.(0.47±0.04657),P<0.017]。他莫昔芬对Cre阴性小鼠血压的影响不显著[收缩压(122.9±3.183)vs.(124±6.878)mmHg,1mmHg=0.133kPa,P=0.427],而AMPK敲除鼠血压显著低于对照组[收缩压(123.5±3.577)vs.(107.5±4.814)mmHg,P=0.037]。结论:成功构建巨噬细胞特异性敲除AMPK的小鼠模型,证实敲除鼠血压降低。

用反渗透法浓缩一磷酸腺苷(AMP)洗脱液

在AMP生产过程中,从离子交换树脂洗脱出来的AMP 稀溶液可以用反渗透法浓缩。一次浓缩除去3/4水,浓缩收率在99%以上。如用多次浓缩,将AMP 浓度为0.3mg/ml 的洗脱液浓缩至33.0mg/ml(浓缩100倍!)即达到其结晶沉淀浓度时,浓缩收率达98%。浓缩产品质量符合要求。在累积300多小时的运行试验中,AMP 洗脱液对膜的污染不大,膜透水量下降不严重。此外,本文还考察了AMP 溶液浓度,pH 值以及操作压力的变化对膜性能的影响。

宰后羊肉一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性及糖酵解的变化

为了研究宰后羊肉一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性与糖酵解指标的相关性,以探讨肌肉宰后生理机理,试验选择18月龄左右的蒙古杂交羊,屠宰后取后腿股二头肌,分别于0,1,4,8,12,24小时时测定其AMPK活性和糖酵解各理化指标。结果表明:宰后能量状态的改变激活了AMPK,活化的AMPK促进了宰后羊肉糖酵解,提高了糖酵解过程中关键酶的活性,促进了糖酵解底物的分解和产物的生成。

不同月龄和部位羊肉中一磷酸腺苷激活蛋白激酶活性与肉品质的关系

选取巴美肉羊5、6、8月龄和12月龄不同部位的骨骼肌,分别测定并比较它们的一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)活性、糖酵解指标和肉质指标,以探讨AMPK与宰后肌肉品质的相关性。结果表明:AMPK活性随着月龄的增加呈下降的趋势(P<0.05),背最长肌的AMPK活性显著高于股二头肌和臂三头肌(P<0.05);AMPK活性与肌糖原含量、乳酸含量和己糖激酶活性呈极显著正相关(P<0.01),与b*值呈显著负相关(P<0.05),与L*值、a*值、剪切力和熟肉率呈负相关(P<0.05)。提示AMPK活性与肌糖原、己糖激酶、乳酸、肉的色泽、剪切力和熟肉率具有相关性,AMPK可能通过调节糖酵解进程进而影响肉品质。

哮喘患者一磷酸腺苷支气管激发试验的临床应用价值

目的探讨一磷酸腺苷(AMP)支气管激发试验在哮喘中的临床应用价值。方法纳入健康志愿者24例(正常对照组),哮喘患者60例[哮喘未控制组19例、部分控制组22例、完全控制组19例],急性上呼吸道感染患者20例(上炎组)。均进行AMP支气管激发试验。分析各组FEV1下降20%时AMP累积剂量(PD20FEV1-AMP)、激发试验敏感性、特异性及不良反应。随访23例患者(未控制组11例和部分控制组12例),分别予以规范吸入ICS治疗3和6个月后再次行AMP支气管激发试验,并在每次试验前1周行哮喘症状评分。分析PD20FEV1-AMP值与哮喘症状评分的相关性。PD20FEV1-AMP数据以中位数(四分位间距)[M(QR)]表示。结果对照组阳性率为0(0/24);哮喘未控制组阳性率为100%(19/19),哮喘部分控制组阳性率为86.4%(19/22),哮喘完全控制组阳性率为26.3%(5/19);上炎组阳性率为0(0/20)。对照组和上炎组的PD20FEV1-AMP均>40mg;哮喘未控制组、部分控制组、完全控制组的PD20FEV1-AMP分别为0.6mg(0.4mg)、5.38mg(32.67mg)、40mg(29.3mg)。AMP支气管激发试验的灵敏度、特异度分别为72%、100%。lgPD20FEV1-AMP与哮喘症状评分的对数呈负相关(r=-0.598,P<0.01)。不良反应包括喘息(37.5%)、咳嗽(21.2%)、气促(15.4%)、咽部刺激感(7.7%)、胸闷(7.7%)、咳痰(4.8%)、发绀(1.0%)。结论AMP支气管激发试验能够诊断和鉴别诊断哮喘,评估哮喘的严重程度和控制情况,监测哮喘的治疗疗效,对哮喘治疗方案有指导性意义,且不良反应轻微,具有较好的临床应用前景。

超声波联合一磷酸腺苷(AMP)对鸡胸肉的嫩化效果

为了解超声波与一磷酸腺苷(AMP)对鸡胸肉品质的作用,采用超声波和AMP对鸡胸肉进行处理。测定对照和经超声波、AMP等不同处理的鸡胸肉pH、肌原纤维小片化指数(MFI)、过滤残留量、肉品的热力学指标、蒸煮损失、剪切力、肌原纤维蛋白的凝胶电泳图、肉品组织切片和表面微观结构等指标。结果显示,与对照鸡胸肉相比,超声波和AMP处理后,肉品pH升高、肌原纤维小片化指数显著增大(P<0. 05),肌动蛋白和肌球蛋白热敏性增大,过滤残留量、蒸煮损失和剪切力则显著减小(P<0. 05),组织状态和表面微观结构发生明显变化,更多的肌原纤维蛋白降解,肌动蛋白和肌球蛋白含量显著升高,从而显著改善鸡胸肉的嫩度。因此,超声波和AMP处理均可破坏肌肉中肌原纤维完整结构,改变肌肉的组织状态使其变柔软,且超声波和AMP联合使用对鸡胸肉的嫩化效果最佳,可进一步提高鸡胸肉的食用品质。

脂联素对气道平滑肌细胞增殖作用及一磷酸腺苷活化蛋白激酶活性的影响

目的探讨脂联素对气道平滑肌细胞(AMSCs)增殖的影响及相关机制的研究。方法体外培养大鼠气道平滑肌细胞株;RT-PCR法检测ASMCs脂联素受体的表达;不同浓度的脂联素(5、10、20、40及80μg/mL)作用于体外培养的大鼠ASMCs,孵育不同时间,MTT法检测吸光值,计算细胞抑制率;不同浓度脂联素(5、10、20及40μg/mL)作用于气道平滑肌细胞48h后提取蛋白,Western blot法检测一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)及磷酸化一磷酸腺苷活化蛋白激酶(pho-AMPK)的表达。结果 5～80μg/mL脂联素在不同时间(1、12、24、48及72h)明显抑制ASMCs增殖,并存在浓度依赖性(r=0.324,P<0.01)和时间依赖性(r=0.607,P<0.01);Western blot法检测显示空白对照组无pho-AMPK表达,干预组随着脂联素浓度的升高AMPK的活性增强(r=0.907,P<0.01),pho-AMPK/AMPK比值分别为(27.66±1.03)%、(31.91±0.86)%、(75.52±2.67)%和(84.50±1.05)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂联素可能通过激活AMPK来抑制体外培养的ASMC增殖。

术前应用乌司他丁对小鼠肝大部分切除术后肝功能及一磷酸腺苷活化蛋白激酶信号通路的影响

目的:探讨术前应用乌司他丁对小鼠70%肝切除术后肝功能及一磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)信号通路的影响.方法:♂ICR小鼠48只,体质量25-30 g,随机均分为70%肝切除对照组和乌司他丁组.检测术后第1、3、5、7天肝功能指标,残肝组织病理学改变以及AMPK蛋白活化情况.结果:与对照组比较,乌司他丁组术后第1、3天谷草转氨酶水平较低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,乌司他丁组术后第3天乳酸脱氢酶水平有所降低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,Western blot结果显示乌司他丁组肝切除术后早期AMPK磷酸化较晚;与对照组比较,Western blot结果显示乌司他丁组肝切除术后胆盐输出泵蛋白(bile salt export protein,BSEP)水平较高.结论:术前应用乌司他丁可以保护术后肝功能,降低肝损伤,促进术后肝功能的恢复.其机制可能与维持肝细胞能量供应以及促进肝细胞极化有关.

一磷酸腺苷活化蛋白激酶对环氧合酶-2表达与5氟-尿嘧啶治疗结肠癌敏感性的关系

目的探讨一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)对环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达及结肠癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的影响。方法选用HT-29结肠癌细胞株,按照HT-29细胞的培养液不同,分为空白对照组(常规培养)、5-Fu培养组、5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)培养组、5-Fu+AICAR培养组。用western blot法测定各组中P-ACC和COX-2的表达,并分别于培养6、12、24小时分析5-Fu培养组和5-Fu+AICAR培养组中P-ACC和COX-2的表达水平的变化;用MTT法检测12、24、48小时各组细胞的存活率。结果5-Fu组作用后COX-2蛋白上调,AICAR致P-ACC表达后,可下调COX-2蛋白的表达;5-Fu联合AICAR可降低细胞存活率。结论AMPK的激活可能下调COX-2表达,并可能提高以5-Fu治疗为基础的结肠癌化疗敏感性。